檢驗科性能驗證程序

1、XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第1頁共20頁性能驗證1 目的驗證檢測試劑在儀器上的性能指標。2 適用范圍適用于檢驗科檢驗項目試劑的性能指標驗證。3 職責3.1 科主任：負責審批性能驗證計劃。3.2 技術(shù)負責人3.2.1 負責制定性能驗證方案和計劃。3.2.2 負責組織性能驗證的實施。3.2.3 負責定期對科室性能驗證數(shù)據(jù)的統(tǒng)計、分析和總結(jié)。3.2.4 負責組織對上述活動的可行性和有效性評審。3.3 各專業(yè)組技術(shù)管理員3.3.1 負責組織本組人員完成本組性能驗證的驗證工作。3.3.2 負責對本組性能驗證數(shù)

2、據(jù)的統(tǒng)計、分析和總結(jié)工作。3.4 檢驗人員3.4.1 負責協(xié)助科室技術(shù)負責人和本組技術(shù)管理員完成本組的性能驗證工作。3.4.2 負責完成本組性能驗證工作中應(yīng)承擔的檢驗工作。3.4.3 負責認真填寫本組性能驗證的檢驗記錄。4內(nèi)容4.1 生化生化室項目需要驗證的參數(shù)包括批內(nèi)精密度，批間精密度、正確度、線性范圍、參考區(qū)間、可報告區(qū)間等，適用時，還要考慮分析靈敏度（僅對那些在接近0的低值有臨床意義的項目有必要進行確定，必要時，可引用說明書中給出的低值）和干擾試驗。4.1.1 精密度4.1.1.1 標本準備及要求可采用新鮮或凍存的樣本。當樣本中待測物不穩(wěn)定或樣本不易得到時，也可考慮使用基質(zhì)與實際待檢樣本

3、相似的樣本，如質(zhì)控品。應(yīng)至少評估2個濃度水平樣本的不精密度。當2個濃度水平樣本的不精密度有顯著差異時，建議增加為3個濃度水平。所選樣本的被測物水平應(yīng)在測量區(qū)間內(nèi)，適宜時，至少有1個樣本的被測物水平在醫(yī)學決定水平左右。注1：通常較高值樣本的不精密度較小，較低值樣本的不精密度偏大。對低值有臨床意義的檢測項目，宜評估有判斷價值的低水平樣本的不精密度。注2：如檢測結(jié)果沒有明確的醫(yī)學決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選1個濃度，再根據(jù)檢驗項目的特點在測量區(qū)間內(nèi)選擇另一個濃度。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第2頁共20

4、頁注3：如與廠商或文獻報導的不精密度比較，所選樣本水平宜與被比較的樣本水平接近。4.1.1.2 方案、丿；£.方案1：對驗證材料每天分析1批次，2個濃度，每個濃度重復(fù)測定4次，連續(xù)5天。記錄結(jié)果并計算均值、標準差和批內(nèi)、批間變異系數(shù)CV（%）。方案2：批內(nèi)精密度：濃度分別處于正常和病理水平的混合新鮮臨床標本，按照臨床標本相同的檢測方法，同批次內(nèi)檢測混合的新鮮臨床標本20次。記錄結(jié)果并計算均值（X）、標準差（SD）和批內(nèi)變異系數(shù)CV（%）。批間精密度：濃度分別處于正常和病理水平的混合新鮮臨床標本，按照臨床標本相同的檢測方法（或?qū)⑹覂?nèi)質(zhì)控品按照常規(guī)標本的方法一樣測定，測定結(jié)果在遵照廠商參

5、數(shù)不出控的前提下），同批次內(nèi)檢測混合的新鮮臨床標本20次，同一批號室內(nèi)質(zhì)控品某一時間段（至少20天）的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)逐步累積最終得出均值、標準差。4.1.1.3 結(jié)果判斷從衛(wèi)生標準或美國臨床實驗室室間質(zhì)量評估或衛(wèi)生部/省臨檢中心室間質(zhì)評允許總誤差表中查閱評價項目的允許誤差范圍，由實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計的批內(nèi)不精密度和批間不精密度小于等于允許誤差范圍的1/4和1/3作為檢測系統(tǒng)不精密度性能的的可接受標準，且又小于等于廠商提供的精密度性能指標，說明由實驗室評價的檢測系統(tǒng)的不精密度性能可接受，符合要求。若大于判斷限，檢測系統(tǒng)的不精密度是否符合要示，應(yīng)再進一步做統(tǒng)計學處理作出判斷。4.1.2 正確度4.1.2.1

6、 標本準備及要求按照如下優(yōu)先順序選用具有互換性的標準物質(zhì)或基質(zhì)與待測樣本相類似的標準物質(zhì)：1）有證標準物質(zhì)（CRM），包括國家標準物質(zhì)（如GBW）、國際標準物質(zhì)（如WHO、IFCC）、CNAS認可的標準物質(zhì)生產(chǎn)者（RMP）提供的有證標準物質(zhì)、與我國簽署互認協(xié)議的其他國家計量機構(gòu)提供的有證標準物質(zhì)（如NIST、JSCC）等；2）標準物質(zhì)（RM），如廠商提供的工作標準品；3）標準物質(zhì)（RM），如廠商提供的工作標準品；4）正確度控制品；5）正確度驗證室間質(zhì)評樣本，如CNAS認可的PTP提供的正確度驗證樣本。宜根據(jù)測量區(qū)間選用至少2個濃度水平的標準物質(zhì)樣本。6）衛(wèi)生部或省臨檢中心室間質(zhì)評質(zhì)控血清含蓋的

7、項目，則以衛(wèi)生部或省臨床檢驗中心室間質(zhì)評結(jié)果為準。衛(wèi)生部或省臨檢中心室間質(zhì)評未涉及的項目，通過儀器之間的比對來驗證。4.1.2.2 方案方案1：根據(jù)測量區(qū)間選用2個濃度水平的室間質(zhì)評血清，每個濃度水平每天重復(fù)測定2次，連續(xù)測定5天，記錄檢測結(jié)果，計算全部檢測結(jié)果的均值和偏倚。方案2:使用5個水平的室間質(zhì)評血清，每個水平重復(fù)測定3次。記錄結(jié)果，計算每份質(zhì)控血清均值與靶值的偏倚。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第3頁共20頁衛(wèi)生部或省臨檢中心室間質(zhì)評未涉及的項目，通過儀器之間的比對來實現(xiàn)，以參加衛(wèi)生部或省臨檢

