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文檔簡介

1、2011高考生物備考:必考知識點匯編(14)專題2 細胞工程1.植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞的增殖培養(yǎng)基的物理性質(zhì)固體液體(合成培養(yǎng)基)培養(yǎng)基的成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂、激素等葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等結(jié)果培育成新的植株或組織培育成細胞系或細胞株培養(yǎng)目的植株快速繁殖脫毒植株的培育人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究取材植物幼嫩的部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織其他條件均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH、O2 等條件

2、(1)植物組織培養(yǎng)(2)動物細胞培養(yǎng)概念:取動物體的相關(guān)組織分散成單個細胞后,在適宜培養(yǎng)基中使細胞生長和增殖的過程。基本過程:培養(yǎng)的動物細胞大都取自動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官組織,將組織取出來以后,先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理,使細胞分散成單個細胞,然后配制一定濃度的懸浮液,在培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)。隨著細胞的生長和增殖,大多數(shù)細胞不適應(yīng)懸浮生長,它們必須在固定的表面上生長和分裂,細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長,隨著細胞越來越多,貼壁生長的細胞分裂生長到表面相互接觸時就停止分裂增殖,這種現(xiàn)象叫接觸抑制。這樣就需定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來,配成細胞懸浮液,分裝到兩個或兩上以上的培養(yǎng)瓶

3、中進行傳代培養(yǎng)。在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)細胞株和細胞系兩種類型。(如圖所示)2植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞的全能性細胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散后,誘導(dǎo)細胞融合誘導(dǎo)手段離心、電刺激、振動、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細胞雜交相比,還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果獲取雜種植株獲得雜種細胞,以生產(chǎn)細胞產(chǎn)品用途克服遠緣雜交不親和的障礙,擴展雜交親本范圍,培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等(1)植物體細胞雜交技術(shù)植物體細胞雜交就是將不同種植物的體細胞,在一定條件下融合

4、成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。植物體細胞雜交的障礙,一是植物細胞有細胞壁,二是如何誘導(dǎo)植物細胞融合。利用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁,這樣可保持原生質(zhì)體的活性。去除細胞壁的原生質(zhì)體再利用人工誘導(dǎo)的方法融合,人工誘導(dǎo)的方法包括物理法和化學(xué)法。物理法包括離心、振動、電激等,化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。原生質(zhì)體融合后的細胞是雜種細胞,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)把雜種細胞培養(yǎng)成雜種植株。(2)動物體細胞核移植動物體細胞核移植依據(jù)的原理還是細胞的全能性。動物細胞的全能性隨著動物細胞分化程度的提高而逐漸受到抑制,全能性表達很難,但是動物的細胞核內(nèi)仍含有該種動物的全部遺傳

5、基因,具有發(fā)育成完整個體的潛能,即動物的細胞核仍具有全能性。但只靠動物的細胞核是不行的,必需提供促進細胞核表達全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件,還要保證細胞的完整性,這樣去核的卵母細胞是最合適的細胞。因為卵母細胞體積大、易操作,含有促使細胞核表達全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。通過核移植形成重組細胞,重組細胞必須通過細胞培養(yǎng)形成重組胚胎,然后才能進行胚胎移植,進入代孕母體,發(fā)育成成熟胚胎,產(chǎn)出即是克隆動物,該動物的核基因型與供體體細胞完全相同,該技術(shù)是一種無性繁殖技術(shù)。(3)動物細胞融合、單克隆抗體制備細胞融合是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程,也叫細胞雜交。雜交細胞是具有兩個或多個細胞的遺傳信息的單

6、核細胞。雜交細胞的形成需要人工誘導(dǎo),如聚乙二醇(PEG)、滅活的仙臺病毒、電激等。融合的細胞要繁殖就要進行動物細胞的培養(yǎng),通過動物細胞的培養(yǎng),雜交細胞表現(xiàn)出兩個親本各自的優(yōu)良特點。單克隆抗體的制備,首先應(yīng)獲得雜交瘤細胞,其過程是用已免疫的效應(yīng)B細胞和骨髓瘤細胞雜交獲得三種細胞:BB細胞、B瘤細胞、瘤瘤細胞,然后用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細胞。雜交瘤細胞要發(fā)揮其繁殖快、產(chǎn)生特異性抗體的優(yōu)點,應(yīng)通過動物細胞培養(yǎng)才能實現(xiàn)。所以無論是動物細胞融合還是單克隆抗體的制備,都是以動物細胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)的。3生物技術(shù)與育種技術(shù)原理優(yōu)點缺點誘變育種基因突變提高生物便宜的頻率,使后代變異性狀較快穩(wěn)定;可大幅度改良某些性狀,縮短育種進程盲目性大,需大量處理供試材料雜交育種基因重組使位于不同個體的優(yōu)良性狀集中于一個個體周期長,難以克服遠緣雜交不親和的障礙單倍體育種染色體變異獲得個體均為純種,明顯縮短育種年限技術(shù)復(fù)雜,須與雜交育種配合、且需細胞工程參與多倍體育種染色體變異器官大,提高產(chǎn)量和營養(yǎng)成分適用于植物,動物方面難以展開基因工程育種分子遺傳學(xué)原理打破物種界限,定向地

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