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1、 實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理 (continued) 實驗材料實驗材料 涂片涂片干燥干燥 固定固定染色染色水洗水洗干燥干燥鏡檢鏡檢操作步驟操作步驟 操作步驟操作步驟(continued) 革蘭氏染色(革蘭氏染色(Gram stain) 1984年,丹麥醫(yī)生年,丹麥醫(yī)生Gram采用革蘭氏染色法細(xì)采用革蘭氏染色法細(xì)菌細(xì)胞壁區(qū)分為兩種類型:革蘭氏陰性(菌細(xì)胞壁區(qū)分為兩種類型:革蘭氏陰性(G+)和革蘭氏陽性(和革蘭氏陽性(G-)革蘭氏染色步驟革蘭氏染色步驟: 1)結(jié)晶紫初染;)結(jié)晶紫初染;2)碘液媒染;)碘液媒染; 3)酒精脫色;)酒精脫色; 4)番紅復(fù)染)番紅復(fù)染 G G菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)
2、菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性屏障,當(dāng)狀分子形成一種透性屏障,當(dāng)乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫障縮小,故保留結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高縮,其脂含量高, ,乙醇將脂溶乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫解,縫隙加大,結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,番紅復(fù)染后合物溶出細(xì)胞壁,番紅復(fù)染后呈紅色。呈紅色。本實驗安排本實驗安排細(xì)菌三形永久片觀察細(xì)菌三形永久片觀察簡單染色:枯草芽孢(簡單染色:枯草芽孢(1d1d)。)。革蘭氏染色:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、革蘭氏染色:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、斜面菌株。斜面菌株。芽孢染色:枯草芽孢(芽孢染色:枯草芽孢(2d2d)另外,每大組派兩人從斜面挑取枯草芽孢另外,每大組派兩人從斜面挑取枯草芽孢(2d2d)于離心管,水浴鍋中煮沸。)于離心管,水浴鍋中煮沸。思考題思考題80頁思考題第頁思考題
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