pcr實驗室設計的基本原則及建設要求講課教案

1、精品文檔能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學研究和實驗的常規(guī)方 法，PCR實驗室廣泛應用于生物學各個領域，例如：艾滋病檢測， 乙型肝炎，禽疫病，癌基因的檢測和診斷，DNA指紋，個體識別,親子鑒定及法醫(yī)物證等等，今天為大家進行詳解。一 .PCR實驗室布局PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)，樣品制備區(qū)，擴增區(qū)和擴增 產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域，并設有專用走廊，各工作區(qū)域應設 緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。 不同功能的工作區(qū)應是分 隔獨立的，各工作區(qū)有明顯的標志，不能直通，如果緊密連接，需安 裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū)，后兩區(qū)為擴增后區(qū)，即從：試劑 準備區(qū)一一樣品制備區(qū)一一PCR擴增室一

2、一產(chǎn)物分析室，不得逆向 流動。實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應該安裝紫外燈，紫外燈波長為254mm,每20 nf一支 40W的紫外燈。西東二.實驗室各區(qū)功能及主要設備1 .試劑準備區(qū)：主要進行試劑的制備，分裝和主反應混合液的 制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區(qū)域。 試劑原材料 必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。 本區(qū)主要設備有 天平，冰箱，離心機，加樣器，振蕩器等。對于氣流壓力的控制，本 區(qū)并沒有嚴格的要求，一般為+10Pa。2 .樣品制備區(qū)：主要進行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加 入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設備有冰

3、箱，生物安 全柜，離心機，加樣器，振蕩器等。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于 鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染，一般為 +10Pa 。3 .擴增區(qū)：主要進行DNA擴增。止匕外，已制備的DNA模板（來 自樣品制備區(qū)）的加入和主反應混合液（來自試劑準備區(qū)）制備成反 應混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)主要設備有：擴增儀，冰箱，離心機，加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為-25Pa。4 .擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設備有酶標儀， 洗板機.加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于鄰近 區(qū)域為負壓，一般為-25Pa ,以避免擴增

4、產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域3 .PCR實驗室通風系統(tǒng)及壓力控制各區(qū)域之間應具備單間的實驗工藝流，物流，人流與氣流，形成 單向流程的保護屏障，避免實驗室之間的相互干擾，防止氣溶膠擴散 對實驗過程造成污染。PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域 交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴格控制送， 排風的比例以保證個實驗區(qū)的壓力要求。4 .PCR實驗室裝飾實驗室圍護結構應牢固，氣密性好；所有陰陽角宜采用圓弧過度； 墻體內(nèi)壁光潔，不積塵，耐腐蝕，易清洗消毒；地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪，材料應滿足無縫隙，無滲漏，光潔，耐腐蝕的要 求。5 .PCR實驗室注意事項1 .幾個區(qū)域的大小設置情況，試劑準備區(qū)，擴增區(qū)，擴增產(chǎn)物分 析區(qū)，空間可以相對小一些，樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰 箱，空間應大一些。2 .試劑準備區(qū)，樣品制備區(qū)設緊急洗眼器，以保證操作人員的安西安博爾實驗室承接各類實驗室整體建設，15年實驗室行業(yè)解 決方案經(jīng)驗，做過上百個行業(yè)的實驗室建設：化學實驗室設計 物理 實驗室設計研發(fā)實驗室設計 PCR實驗室設計微生物實驗室設 計醫(yī)學實驗室設計BSL-2實驗室設計醫(yī)藥實驗室設計分子生 物實驗室設計 食品檢測實驗室設計 藥品檢驗實驗室設計 細胞 實驗室設計動物房實驗室設計 石油化工實驗室設計 環(huán)境監(jiān)測 實驗室設計公安系統(tǒng)實驗室設計 科