8、中心的室間質(zhì)評的作為比對基準儀器，其最近1次參加衛(wèi)生部或省臨檢中心的室間質(zhì)評結(jié)果。采用5個患者的標本，標本濃度水平盡量覆蓋測量范圍，包括醫(yī)學決定水平。計算在醫(yī)學決定性水平下的系統(tǒng)誤差(偏倚)，偏倚=丨測定值-靶值I/靶值*100%,偏倚%應(yīng)1/2CLIA'88或衛(wèi)生部或省臨檢中心室間質(zhì)評最大允許誤差，80%以上的數(shù)據(jù)符合以上要求即為通過。成績在80%以上者即為驗證通過。4.1.2.3結(jié)果判斷：偏倚1/2衛(wèi)生標準或美國臨床實驗室室間質(zhì)量評估或衛(wèi)生部/省臨檢中心室間質(zhì)評允許總誤差。80%以上的數(shù)據(jù)符合以上要求即為通過。4.1.3 線性范圍4.1.3.1 目的：在確定某項目檢測上限的同時檢測

9、其檢測上下限是否呈線性關(guān)系，從而保證該濃度范圍檢測結(jié)果的準確性。4.1.3.2 標本來源：采用本實驗室常規(guī)檢測標本獲得的高值/低值標本進行。4.1.3.3 驗證頻率：僅在更換試劑盒廠家時進行驗證。一旦驗證通過，無特殊情況，不重復(fù)驗證。4.1.3.4 方案方案1：不同濃度標本制備：取高值和低值標本各一份，按如下配比：標本1：低濃度樣本；標本2：三份低濃度標本與一份高濃樣標本混勻；標本3：二份低濃度標本與二份高濃樣標本混勻；標本4：一份低濃度標本與三份高濃樣標本混勻；標本5：高濃度樣本。檢測時，按標本1,2，3，4，5，5，4，3，2，1，1,2，3，4，5排列，每個標本測量3次，記錄濃度以理論濃

10、度為縱坐標(Y),實測濃度為橫坐標(X)。由統(tǒng)計學計算出r2和回歸方程Y=aX+b。方案2：取高值標本和低值標本各一份，將兩者按一定的比例稀釋成系列不同濃度的標本(如4:0、3:1、2:2、1:3、0:4等)，濃度范圍遍布整個預(yù)期可報告區(qū)間，分別上機按低到高各重復(fù)測定3次，計算線性回歸方程Y=aX+b及相關(guān)系數(shù)R2。4.1.3.5 驗證結(jié)果判斷a在0.951.05范圍內(nèi)，b接近0,R±0.975,R2±0.95,則判斷為線性范圍驗證通過。4.1.4 參考區(qū)間4.1.4.1 標本選擇選擇年齡、性別等均勻分布，符合建立參考區(qū)間的健康體檢者血清標本20份，對不同項目的參考區(qū)間進行

11、驗證。如堿性磷酸酶(ALP)等在不同年齡人群的不同參考區(qū)間應(yīng)分別進行驗證，如某些年齡人群標本不易獲得時，可暫不做驗證，但需與臨床溝通，對于性激素等檢測項目因生理周期變化等因素導致無法獲取有效人群標本，暫不做驗證，但亦需與臨床溝通。4.1.4.2結(jié)果判斷：規(guī)定小于或等于2份標本結(jié)果超出參考區(qū)間，即為驗證通過?；騌=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)±90%即合格。4.1.5 最大稀釋倍數(shù)和可報告范圍驗證4.1.5.1 僅對于那些臨床可報告區(qū)間大于分析測量范圍的檢測項目才需要進行驗證。通常是在線性范圍高值的基礎(chǔ)上外延至最大稀釋度倍數(shù)對應(yīng)的值。4.1.5.2 標本來源：含本項目濃度接近

12、線性范圍上限的臨床新鮮標本。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第4頁共20頁4.1.5.3 評價方案：用廠家推薦的稀釋液(或以生理鹽水或蒸餾水為稀釋介質(zhì))對超過分析測量范圍上限的高值標本進行系列手工稀釋，分別進行不同倍數(shù)(2倍、4倍、8倍、16倍)的稀釋，每份稀釋標本重復(fù)測定2次，計算稀釋后標本結(jié)果均值X與原濃度結(jié)果的偏倚B?？蓤蟾娣秶孪逓榫€性范圍下限，可報告范圍上限為線性范圍高限*最大稀釋倍數(shù)。4.1.5.4結(jié)果判斷：偏倚BW1/2衛(wèi)生標準或美國臨床實驗室室間質(zhì)量評估或衛(wèi)生部/省臨檢中心室間質(zhì)評允許總誤

13、差。符合要求的最大稀釋倍數(shù)為實驗室最大稀釋倍數(shù)?？蓤蟾娣秶孪逓榫€性范圍下限，可報告范圍上限為線性范圍高限*最大稀釋倍數(shù)。4.1.6 攜帶污染驗證4.1.6.1 標本來源：含本項目濃度接近線性范圍上限的臨床新鮮標本。4.1.6.2評價方案：選取一份檢測線性范圍內(nèi)的高濃度標本(H)，以及一份低值標本或生化純水(L)，按照下列次序進行檢測：H、H、H、L、L、L,測定值分別為：Hl、H2、H3、LI、L2、L3,計算攜帶污染率二(L1-L3)/(H3-L3)*100%。4.1.6.3結(jié)果判斷：攜帶污染率W2%。4.2免疫-定性(ELISA法)操作者熟悉檢驗程序和評價操作程序，對操作程序校準為最佳狀

14、態(tài)，嚴格按操作程序進行驗證。從以下幾方面進行驗證：靈敏度、特異性、符合率、檢出限、Cutoff值驗證、重復(fù)性和比對試驗。4.2.1 符合率、敏感度和特異性4.2.1.1 根據(jù)CLSI發(fā)布EP12-A2文件要求(應(yīng)參考定量分析將偏倚和不精密度應(yīng)用于定性試驗的評價，除陰性和強陽性標本外，選取在臨界值附近的濃度用于定性試驗不精密度的研究。)來驗證本實驗室定性實驗的符合率、敏感度和特異性，計算了近一年參加衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評的對比結(jié)果，將兩方結(jié)果輸入表格中通過公式計算各項性能指標。實驗方法(新方法)金標準陽性(n)陰性(n)合計陽性a(真陽性)b(假陽性)a+b陰性c(假陰性)d(真陰性)c+d合計

