任務(wù)六測(cè)定食品中的脂類

1、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)1任務(wù)六測(cè)定食品中的脂類李京東 余奇飛 劉麗紅食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)2v技能目標(biāo)1會(huì)測(cè)定食品中的粗脂肪。2會(huì)測(cè)定食品中的DHA、EPA。3會(huì)測(cè)定食品中的磷脂。v知識(shí)目標(biāo)1明確常見食品中脂肪含量，以及測(cè)定原理。2明確常見DHA、EPA含量較高食品，以及測(cè)定原理。3明確食品中磷脂含量水平，以及測(cè)定原理。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)3項(xiàng)目一：測(cè)定食品中粗脂肪v一、案例v二、選用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.6-2003食品中脂肪的測(cè)定索氏提取法。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)4v三、測(cè)定方法1濾紙筒制備v用20cm8cm脫脂濾紙卷在直徑為1.52cm試管外，將下端折疊封口成筒狀，在下部置入一塊脫脂棉，然后在1

2、00士5干燥箱烘至恒量。2樣品制備v精密稱取干燥并研細(xì)的固體樣品25g，必要時(shí)拌以海砂，全部移入濾紙筒內(nèi)，用一小塊脫脂棉擦拭干凈使用儀器后，放入濾紙筒上部，折疊封口，用脫脂棉線扎緊，防止樣品泄露。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)5v3抽提將包埋好的濾紙筒放入索氏提取筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的脂肪接收瓶，由冷凝管上方注入乙醚或石油醚，至虹吸管高度以上，提取液回流，繼續(xù)加量至接收瓶體積的2/3，將接收瓶于水浴中加熱 (夏天65，冬天80左右)，用一小塊脫脂棉輕輕塞入冷凝管上口，進(jìn)行回流提取，控制每分鐘回流液的速度在120滴左右（或回流68次/h），提取時(shí)間視試樣中粗脂肪含量而定，一般樣品提取612h。v4回收溶劑

3、、稱重將提脂管下口滴下的乙醚或石油醚滴在濾紙或毛玻璃上，揮發(fā)后不留下痕跡表明抽提完全，回收溶劑，取下接收瓶，水浴上蒸干并除盡殘余提取液，將接收瓶置于100士5的干燥箱內(nèi)干燥2h，放干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱量，反復(fù)以上操作至恒量（兩次稱量之差不超過(guò)2mg）。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)6v5結(jié)果計(jì)算 式中X脂肪的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；m1接收瓶的質(zhì)量，g；m2接收瓶和粗脂肪的質(zhì)量，g；m試樣的質(zhì)量，g。v6試劑無(wú)水乙醚（或無(wú)水石油醚）、海砂v7實(shí)驗(yàn)儀器索氏提取器、分析天平、恒溫干燥箱、恒溫水浴鍋、脫脂棉、脫脂濾紙、脫脂棉線。%10012mmmXmmmX12食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)7v四、相關(guān)知識(shí)（一）食品中脂肪測(cè)定索氏

4、提取法原理v 樣品經(jīng)處理后，用無(wú)水乙醚或石油醚等溶劑回流抽提，樣品中的脂肪完全溶解于溶劑，將溶劑回收后剩余的殘留物即為脂肪，由于提取物中含有磷脂、色素、樹脂、固醇、芳香油、糖脂等，用此法測(cè)得的脂肪稱為粗脂肪；由于結(jié)合態(tài)脂肪不能溶于乙醚或石油醚，所以測(cè)定的脂肪是食品中游離態(tài)脂肪。v 本法摘自GB/T5009.6-2003，適用于肉制品、豆制品、谷物、堅(jiān)果、油炸果品、中西式糕點(diǎn)中粗脂肪的測(cè)定。此法是經(jīng)典方法，對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠，但費(fèi)時(shí)間，溶劑用量大，且需專門的索氏抽提器。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)8v（二）注意事項(xiàng)1樣品處理2濾紙筒的包扎和放置。3含糖及糊精高的樣品處理4在抽提時(shí)，冷凝管上端處理。5

