文章—養(yǎng)胃顆?？?jié)冏饔玫膶?shí)驗(yàn)研究

1、養(yǎng)胃顆?？?jié)冏饔玫乃幮W(xué)研究摘要： 目的 進(jìn)行養(yǎng)胃顆粒對大鼠不同胃潰水浸拘束瘍模型的藥效學(xué)研究。方法 采用大鼠水浸應(yīng)激法、大鼠醋酸灼燒法、大鼠消炎痛法及小鼠利血平法等實(shí)驗(yàn)方法，建立不同的實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍模型，觀察養(yǎng)胃顆粒對各型潰瘍的影響，以潰瘍指數(shù)及潰瘍面積表示大鼠胃粘膜損傷程度，比較養(yǎng)胃顆粒組和模型對照組及陽性對照組（雷尼替?。┑牟顒e。結(jié)果 結(jié)論關(guān)鍵詞：養(yǎng)胃顆粒 實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍 藥效學(xué) 養(yǎng)胃顆粒是我院自制的中藥復(fù)方制劑，由黃芪、威靈仙、桂枝、元胡、白芍等中藥組成。臨床上用于治療胃潰瘍，具有養(yǎng)胃健脾，生津止血之功效。本研究通過建立不同實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠模型， 觀察養(yǎng)胃顆粒的抗?jié)兯幚碜饔谩? 材料1

2、.1 實(shí)驗(yàn)動物 SD大鼠，清潔級，雌雄兼用，（200±20) g，昆明種小鼠，雌雄兼用，（18±2) g購自徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心，動物質(zhì)量合格證號：1.2 藥品和試劑 養(yǎng)胃顆粒（深褐色顆粒，由解放軍第九七醫(yī)院制劑室提供，批號： ，劑型：顆粒劑），用0.9%氯化鈉注射液配制成10、5的濃度供試驗(yàn)； 雷尼替丁膠囊（）；無水乙醇（）；利血平注射液（1ml, 1mg支）；醋酸（）1.3 儀器和設(shè)備2 方法2.1 養(yǎng)胃顆粒對大鼠水浸應(yīng)激性潰瘍的影響1 SD大鼠50只，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組，每組10只（雌雄各半），即模型對照組，雷尼替丁組，養(yǎng)胃顆粒低中高劑量組。雷尼替丁陽性藥對照組

3、每天灌胃給予雷尼替丁 0.03g/(kg.d)；養(yǎng)胃顆粒低中高劑量組每天灌胃給予養(yǎng)胃顆粒（2g/kg、4g/kg、8g/kg）；模型對照組每天灌胃給予等體積的0.9%氯化鈉；每天1次，共3天。第二天給藥后開始禁食24h，不禁水，末次給藥1h后，將各組大鼠輕度乙醚麻醉后四肢固定于鼠板上以限制其活動，待大鼠清醒后將其頭部向上垂直侵入 (20±0.5)水浴，液面保持在劍突水平，共水浸20h，從而復(fù)制水浸應(yīng)激性模型。造模結(jié)束后立即將所有大鼠處死，用手術(shù)剪于大鼠劍突下剖開腹部，先結(jié)扎幽門，從食道向胃內(nèi)注入10%福爾馬林10ml，結(jié)扎賁門，將胃從幽門賁門處剪下，再將胃放置于福爾馬林溶液中浸泡30

4、 min后取出，沿胃大彎剪開，用生理鹽水沖洗胃內(nèi)殘留物，檢查潰瘍病變。以潰瘍長度的總和作為潰瘍指數(shù)，計(jì)算潰瘍抑制百分率。潰瘍抑制百分率（%）： （溶媒對照組潰瘍長度指數(shù) 實(shí)驗(yàn)組潰瘍長度指數(shù)） / 溶媒對照組潰瘍長度指數(shù) × 100%表1養(yǎng)胃顆粒對大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的影響(±s)組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)潰瘍指數(shù)(±SD)潰瘍抑制率（%）模型對照組10雷尼替丁組100.03養(yǎng)胃顆粒低劑量組100.75養(yǎng)胃顆粒中劑量組101.5養(yǎng)胃顆粒高劑量組1032.2 養(yǎng)胃顆粒對大鼠乙酸燒灼致胃潰瘍的影響2 采用改良Okabe法，各組大鼠于術(shù)前禁食不禁水24h，按文獻(xiàn)報(bào)道的方

5、法3，用水合氯醛腹腔注射麻醉下，按無菌操作要求，消毒，打開腹腔，將胃輕輕拉至腹部，用內(nèi)徑6mm，長2cm的玻璃管，緊貼于胃體部與幽門交界處，向玻璃管內(nèi)注入100乙酸01ml，lmin后立即用棉簽拭去乙酸，然后用蘸生理鹽水的棉球輕輕抹洗2次，將胃還納于腹腔內(nèi)，縫合手術(shù)切口，用碘酒外消毒，手術(shù)的當(dāng)天小鼠禁食不禁水，3d成模，于術(shù)后第3天隨機(jī)分為5組(n=10)，各組均采用等容積不等濃度灌胃給藥，每天1次，連續(xù)治療14天，末次給藥后，禁食26h，處死大鼠，取胃，10%福爾馬林固定，沿胃大灣剪開，將胃壁展開，觀察胃潰瘍發(fā)生情況，測量潰瘍最大縱徑（d1）和橫徑（d2），計(jì)算潰瘍面積和潰瘍愈合率，潰瘍面積