15、a+cb+da+b+c+d總符合率=(a+d)/(a+b+c+d)X100%，靈敏度=(a+d)/(a+b+c+d)，特異性二d/(b+d)4.2.1.2 結(jié)果判斷按照衛(wèi)生部臨檢中心對室間質(zhì)評結(jié)果的要求認為80%及以上即為滿意，故選擇80%作為評價結(jié)果是否可接受的標準。靈敏度±95%。特異性±95%。4.2.2 人員比對4.2.2.1 方法選取至少20份標本(包括陽性、陰性和弱陽性)，先由實驗室經(jīng)驗豐富的操作人員進行實驗，以其實驗結(jié)果作為參照，所有從事該項目檢測的人員均對同標本進行操作，將各自結(jié)果與參照結(jié)果進行比對。參考人員結(jié)果檢測人陽性(n)陰性(n)合計XXX人民醫(yī)院檢

16、驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第5頁共20頁員結(jié)果陽性a（真陽性）b（假陽性）a+b陰性c（假陰性）d（真陰性）c+d合計a+cb+da+b+c+d總符合率=(a+d)/(a+b+c+d)X100%4.2.2.2結(jié)果判斷以本實驗室參加人員檢測結(jié)果與參考人員檢測結(jié)果是否達到80%以上（80%以上即可，如能做到更高，可以以更高的標準來判斷）來作為判斷標準。4.2.3 定性實驗的檢出限將定值樣品進行倍比稀釋（如稀釋到原濃度的2、4、8、16倍）后進行檢測。首次出現(xiàn)陰性的前一個稀釋倍數(shù)為該實驗的檢出限。4.2.4 Cut-of

17、f值驗證方法1：在臨界值基礎(chǔ)上，準備出-20%濃度樣本和+20%濃度樣本（即定值樣品本身），對以上低、高濃度樣本分別測定20次，記錄陰性及陽性結(jié)果數(shù)，即為cut-off重復(fù)性驗證。應(yīng)至少有19次以上（±95%）陽性反應(yīng)或者有19次以上（±95%）陰性反應(yīng)為通過。方法2：連續(xù)統(tǒng)計上百份已檢測樣本結(jié)果，計算臨界值結(jié)果所占的比例，小于5%為可接受限。4.2.5 精密度4.2.5.1 批內(nèi)精密度驗證4.2.5.1.1 驗證方法選弱陽性室內(nèi)質(zhì)控品在同一批試驗內(nèi)，按規(guī)定的操作方法，一天內(nèi)平行做20個測試相同的樣本，計算其x、S與CV。4.2.5.1.2 結(jié)果判斷定性實驗（ELISA）的

18、批內(nèi)變異CV%應(yīng)W10%（請確認）?；蛴眯l(wèi)生部臨檢中心的允許總誤差、說明書、CLIA'88等做判定標準。4.2.5.2 批間精密度驗證4.2.5.2.1 方法選擇弱陽性室內(nèi)質(zhì)控品，每天按照常規(guī)標本的方法一樣測定，連續(xù)測定20天，計算其X、s與CV。4.2.5.2.2 結(jié)果判斷定性實驗（ELISA）的批間變異CV%應(yīng)W15%（請確認）?；蛴眯l(wèi)生部臨檢中心的允許總誤差、說明書、CLIA'88等做判定標準。4.2.6 比對試驗分別收集化學發(fā)光法檢測出的HBeAg20例陽性及20例陰性樣本，用酶聯(lián)免疫方法進行比對檢測，根據(jù)陰陽性結(jié)果評價檢測結(jié)果的符合率。結(jié)果判斷：用陰陽性判斷兩種方法檢

19、測結(jié)果的符合率。4.3 免疫-定量根據(jù)試劑盒說明書或行業(yè)內(nèi)（如CLIA'88）要求制定擬驗證的性能參數(shù)。免疫的定量項目性能驗證參考生化的性能驗證。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第6頁共20頁4.4臨檢（血常規(guī)）相關(guān)性能參數(shù)包括：精密度（批內(nèi)、批間精密度）、正確度、攜帶污染率、線性范圍、可報告區(qū)間、參考區(qū)間的驗證、不同方法和儀器間的比對、儀器分類結(jié)果與手工分類結(jié)果的比對、實驗室內(nèi)結(jié)果的可比性等，必要時，還要考慮干擾。4.4.1 精密度4.4.1.1 樣本檢測（可參考）參照美國臨床實驗室標準化委員會

20、（NCCLS）EP15A“用戶對精密度和準確度性能的核實:批準指南”中關(guān)于精密度的內(nèi)容要求，用兩個濃度水平的質(zhì)控品，每天上機測量4次（連續(xù)測定，中間不間斷），連續(xù)測量5天。4.4.1.2 數(shù)據(jù)分析方法（可參考）按照EP15-A文件之規(guī)定，通過Excel軟件，計算出批內(nèi)標準差Switin和批間標準差Stotal。具體的計算公式為：withinD(n一1)tPtCLXSwithin其中：D：表示總共檢測天數(shù)（D=5）；n單個樣本每天重復(fù)檢測的次數(shù)（n=4）；xdi:每個樣本每天四次單獨檢測的結(jié)果；xd:每個樣本每天四次檢測結(jié)果的算數(shù)均數(shù)；xt：單個樣本每天檢測結(jié)果的算數(shù)均數(shù)的算數(shù)均數(shù)。4.4.1.

