生化分離工程復(fù)習(xí)題2及答案

1、生化分離工程復(fù)習(xí)題一、填空題1. 生化分離過程主要包括四個方面： 預(yù)處理 、 細胞分離 、 純化 、產(chǎn)品加工。 2. 發(fā)酵液常用的固液分離方法有 沉淀法 和 結(jié)晶法 等。3. 膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為 微濾膜 、超濾膜、納濾膜和 反滲透膜 ； 4. 離子交換分離操作中，常用的洗脫方法 簡單洗脫 和 梯度洗脫 。5. 等電聚焦電泳法分離不同蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)其 各種蛋白質(zhì)等電點 的不同。6. 典型的工業(yè)過濾設(shè)備有 板框壓濾機 和 轉(zhuǎn)筒真空過濾機 。7. 常用的蛋白質(zhì)沉析方法有 鹽析法 、 等電點沉淀 和有機溶劑沉淀。8. 離子交換樹脂由 載體 、 活性基團 和可交換

2、離子組成。 9. 超臨界流體的特點是與氣體有相似的 擴散性能 ，與液體有相似的 密度 。二、單選題1供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不包括（ D ）A. 動物 B. 植物 C. 微生物 D. 礦物質(zhì)2下列哪個不屬于初步純化：( C )A. 沉淀法 B. 吸附法 C. 親和層析 D. 萃取法3HPLC是哪種色譜的簡稱（ C ）。A. 離子交換色譜 B.氣相色譜 C.高效液相色譜 D.凝膠色譜4其他條件均相同時，優(yōu)先選用那種固液分離手段（ B ）A. 離心分離 B. 過濾 C. 沉降 D. 超濾5適合小量細胞破碎的方法是（ C ）A. 高壓勻漿法 B. 超聲破碎法 C. 高速珠磨法 D. 高壓擠壓法6有機

3、溶劑沉淀法中可使用的有機溶劑為（ D ）A. 乙酸乙酯 B. 正丁醇 C. 苯 D. 丙酮7液-液萃取時常發(fā)生乳化作用，如何避免（ D ）A. 劇烈攪拌 B. 低溫 C. 靜止 D. 加熱8鹽析法與有機溶劑沉淀法比較，其優(yōu)點是（ B ） A分辨率高 B變性作用小 C雜質(zhì)易除 D沉淀易分離 9工業(yè)上常用的過濾介質(zhì)不包括（ D ）A. 織物介質(zhì) B. 堆積介質(zhì) C. 多孔固體介質(zhì) D. 真空介質(zhì)10哪一種膜孔徑最?。?C ）A. 微濾 B. 超濾 C. 反滲透 D. 納米過濾11用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（ C ）A. 離子交換色譜 B. 親和色譜 C. 凝膠過濾色譜 D. 反

4、相色譜12“類似物容易吸附類似物”的原則，一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（ B ） A極性溶劑 B非極性溶劑 C水 D溶劑13下列細胞破碎的方法中，哪個方法屬于非機械破碎法( A )A. 化學(xué)法 B. 高壓勻漿 C. 超聲波破碎 D. 高速珠磨14離子交換樹脂適用（ A ）進行溶脹A. 水 B. 乙醇 C. 氫氧化鈉 D. 鹽酸15使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（ D ）A. 氯化鈉 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸銨16超臨界流體萃取法適用于提?。?B ）A. 極性大的成分 B. 極性小的成分 C. 離子型化合物 D. 能氣化的成分17最常用的干燥方法有（ D ）A. 常壓干燥 B

5、. 減壓干燥 C. 噴霧干燥 D. 以上都是18分子篩層析指的是（ C ）A. 吸附層析 B. 分配層析 C. 凝膠過濾 D. 親和層析19為加快過濾效果通常使用（ C ）A. 電解質(zhì) B. 高分子聚合物 C. 惰性助濾劑 D. 活性助濾劑20影響電泳分離的主要因素（ B ）A. 光照 B. 待分離生物大分子的性質(zhì) C. 濕度 D. 電泳時間21發(fā)酵液的預(yù)處理方法不包括（ C ）A. 加熱 B. 絮凝 C. 離心 D. 調(diào)pH22哪種細胞破碎方法適用工業(yè)生產(chǎn)（ A ）A. 高壓勻漿 B. 超聲波破碎 C. 滲透壓沖擊法 D. 酶解法23液-液萃取時常發(fā)生乳化作用，如何避免（ D ）A. 劇烈攪

6、拌 B. 低溫 C. 靜止 D. 加熱24在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中，目標蛋白質(zhì)存在于（ A ）A. 上相 B. 下相 C. 葡聚糖相 D. 以上都有可能25使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（ D ）A. 氯化鈉 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸銨26超濾技術(shù)常被用作（ C ）A. 小分子物質(zhì)的脫鹽和濃縮 B. 小分子物質(zhì)的分級分離 C. 小分子物質(zhì)的純化 D. 固液分離27吸附色譜分離的依據(jù)是（ A ）。A. 固定相對各物質(zhì)的吸附力不同 B. 各物質(zhì)分子大小不同C. 各物質(zhì)在流動相和固定相的分配系數(shù)不同 D. 各物質(zhì)與專一分子的親和力不同28人血清清蛋白的等電點為4.64，在pH為7的溶

