第四章種子的擴大培養(yǎng)

1、第四章 種子的擴大培養(yǎng)本章學(xué)習(xí)目的和要求1、掌握種子擴大培養(yǎng)的目標(biāo)與要求。2、掌握種子擴大培養(yǎng)的條件。3、掌握種子制備過程的技術(shù)概要。4、了解常見種子制備過程實例。從保藏在試管中的微生物菌種逐級擴大為生產(chǎn)用種子是一個由實驗室制備到車間生產(chǎn)的過程。其生產(chǎn)方法與條件隨不同的生產(chǎn)品種和菌種種類而異。種子擴大培養(yǎng)應(yīng)根據(jù)菌種的生理特性，選擇合適的培養(yǎng)條件來獲得代謝旺盛、數(shù)量足夠的種子。第一節(jié) 種子擴大培養(yǎng)的目的與要求一、概述1、種子擴大培養(yǎng)：指將保存在沙土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級擴大培養(yǎng),最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物成為種子

2、。一、概述2、種子擴大培養(yǎng)的意義（1）為發(fā)酵生產(chǎn)提供沖突的代謝旺盛、生命力強的種子。（2）有效地縮短主發(fā)酵罐的發(fā)酵周期。3、種子擴大培養(yǎng)的目的（1）接種量的需要 （2）菌種的馴化（3）縮短發(fā)酵時間、保證生產(chǎn)水平二、發(fā)酵生產(chǎn)中對種子的要求發(fā)酵生產(chǎn)過程中的種子必須滿足以下條件：（1）菌種細胞的生長活力強，移種至發(fā)酵罐后能迅速生長，遲緩期短；（2）生理性狀穩(wěn)定；（3）菌體總量及濃度能滿足大容量發(fā)酵罐的要求；（4）無雜菌污染；（5）保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。生產(chǎn)中主要對以下幾方面進行穩(wěn)定檢查：（1）細胞或菌體的外部特征：對于單細胞，要求菌體健壯、菌形一致、均勻整齊；對于霉菌、放線菌，要求菌絲粗壯、對某些染料

3、著色力強、生長旺盛、俊熙分枝情況和內(nèi)含物情況好。（2）生化指標(biāo)：主要包括種子液的糖、氮、磷的含量和pH變化與正常的基質(zhì)消耗曲線相近。（3）產(chǎn)物生成量（4）酶活力：種子液中某種酶的活力，與目的產(chǎn)物的產(chǎn)量有一定的關(guān)聯(lián)。第二節(jié) 種子培養(yǎng)的條件一、影響種子質(zhì)量的因素及控制生產(chǎn)過程中影響種子質(zhì)量的因素通常有：孢子的質(zhì)量、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、種齡、接種量。一、影響種子質(zhì)量的因素及控制1、培養(yǎng)基生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象，其主要原因是：原材料質(zhì)量波動。此外，地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染，均可造成水質(zhì)波動，影響種子質(zhì)量。菌種在不同固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類型的菌落，氮源品種越多，出現(xiàn)的菌落類型也越多，不利于穩(wěn)定生產(chǎn)。一、影響種子質(zhì)量的因素及控制針對以上影響因素，提出如下的解決措施：（1）培養(yǎng)基所用原料要經(jīng)過發(fā)酵試驗合格才可使用。（2）嚴格控制滅菌后培養(yǎng)基的質(zhì)量。（3）斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定時間。（4）共生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，作為選種或分離用的培養(yǎng)基則采用較復(fù)雜的有機氮源。一、影響種子質(zhì)量的因素及控制種子培養(yǎng)基應(yīng)該滿足的條件：（1）營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要（2）選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培養(yǎng)基。（3）營養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用。（4）營養(yǎng)成分