白酒中鄰苯二甲酸酯類的測定

1、主要內(nèi)容主要內(nèi)容 鄰苯二甲酸酯類化合物的特性鄰苯二甲酸酯類化合物的特性 檢測方法檢測方法概述概述 氣質(zhì)聯(lián)用方法氣質(zhì)聯(lián)用方法 檢測檢測過程中的關(guān)鍵控制點過程中的關(guān)鍵控制點 檢驗結(jié)果的分析和確認檢驗結(jié)果的分析和確認一、鄰苯二甲酸酯類一、鄰苯二甲酸酯類特性分析特性分析 n鄰苯二甲酸酯類鄰苯二甲酸酯類化合物化合物（PAEsPAEs），是指從鄰苯二甲酸二甲基酯），是指從鄰苯二甲酸二甲基酯到十三烷基酯，共到十三烷基酯，共2020多種化合物。多種化合物。n是目前最常用的是目前最常用的增塑劑增塑劑，主要，主要 用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯 由硬塑膠變?yōu)橛袕椥缘乃苣z。由硬塑膠變?yōu)橛袕?/p>

2、性的塑膠。n其具有種類多、難以降解、生物富其具有種類多、難以降解、生物富 集性強的特點集性強的特點, , 具有雌激素樣作用，具有雌激素樣作用， 是是全球環(huán)境污染最為嚴重物質(zhì)之一全球環(huán)境污染最為嚴重物質(zhì)之一。PAEs性質(zhì)性質(zhì) 鄰苯二甲酸酯的一般化學結(jié)構(gòu)是由一個剛性平面芳烴和兩個可塑的非線性脂肪側(cè)鏈組成鄰苯二甲酸酯的一般化學結(jié)構(gòu)是由一個剛性平面芳烴和兩個可塑的非線性脂肪側(cè)鏈組成, ,常溫下呈無色油狀常溫下呈無色油狀粘稠液體。一般難溶于水粘稠液體。一般難溶于水, ,易溶于有機溶劑易溶于有機溶劑, ,屬中等極性物質(zhì)。屬中等極性物質(zhì)。 該類化合物的液態(tài)溫度范圍相當寬該類化合物的液態(tài)溫度范圍相當寬, ,

3、具有非常大的流動性和較小的揮發(fā)性和水溶性具有非常大的流動性和較小的揮發(fā)性和水溶性, ,這些理化性質(zhì)決定了這些理化性質(zhì)決定了PAEsPAEs的行為特點。的行為特點。幾種重點關(guān)注的幾種重點關(guān)注的PAEs性質(zhì)性質(zhì)DMP:沸點282。與乙醇、乙醚混溶，溶于苯、丙酮等多種有機溶劑20水中溶解度小于0.1g/L。logP=1.56。DEP：沸點350。與乙醇、乙醚混溶，溶于丙酮、苯等有機溶劑，20水中溶解度1g/L。logP=3.3。DBP：沸點340。水溶性及揮發(fā)性都很低，但易溶于乙醇、乙醚、丙酮和苯等有機溶劑也能與大多數(shù)烴類互溶。 logP=4.72。 DIBP：沸點327。在水中溶解度0.05g/L

4、（25）。logP=4.11。 DEHP：沸點386。不溶于水，溶于大多數(shù)有機溶劑和烴類。 logP=7.19。 PAEs特性總結(jié)與分析思路特性總結(jié)與分析思路 PAEs具有較高的沸點，對光熱穩(wěn)定。大部分PAEs具有親脂性，易溶于非極性溶劑。其中DMP、DEP等有一定的親水性。 適合用液液萃取、固相萃取等方式進行凈化、富集，但須照顧到具有一定親水性的組分DMP、DEP、DMEP、DEEP。二、二、白酒中白酒中PAEsPAEs的檢測方法的檢測方法概述概述1 1、方法和標準、方法和標準 試劑盒法試劑盒法 氣相色譜法氣相色譜法(GC)(GC)、氣質(zhì)聯(lián)用法（氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MSGC-MS）。）。 液相

5、色譜法液相色譜法(LC(LC），液質(zhì)聯(lián)用法（），液質(zhì)聯(lián)用法（L LC-MSC-MS/MS/MS）。）。GB/T 21911-2008 GB/T 21911-2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測定食品中鄰苯二甲酸酯的測定 2 2、試劑盒法、試劑盒法 基于ELISA原理 針對鄰苯二甲酸酯一類全部物質(zhì)的試劑盒 專門針對DBP的試劑盒 檢測限多在0.05ppm1ppm之間 多達數(shù)十種應用分析應用分析 最為關(guān)注的就是DBP。由于DBP限量低，其余兩種成分限量要求高，還可能有其他沒有限量要求的組分存在。因此，試劑盒篩查發(fā)現(xiàn)有檢出的，并不能確認合格與否。 專門針對DBP檢測的試劑盒，存在同類物質(zhì)的交叉反應，特別