7、液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向（ A ）A. 正極移動 B. 負極移動 C. 不移動 D. 不確定。29蛋白質(zhì)分子量的測定可采用（ C ）方法。A離子交換層析 B. 親和層析 C. 凝膠層析 D. 聚酰胺層析30陰離子交換劑（ C ）。A. 可交換的為陰、陽離子 B. 可交換的為蛋白質(zhì) C. 可交換的為陰離子 D. 可交換的為陽離子31下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法（ A ）。A. 親和層析 B. 凝膠層析 C. 離子交換層析 D. 鹽析32下列哪項不是蛋白質(zhì)的濃度測定的方法（ D ）。A. 凱氏定氮法 B. 考馬斯亮藍法 C. 福林-酚法 D. 核磁共振33物理萃取即溶

8、質(zhì)根據(jù)（ B ）的原理進行分離的。A. 吸附 B. 相似相溶 C. 分子篩 D. 親和34葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹（ B ）A. 甲醇 B. 乙醇 C. 緩沖液 D. 乙酸乙酯35疏水性相互作用層析通常在（ D ）的條件下進行A. 酸性 B. 堿性 C. 中性 D. 高濃度鹽溶液36超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)的溶解度達到分離的目的（ C ）A. 降溫 B. 升高壓力 C.升溫 D. 加入夾帶劑37HPLC是哪種色譜的簡稱（ C ）。A離子交換色譜 B. 氣相色譜 C. 高效液相色譜 D. 凝膠色譜38最常用的干燥方法有（ D ）A. 常壓干燥 B. 減壓干燥 C. 噴霧干燥 D. 以上

9、都是三、判斷題1細胞破碎技術(shù)是生化分離操作中必需的步驟。（ × ）2板框壓濾機可過濾所有菌體。（ × ）3冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質(zhì)。（ ）4鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。（ ）5要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點附近進行提取。（ × ）6助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。（ × ） 7通過加入某些反應(yīng)劑是發(fā)酵液進行預(yù)處理的方法之一。（ ）8珠磨法中適當(dāng)?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。（ × ）9冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質(zhì)。（ ）10氨基酸、蛋

10、白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點沉析。（ ）11蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變pH可改變其荷電性質(zhì)，pHpI蛋白質(zhì)帶正電。（ × ）12層析分離是一種化學(xué)的分離方法。（ × ）13層析點樣時用一根毛細管，吸取樣品溶液，在距薄層一端1.5-2cm的起始線上點樣，樣品點直徑小于3mm。（ ）14凝膠層析會使得大分子物質(zhì)后流出，小分子物質(zhì)先流出。（ × ）15蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中，最好在高溫下進行，因為溫度高會增加其溶解度。（ × ）16溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。（ × ）17要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點附近進行提取。

11、（ × ）18應(yīng)用有機溶劑提取生化成分時，一般在較高溫度下進行。（ × ）19氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點沉析。（ ）20色譜分離技術(shù)中固定相都是固體。（ × ）四、簡答題1. 生化分離技術(shù)的基本涵義及內(nèi)容？生化分離是從生物材料、微生物的發(fā)酵液、生物反應(yīng)液或動植細胞的培養(yǎng)液中分離并純化有關(guān)生化產(chǎn)品（如具有藥理活性作用的生物藥物等）的過程，又稱下游工程。發(fā)酵液預(yù)處理細胞分離（細胞破碎細胞碎片分離）初步純化高度純化成品加工2. 簡述生化分離過程的特點? 特點：1、目的產(chǎn)物在初始物料（發(fā)酵液）中的含量低；2、培養(yǎng)液是多組分的混合物，除少量產(chǎn)物外，還

12、有大量的細胞及碎片、其他代謝物（幾百上千種）、培養(yǎng)基成分、無機鹽等；3、生化產(chǎn)物的穩(wěn)定性低，易變質(zhì)、易失活、易變性，對溫度、pH值、重金屬離子、有機溶劑、剪切力、表面張力等非常敏感；4、對最終產(chǎn)品的質(zhì)量要求高3 簡述軟水和無鹽水的制備方法？軟水的制備：利用鈉型磺酸樹脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。無鹽水的制備：將原水通過氫型強酸性陽離子交換樹脂和羥型強堿或弱堿性陰離子交換樹脂的組合，經(jīng)過離子交換反應(yīng)，將水中所有的陰、陽離子除去，從而制得純度很高的無鹽純水。4. 試述柱層析的基本操作過程。答：1、裝柱：干法裝柱濕法裝柱注意：濕法裝柱中柱內(nèi)預(yù)留一部分水，防止氣泡的產(chǎn)生，裝柱過程要

13、連貫。平衡。2、加樣：干法加樣濕法加樣注意：加樣過程中，要防止產(chǎn)生飛濺，量要適中。3、洗脫：以設(shè)定好的流速加入洗脫劑，可以是單一溶劑，也可以梯度洗脫。注意：不使柱表面的溶液流干，柱上端保留一層溶液。4、收集：每隔10mL收集一試管，使用層析的手段或紫外檢測器進行實時的檢測，合并具有相同物質(zhì)的流份。5. 簡述凝膠層析有哪些用途？1、脫鹽2、用于分離提純3、測定高分子物質(zhì)的分子量4、高峰自溶液的濃縮6. 簡述膜分離技術(shù)的類型？微濾、納濾、超濾、反滲透、電滲析7. 木瓜蛋白酶是一種來源廣泛的植物蛋白酶，它對蛋白質(zhì)、短肽化合物、氨基酸酯以及酰胺等多類化合物的水解反應(yīng)都具有良好的催化活性。被廣泛應(yīng)用于肉類嫩化、啤酒澄清、明膠制造、蠶繭脫膠、皮革脫毛等工業(yè) ,在醫(yī)療衛(wèi)生方面用途前景更為廣闊。木瓜蛋白酶的生產(chǎn)以番木瓜未成熟果實的新鮮乳汁為原料 ,如何改進生產(chǎn)工藝、提高產(chǎn)