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1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)單克隆抗體技術(shù)核移植核移植動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞工程工程常用常用技術(shù)技術(shù) 一、教學(xué)目標(biāo):一、教學(xué)目標(biāo): 1、簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用、簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用 2、簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物、簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程及應(yīng)用前景的過(guò)程及應(yīng)用前景 3、舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原、舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用理和應(yīng)用 二、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn):二、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn): 1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件 2.用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技
2、術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程 3.單克隆抗體的制備和應(yīng)用單克隆抗體的制備和應(yīng)用一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 1. 1.發(fā)展歷史發(fā)展歷史: : 20 20世紀(jì)初,人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)世紀(jì)初,人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的,還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞胞質(zhì)向外突出形成的,還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開了激烈的爭(zhēng)論。融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開了激烈的爭(zhēng)論。19071907年,美國(guó)生物學(xué)家哈里森年,美國(guó)生物學(xué)家哈里森(Harrison)(Harrison)從蝌蚪的脊索從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織,把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培中分
3、離出神經(jīng)組織,把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周,并且從神經(jīng)細(xì)胞中養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周,并且從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題,而且開創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后,在起源問(wèn)題,而且開創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后,在許多科學(xué)家的不懈努力下,動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐許多科學(xué)家的不懈努力下,動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。2 2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念:、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念: 動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相
4、關(guān)機(jī)體中取出相關(guān)的組織的組織, ,將它分將它分散成單個(gè)細(xì)胞散成單個(gè)細(xì)胞, ,然后然后, ,放在適宜放在適宜的培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中, ,讓讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖增殖. .3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞維
5、等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。(分解彈性纖維)(分解彈性纖維) 幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官取動(dòng)物器官和組織和組織剪碎組織剪碎組織胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理細(xì)胞培細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞 思考討論:思考討論:在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中, 為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物 組織進(jìn)行處理?組織進(jìn)行處理? 胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,可以使動(dòng)物組織細(xì)胞胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解,獲得單間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解,獲得單個(gè)細(xì)胞。個(gè)細(xì)胞。
6、原代培養(yǎng):原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1 1代細(xì)胞與傳代細(xì)胞與傳1010代以內(nèi)代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞株:細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至原代細(xì)胞一般傳至1010代左右細(xì)胞代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存生長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到活到405040
7、50代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系:細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至5050代后又出現(xiàn)細(xì)胞代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的生長(zhǎng)停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代,這改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別: 細(xì)胞系的遺傳細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。容易傳代培養(yǎng)。3.3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件: :1.1.無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)
8、境2.2.營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)3.3.溫度和溫度和pHpH4.4.氣體環(huán)境氣體環(huán)境 4.4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用: : 1.1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 2.2.健康細(xì)胞培養(yǎng)健康細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植 3.3.細(xì)胞的生理、藥理、病理研究細(xì)胞的生理、藥理、病理研究 比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特
9、有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 動(dòng)物血清動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果植物體植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育無(wú)病毒植株無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白分泌蛋白思考:思考:2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?培養(yǎng)材料?1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?有何獨(dú)特之處?3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否
10、像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。主要成分:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有:獨(dú)特之處有:1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體
11、動(dòng)物個(gè)體二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核核,移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.胚胎移植技術(shù)胚胎移植技術(shù)胚胎移植的基本程序如下(以牛胚胎移植為例)核移植技術(shù)核移植技術(shù)1.克隆羊培育過(guò)程克隆羊培育過(guò)程黑面綿羊去黑面綿羊去核卵細(xì)胞核卵細(xì)胞白面綿羊乳白面綿羊乳腺細(xì)胞核腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植重組細(xì)胞重組細(xì)胞電脈沖刺激電脈沖刺激早期胚胎
12、早期胚胎胚胎移植胚胎移植另一頭綿羊的子宮另一頭綿羊的子宮妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利多利羊多利羊2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景3.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題 1、什么叫動(dòng)物細(xì)胞融合?植物體雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞、什么叫動(dòng)物細(xì)胞融合?植物體雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合有什么不同呢?融合有什么不同呢? 2、動(dòng)物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別?這與它們雜交或融合、動(dòng)物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別?這與它們雜交或融合過(guò)程有什么影響?過(guò)程有什么影響? 3、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同??jī)烧叩娜诤线^(guò)程是否
13、也一樣?相同??jī)烧叩娜诤线^(guò)程是否也一樣?一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用受精作用細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核 因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合,不滅質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合,不滅活的話會(huì)感
14、染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。活的話會(huì)感染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用于哪些方面?細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用于哪些方面? 細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)及制備單克隆抗體。細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)及制備單克隆抗體。什么是抗體?什么是抗體? 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。疫功能的球蛋白。B B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。B B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)物體內(nèi)的B B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體,每種抗體對(duì)
15、特定的抗原萬(wàn)種以上的抗體,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。體。所以傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么?所以傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么?怎樣解決這個(gè)問(wèn)題?怎樣解決這個(gè)問(wèn)題? 由單個(gè)由單個(gè)B B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 特點(diǎn):特點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高 利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用淋巴
16、細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能 利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性 利用細(xì)胞融合的技術(shù)將利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融兩種細(xì)胞融合合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的性的雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞如何篩選?如何篩選?融融合合方方式?式? 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培
17、養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體思考:思考:1 1、本過(guò)程利用了哪些原理?、本過(guò)程利用了哪些原理?免疫原理,細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理免疫原理,細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2 2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B B細(xì)胞融合?細(xì)胞融合?這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),不僅具有的遺傳物質(zhì),不僅具有B B細(xì)胞分泌抗體的能細(xì)胞分泌抗體的能力,而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng),因而可以獲力,而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng),因而可以獲得大量單克隆抗體得大量單克隆抗體單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比
18、,單克隆抗體產(chǎn)量高,特異與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體產(chǎn)量高,特異性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有:應(yīng)用主要有:1 1、臨床診斷、臨床診斷2 2、作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成、作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療腫瘤治療腫瘤資料資料:目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗:目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個(gè)內(nèi)分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外,用
19、單克隆抗體做體內(nèi)診斷,借以鑒別和定必然趨勢(shì)。另外,用單克隆抗體做體內(nèi)診斷,借以鑒別和定位體內(nèi)位體內(nèi)“病灶病灶”也引起人們的注意,目前,主要用于腫瘤追也引起人們的注意,目前,主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。蹤及心肌梗塞的診斷。比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、 細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法物理(離心、振蕩、物理(離心、振蕩、電刺激)電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)化
20、學(xué)(聚乙二醇)物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法(同左)(同左)滅活的病毒滅活的病毒用途用途獲得雜種植株獲得雜種植株制備單克隆抗體制備單克隆抗體小結(jié)小結(jié)兩個(gè)過(guò)程兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)三個(gè)“一一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法滅活一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法滅活病毒病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì) 下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?為什么?、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?為什么?4、圖中、圖中B為為_過(guò)程,常用過(guò)程,常用_作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼承承_的遺傳特性,既能的遺傳特性,既能_,又能又能_。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是_3
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