5、 反復(fù)加熱會(huì)因脂類氧化而增重，質(zhì)量增加時(shí)，以增重前的質(zhì)量作為恒量。6 蒸發(fā)皿及黏附有樣品的玻璃棒都用沾有乙醚的脫脂棉擦凈，將脫脂棉一同放進(jìn)濾紙筒內(nèi)，減小測(cè)定誤差。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)9v7.乙醚及石油醚的安全使用及要求乙醚或石油醚要求是無(wú)水、無(wú)醇、無(wú)過(guò)氧化物，揮發(fā)性殘?jiān)康汀＿^(guò)氧化物檢查：v取6mL乙醚，加2mL10%KI溶液，用力振蕩，放置1min后，若出現(xiàn)黃色，表明有過(guò)氧化物存在，應(yīng)該另選乙醚或處理后再用。乙醚的處理：v乙醚中加入1/201/10體積的200g/L硫代硫酸鈉溶液洗滌，再用水洗，然后加入少量無(wú)水氯化鈣或無(wú)水硫酸鈉脫水，置于水浴蒸餾，蒸餾溫度略高于溶劑沸點(diǎn)，至燒瓶?jī)?nèi)沸騰即可，棄

6、去最初和最后的1/10餾出液，收集中間餾出液即可食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)10v五、測(cè)定食品中脂肪的方法（一）食品中脂類意義v食品中的脂類包括脂肪和類脂，脂肪的存在形式有游離態(tài)，也有結(jié)合態(tài)，以游離態(tài)脂肪為主，結(jié)合態(tài)脂肪含量較少。v測(cè)定脂類的方法常用萃取法v低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑，如乙醚、石油醚、氯仿-甲醇溶劑等。v食品脂肪測(cè)定的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法包括索氏提取法、酸水解法、羅斯-哥特里氏法、巴布科克氏法和蓋勃氏法、氯仿-甲醇提取法、儀器法等。其中酸水解法可以測(cè)定包括結(jié)合態(tài)脂在內(nèi)的全部脂肪，羅斯-哥特里氏法適用于乳及乳制品中脂肪的測(cè)定。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)11v（二）酸水解法樣品與鹽酸溶液一同加熱水解，結(jié)合或包藏在組織里

7、的脂肪游離出來(lái)，再用乙醚或石油醚提取脂肪，蒸發(fā)回收溶劑，干燥后稱量，提取物的質(zhì)量即為脂肪含量 (游離態(tài)及結(jié)合態(tài)脂肪的總量)。本法摘自GB/T5009.6-2003，適用于各類食品中脂肪的分析檢測(cè)，特別是不能采用索氏提取法的加工后的混合食品，以及容易吸濕、結(jié)塊、不易烘干的食品，此法具有效果較好，測(cè)定時(shí)間短，在一定程度上可以防止脂類物質(zhì)的氧化。但對(duì)于含磷脂豐富的食品如魚類、貝類、蛋及蛋制品、多糖類食品不適合，因?yàn)榱字愂澄镌邴}酸溶液中易分解，而多糖遇強(qiáng)酸易碳化，都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)12v1. 樣品處理 稱取固體樣品約2.00g，置于50mL大試管內(nèi)，加8mL水，混勻后再加10mL鹽

8、酸（液體樣品則稱取10.00g置于50mL大試管內(nèi)，加入10mL鹽酸）。v2水解將試管放入7080水浴中，每510min用玻璃棒攪拌一次，經(jīng)4050min至樣品消化完全為止。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)13v3提取取出試管后加10mL乙醇，混合促使蛋白質(zhì)沉淀，冷卻后將混合物移入100mL具塞量筒中，以20mL乙醚分?jǐn)?shù)次洗試管，并將乙醚全部倒入量筒，然后加塞振搖1min，小心開塞放出氣體，再加塞靜置12min，小心開塞，用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪，靜置1020min，上部液體清晰，吸上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi)，再加5mL乙醚于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶?jī)?nèi)。v

9、4回收溶劑、稱重將錐形瓶于水浴上蒸干后，置100士5干燥箱中干燥2h，取出放入干燥器內(nèi)冷卻30min后稱量，重復(fù)上述操作至恒量。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)14v 5結(jié)果計(jì)算v 式中X樣品中脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%m2錐形瓶和脂類質(zhì)量，g；m1空錐形瓶的質(zhì)量，g；m試樣的質(zhì)量，g。v6試劑乙醇（95%）、乙醚 (不含過(guò)氧化物)、石油醚 (3060沸程)、鹽酸。v7儀器100mL具塞刻度量筒、50mL大試管、錐形瓶。mmmX12食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)15v8注意事項(xiàng)（1）待測(cè)樣品充分磨細(xì)，液體樣品需充分混合均勻，便于樣品水解，如果結(jié)合性脂肪不能完全游離，影響測(cè)定結(jié)果。（2）水解時(shí)應(yīng)防止大量水分損失，使酸濃度升高，影響