21、3 結(jié)果判斷（可參考）4.4.1.3.1 于批內(nèi)精密度的判斷，具體的計算和判斷過程1）按照下述公式計算出批內(nèi)精密度的自由度V。v=DX(n-1)D：表示總共檢測天數(shù)（D=5）；n單個樣本每天重復(fù)檢測的次數(shù)（n=4）;因此，按照我們的驗證方案，批內(nèi)精密度（Swithin）的自由度為15。2）按照下述公式計算出C值百分點。C值百分點=1.一a/£其中a為檢驗水準或者說可接受I類誤差的概率，一般設(shè)置為5%；.為測試水平,本次證的測試水平為2。因此C值百分點=（10.05/2）X100%=97.5%。同時，根據(jù)EP-15A提供的表格查出C值，在本次驗證中，C值為27.49。XXX人民醫(yī)院檢驗

22、科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第7頁共20頁其中awithin表示該項目1/4CLIA'88的總誤差。3）如果Swithin小于verificationvalue，表明本次驗證得到的精密度與1/4CLIA'88總誤差之間的差異無統(tǒng)計學意義，儀器可以繼續(xù)使用；反之，則認為分析系統(tǒng)的批內(nèi)精密度不滿足臨床要求，需要聯(lián)系生產(chǎn)廠家查找可能的原因。4.1.3.2 對于批間精密度的判斷，具體的計算和判斷過程：1）按照下述公式計算出室內(nèi)精密度的自由度T：（伍-1）+仇眄尸一（寧）戲品+（島）其中，B的計算公式為：C_爲】

23、（九研D-1其中：D：表示總共檢測天數(shù)（D=5）；n：單個樣本每天重復(fù)檢測的次數(shù)（n=4）；xdi：每個樣本每天四次單獨檢測的結(jié)果；xd：每個樣本每天四次檢測結(jié)果的算數(shù)均數(shù)；xt：單個樣本每天檢測結(jié)果的算數(shù)均數(shù)的算數(shù)均數(shù)。2）按照下述公式計算出C值百分點。C值百分點=1-«/其中a為檢驗水準或者說可接受I類誤差的概率，一般設(shè)置為5%；為測試水平，本次驗證的測試水平為2。因此C值百分點=（10.05/2）X100%=97.5%。同時，根據(jù)EP-15A提供的表格查出C值，在本次驗證中，C值為27.49。3）計算出verificationvalue。其中atotal表示該項目的1/4CLI

24、A'88總誤差。4）如果Stotal小于verificationvalue，表明本次驗證得到的批間精密度與1/2CLIA'88總誤差之間的差異無統(tǒng)計學意義，儀器可以繼續(xù)使用；反之，則認為分析系統(tǒng)的批間精密度不滿足臨床要求，需要聯(lián)系生產(chǎn)廠家查找可能的原因。4.4.2 正確度XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第8頁共20頁4.4.2.1 實驗方案：根據(jù)衛(wèi)生臨檢中心室間質(zhì)評結(jié)果對血細胞分析項目進行正確度評估，成績在80%以上者即為驗證通過。而沒有參加室間質(zhì)評的儀器，至少使用10份檢測結(jié)果在參考區(qū)間

25、內(nèi)的新鮮血樣本，每份樣本檢測兩次，計算20次以上檢測結(jié)果的均值，以參加室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良的儀器檢測結(jié)果為標準，計算偏倚。4.4.2.2 結(jié)果符合相關(guān)標準。4.4.3 線性范圍4.4.3.1 實驗方案選取一份接近預(yù)期上限的高值全血樣本(H),分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次，計算均值。以理論濃度為縱坐標，實測濃度為橫坐標。由統(tǒng)計學計算出R2和回歸方程式Y(jié)=aX+b。4.4.3.2要求：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r±0.975。4.4.2.2 結(jié)果符合相關(guān)標準。4.4.3 線性范圍4.4.3.1 實驗方

26、案選取一份接近預(yù)期上限的高值全血樣本(H),分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次，計算均值。以理論濃度為縱坐標，實測濃度為橫坐標。由統(tǒng)計學計算出R2和回歸方程式Y(jié)=aX+b。4.4.3.2要求：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r±0.975。4.4.4 參考區(qū)間4.4.4.1 人群來源選擇身體健康體檢者20例，男女各半，無任何系統(tǒng)重大疾病史，目前無主觀不適。抽取上述人群的空腹靜脈血液，按照標準操作程序進行相關(guān)項目的檢測。4.4.4.2 結(jié)果分析判斷規(guī)定小于或等于2份標本結(jié)果超出生物學參考區(qū)間，即為驗證通過。或只

27、=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)±90%即合格。4.4.4.3 生物學參考區(qū)間評審每年一次。如更改檢驗程序(如在檢測方法、儀器、試劑等出現(xiàn)變更)或檢驗前程序，也應(yīng)對生物學參考區(qū)間進行評審。再者，如在檢驗程序的執(zhí)行過程中出現(xiàn)生物學參考區(qū)間不適用于實驗室所服務(wù)的被檢測人群的情況，也應(yīng)對生物學參考區(qū)間進行評審。4.4.5 可報告區(qū)間結(jié)合臨床要求，其線性范圍可以滿足臨床的需求，因此可報告區(qū)間即為線性范圍。大于或小于上述范圍時，可用手工法或涂片染色鏡檢驗證，以鏡檢結(jié)果報告或以大于或小于線性值報告。4.4.6 攜帶污染率4.4.6.1 實驗方案取高濃度血液樣本，混合均勻后連續(xù)測定三次，測

28、定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液樣本，連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。按下列公式計算攜帶污染率。4.4.6.2 要求XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第9頁共20頁結(jié)果與廠家性能要求或其它性能標準比較以判斷是否可接受。4.4.7 儀器分類與手工分類比對4.4.7.1 實驗方案：取20位儀器分類未見明顯異常報警之患者樣本，每位患者分別用于參考方法和儀器法檢測，其中參考方法為人工染色顯微鏡分析，每份標本推兩張血涂片（A片和B片），由兩位資深檢驗人員對每張血涂片分析200個細胞。其中一位使用

29、血涂片A，另一位使用B片，每份樣本的人工分類結(jié)果取平均值。4.4.7.2 判定方法：將儀器法測量結(jié)果與人工分析的結(jié)果比較，計算兩種方法的偏倚，偏倚=丨儀器測定值-顯微鏡計數(shù)值丨/顯微鏡計數(shù)值*100%,其差值在生物學變異允許范圍內(nèi)即可。4.4.8 不同吸樣模式的結(jié)果可比性4.4.8.1 實驗方案驗證方法：每次校準后，取5份臨床樣本分別使用不同模式進行檢測，每份樣本各檢測2次，分別計算兩種模式下檢測結(jié)果均值間的相對差異。自動均值一手動均值相對偏差二X100%自動均值4.4.8.2 要求：結(jié)果與廠家性能要求或其它性能標準比較以判斷是否可接受。4.4.9 實驗室內(nèi)結(jié)果的可比性4.4.9.1 實驗方案