6、是作為異構(gòu)體的DIBP，交叉反應率較高，多數(shù)試劑盒都在30%上，存在較高的誤判可能。3 3、氣相色譜檢測方法、氣相色譜檢測方法 氣相色譜法：氣相色譜法使用FID檢測器，可以對鄰苯二甲酸類物質(zhì)進行檢測。但是受靈敏度的限制，對于酒類中的微量DBP不能滿足檢測要求。若采用濃縮富集、以及使用大體積進樣的方式雖可提高靈敏度，但考慮到塑化劑類物質(zhì)在各種試劑乃至器具中都存在本底值，濃縮富集可能加劇這種影響，實際操作中應當慎用。三、三、白酒中白酒中PAEsPAEs氣質(zhì)聯(lián)用檢測方法氣質(zhì)聯(lián)用檢測方法1、方法原理 白酒中的PAEs以正己烷提取，使用HP-5MS石英毛細管柱，經(jīng)氣相色譜分離后，使用帶EI源的單四極桿質(zhì)

7、譜儀，選擇離子模式（SIM）監(jiān)測，以各組分保留時間和特征離子的豐度比定性，外標法定量。2 2、試劑、材料、儀器、試劑、材料、儀器 正己烷（色譜純或重蒸分析純）、氯化鈉；正己烷（色譜純或重蒸分析純）、氯化鈉； 具塞玻璃離心管、玻璃膠頭滴管、渦旋混合器、水浴鍋；具塞玻璃離心管、玻璃膠頭滴管、渦旋混合器、水浴鍋； 1616種鄰苯二甲酸酯類化合物標樣，正己烷稀釋至濃度為種鄰苯二甲酸酯類化合物標樣，正己烷稀釋至濃度為0.020.02、0.050.05、0.10.1、0.20.2、0.50.5、1.0g/mL1.0g/mL的標準系列溶液待用；的標準系列溶液待用； 氣相色譜氣相色譜- -質(zhì)譜聯(lián)用儀，具有電子

8、轟擊電離源。質(zhì)譜聯(lián)用儀，具有電子轟擊電離源。3 3、白酒樣品的處理、白酒樣品的處理3.1 3.1 標準方法標準方法稱取白酒樣品稱取白酒樣品5.00g5.00g（精確至（精確至1mg1mg）于）于10mL10mL具塞玻璃離心管中，加入具塞玻璃離心管中，加入2.00mL2.00mL正己烷，振蕩正己烷，振蕩1 min1 min，再加適量氯化鈉，靜置或離心分層；，再加適量氯化鈉，靜置或離心分層；取上層正己烷進取上層正己烷進GC-MSGC-MS分析。分析。問題：問題： 部分組分，如部分組分，如DMPDMP、DEPDEP、DMEPDMEP、DEEPDEEP等，回收率差，僅為等，回收率差，僅為30%60%。

9、3.2 3.2 改進的方法改進的方法方法一方法一稱取白酒樣品稱取白酒樣品2.00g2.00g（精確至（精確至1mg1mg）于）于10mL10mL具塞玻璃離心管中，置于具塞玻璃離心管中，置于9595水浴中水浴中3030分鐘，驅(qū)除乙醇；分鐘，驅(qū)除乙醇；離心管取出冷至室溫，補加水至離心管取出冷至室溫，補加水至2mL2mL，加入，加入5.00mL5.00mL正己烷，渦旋提取正己烷，渦旋提取2min2min，再加再加1g1g氯化鈉，振搖氯化鈉，振搖0.5min0.5min，靜置或離心分層；，靜置或離心分層；取上層正己烷進取上層正己烷進GC-MSGC-MS分析。分析。方法二方法二稱取白酒樣品稱取白酒樣品2

