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文檔簡介
1、實驗室生物安全基礎(chǔ)知識實驗室生物安全基礎(chǔ)知識 實驗室生物安全基本概念實驗室安全危害來源生物實驗室危害來源: 生物危害 其他危害 危險性化學(xué)品 火的危害 電的危害 噪聲 電離輻射等一、生物安全基本知識 相關(guān)文件和標準 中華人民共和國國務(wù)院令第中華人民共和國國務(wù)院令第424424號號病原微生物實驗室病原微生物實驗室生物安全管理條例生物安全管理條例已經(jīng)已經(jīng)20042004年年1111月月5 5日國務(wù)院第日國務(wù)院第6969次次常務(wù)會議通過并施行。(共七章七十二條)。常務(wù)會議通過并施行。(共七章七十二條)。 國家環(huán)境保護總局令第國家環(huán)境保護總局令第3232號號病原微生物實驗室生物病原微生物實驗室生物安全
2、環(huán)境管理辦法安全環(huán)境管理辦法 (20062006年年5 5月月1 1日實施)日實施) 福建省實驗動物許可證管理辦法(共福建省實驗動物許可證管理辦法(共1515條,條,20032003年十年十月一日實施)月一日實施) CNASCNAS已于已于20092009年年0606月月3030日發(fā)布日發(fā)布實驗室生物安全認可實驗室生物安全認可準則準則(CNAS-CL05:2009CNAS-CL05:2009),),20092009年年0707月月0101日正式實日正式實施。施。 實驗室生物安全認可規(guī)則實驗室生物安全認可規(guī)則(CNAS-RL05CNAS-RL05:20082008) 世界衛(wèi)生組織(世界衛(wèi)生組織(
3、WHOWHO)實驗室生物安全手冊)實驗室生物安全手冊一、生物安全基本知識相關(guān)文件和標準GB 19489-2008 GB 19489-2008 實驗室實驗室 生物安全通用要求生物安全通用要求GB 50346-2004 GB 50346-2004 生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范GB 15981-1995 GB 15981-1995 消毒與滅菌效果評價方法與標準消毒與滅菌效果評價方法與標準GB/T 19495.2-2004 GB/T 19495.2-2004 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 實驗室技術(shù)要求實驗室技術(shù)要求GB/T 27403-2008 GB/T 27403-2008
4、 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測食品分子生物學(xué)檢測GB/T 27405-2008 GB/T 27405-2008 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測食品微生物檢測GB 50073-2001 GB 50073-2001 潔凈廠房設(shè)計規(guī)范潔凈廠房設(shè)計規(guī)范GBJ19-87 GBJ19-87 采暖通風(fēng)和空氣調(diào)節(jié)設(shè)計規(guī)范采暖通風(fēng)和空氣調(diào)節(jié)設(shè)計規(guī)范WS233-2002 WS233-2002 微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室安全通用準則微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室安全通用準則SN/T 1193-2003 SN/T 1193-2003 基因檢驗實驗室技術(shù)要求基因檢驗實驗室技術(shù)要求Y
5、Y0569-2005 YY0569-2005 生物安全柜生物安全柜ISO 14644.1ISO 14644.18 8 潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境國際標準潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境國際標準ISO/DIS 14698.1 ISO/DIS 14698.1 3 3:潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境:潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境 生物污染控制生物污染控制一、生物安全基本知識 什么叫實驗室生物安全?Laboratory bilsafetyLaboratory bilsafety 實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平,可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境平,可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境
6、受到不可接受的損害,符合相關(guān)法規(guī)、標準等對受到不可接受的損害,符合相關(guān)法規(guī)、標準等對實驗室生物安全責(zé)任的要求。實驗室生物安全責(zé)任的要求?!皩嶒炇疑锇踩币辉~用來描述那些用以防止發(fā)生病原體或毒素?zé)o意中暴露及意外釋放的防護原則、技術(shù)以及實踐。 實驗室生物安全防護(biosafety protection for laboratories) 是指當(dāng)實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病性微生物及其毒素時,通過在實驗室設(shè)計建造、使用個體防護設(shè)施、嚴格遵守標準化工作及操作程序等方面采取綜合措施,以確保實驗室工作人員不受實驗室對象侵染,確保周圍環(huán)境不受污染。一、生物安全基本知識 實驗室生物安全保障(la
7、boratory biosecurity) “實驗室生物安全保障”則是指單位和個人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉(zhuǎn)移或有意釋放而采取的安全措施。氣氣溶膠膠 aerosols 懸懸浮于氣氣體介質(zhì)質(zhì)中的粒徑徑一般為為0.001 100m 的固態(tài)態(tài)或液態(tài)態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)對穩(wěn)定的分散 體系。一、生物安全基本知識感染性微生物的危險度等級分類感染性微生物的危險度等級分類危險度危險度 1 1 級(無或極低的個體和群體危險)級(無或極低的個體和群體危險) 不太可能引起人或動物致病的微生物。危險度危險度2 2 級(個體危險中等,群體危險低)級(個體危險中等,群體危險低) 病原體能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?,?/p>
8、對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染,但對感染有有效的預(yù)防和治療措施,并且疾病傳播的危險有限。危險度危險度3 3 級(個體危險高,群體危險低)級(個體危險高,群體危險低) 病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播,并且對感染有有效的預(yù)防和治療措施。危險度危險度4 4 級(個體和群體的危險均高)級(個體和群體的危險均高) 病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播,對感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。一、生物安全基本知識 實驗實驗室分級級實驗室可以分為:實驗室可以分為: 基礎(chǔ)實驗室基礎(chǔ)實