30、4.4.9.1.1 新儀器使用前，配套檢測系統(tǒng)至少使用20份臨床標本（濃度分布符合相關(guān)標準）每份樣本分別使用臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)和被比對儀器進行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果為標準，計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.4.9.1.2 新儀器使用前，非配套檢測系統(tǒng)按EP9-A文件與配套檢測系統(tǒng)進行比對，至少使用40份臨床樣本（濃度選擇符合相關(guān)標準），計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.4.9.1.3 常規(guī)檢測儀器使用過程中，至少使用20份臨床樣本（濃度選擇符合相關(guān)標準）定期進行一次結(jié)果比對，每個檢測

31、項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.4.9.2 以下情況，可按WS/T407的方法和要求進行比對：如室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢時、室間質(zhì)評結(jié)果不合格，采取糾正措施后、更換重要部件或重大維修后、軟件程序變更后、臨床醫(yī)生對結(jié)果的可比性有疑問時、患者投訴對結(jié)果可比性有疑問（需要確認時）、需要提高周期性比對頻率時。4.4.9.3 結(jié)果判定：結(jié)果符合相關(guān)標準。4.5 臨檢（凝血）精密度（批內(nèi)、批間精密度）、正確度、攜帶污染率、線性范圍（可能只適用幾個項目，如纖維蛋白原等）、可報告區(qū)間、參考區(qū)間，必要時，還要考慮干擾和實驗室內(nèi)結(jié)果的比對等。4.5.1 精密度、正確度、可報告區(qū)間、參考區(qū)間可參

32、考血常規(guī)的做法。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第10頁共20頁4.5.2 線性范圍（可參考）4.5.2.1 實驗方案選取一份接近預(yù)期上限的高值（FIB）全血樣本（H）,分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次，計算均值。將實測值與理論值作比較（偏離應(yīng)小于10%），計算y=ax+b，驗證線性范圍。4.5.2.2要求：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r±0.975，則判斷為線性范圍驗證通過。4.5.3 攜帶污染率4.5.3.1 實驗方案（可參

33、考）高值樣本對低值樣本的污染：將低值樣本架1和3的位置，高值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。計算：L_、二:低值樣本對高值樣本的污染：將高值樣本置樣本架1和3位置，低值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6。電_4斗一網(wǎng)0口“（龍1沖2朋計算：.；：.一：.4.5.3.2 要求：CV符合廠家提供的標準或相關(guān)的性能標準。4.5.4 干擾試驗（可參考）4.5.4.1 實驗方案：使用溶血樣本、黃疸樣本及脂血樣本，按一定比例加入正?；旌涎獫{，以原空白混合血漿作為空白對照，

34、分別測定PT、APTT、FIB，每個樣本重復(fù)檢測兩次取均值，計算偏離值，應(yīng)10%。4.5.4.2 要求：結(jié)果符合廠家標準或相關(guān)性能標準。4.5.5 實驗室內(nèi)結(jié)果的比對4.5.5.1 實驗方案4.5.5.1.1 新儀器使用前，配套檢測系統(tǒng)至少使用20份臨床標本（包含正常和異常結(jié)果標本），每份樣本分別使用臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)和被比對儀器進行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果為標準，計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.5.5.1.2 新儀器使用前，非配套檢測系統(tǒng)按EP9-A文件與配套檢測系統(tǒng)進行比對，至少使用40份臨床樣本（包含正常和異常結(jié)果標本

35、），計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.5.5.1.3 常規(guī)檢測儀器使用過程中，至少使用20份臨床樣本（包含正常和異常結(jié)果標本）定期進行一次結(jié)果比對，每個檢測項目的相對偏差符合標準的比例應(yīng)±80%。4.5.5.1.4 以下情況，需要進行比對：如室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢時、室間質(zhì)評結(jié)果不合格，采取糾正措施后、更換重要部件或重大維修后、軟件程序變更后、臨床醫(yī)生對結(jié)果的可比性有疑問時、患者投訴對結(jié)果可比性有疑問（需要確認時）、需要提高周期性比對頻率時。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日

36、期：20190601第11頁共20頁4.6體液尿液分析儀及試帶主要對性能（正確度、精密度、參考區(qū)間等）進行評價，必要時，還要考慮不同方法的比較，如與鏡檢的比較。尿干化學的判定標準和室內(nèi)質(zhì)控的判定標準類似。PH和比重的項目，可參考說明書中提到要求。4.6.1 精密度4.6.1.1 批內(nèi)精密度按常規(guī)方法連續(xù)檢測20次尿液質(zhì)控品（陰性和陽性），檢測結(jié)果相差同方向不超過一個級別，但是陰性結(jié)果不能檢測成陽性，陽性結(jié)果不能檢測呈陰性。4.6.1.2 批間精密度選擇室內(nèi)質(zhì)控作為衡量批間精密度的依據(jù)。每天室內(nèi)質(zhì)控品按照常規(guī)標本的方法一樣測定，連續(xù)收集同一批號室內(nèi)質(zhì)控品某一時間段（至少20天）的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)。檢

37、測結(jié)果相差同方向不超過一個級別，但是陰性結(jié)果不能檢測成陽性，陽性結(jié)果不能檢測呈陰性。4.6.2 正確度根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心的室間質(zhì)評成績，成績在80%以上判定為通過。4.6.3 參考區(qū)間4.6.3.1 入選參考區(qū)間健康人群的標準要求近1個月無服藥史及發(fā)熱，無泌尿系統(tǒng)疾病、高血壓、糖尿病、肝炎、風濕等全身性疾病，無泌尿系統(tǒng)疾病的家族史、泌尿道外科手術(shù)史及泌尿道結(jié)石史，無浮腫的現(xiàn)象，女性在非月經(jīng)期內(nèi)。4.6.3.2判斷標準：計算95%分位數(shù)的結(jié)果。R=測定結(jié)果在參考區(qū)間范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)±95%即合格。4.7PCRHBV-DNA定量項目（可采用對數(shù)參與計算）需要驗證的參數(shù)包括:精密度