10、.00g2.00g（精確至（精確至0.1mg0.1mg）于）于10mL10mL具塞玻璃具塞玻璃離心管中；離心管中；加入加入4.00mL4.00mL正己烷，渦旋提取正己烷，渦旋提取2min2min，再加，再加1g1g氯化鈉，氯化鈉，振搖振搖0.5min0.5min，靜置或離心分層；，靜置或離心分層；用玻璃滴管將上層正己烷相轉(zhuǎn)移至另一用玻璃滴管將上層正己烷相轉(zhuǎn)移至另一10mL10mL刻度管中，刻度管中，再依次用再依次用3mL3mL、2mL2mL正己烷萃取正己烷萃取2 2次，合并三次萃取液，次，合并三次萃取液，正己烷定容至正己烷定容至10mL10mL，搖勻后進，搖勻后進GC-MSGC-MS分析。分析

11、。4 4、儀器操作參數(shù)、儀器操作參數(shù) 進樣口：溫度進樣口：溫度250250，進樣量，進樣量1 1不分流進樣；不分流進樣； 柱溫程序：初始溫度柱溫程序：初始溫度6060，保持，保持1min1min，以，以20/min20/min升升溫至溫至220220，保持，保持1 min1 min，再以，再以5/min5/min升溫至升溫至280280，保持保持4 min4 min； 傳輸線溫度：傳輸線溫度：280280； 載氣：氦氣載氣：氦氣( (純度純度99.99999.999），流速），流速1mL/min1mL/min； 色譜柱：色譜柱：HP-5MSHP-5MS石英毛細管柱石英毛細管柱30m30m0.2

12、5mm0.25mm0.25m0.25m 離子源為離子源為EIEI模式，質(zhì)譜調(diào)諧參數(shù)根據(jù)儀器的特點進行模式，質(zhì)譜調(diào)諧參數(shù)根據(jù)儀器的特點進行調(diào)整，確保充分滿足方法的檢出限要求。調(diào)整，確保充分滿足方法的檢出限要求。 各組分監(jiān)測離子附后。各組分監(jiān)測離子附后。標準品色譜圖標準品色譜圖 5 5、陽性樣品定性驗證、陽性樣品定性驗證 試樣待測液與標準品的選擇離子色譜峰在相同保留時間處偏差不超過0.5%，并且對應質(zhì)譜碎片離子的質(zhì)荷比與標準品一致，其豐度對與標準品相比應符合： 相對豐度50%時，允許10%偏差； 相對豐度20%50%時，允許15%偏差； 相對豐度10%20%時，允許20%偏差； 相對豐度10%，允

13、許50%偏差，此時可定性確證目標分析物。6 6、檢出限、線性范圍、檢出限、線性范圍檢出限 按照GB/T 21911-2008，白酒屬于不含油脂的樣品，檢出限為0.05mg/kg?？赏ㄟ^空白值分析、標準添加確定是否滿足。改進的處理方法均可滿足0.05mg/kg的檢出限。線性范圍 0.02g/mL1g/mL。四、關(guān)鍵控制點四、關(guān)鍵控制點1 1、玻璃器皿的洗滌、玻璃器皿的洗滌 所用玻璃器皿洗凈后，用重蒸水洗三次，丙酮中浸泡所用玻璃器皿洗凈后，用重蒸水洗三次，丙酮中浸泡1h1h，在，在200200下下烘烤烘烤2h2h，冷卻至室溫備用。全部器皿單獨存放，避免誤用。另外，接觸過，冷卻至室溫備用。全部器皿單

14、獨存放，避免誤用。另外，接觸過標準品的玻璃器皿應單獨洗滌，防止交叉污染標準品的玻璃器皿應單獨洗滌，防止交叉污染。2 2、其他可能導致污染的因素、其他可能導致污染的因素 標樣的儲存、配置標準系列的過程 蒸餾水洗瓶 滴管的膠頭 試劑瓶的內(nèi)蓋 氣相色譜自動進樣器針、洗針液和廢液瓶 氣相色譜系統(tǒng)，進樣隔墊 3 3、試劑、器具的選擇與評價、試劑、器具的選擇與評價 正己烷、水：PAEs背景低，含量穩(wěn)定； 杜絕使用塑料材質(zhì)的器具； 所有的器具和試劑應經(jīng)過嚴格的評價； 來自不同瓶的試劑均需做空白試驗試劑評價結(jié)果試劑評價結(jié)果RT: 10.20 - 19.03111213141516171819Time (min

15、)050100050100050100050100Relative Abundance05010005010011.6818.5510.7912.6118.4116.4114.1017.5713.0715.6814.9411.6810.7818.5514.2812.03 12.5014.9013.2516.4015.7317.8917.1311.6710.7918.5512.0314.2812.6314.9116.4213.1817.7315.3918.5511.6810.7917.7012.4517.2812.8216.0714.9213.5818.5510.7911.6812.7818.4