9、驗室生物安全防護水平一級(生物安全防護水平一級(BSL-1BSL-1) 基礎(chǔ)實驗室基礎(chǔ)實驗室生物安全防護水平二級(生物安全防護水平二級(BSL-2BSL-2) 防護實驗室防護實驗室生物安全防護水平三級生物安全防護水平三級 (BSL-3BSL-3) 最高防護實驗室最高防護實驗室生物安全防護水平四級(生物安全防護水平四級(BSL-4BSL-4) 根據(jù)操作不同危險度等級微生物所需的實驗室設(shè)計特根據(jù)操作不同危險度等級微生物所需的實驗室設(shè)計特點、建筑構(gòu)造、防護設(shè)施、儀器、操作以及操作程序來決點、建筑構(gòu)造、防護設(shè)施、儀器、操作以及操作程序來決定實驗室的生物安全水平。表定實驗室的生物安全水平。表1 1 敘述
10、了與不同危險度等級敘述了與不同危險度等級相對應(yīng)的(而非相對應(yīng)的(而非“等同的等同的”)各危險度等級微生物所要求)各危險度等級微生物所要求的實驗室生物安全水平。的實驗室生物安全水平。危險度危險度等等 級級生物安全水平生物安全水平實驗室類型實驗室類型實驗室操作實驗室操作安全設(shè)施安全設(shè)施1 級級 基礎(chǔ)實驗室基礎(chǔ)實驗室生物安全水平生物安全水平一一級級基礎(chǔ)的教學(xué)、基礎(chǔ)的教學(xué)、研究研究GMT不需要;開放實驗不需要;開放實驗臺臺2 級級基礎(chǔ)實驗室基礎(chǔ)實驗室生物安全水平生物安全水平二二級級初級衛(wèi)生服初級衛(wèi)生服務(wù);診斷、務(wù);診斷、研究研究加防護服、生物危加防護服、生物危害標志害標志開放實驗臺,此外開放實驗臺,此
11、外需需BSC 用于防護可用于防護可能生成的氣溶膠能生成的氣溶膠3 級級防護實驗室防護實驗室生物安全水平生物安全水平三三級級特殊的診斷、特殊的診斷、研究研究在二級生物安全防在二級生物安全防護水平上增加特殊護水平上增加特殊防護服、進入制度、防護服、進入制度、定向氣流定向氣流BSC 和或其他所和或其他所有實驗室工作所需有實驗室工作所需要的基本設(shè)備要的基本設(shè)備4 級級最高防護實驗最高防護實驗室室生物安全生物安全水平水平四級四級危險病原體危險病原體研究研究在三級生物安全防在三級生物安全防護水平上增加氣鎖護水平上增加氣鎖入口、出口淋浴、入口、出口淋浴、污染物品的特殊處污染物品的特殊處理理級級BSC 或或級
12、級BSC并穿著正壓服、并穿著正壓服、雙開門高壓滅菌器雙開門高壓滅菌器(穿過墻體)、經(jīng)(穿過墻體)、經(jīng)過濾的空氣過濾的空氣 生物安全水平、操作和設(shè)備生物安全水平、操作和設(shè)備 BSC:生物安全柜;GMT:微生物操作技術(shù)規(guī)范生物安全水平生物安全水平1級級2級級3級級4級級實驗室隔離實驗室隔離a不需要不需要不需要不需要需要需要需要需要房間能夠密閉消毒房間能夠密閉消毒不需要不需要不需要不需要需要需要需要需要通風(fēng)通風(fēng)向內(nèi)的氣流向內(nèi)的氣流通過建筑系統(tǒng)的通風(fēng)設(shè)備通過建筑系統(tǒng)的通風(fēng)設(shè)備HEPA HEPA 過濾排風(fēng)過濾排風(fēng)不需要不需要不需要不需要不需要不需要最好有最好有最好有最好有不需要不需要需要需要需要需要需要
13、需要/不需要不需要b需要需要需要需要需要需要雙門入口雙門入口不需要不需要不需要不需要需要需要需要需要氣鎖氣鎖不需要不需要不需要不需要不需要不需要需要需要帶淋浴設(shè)施的氣鎖帶淋浴設(shè)施的氣鎖不需要不需要不需要不需要不需要不需要需要需要通過間通過間不需要不需要不需要不需要需要需要/ 不同生物安全水平對設(shè)施的要求不同生物安全水平對設(shè)施的要求 a a 在環(huán)境與功能上與普通流動環(huán)境隔離在環(huán)境與功能上與普通流動環(huán)境隔離 b b 取決于排風(fēng)位置取決于排風(fēng)位置生物安全水平生物安全水平1級級2級級3級級4級級帶淋浴設(shè)施的通過間帶淋浴設(shè)施的通過間不需要不需要不需要不需要需要需要/不需要不需要c不需要不需要污水處理污水
14、處理不需要不需要不需要不需要需要需要需要需要高壓滅菌器高壓滅菌器現(xiàn)場現(xiàn)場實驗室內(nèi)實驗室內(nèi)雙門雙門不需要不需要不需要不需要不需要不需要最好有最好有不需要不需要不需要不需要需要需要最好有最好有最好有最好有需要需要需要需要需要需要生物安全柜生物安全柜不需要不需要最好有最好有需要需要需要需要人員安全監(jiān)控條件人員安全監(jiān)控條件d d不需要不需要不需要不需要最好有最好有需要需要 不同生物安全水平對設(shè)施的要求不同生物安全水平對設(shè)施的要求c c 取決于實驗室中所使用的微生物因子取決于實驗室中所使用的微生物因子 d d 例如:觀察窗、閉路電視、雙向通訊設(shè)備例如:觀察窗、閉路電視、雙向通訊設(shè)備個體防護裝備裝備裝備避
15、免的危害避免的危害安全性特征安全性特征實驗服、隔離衣、實驗服、隔離衣、連體衣連體衣污染衣服污染衣服背面開口背面開口罩在日常服裝外罩在日常服裝外塑料圍裙塑料圍裙污染衣服污染衣服防水防水鞋襪鞋襪碰撞和噴濺碰撞和噴濺不露腳趾不露腳趾護目鏡護目鏡碰撞和噴濺碰撞和噴濺防碰撞鏡片(必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡)防碰撞鏡片(必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡)側(cè)面有護罩側(cè)面有護罩安全眼鏡安全眼鏡碰撞碰撞防碰撞鏡片(必須有視力校正)防碰撞鏡片(必須有視力校正)側(cè)面有護罩側(cè)面有護罩面罩面罩碰撞和噴濺碰撞和噴濺罩住整個面部罩住整個面部發(fā)生意外時易于取下發(fā)生意外時易于取下防毒面具防毒面具吸入氣溶膠吸入氣溶膠在設(shè)計
16、上包括一次性使用的、整在設(shè)計上包括一次性使用的、整個面部或一半面部空氣凈化的、個面部或一半面部空氣凈化的、整個面部或加罩的動力空氣凈化整個面部或加罩的動力空氣凈化(powered air purifyingpowered air purifying,PAPRPAPR)的以及供氣的防毒面具的以及供氣的防毒面具手套手套直接接觸微生物直接接觸微生物劃破劃破得到微生物學(xué)認可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚腈類材得到微生物學(xué)認可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚腈類材料料 保護手保護手 網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)一級和二級生物安全水平一級和二級生物安全水平安全指南安全指南主要內(nèi)容 實驗室的設(shè)計和設(shè)施 實驗室的基本規(guī)范 健康和醫(yī)
17、學(xué)監(jiān)測 培訓(xùn) 實驗室設(shè)備 檢測過程安全防護 廢棄物處理一、實驗室的設(shè)計和設(shè)施在設(shè)計實驗室和安排某些類型的實驗工作時,對于那些可能造成安全問題的情況在設(shè)計實驗室和安排某些類型的實驗工作時,對于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關(guān)注,這些情況包括:要加以特別關(guān)注,這些情況包括:1 1、氣溶膠的形成、氣溶膠的形成2 2、處理大容量和、處理大容量和或高濃度微生物或高濃度微生物3 3、儀器設(shè)備過度擁擠和過多、儀器設(shè)備過度擁擠和過多4 4、嚙齒動物和節(jié)肢動物的侵擾、嚙齒動物和節(jié)肢動物的侵擾5 5、未經(jīng)允許人員進入實驗室、未經(jīng)允許人員進入實驗室6 6、工作流程:一些特殊標本和試劑的使用。、工作流程:一些特