38、（批內(nèi)、批間）、正確度、線性范圍、可報告區(qū)間、參考范圍。定性檢測項目驗證內(nèi)容至少應(yīng)包括檢出限及符合率等。4.7.1 精密度4.7.1.1 批內(nèi)精密度4.7.1.1.1 樣本來源:高濃度及低濃度的混合的新鮮臨床標本。4.7.1.1.2 實驗方法:質(zhì)控結(jié)果在控時，將高低值兩個樣本在同一批次內(nèi)分別測定20次，同時進行質(zhì)控品的測定，并計算均值、標準差和批內(nèi)精密度（%）。4.7.1.1.3 結(jié)果判斷本項目的批內(nèi)精密度實驗CV<5%（請確認），則認為驗證通過。4.7.1.2 批間精密度4.7.1.2.1 樣本來源:高濃度及低濃度的混合的新鮮臨床標本。4.7.1.2.2 實驗方法:取高、低值兩個樣本，

39、與病人標本一同進行測定20次，同時進行質(zhì)控品的測定并計算均值、標準差和批內(nèi)精密度（%）。4.7.1.2.3 結(jié)果判斷本項目的批間精密度實驗CV<8%（請確認），則認為符合要求，可以進行常規(guī)檢測。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第12頁共20頁4.7.2 正確度根據(jù)衛(wèi)生臨檢中心室間質(zhì)評成績（可以是最近幾年的成績）對HBV-DNA定量測定進行正確度驗證，成績在80%者即為驗證通過。4.7.3 線性范圍4.7.3.1 樣本來源：已知濃度的病人標本，濃度收集接近線性范圍上限。實驗方法：方法1：將病人血清用滅

40、菌蒸餾水稀釋為5個濃度后，分別將每個稀釋度檢測2次，計算線性回歸系數(shù)R2。稀釋方案：樣本1：20卩l(xiāng)血清與180l蒸餾水混勻。樣本2:20l樣本1與180l蒸餾水混勻。樣本3：20l樣本2與180l蒸餾水混勻；樣本4:20l樣本3與180l蒸餾水混勻。樣本5:20l樣本4與180l蒸餾水混勻。方法2：收集接近線性范圍高限病人血清混合，用已檢測無擴增的陰性血清稀釋5個濃度（如10、100、1000），分別將每個稀釋度檢測2次，取其對數(shù)值計算線性回歸方程y=ax+b及相關(guān)系數(shù)R2。4.7.3.2 結(jié)果判斷計算所得線性回歸系數(shù)R2±95%之間，認為線性范圍驗證通過。4.7.4 可報告區(qū)間結(jié)

41、合臨床要求，該項目線性范圍可以滿足臨床需要，因此線性范圍即為可報告區(qū)間（請確認）。4.7.5 參考區(qū)間4.7.5.1實驗方法：樣本選入原則為健康體檢者中無HBV感染、肝功能、B超等正常者20人，其中男女各10人，取血清進行HBV-DNA測定，同時進行質(zhì)控品的測定。4.7.5.2 結(jié)果判斷規(guī)定小于或等于1份標本結(jié)果超出參考區(qū)間，即為驗證通過。4.8 微生物-人員比對選取20份標本（包括革蘭陽性、革蘭陰性），先由實驗室經(jīng)驗豐富的操作人員進行試驗，以其實驗結(jié)果作為參照，再由從事該項目檢測的人員對標本進行操作，將各自結(jié)果與參照結(jié)果進行比對，計算符合率。4.9 微生物-細菌鑒定4.9.1 符合率以公認的

42、標準菌株按日常操作上機鑒定，比較鑒定的百分率及生化反應(yīng)的符合率。試驗結(jié)果和預(yù)期結(jié)果完全符合；要求鑒定菌種正確，生化反應(yīng)不符合項數(shù)不超過一項。4.9.2 重復(fù)性采用公認的標準菌株及衛(wèi)生部質(zhì)評菌株，對同一株細菌在不同工作日進行上機鑒定，比較兩次鑒定結(jié)果的鑒定百分率及生化反應(yīng)的符合率。要求兩次鑒定完全相同；差異生化反應(yīng)項數(shù)不多于一項。4.10微生物藥敏試驗（KB法）XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第13頁共20頁可采用室內(nèi)質(zhì)控的數(shù)據(jù)。4.10.1 符合率以公認的標準菌株按日常操作方法操作，比較藥敏紙片的抑菌圈直

43、徑大小的差異性。4.10.2 重復(fù)性采用公認的標準菌株，對同一株細菌在不同工作日進行藥敏試驗，比較兩次鑒定結(jié)果的鑒定百分率及生化反應(yīng)的符合率。4.11微生物-血培養(yǎng)(儀器法)4.11.1 假陰性率對血培養(yǎng)系統(tǒng)陰性瓶盲轉(zhuǎn)血平板，任何細菌生長均視為假陰性，統(tǒng)計分析假陰性結(jié)果占總送檢血培養(yǎng)數(shù)的百分比。全自動血培養(yǎng)分析系統(tǒng)性能驗證分析方法：季度回顧分析全自動血培養(yǎng)分析系統(tǒng)的假陰性率和假陽性率。4.11.2 假陽性率對血培養(yǎng)系統(tǒng)陽性瓶鏡檢未見細菌，轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)血平板和巧克力平板培養(yǎng)一周后無任何細菌生長均視為假陽性任何細菌生長均視為假陰性，統(tǒng)計分析假陽性結(jié)果占總送檢血培養(yǎng)數(shù)的百分比。全自動血培養(yǎng)分析系統(tǒng)性能驗證分

44、析方法：季度回顧分析全自動血培養(yǎng)分析系統(tǒng)的假陰性率和假陽性率。4.11.3 報陽時間用一個或多個微生物調(diào)制菌懸液濃度為10iCFU/ml,接種于各種血培養(yǎng)瓶中模擬常規(guī)操作上機測定，觀察血培養(yǎng)瓶報陽時間是否適當(V72h)。將不同微生物接種在不同的培養(yǎng)瓶內(nèi),要求所有被測微生物在參考時間內(nèi)呈陽性。同時進行驗證試驗：轉(zhuǎn)鐘相應(yīng)的平板培養(yǎng)基，有相應(yīng)的微生物生長說明質(zhì)量有效；無相應(yīng)微生物生長必須重復(fù)試驗，檢查操作是否有誤、培養(yǎng)瓶是否在有效期內(nèi)；如果重復(fù)試驗仍未通過，立即停用培養(yǎng)瓶并尋找原因。做好記錄，通知供應(yīng)商或或退回培養(yǎng)瓶。4.12應(yīng)用說明中的提到的性能驗證(節(jié)選)4.12.1 分子診斷領(lǐng)域4.12.1