16、816.4018.0613.0114.4215.2911.6810.8018.5611.2211.9616.4017.8916.0712.5613.7117.1114.99NL:2.39E5TIC MS HUANJIWANNL:1.87E8TIC MS shiyoumi-30-60NL:1.55E7TIC MS shiyoumi-chongzhengNL:1.09E7TIC MS yisuanyizhiNL:8.87E4TIC MS zhengjiwan2NL:5.53E4TIC MS zhengjiwan-nongcanji3環(huán)己烷環(huán)己烷石油醚石油醚重蒸石油醚重蒸石油醚乙酸乙酯乙酸乙酯色譜級

17、正己烷色譜級正己烷農(nóng)殘級正己烷農(nóng)殘級正己烷在溶劑中存在的鄰苯酯類主要有三種，鄰苯二甲酸二異丁酯在溶劑中存在的鄰苯酯類主要有三種，鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、）、鄰苯二甲酸二（鄰苯二甲酸二（2- -乙基）己酯乙基）己酯（DEHP）。）。實驗時應嚴格控制，注意選取空白值實驗時應嚴格控制，注意選取空白值低的溶劑。低的溶劑。4 4、質(zhì)控措施、質(zhì)控措施空白試驗：每批測定時，須帶至少一個空白試樣，除不加樣品外，空白試驗：每批測定時，須帶至少一個空白試樣，除不加樣品外，其他操作同樣品處理步驟一致，考察背景空白影響。其他操作同樣品處理步驟一致，考察背景空白影響

18、。質(zhì)控樣：使用質(zhì)控樣。沒有質(zhì)控樣可采用加標回收，在陰性樣品質(zhì)控樣：使用質(zhì)控樣。沒有質(zhì)控樣可采用加標回收，在陰性樣品中加入中加入乙醇乙醇配制的標樣溶液，按相同方法處理后，計算回收率。加配制的標樣溶液，按相同方法處理后，計算回收率。加標水平應包含檢出限、兩倍檢出限和十倍檢出限。對于結(jié)果存有疑標水平應包含檢出限、兩倍檢出限和十倍檢出限。對于結(jié)果存有疑問需確證的樣品，還應做樣品加標。問需確證的樣品，還應做樣品加標。在儀器運行高含量的標樣或樣品后，應進行空白溶劑分析，驗證在儀器運行高含量的標樣或樣品后，應進行空白溶劑分析，驗證儀器的交叉污染水平。儀器的交叉污染水平。在樣品分析過程中，按照一定頻次加入質(zhì)控

19、樣，驗證測試系統(tǒng)的在樣品分析過程中，按照一定頻次加入質(zhì)控樣，驗證測試系統(tǒng)的穩(wěn)定性。穩(wěn)定性。五、檢驗結(jié)果的分析五、檢驗結(jié)果的分析1 1、結(jié)果定性、結(jié)果定性 在相同條件下，試樣和標樣選擇離子色譜峰的相同在相同條件下，試樣和標樣選擇離子色譜峰的相同保留時間偏差不超過保留時間偏差不超過0.5%0.5%，對應質(zhì)譜碎片離子的質(zhì)荷，對應質(zhì)譜碎片離子的質(zhì)荷比一致，其豐度比與標準品的偏差符合要求，可定性確比一致，其豐度比與標準品的偏差符合要求，可定性確證目標物。證目標物。 保留時間和離子豐度比超出但接近定性的正常偏差保留時間和離子豐度比超出但接近定性的正常偏差范圍怎么辦？范圍怎么辦？問題分析問題分析 保留時間的

20、偏差是否基質(zhì)差異導致？多次進樣偏差是單向性還是隨機性的？再加標確認 同一化合物，各碎片離子質(zhì)量色譜圖中的保留時間、峰形是否一致？ 每個組分色譜峰采集的數(shù)據(jù)點數(shù)是否滿足定量要求？15個點以上方可準確定量。 所用儀器定性離子豐度比的RSD是多少？ 3%二、二、白酒中白酒中PAEsPAEs的檢測方法的檢測方法概述概述1 1、方法和標準、方法和標準 試劑盒法試劑盒法 氣相色譜法氣相色譜法(GC)(GC)、氣質(zhì)聯(lián)用法（氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MSGC-MS）。）。 液相色譜法液相色譜法(LC(LC），液質(zhì)聯(lián)用法（），液質(zhì)聯(lián)用法（L LC-MSC-MS/MS/MS）。）。GB/T 21911-2008 GB/T 21911-2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測定食品中鄰苯二甲酸酯的測定 3.2 3.2 改進的方法改進的方法