18、殊標本和試劑的使用。 設(shè)施和設(shè)備要求詳見設(shè)施和設(shè)備要求詳見 GB/T 19489-2008GB/T 19489-2008中的要求中的要求典型的一級生物安全水平實驗室典型的二級生物安全水平實驗室在生物安全柜中進行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。在生物安全柜中進行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈kU標志。潛在被污染的廢棄物同普通廢門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈kU標志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開。棄物隔開。二、實驗室的基本規(guī)范 BSL-和BSL-實驗室: 1 1進入規(guī)定進入規(guī)定 2 2工作人員的防護要求工作人員的防護要求 3. 3. 有關(guān)安全操作有關(guān)安全操作 4. 4. 實驗室工作區(qū)實驗
19、室工作區(qū) 5. 5. 生物安全管理生物安全管理 1. 進入規(guī)定 1、在處理危險度2 級或更高危險度級別的微生物時,在實驗室門上應(yīng)標有國際通用的生物危害警告標志(圖1)。 2、只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。 3、實驗室的門應(yīng)保持關(guān)閉。 4、兒童不應(yīng)被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。 5、進入動物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過特別批準。 6、與實驗室工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。2.人員防護1 1、在實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。、在實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。2 2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的、在進行可能直接或意外接觸到
20、血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時,應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后,應(yīng)先消材料或感染性動物的操作時,應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后,應(yīng)先消毒再摘除,隨后必須洗手。毒再摘除,隨后必須洗手。3 3、在處理完感染性實驗材料和動物后,以及在離開實驗室工作區(qū)域前,、在處理完感染性實驗材料和動物后,以及在離開實驗室工作區(qū)域前,都必須洗手。都必須洗手。4 4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設(shè)備。必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設(shè)備。5 5、嚴禁穿著實驗室
21、防護服離開實驗室,(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間)。圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間)。6 6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7 7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8 8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。9 9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。3.有關(guān)安全操作有關(guān)安全操作1 1、嚴禁用
22、口吸移液管。、嚴禁用口吸移液管。2 2、嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。、嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。3 3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。4 4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液,皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。動物體液,皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5 5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,必須向?qū)嶒炇?、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能
23、暴露于感染性物質(zhì)時,必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室?yīng)保存這些事件或事故的書面報告。主管報告。實驗室應(yīng)保存這些事件或事故的書面報告。6 6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序,并予以遵守執(zhí)行。、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序,并予以遵守執(zhí)行。7 7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染(采用化學(xué)或物、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染(采用化學(xué)或物理學(xué)方法)。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果,可能需要準備理學(xué)方法)。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果,可能需要準備污水處理系統(tǒng)。污水處理系統(tǒng)。8 8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污
24、染。、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。4. 實驗室工作區(qū)1 1、實驗室應(yīng)保持清潔整齊,嚴禁擺放和實驗無關(guān)的物品。、實驗室應(yīng)保持清潔整齊,嚴禁擺放和實驗無關(guān)的物品。2 2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后,都必、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后,都必須清除工作臺面的污染。須清除工作臺面的污染。3 3、所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,、所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,必須清除污染。必須清除污染。4 4、在進行包裝和運輸時必須遵循國家和、在進行包裝和運輸時必須遵循國家和或國際的相關(guān)規(guī)定?;驀H