45、.1 定量檢測方法和程序的分析性能驗證內(nèi)容至少應(yīng)包括正確度、精密度、可報告區(qū)間等。定性檢測項目驗證內(nèi)容至少應(yīng)包括檢出限及符合率等。驗證結(jié)果應(yīng)經(jīng)過授權(quán)人審核。4.12.1.2 通過與其他實驗室(如已獲認可的實驗室、使用相同檢測方法的實驗室、使用配套系統(tǒng)的實驗室)比對的方式確定檢驗結(jié)果的可接受性時，應(yīng)滿足如下要求：(a) 規(guī)定比對實驗室的選擇原則；(b) 樣品數(shù)量：至少5份，包括正常和異常水平；(c) 頻率：至少每年2次；(d) 判定標準：應(yīng)有±80%的結(jié)果滿足要求。4.12.1.3 實驗室應(yīng)對新批號或同一批號不同貨運號的試劑和關(guān)鍵耗材進行驗收，驗收試驗至少應(yīng)包括：XXX人民醫(yī)院檢驗科程

46、序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第14頁共20頁（a）外觀檢查：肉眼可看出的，如包裝完整性、有效期等；（b）性能驗證：通過實驗才能判斷的，如試劑的核酸提取效率和核酸擴增效率、試劑的批間差異、關(guān)鍵耗材的抑制物等：試劑性能驗證記錄應(yīng)能反映該批試劑的核酸提取效率和核酸擴增效率。一般情況下，臨床實驗室采用新批號試劑或關(guān)鍵耗材檢測5份過去用舊試劑或關(guān)鍵耗材檢測過的患者樣品進行驗證，符合附錄A.6要求即可視為滿足要求。但當實驗室懷疑提取試劑有質(zhì)量問題時，可采用凝膠電泳試驗比較核酸提取物與核酸標準物確認核酸片段提取的完整性、260nm紫外波

47、長測定確認核酸提取的產(chǎn)率、260nm/280nm比值確認核酸提取的純度。核酸擴增效率可通過計算標準曲線的斜率（slope）獲得，實驗室可參照供應(yīng)商提供的斜率范圍來評價該批試劑的符合性。用于定性檢驗的試劑，選擇陰性和弱陽性的樣品進行試劑批號驗證。用于定量檢驗的試劑，應(yīng)進行新舊試劑批間的差異驗證，方法和要求參照附錄A.6要求。耗材的抑制物驗收：對關(guān)鍵耗材應(yīng)檢測是否存在核酸擴增的抑制物，方法和要求參照附錄A.6要求。4.12.1.4 實驗室使用兩套及以上檢測系統(tǒng)檢測同一項目時，應(yīng)有比對數(shù)據(jù)表明其檢測結(jié)果的一致性，比對頻次每年至少2次，每次不少于20份樣品，濃度水平覆蓋測量范圍；比對結(jié)果的系統(tǒng)偏倚應(yīng)符

48、合附錄A.4的要求。使用不同參考區(qū)間的檢測系統(tǒng)間不宜進行比對。比對記錄應(yīng)由實驗室負責人審核并簽字，并應(yīng)保留至少2年。分子診斷項目分析性能標準A.1應(yīng)不低于國家標準、行業(yè)標準、地方法規(guī)要求。A.2自建檢測系統(tǒng)不精密度要求：以能力驗證/室間質(zhì)評評價界限（靶值0.4對數(shù)值）作為允許總誤差（TEa），重復(fù)性精密度3/5TEa；中間精密度4/5TEa。A.3設(shè)備故障修復(fù)后，分析系統(tǒng)比對5份樣品，覆蓋測量區(qū)間，至少4份樣品測量結(jié)果偏倚7.5%。A.4實驗室內(nèi)分析系統(tǒng)定期比對：樣品數(shù)n±20，濃度應(yīng)覆蓋測量區(qū)間，計算回歸方程，系統(tǒng)誤差應(yīng)7.5%。A.5留樣再測判斷標準：按照項目穩(wěn)定性要求選取最長期

49、限樣品，5個樣品，覆蓋測量區(qū)間，至少4個樣品測量結(jié)果偏倚7.5%。A.6試劑批間差異、耗材的抑制物的驗收合格判斷標準：選取5個舊批號檢測過的樣品，覆蓋測量區(qū)間（包括陰性、臨界值、低值、中值和高值），至少4個樣品測量結(jié)果偏倚7.5%，其中陰性和臨界值樣品必須符合預(yù)期。A.7沒有標準和室間質(zhì)評要求時，實驗室間結(jié)果比對合格標準可依據(jù)制造商聲明的性能標準而制定。4.12.2 臨床化學領(lǐng)域使用配套分析系統(tǒng)時，可使用制造商的溯源性文件，并制定適宜的正確度驗證計劃；使用非配套分析系統(tǒng)時，實驗室應(yīng)采用有證參考物質(zhì)、正確度控制品等進行正確度驗證或與經(jīng)確認的參考方法（參考實驗室）進行結(jié)果比對以證明實驗室檢驗結(jié)果的

50、正確度。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第15頁共20頁如以上方式無法實現(xiàn)，可通過以下方式提供實驗室檢測結(jié)果可信度的證明：參加適宜的能力驗證/室間質(zhì)評，且在最近一個完整的周期內(nèi)成績合格；與使用相同檢測方法的已獲認可的實驗室、或與使用配套分析系統(tǒng)的實驗室進行比對，結(jié)果滿意。設(shè)備故障修復(fù)后，應(yīng)首先分析故障原因，如果設(shè)備故障影響了分析性能，應(yīng)通過以下合適的方式進行相關(guān)的檢測、驗證：(a) 可校準的項目實施校準或校準驗證；(b) 質(zhì)控物檢測結(jié)果在允許范圍內(nèi)；(c) 與其他儀器的檢測結(jié)果比較，偏差符合附錄A.3的要

