第十一章高效毛細(xì)管電泳分析法

1、2022-4-26第第第第第第十一十一十一十一十一十一章章章章章章高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳分析法分析法分析法分析法分析法分析法一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀high performance capillary electrophoresis apparatus二、流程與主要部件二、流程與主要部件process and main assembly三、進(jìn)樣方式三、進(jìn)樣方式injection method第三節(jié)第三節(jié)第三節(jié)第三節(jié)第三節(jié)第三節(jié)高效毛細(xì)管電泳儀高效毛細(xì)管電泳儀高效毛細(xì)管電泳儀高效毛細(xì)管電泳儀高效毛細(xì)管電泳儀高效毛細(xì)管電

2、泳儀high performance capillary electrophoresis,HPCEhigh performance capillary electrophoresis apparatus2022-4-26一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀一、高效毛細(xì)管電泳儀high performance capillary electrophoresis apparatushigh performance capillary electrophoresis apparatushigh performance capillary

3、 electrophoresis apparatus2022-4-26儀器儀器儀器儀器儀器儀器2 2 2 2 2 22022-4-26儀器儀器儀器儀器儀器儀器3 3 3 3 3 32022-4-26二、儀器流程與主要部件二、儀器流程與主要部件二、儀器流程與主要部件二、儀器流程與主要部件二、儀器流程與主要部件二、儀器流程與主要部件 process and main assemblyprocess and main assemblyprocess and main assembly 電壓：030kV； 分離柱不涂敷任何固定液； 紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測器；（可檢測到：10-1910-21 mol/L

4、）2022-4-261.1.1.1.1.1.高壓電源高壓電源高壓電源高壓電源高壓電源高壓電源（1 1）0 03030 kV kV 穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源；穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源；（2 2）具有恒壓、恒流、恒功率輸出；）具有恒壓、恒流、恒功率輸出；（3 3）電場強(qiáng)度程序控制系統(tǒng)；）電場強(qiáng)度程序控制系統(tǒng)；（4 4）電壓穩(wěn)定性：）電壓穩(wěn)定性：0.1%0.1%；（5 5）電源極性易轉(zhuǎn)換；）電源極性易轉(zhuǎn)換；2. 2. 毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱 （1 1）材料：石英：各項(xiàng)）材料：石英：各項(xiàng)性能好；玻璃：光學(xué)、機(jī)性能好；玻璃：光學(xué)、機(jī)械性能差；械性能差； （2 2）規(guī)格：內(nèi)徑）規(guī)格：內(nèi)徑20207575m m，

5、外徑外徑350350400400m m；長度長度=1=1m m2022-4-263.3.3.3.3.3.緩沖液池緩沖液池緩沖液池緩沖液池緩沖液池緩沖液池 化學(xué)惰性，機(jī)械穩(wěn)定性好；4. 4. 檢測器檢測器 要求：具有極高靈敏度，可柱端檢測； 檢測器、數(shù)據(jù)采集與計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理一體化； 類型類型 檢測限檢測限/ /mol mol 特點(diǎn)特點(diǎn)紫外-可見 10-1310-15 加二極管陣列，光譜信息熒光 10-1510-17 靈敏度高，樣品需衍生激光誘導(dǎo)熒光 10-1810-20 靈敏度極高，樣品需衍生電導(dǎo) 10-1810-19 離子靈敏，需專用的裝置；2022-4-26三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式三、毛細(xì)管

6、電泳的進(jìn)樣方式三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式 injection method ofinjection method ofinjection method of HPCEHPCEHPCE 進(jìn)樣量：毛細(xì)管長度的1%-2%；納升級、非常小；1. 1. 流體力學(xué)進(jìn)樣方式流體力學(xué)進(jìn)樣方式 （1 1）進(jìn)樣端加壓）進(jìn)樣端加壓 （2 2）出口端抽真空）出口端抽真空 （3 3）虹吸進(jìn)樣）虹吸進(jìn)樣tLPd 1284 進(jìn)樣體積進(jìn)樣體積2022-4-26 毛細(xì)管一端插入樣品瓶，加電壓；毛細(xì)管一端插入樣品瓶，加電壓；2. 2. 2. 2. 2. 2.

7、電動進(jìn)樣方式電動進(jìn)樣方式電動進(jìn)樣方式電動進(jìn)樣方式電動進(jìn)樣方式電動進(jìn)樣方式tLctrVefeo2) （進(jìn)進(jìn)樣樣量量 進(jìn)樣不均進(jìn)樣不均：電歧視現(xiàn)象，淌度大的離子比淌度大的進(jìn)樣：電歧視現(xiàn)象，淌度大的離子比淌度大的進(jìn)樣量大；量大； 離子丟失離子丟失：淌度大且與電滲流方向相反的離子可能進(jìn)不：淌度大且與電滲流方向相反的離子可能進(jìn)不去；去； 特別適合黏度大的試樣特別適合黏度大的試樣；3. 3. 擴(kuò)散進(jìn)樣擴(kuò)散進(jìn)樣 試樣通過擴(kuò)散作用進(jìn)入分離柱端口處。試樣通過擴(kuò)散作用進(jìn)入分離柱端口處。2022-4-26內(nèi)容選擇內(nèi)容選擇內(nèi)容選擇內(nèi)容選擇內(nèi)容選擇內(nèi)容選擇結(jié)束結(jié)束結(jié)束結(jié)束結(jié)束結(jié)束第一節(jié)第一節(jié) 概述概述generalization第二節(jié)第二節(jié) 高效毛細(xì)管電泳的理論基礎(chǔ)高效毛細(xì)管電泳的理論基礎(chǔ)basic theory of HPCE第三節(jié)第三節(jié) 高效毛細(xì)管電泳儀器高效毛細(xì)管電泳儀器high performance capillary electrophore