25、的相關(guān)規(guī)定。5 5、如果窗戶可以打開,則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗。、如果窗戶可以打開,則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗。5. 生物安全管理1 1、實驗室主任(對實驗室直接負責(zé)的人員)負責(zé)制訂和采用生物安全、實驗室主任(對實驗室直接負責(zé)的人員)負責(zé)制訂和采用生物安全管理計劃以及安全或操作手冊。管理計劃以及安全或操作手冊。2 2、實驗室主管(向?qū)嶒炇抑魅螀R報)應(yīng)當(dāng)保證提供常規(guī)的實驗室安全、實驗室主管(向?qū)嶒炇抑魅螀R報)應(yīng)當(dāng)保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓(xùn)。培訓(xùn)。3 3、要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員,同時要求他們閱、要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員,同時要求他們閱讀生物安全或操
26、作手冊,并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應(yīng)當(dāng)確讀生物安全或操作手冊,并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應(yīng)當(dāng)確保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊。操作手冊。4 4、應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。、應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。5 5、如有必要,應(yīng)為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評估、監(jiān)測和治療,、如有必要,應(yīng)為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評估、監(jiān)測和治療,并應(yīng)妥善保存相應(yīng)的醫(yī)學(xué)記錄。并應(yīng)妥善保存相應(yīng)的醫(yī)學(xué)記錄。三、健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測主管機構(gòu)有責(zé)任通過實驗室主任來確保實驗室全體工作人員接受
27、適當(dāng)主管機構(gòu)有責(zé)任通過實驗室主任來確保實驗室全體工作人員接受適當(dāng)?shù)慕】当O(jiān)測。監(jiān)測的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達到這些目的,的健康監(jiān)測。監(jiān)測的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達到這些目的,應(yīng)進行如下工作:應(yīng)進行如下工作:1 1、根據(jù)需要提供主動或被動免疫(工作人員的免疫接種)、根據(jù)需要提供主動或被動免疫(工作人員的免疫接種)2 2、促進實驗室感染的早期檢測、促進實驗室感染的早期檢測3 3、應(yīng)禁止高度易感人群(如孕婦或免疫損傷人員)在高危險實驗室中、應(yīng)禁止高度易感人群(如孕婦或免疫損傷人員)在高危險實驗室中工作工作4 4、提供有效的個體防護裝備和方法。、提供有效的個體防護裝備和方法。在一級生物安全水
28、平操作微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南: 歷史證據(jù)表明,在一級生物安全水平操作的微生歷史證據(jù)表明,在一級生物安全水平操作的微生物不太可能引起人類疾病或獸醫(yī)學(xué)意義的動物疾病。物不太可能引起人類疾病或獸醫(yī)學(xué)意義的動物疾病。但理想的做法是,所有實驗室工作人員應(yīng)進行上崗前但理想的做法是,所有實驗室工作人員應(yīng)進行上崗前的體檢,并記錄其病史。疾病和實驗室意外事故應(yīng)迅的體檢,并記錄其病史。疾病和實驗室意外事故應(yīng)迅速報告,所有工作人員都應(yīng)意識到應(yīng)用規(guī)范的實驗室速報告,所有工作人員都應(yīng)意識到應(yīng)用規(guī)范的實驗室操作技術(shù)的重要性。操作技術(shù)的重要性。 在二級生物安全水平操作微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測在二級生物安全水平
29、操作微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南:指南: 1、必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個人病史,并進、必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個人病史,并進行一次有目的的職業(yè)健康評估。行一次有目的的職業(yè)健康評估。 2、實驗室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄。、實驗室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄。 3、育齡期婦女應(yīng)知道某些微生物(如風(fēng)疹病毒)的職業(yè)、育齡期婦女應(yīng)知道某些微生物(如風(fēng)疹病毒)的職業(yè)暴露對未出生孩子的危害。保護胎兒的正確措施因婦女可暴露對未出生孩子的危害。保護胎兒的正確措施因婦女可能接觸的微生物而異。能接觸的微生物而異。四、培訓(xùn) 進入實驗室工作人員必須經(jīng)過培訓(xùn)進入實驗室工作人員必
30、須經(jīng)過培訓(xùn) , , 方能取得進入實驗室控制區(qū)域工作的方能取得進入實驗室控制區(qū)域工作的資格。培訓(xùn)由實驗室負責(zé)人組織資格。培訓(xùn)由實驗室負責(zé)人組織, ,熟悉實驗室工作和操作規(guī)范的人員擔(dān)任熟悉實驗室工作和操作規(guī)范的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括 : :1. 1. 實驗室生物安全管理規(guī)定、自身防護的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定實驗室生物安全管理規(guī)定、自身防護的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定 ;2. 2. 實驗室各項儀器裝備的使用方法;實驗室各項儀器裝備的使用方法;3. 3. 正確的著裝方法;正確的著裝方法;4. 4. 微生物學(xué)操作基本技術(shù)及無菌操作方法;微生物學(xué)操作基本技術(shù)及無菌操作方法;5. 5. 實驗室
31、清潔及消毒方法;實驗室清潔及消毒方法;6. 6. 意外事故處理方法;意外事故處理方法;7. 7. 國內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。國內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。培訓(xùn)的實施細則培訓(xùn)的實施細則 1. 1. 理論培訓(xùn)理論培訓(xùn): :(l) (l) 培訓(xùn)目標培訓(xùn)目標 : : 熟悉本實驗室的各項規(guī)章制度和操作規(guī)范熟悉本實驗室的各項規(guī)章制度和操作規(guī)范 , ,形成初步的實驗室工作概念。了解本實驗室從事工作的特點以形成初步的實驗室工作概念。了解本實驗室從事工作的特點以及各種微生物的危害評估文件。及各種微生物的危害評估文件。(2) (2) 培訓(xùn)方式培訓(xùn)方式 : : 講解。講解。(3) (3) 培訓(xùn)內(nèi)容培