51、求；(d) 使用留樣再測結(jié)果進行判斷，偏差符合附錄A.5的要求。4.12.2.1 檢驗程序驗證檢驗方法和程序的分析性能驗證內(nèi)容至少應(yīng)包括正確度、精密度和可報告區(qū)間。4.12.2.2 檢驗程序的確認如果使用內(nèi)部程序，如自建檢測系統(tǒng)，應(yīng)有程序評估并確認正確度、精密度、可報告區(qū)間、參考區(qū)間等分析性能符合預(yù)期用途。4.12.2.3 生物學參考區(qū)間或臨床決定值參考區(qū)間評審內(nèi)容應(yīng)包括：參考區(qū)間來源、檢測系統(tǒng)一致性、參考人群適用性等，評審應(yīng)有臨床醫(yī)生參加。臨床需要時，宜根據(jù)性別、年齡等劃分參考區(qū)間。如果建立參考區(qū)間，樣品數(shù)量應(yīng)不少于120例，若分組，每組的樣品數(shù)量應(yīng)不少于120例。驗證參考區(qū)間時，每組的樣品

52、數(shù)量應(yīng)不少于20例。4.12.2.4 替代方案對沒有開展能力驗證/室間質(zhì)評的檢驗項目，應(yīng)通過與其他實驗室(如已獲認可的實驗室、使用相同檢測方法的實驗室、使用配套系統(tǒng)的實驗室)比對的方式，判斷檢驗結(jié)果的可接受性，并應(yīng)滿足如下要求：(a) 規(guī)定比對實驗室的選擇原則；(b) 樣品數(shù)量：至少5份，包括正常和異常水平；(c) 頻率：至少每年2次；(d) 判定標準：應(yīng)有±80%的結(jié)果符合要求。4.12.2.5 檢驗結(jié)果可比性實驗室用兩套及以上檢測系統(tǒng)檢測同一項目時，應(yīng)有比對數(shù)據(jù)表明其檢測結(jié)果的一致性，實驗方案可參考中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T407-2012醫(yī)療機構(gòu)內(nèi)定量檢驗結(jié)果的可比性驗

53、證指南，或比對頻次每年至少1次，樣品數(shù)量不少于20，濃度水平應(yīng)覆蓋測量范圍；比對結(jié)果的系統(tǒng)偏倚應(yīng)符合附錄A.1或A.4的要求。比對結(jié)果不一致時，應(yīng)分析原因，并采取必要的糾正指施，及評估糾正指施的有效性。使用不同參考區(qū)間的檢測系統(tǒng)間不宜進行結(jié)果比對。比對記錄應(yīng)由實驗室負責人審核并簽字，并應(yīng)保留至少2年。臨床化學檢驗分析性能要求A.1適用時，性能指標應(yīng)不低于國家標準、行業(yè)標準、或地方法規(guī)的要求，如中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T403-2012A.2檢測系統(tǒng)不精密度要求：以能力驗證/室間質(zhì)評評價界限作為允許總誤差(TEa),重復(fù)性精密度l/4TEa；中間(室內(nèi))精密度l/3TEa；或小于規(guī)定的不

54、精密度。XXX人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：JYK-02-CXWJ版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容性能驗證生效日期：20190601第16頁共20頁A.3實驗室內(nèi)分析系統(tǒng)間不定期比對(如設(shè)備故障修復(fù)后)要求：樣品數(shù)n±5,濃度應(yīng)覆蓋測量范圍，包括醫(yī)學決定水平，至少4份樣品測量結(jié)果的偏差l/2TEa；或小于規(guī)定的偏倚。A.4實驗室內(nèi)分析系統(tǒng)間定期比對要求：樣品數(shù)n±20，濃度應(yīng)覆蓋測量范圍，包括醫(yī)學決定水平，計算回歸方程，計算在醫(yī)學決定性水平下的系統(tǒng)誤差(偏倚)，應(yīng)l/2TEa。A.5留樣再測判斷標準：依據(jù)檢測項目樣品穩(wěn)定性要求選取長期限樣品，n±5，覆蓋測量范圍，考

55、慮醫(yī)學決定水平，至少4份樣品測量結(jié)果的偏差l/3TEa；A.6沒有標準和室間質(zhì)評要求時，實驗室間結(jié)果比對合格標準可依據(jù)制造商聲明的性能標準而制定。4.12.3 免疫領(lǐng)域設(shè)備故障修復(fù)后，應(yīng)首先分析故障原因，如果設(shè)備故障影響了方法學性能，可通過以下合適的方式進行相關(guān)的檢測、驗證：(a) 可校準的項目實施校準或校準驗證；(b) 質(zhì)控物檢測結(jié)果在允許范圍內(nèi)；(c) 與其他儀器的檢測結(jié)果比較；(d) 使用留樣再測結(jié)果進行判斷。檢驗方法和程序的分析性能驗證內(nèi)容應(yīng)參考試劑盒說明書上明確標示的性能參數(shù)進行驗證，至少應(yīng)包括：檢出限，精密度(包括重復(fù)性和中間精密度)、符合率(采用國家標準血清盤或臨床診斷明確的陰陽

56、性樣品各20份或與其他分析方法比對)；并應(yīng)明確檢驗項目的預(yù)期用途，如篩查、診斷、確認。注：cut-off值可以選擇以下方法之一驗證：陰性來源：選擇60份健康人新鮮血清和60份目標標志物陰性而有其他免疫標志物陽性的患者新鮮血清，共120份，分3-5批3-5天進行檢測，計算X、s，CUTOFF驗證值為：X+3s；陽性來源：選擇弱陽性(CUTOFF值±20%，土應(yīng)均勻分布)新鮮血清或質(zhì)控血清共120份，分3-5批3-5天進行檢測，計算X、s，CUTOFF值驗證值為：X-3s。4.12.3.1 替代方案對沒有開展能力驗證/室間質(zhì)評的檢驗項目，實驗室應(yīng)通過與其他至少2個以上實驗室(如已獲認可的實驗室或其它使用相同檢測方法的配套系統(tǒng)的同級別或高級別醫(yī)院的實驗室)比對的方式判斷檢驗結(jié)果的可接受性，并應(yīng)滿足如下要求：(e) 規(guī)定比對實驗室的選擇原則；(f) 樣品數(shù)量：至少5份，包括陰性和陽性；(g) 頻率：至少每年2次；(h) 判定標準：應(yīng)有±80%的結(jié)果符合要求。(i) 結(jié)果不一致時，應(yīng)分析不一致的原因，必要時，采取有效的糾正措施，并定期評價實驗室間比對對其質(zhì)量的改進作用，保留相應(yīng)的記錄。4.12.3.2 檢驗結(jié)果可比性如果采用手工操作或同一項目使用兩套及以上檢測系統(tǒng)時，應(yīng)至少每年1次進行實驗室內(nèi)部比對，