6、=*（d1/2）*（d2/2），潰瘍愈合百分率=（對照組潰瘍面積總和均值給藥組潰瘍面積總和均值）/ 對照組潰瘍面積總和均值 * 100%。結(jié)果見表2。表2 養(yǎng)胃顆粒對大鼠乙酸燒灼性胃潰瘍的影響組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)潰瘍面積(±SD)潰瘍愈合率（%）模型對照組10雷尼替丁組100.03養(yǎng)胃顆粒低劑量組100.75養(yǎng)胃顆粒中劑量組101.5養(yǎng)胃顆粒高劑量組1032.3 養(yǎng)胃顆粒對大鼠消炎痛誘發(fā)胃潰瘍的影響4 大鼠隨機(jī)分為5組（n=10）：生理氯化鈉溶液組，雷尼替丁組和養(yǎng)胃顆粒低中高劑量組，給藥組大鼠每日上午灌胃給藥，連續(xù)6d，第5天給藥前禁食不禁水24h，末次給藥后0.5h灌胃

7、消炎痛40mg/kg（5%碳酸氫鈉溶解），灌胃消炎痛后大鼠禁食不禁水，5h后處死，取出胃，注入2ml生理鹽水，混勻后，抽出1ml，注入2ml離心管內(nèi)，備用。再將胃用多聚甲醛固定，計(jì)算潰瘍指數(shù)。計(jì)分方法：出血點(diǎn)長度小于lmm的計(jì)1分，lmm-一2mm計(jì)2分，2"-3mm計(jì)3分，3-一4mm，計(jì)4分；大于4mm者，計(jì)5分；損傷寬度超過lmm時(shí)分?jǐn)?shù)加倍；每組潰瘍分?jǐn)?shù)的均值為胃潰瘍指數(shù)，并計(jì)算潰瘍抑制率。潰瘍抑制百分率=(模型組潰瘍指數(shù)一給藥組潰瘍指數(shù))模型組潰瘍指數(shù)X 100。組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)潰瘍指數(shù)(±SD)潰瘍抑制率（%）總酸度mmol/mL總酸排出量mmol

8、模型對照組10雷尼替丁組100.05養(yǎng)胃顆粒低劑量組100.75養(yǎng)胃顆粒中劑量組101.5養(yǎng)胃顆粒高劑量組103胃酸測定5：各取胃液上清液0.5ml于燒杯中，加入兩滴酚酞指示劑，用20mmol/L氫氧化鈉滴定，同時(shí)不斷搖晃，至紅色消失，繼續(xù)滴定直至微紅色不退為止，記錄氫氧化鈉的消耗體積。計(jì)算出總酸度及酸度排出量。總酸度=氫氧化鈉毫升數(shù)*20.總酸排出量=總酸度*胃液量*2.2.4 養(yǎng)胃顆粒對小鼠利血平致胃潰瘍的影響6昆明小鼠50只，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組(n=10)，養(yǎng)胃顆粒給藥劑量為：（3.5g/kg、7g/kg、14g/kg），雷尼替丁0.05g/kg，灌胃給藥，每天1次，共6天，禁食不禁

9、水24h后，于末次灌胃給藥后1h，各組皮下注射利血平10mg/kg，并停止飲水和禁食，6h后處死動物，摘除全胃，見3.1，觀察腺胃粘膜潰瘍形成情況，計(jì)算潰瘍指數(shù)，方法見2.3。結(jié)果見表4。表4 養(yǎng)胃顆粒對小鼠利血平致胃粘膜損傷的影響組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)潰瘍指數(shù)(±SD)潰瘍抑制率（%）模型對照組10雷尼替丁組100.05養(yǎng)胃顆粒低劑量組100.75養(yǎng)胃顆粒中劑量組101.5養(yǎng)胃顆粒高劑量組1034 討論養(yǎng)胃顆粒經(jīng)口灌胃給予0.5g/kg和1.0g/kg兩劑量均可明顯抑制小鼠水浸應(yīng)激性胃潰瘍、大鼠幽門結(jié)扎型胃潰瘍和無水乙醇引起的大鼠胃粘膜損傷。對利血平所致的大鼠胃潰瘍模型，

10、1.0g/kg劑量組可顯著地抑制潰瘍發(fā)生，0.5g/kg劑量組與對照組比較雖沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但呈明顯的減輕損傷的趨勢。對乙酸燒灼型大鼠慢性胃潰瘍的形成可減小潰瘍面積，但潰瘍深度未見減小，這可能與乙酸從漿膜面燒灼，造成潰瘍底部大部分組織變性壞死有關(guān)，而潰瘍面減小則可能是由于潰瘍周圍的正常組織在藥物作用下加速向潰瘍面增生而致。綜上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：養(yǎng)胃顆粒在多種胃潰瘍動物模型上具有明顯的抗?jié)冏饔?。通過藥效學(xué)研究了解和證實(shí)該藥物的有效性、 藥理反應(yīng)特點(diǎn)及量效關(guān)系，為臨床研究提供科學(xué)依據(jù)。參考文獻(xiàn)1. 徐叔云，卞如濂，陳修。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M. 第三版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2002131613182. 王濱，趙紅曄，周麗. 潰瘍平對胃潰瘍大鼠胃黏膜組織中EGF和EGFR mRNA表達(dá)的影響J.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2008,31(11),759-7623. Okabe S, Roth JL, Pfeiffer CJ A method for experimental, penetrating gastric and duodenal ulcers in rats. Observations on normal healing. The American Journal of Digestive Diseases. 1971; 16(3):277-84.4. 徐叔云，卞如濂