32、訓(xùn)內(nèi)容 : : 本實驗室各項成文的規(guī)章制度本實驗室各項成文的規(guī)章制度: :生物安全防護、生物安全防護、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購制度、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購制度、儀器使用制度等。實驗室的各項規(guī)章制度和生物安全管理手冊。儀器使用制度等。實驗室的各項規(guī)章制度和生物安全管理手冊。(4) (4) 考核考核 : : 由本實驗室三位工作人員組織對理論學(xué)習(xí)的書面考由本實驗室三位工作人員組織對理論學(xué)習(xí)的書面考試和面試工作。書面考試注重其掌握的準確程度試和面試工作。書面考試注重其掌握的準確程度, ,面試主要測試面試主要測試其熟練程度和靈活應(yīng)變能力。考核本合格者
33、須重新學(xué)習(xí)其熟練程度和靈活應(yīng)變能力??己吮竞细裾唔氈匦聦W(xué)習(xí), ,不能進不能進入下一步的培訓(xùn)。入下一步的培訓(xùn)。培訓(xùn)的實施細則培訓(xùn)的實施細則 2. 2. 常規(guī)技能培訓(xùn)常規(guī)技能培訓(xùn): : (l) (l) 培訓(xùn)目標培訓(xùn)目標 : : 熟練基本實驗操作和儀器的使用;初步培養(yǎng)實驗的基本觀熟練基本實驗操作和儀器的使用;初步培養(yǎng)實驗的基本觀念和良好的實驗習(xí)慣。念和良好的實驗習(xí)慣。 (2) (2) 培訓(xùn)方式培訓(xùn)方式 : : 現(xiàn)場實驗?,F(xiàn)場實驗。 (3) (3) 培訓(xùn)內(nèi)容培訓(xùn)內(nèi)容 : :衛(wèi)生打掃衛(wèi)生打掃: : 實驗室地面、實驗臺面、超凈臺面、垃圾處理以及打掃得先后順序;實驗室地面、實驗臺面、超凈臺面、垃圾處理以及打
34、掃得先后順序;工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。 實驗室常規(guī)操作技術(shù)實驗室常規(guī)操作技術(shù) : :包括無菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、包括無菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌(毒)種保存等。菌落接種、活化、菌體收集、菌(毒)種保存等。 小型儀器的使用:微量移液器和移液管的使用、小型儀器的使用:微量移液器和移液管的使用、pHpH計和試紙、天平、混勻計和試紙、天平、混勻器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。 玻璃儀器的清洗玻璃儀器的清洗 : : 量筒、燒杯、三角瓶等。量筒、燒杯、三角瓶等。 大型儀器的使用大型儀器的使用 :
35、 : 普通冰箱和低溫冰箱普通冰箱和低溫冰箱( (存放和處理樣品存放和處理樣品) )、 高壓鍋、離心高壓鍋、離心機、液氮罐、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、電泳設(shè)備、超凈臺、機、液氮罐、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、電泳設(shè)備、超凈臺、 PCR PCR 儀、搖床、儀、搖床、超聲破碎儀、顯微鏡等。超聲破碎儀、顯微鏡等。 消毒和滅菌方法消毒和滅菌方法 : : 物理滅菌(紫外、過濾、灼燒、高壓物理滅菌(紫外、過濾、灼燒、高壓) )法、化學(xué)滅菌法、化學(xué)滅菌( (熏蒸、熏蒸、酒精、消毒液酒精、消毒液) ) 法等。法等。 辦公用品使用的培訓(xùn)辦公用品使用的培訓(xùn) : : 電話、傳真機、電腦、打印機等。電話、傳真機、電腦、打印機
36、等。 五、實驗室設(shè)備 選擇設(shè)備時應(yīng)符合一些基本原則,即:選擇設(shè)備時應(yīng)符合一些基本原則,即: 1 1、在設(shè)計上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接、在設(shè)計上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸觸 2 2、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求 3 3、設(shè)備裝配后應(yīng)無毛刺、銳角以及易松動的部件、設(shè)備裝配后應(yīng)無毛刺、銳角以及易松動的部件 4 4、設(shè)備的設(shè)計、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護、清潔、設(shè)備的設(shè)計、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護、清潔、清除污染和進行質(zhì)量檢驗。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎清除污染和進行質(zhì)量檢驗。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。
37、的物品。 需要詳細咨詢設(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格,以確保設(shè)施具備必要需要詳細咨詢設(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格,以確保設(shè)施具備必要的安全特性。的安全特性。基本生物安全設(shè)備1 1、移液輔助器、移液輔助器避免用口吸的方式移液。有不同設(shè)計的多種產(chǎn)品可供避免用口吸的方式移液。有不同設(shè)計的多種產(chǎn)品可供使用。使用。2 2、生物安全柜,在以下情況使用:、生物安全柜,在以下情況使用: 處理感染性物質(zhì);如果使用密封的安全離心杯,并在生物安全柜內(nèi)處理感染性物質(zhì);如果使用密封的安全離心杯,并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣,則這類材料可在開放實驗室離心裝樣、取樣,則這類材料可在開放實驗室離心 空氣傳播感染的危險增大時空氣傳播感染的危險增大
38、時 進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(包括離心、研磨、混勻、劇烈進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織)。質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織)。3 3、一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以減少、一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以減少生成氣溶膠。生成氣溶膠。4 4、螺口蓋試管及瓶子。、螺口蓋試管及瓶子。5 5、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或
39、其他適當(dāng)工具。、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當(dāng)工具。6 6、一次性巴斯德塑料移液管,盡量避免使用玻璃制品。、一次性巴斯德塑料移液管,盡量避免使用玻璃制品。7 7、在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進、在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進行驗收。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。行驗收。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(1 1) 生物安全柜分為生物安全柜分為I I、IIII、IIIIII個不同等級。個不同等級。 I I級能夠保護工作人員和周圍環(huán)境,但不能切實保護操級能夠保護工作人員和周圍
40、環(huán)境,但不能切實保護操作樣本,因此生物安全柜作樣本,因此生物安全柜I I級不能用于食品微生物檢驗級不能用于食品微生物檢驗的無菌操作。的無菌操作。 IIII級生物安全柜在設(shè)計上不但能提供個體防護,而且級生物安全柜在設(shè)計上不但能提供個體防護,而且能保護工作臺面的物品不受空氣的污染,其有四種不能保護工作臺面的物品不受空氣的污染,其有四種不同的類型(同的類型(A1A1、A2A2、B1B1和和B2B2型),可用于操作危險度型),可用于操作危險度I II I級和級和IIIIII級的感染性物質(zhì)。級的感染性物質(zhì)。 IIIIII級生物安全柜則可提供更高級別的生物安全保護。級生物安全柜則可提供更高級別的生物安全保
41、護。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(2 2)生物安全柜使用要點:生物安全柜使用要點:(1 1)使用者應(yīng)熟知生物安全柜的使用方法和局限性;)使用者應(yīng)熟知生物安全柜的使用方法和局限性;(2 2)使用前后,工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑擦拭消毒,生物安全柜風(fēng)機應(yīng)至少運行)使用前后,工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑擦拭消毒,生物安全柜風(fēng)機應(yīng)至少運行5min5min完完成凈化后使用;成凈化后使用;(3 3)使用中不能打開玻璃觀察檔板,應(yīng)穿個體防護服;)使用中不能打開玻璃觀察檔板,應(yīng)穿個體防護服;(4 4)生物安全柜內(nèi)盡量少放置器材或標本、不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán);)生物安全柜內(nèi)盡量少
42、放置器材或標本、不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán);(5 5)放入生物安全柜的物品應(yīng)采用)放入生物安全柜的物品應(yīng)采用7070酒精來清除表面污染??梢栽谙緞┙竦拿砩暇凭珌砬宄砻嫖廴???梢栽谙緞┙竦拿砩线M行實驗,以吸收可能濺出的液滴;進行實驗,以吸收可能濺出的液滴;(6 6)耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及移液適宜于盛放盤不應(yīng)放在生物安全柜的外面;)耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及移液適宜于盛放盤不應(yīng)放在生物安全柜的外面;(7 7)在工作臺面上的操作應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行;)在工作臺面上的操作應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行;(8 8)在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生
43、物的環(huán)境中,應(yīng)避免使用明火,可使用電熱式)在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應(yīng)避免使用明火,可使用電熱式接種環(huán)滅菌器,最好使用一次性無菌接種環(huán);接種環(huán)滅菌器,最好使用一次性無菌接種環(huán);(9 9)盡可能避免雙臂頻繁進出生物安全柜,否則會干擾空氣屏障的完全性,影響防護;)盡可能避免雙臂頻繁進出生物安全柜,否則會干擾空氣屏障的完全性,影響防護;(1010)一旦發(fā)生生物學(xué)危害物品溢出,應(yīng)在生物安全柜運行狀態(tài)下清理,使用有效的消毒劑,)一旦發(fā)生生物學(xué)危害物品溢出,應(yīng)在生物安全柜運行狀態(tài)下清理,使用有效的消毒劑,盡可能減少氣溶膠,所有接觸溢出的物品都要進行消毒或高壓滅菌。盡可能減少氣溶膠,所有
44、接觸溢出的物品都要進行消毒或高壓滅菌。(1111)每年應(yīng)對生物安全防護效果進行測試,定期維護。)每年應(yīng)對生物安全防護效果進行測試,定期維護。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(3 3)離心機離心機 離心機是最常用的實驗室儀器,最易導(dǎo)致實驗室污染。掌握正確的離心機使用技術(shù)十分重要。離心機是最常用的實驗室儀器,最易導(dǎo)致實驗室污染。掌握正確的離心機使用技術(shù)十分重要。 (1)(1)在使用實驗室離心機時,儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。在使用實驗室離心機時,儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。 (2)(2)應(yīng)按照操作手冊來操作離心機。應(yīng)按照操作手冊來操作離心機
45、。 (3)(3)離心機放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部,以正確放置十字軸和離心桶。離心機放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部,以正確放置十字軸和離心桶。 (4)(4)離心管和盛放離心標本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成,或最好為塑料制品,并且在使用前應(yīng)檢查是否離心管和盛放離心標本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成,或最好為塑料制品,并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。破損。 (5)(5)用于離心的試管和標本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊用于離心的試管和標本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊( (最好使用螺旋蓋最好使用螺旋蓋) )。 (6)(6)離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。離心桶的裝載、
46、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。 (7)(7)離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對,并在裝載離心管后正確平衡。離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對,并在裝載離心管后正確平衡。 (8)(8)操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 (9)(9)空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或乙醇空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或乙醇( (異丙醇,異丙醇,7 O7 O) )來平衡。來平衡。 (1 O)(1 O)對于危險度對于危險度3 3級和級和4 4級的微生物,必須使用可封口的離心桶級的微生物,必須使用可封口的離心桶( (安全杯安全杯) )。 (11)(11)當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時,
47、必須小心不能將離心管裝得過滿,否則會導(dǎo)致漏液。當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時,必須小心不能將離心管裝得過滿,否則會導(dǎo)致漏液。 (1 2)(1 2)應(yīng)當(dāng)檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯,應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。應(yīng)當(dāng)檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯,應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。 (1 3)(1 3)應(yīng)當(dāng)檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細微裂痕。應(yīng)當(dāng)檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細微裂痕。 (1 4)(1 4)每次使用后,要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。每次使用后,要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。 (1 5)(1 5)使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。
48、使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。 (1 6)(1 6) 良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護,以防止感染性氣溶膠和可擴散粒良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護,以防止感染性氣溶膠和可擴散粒子的產(chǎn)生。子的產(chǎn)生。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(4 4) 移液管、移液器移液管、移液器 (1)(1)應(yīng)使用移液設(shè)備,嚴禁用口吸取。應(yīng)使用移液設(shè)備,嚴禁用口吸取。 (2) (2)所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。 (3)(3)不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中
49、吹入氣體。 (4)(4)感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。 (5)(5)不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。 (6)(6)刻度對應(yīng)刻度對應(yīng)(marktomark)(marktomark)移液管不需要排出最后一滴液體,因此最好使移液管不需要排出最后一滴液體,因此最好使用這種移液管。用這種移液管。 (7)(7)污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時間后再進行處理。在消毒劑中浸泡適當(dāng)時間后再進行處理。 (8)(8)盛放廢棄移液
50、管的容器不能放在外面,應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。盛放廢棄移液管的容器不能放在外面,應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。 (9)(9)有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。 (1O)(1O)在打開隔膜封口的瓶子時,應(yīng)使用可以使用移液管的工具,而避免使用在打開隔膜封口的瓶子時,應(yīng)使用可以使用移液管的工具,而避免使用皮下注射針頭和注射器。皮下注射針頭和注射器。 (11)(11)為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散,在工作臺面應(yīng)當(dāng)放置一塊為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散,在工作臺面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙,使用后將其按感染性廢棄物處理。浸有消毒液的
51、布或吸有消毒液的紙,使用后將其按感染性廢棄物處理。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(5 5) 接種環(huán)接種環(huán) 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),能使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),能夠避免在酒精燈的明火上加熱所引起的感染性夠避免在酒精燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要進行消毒的一次性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要進行消毒的一次性接種環(huán)。接種環(huán)。常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(6 6) 冰箱與冰柜冰箱與冰柜(1)(1)冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔,應(yīng)清理出所有在冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔,應(yīng)清理出所有在儲存過程中破
52、碎的安瓿和試管等物品。清理時應(yīng)戴厚橡膠手套并儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時應(yīng)戴厚橡膠手套并進行面部防護,清理后要對內(nèi)表面進行消毒。冰箱內(nèi)物品放置應(yīng)進行面部防護,清理后要對內(nèi)表面進行消毒。冰箱內(nèi)物品放置應(yīng)規(guī)范,。規(guī)范,。(2)(2)儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲存日期和儲存者的姓名。未標明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并儲存日期和儲存者的姓名。未標明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。丟棄。(3)(3)應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。(4)(4)除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。
53、冰箱門上應(yīng)注除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應(yīng)注明這一點。明這一點。 常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(7 7)高壓滅菌器和滅菌消毒設(shè)備高壓滅菌器和滅菌消毒設(shè)備 (1)(1)應(yīng)由受過良好培訓(xùn)的人員負責(zé)高壓滅菌器的操作和日常維護。應(yīng)由受過良好培訓(xùn)的人員負責(zé)高壓滅菌器的操作和日常維護。 (2)(2)預(yù)防性的維護程序應(yīng)包括:由有資格人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性預(yù)防性的維護程序應(yīng)包括:由有資格人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。以及所有的儀表和控制器。 (3)(3)應(yīng)使用飽和蒸氣,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品,這些物質(zhì)可能應(yīng)
54、使用飽和蒸氣,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品,這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。污染正在滅菌的物品。 (4)(4)所有要高壓滅菌的物品都應(yīng)放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中;所有要高壓滅菌的物品都應(yīng)放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中;滅菌器柜腔裝載要松散,以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。滅菌器柜腔裝載要松散,以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。 (5) (5)當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時,互鎖安全裝置可以防止門被打開,而沒有互鎖裝置當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時,互鎖安全裝置可以防止門被打開,而沒有互鎖裝置的高壓滅菌器,應(yīng)當(dāng)關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到的高壓滅菌器,應(yīng)當(dāng)關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到8080以
55、下時再打開門。以下時再打開門。 (6)(6)當(dāng)高壓滅菌液體時,由于取出時液體可能因過熱而沸騰,故應(yīng)采用慢排式設(shè)當(dāng)高壓滅菌液體時,由于取出時液體可能因過熱而沸騰,故應(yīng)采用慢排式設(shè)置。置。 (7)(7)即使溫度下降到即使溫度下降到8080以下,操作者打開門時也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥磉M以下,操作者打開門時也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥磉M行防護。行防護。 (8)(8)在進行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測中,生物指示劑或熱電偶計應(yīng)置于每件高壓在進行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測中,生物指示劑或熱電偶計應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心。最好在滅菌物品的中心。最好在“最大最大”裝載時用熱偶計和記錄儀進行定時監(jiān)測,以確裝載時用熱偶
56、計和記錄儀進行定時監(jiān)測,以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。定滅菌程序是否恰當(dāng)。 (9)(9)滅菌器的排水過濾器滅菌器的排水過濾器( (如果有如果有) )應(yīng)當(dāng)每天拆下清洗。應(yīng)當(dāng)每天拆下清洗。 (1O)(1O)應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。 常用設(shè)備的常用設(shè)備的安全操作注意事項(安全操作注意事項(8 8) 均質(zhì)器、研磨器、超聲處理器均質(zhì)器、研磨器、超聲處理器 在使用均質(zhì)器、研磨器、超聲處理器時,在使用均質(zhì)器、研磨器、超聲處理器時,含有感染性物質(zhì)的氣溶膠可能溢出,應(yīng)戴手套含有感染性物質(zhì)的氣溶膠可能溢出,應(yīng)戴手套并于吸
57、收性材料罩住,在生物安全柜中操作。并于吸收性材料罩住,在生物安全柜中操作。 實驗室菌種的安全要求: 菌株的生物危害程度應(yīng)與保藏實驗室生物防護水平相適應(yīng),實驗室的裝備和管理應(yīng)符合病原微生物實驗室生物安全管理條例和GB 19489實驗室 生物安全通用要求 實驗室應(yīng)制定菌種使用、保藏管理制度和標準化操作規(guī)程,應(yīng)涵蓋菌種申購、保管、使用、傳代、存儲等諸方面。六、檢測過程安全操作注意事項安全操作注意事項感染性物質(zhì)(菌種)的儲存、包裝與運輸感染性物質(zhì)(菌種)的儲存、包裝與運輸 食品微生物檢測中使用的標準(參照菌種)的包裝與運輸應(yīng)按照病原微生物實驗室生物安全管理條例和人間傳染的病原微生物名錄有關(guān)規(guī)定進行。
58、以食品微生物檢測中常見的沙門氏菌屬為例,其屬于第三類病原微生物,實驗活動所需生物安全實驗室級別為二級。運輸包裝分類為B類。具體要求如下:1.運輸專用名稱為:診斷標本或臨床標本或生命物質(zhì)B類。英文運輸專用名稱為:Biological substance,category B。UN編號為:UN3373。2.應(yīng)有三層包裝: 第一層包裝要求用保存標本的原始容器(外螺旋管),稱為主容器(見圖1),需將蓋口密封,主容器單包裝最大運輸量液體1L,固體4kg;運輸標本的主容器運輸標本的主容器 第二層包裝可以采用專用二級包裝桶或耐高壓塑料袋,稱為輔助容器(見圖2),應(yīng)防水、防破損、防泄漏,并含吸收材料;運輸標本
59、的輔助容器運輸標本的輔助容器 (吸收材料吸收材料) 第三層包裝是將密封好的輔助容器放入運輸包裝盒, 稱為外包裝(見附圖5),最大運輸量為液體4L、固體4kg,至少有一個表面100mm 100mm,運輸包裝盒要求有保持冷藏低溫功能,應(yīng)含制冷器件、襯墊材料。 運輸標本的外包裝運輸標本的外包裝七、廢棄物處理七、廢棄物處理 廢棄物是指將要丟棄的所有物品。廢棄物是指將要丟棄的所有物品。 廢棄物處理的首要原則廢棄物處理的首要原則:是所有感染性材料必須在實驗室:是所有感染性材料必須在實驗室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。 用以處理潛在感染性微生物或動物組織的所有的實驗室物用以處理潛在
60、感染性微生物或動物組織的所有的實驗室物品,在被丟棄前應(yīng)考慮的主要問題有:品,在被丟棄前應(yīng)考慮的主要問題有:1 1、是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行了有效的清除污染或消毒?、是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行了有效的清除污染或消毒?2 2、如果沒有,他們是否以規(guī)定的方式包裹,以便就地焚燒或運送到其、如果沒有,他們是否以規(guī)定的方式包裹,以便就地焚燒或運送到其他有焚燒設(shè)施的地方進行處理?他有焚燒設(shè)施的地方進行處理?3 3、丟棄已清除污染的物品時,是否會對直接參與丟棄的人員,或在設(shè)、丟棄已清除污染的物品時,是否會對直接參與丟棄的人員,或在設(shè)施外可能接觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學(xué)或其他方面的危害?
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