10、測(cè)定結(jié)果。（3）水解后加入乙醇，可使蛋白質(zhì)沉淀，同時(shí)促進(jìn)脂肪球聚合，但乙醇會(huì)溶解部分碳水化合物和有機(jī)酸。后面用乙醚提取脂肪時(shí)，因乙醇可溶于乙醚，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。（4）揮干溶劑后，殘留物中若有黑色焦油狀雜質(zhì)，是分解物與水一同混入所致，則測(cè)定值增大，可用等量的乙酸及石油醚溶解后過(guò)濾，再次進(jìn)行揮干溶劑的 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)16v（三）羅斯-哥特里氏法本法是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO），聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）為乳及乳制品定量檢測(cè)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法。適用于各種液狀乳（生乳、加工乳、部分脫脂乳、脫脂乳等）、各種煉乳、乳粉、奶油及

11、冰激凌等在堿性溶液中溶解的乳制品，也適用于豆乳或加水后呈乳狀的食品。本法利用氨-乙醇溶液將乳類膠體性狀及脂肪球膜破壞，將其中非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，使脂肪游離出來(lái)，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，回收溶劑后，殘留物恒量即為乳脂肪。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)17v1操作步驟牛乳10.00mL或精密稱取乳粉約1.00g，用10mL60水，分?jǐn)?shù)次溶解于抽脂瓶中，加入1.25mL氨水，充分混勻，置60水浴中加熱5min，再振搖2min，加入10mL乙醇，充分搖勻，于冷水中冷卻后，加入25mL乙醚，振搖30s，加入25mL石油醚，再振搖30s，靜置30min。待上層液澄清時(shí)，讀取醚層體積，放出一定體積醚層于已

12、恒量的燒瓶中。蒸餾回收乙醚和石油醚，揮干殘余醚后。放入100士5烘箱中干燥 1.5h，取出放入干燥器中冷卻至室溫后稱重。重復(fù)操作直至恒量。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)18v 2結(jié)果計(jì)算式中X樣品中脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；m2燒瓶和脂肪質(zhì)量，g；m1燒瓶質(zhì)量，g；m樣品質(zhì)量，g(或mL/相對(duì)密度)；V讀取醚層總體積，mL；V1放出醚層體積，mL。v3試劑25g/L%氨水 (相對(duì)密度0.91)、96%乙醇、乙醚 (不含過(guò)氧化物)、石油醚 (沸程3060)。v4儀器具塞量筒或抽脂瓶。 %100112VVmmmX食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)19v5注意事項(xiàng)（1）乳類脂肪因脂肪球被乳中酪蛋白鈣鹽包裹，存在于高度分散的膠體分散系中

13、，不能直接被乙醚、石油醚提取，需先用氨水處理，再用乙醚提取，故此法也稱為堿性乙醚提取法。（2）乙醇的作用是沉淀蛋白質(zhì)以防止乳化，并溶解醇溶性物質(zhì)，使其留在水中避免進(jìn)入醚層，影響結(jié)果。（3）加入石油醚可以降低乙醚的極性，避免乙醚與水混溶，便于乙醚提取脂肪，并可使分層清晰。（4）對(duì)已結(jié)塊的乳粉，用本法測(cè)定脂肪，其結(jié)果往往偏低。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)20v（四）巴布科克氏法和蓋勃氏法這兩種方法都是測(cè)定乳脂的標(biāo)準(zhǔn)方法具有操作簡(jiǎn)便、迅速的特點(diǎn)，由于樣品不需要事先烘干，也叫濕法提取.適用于鮮乳及乳制品脂肪的測(cè)定。對(duì)含糖多的乳品由于硫酸可以使糖發(fā)生焦化現(xiàn)象，結(jié)果誤差較大，不宜采用?；驹韛用濃硫酸溶解乳中的乳

14、糖和蛋白質(zhì)，同時(shí)硫酸使乳中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白，包裹脂肪球的膜被軟化破壞，脂肪游離出來(lái)，再通過(guò)加熱離心，使脂肪完全分離，直接讀取脂肪層得到被測(cè)乳的含脂率。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)21v1.測(cè)定方法（1）巴布科克氏法準(zhǔn)確吸取吸取17.6mL均勻鮮乳，置于巴布科克氏乳脂瓶中，沿瓶頸壁緩緩注入17.5mL濃硫酸，手持瓶頸回旋，使液體充分混勻，直至無(wú)凝塊并呈均勻的棕色。將乳脂瓶放入離心機(jī)，以約1000r/min的速度離心5min，取出加入60以上的熱水，直至液面達(dá)瓶頸基部，離心機(jī)中離心2min，取出后再加入60以上的熱水，至液面接近瓶頸刻度標(biāo)線約4%處，再離心1min。將乳脂瓶置于5560

15、水浴中，待脂肪柱穩(wěn)定，取出讀取脂肪柱最高點(diǎn)與最低點(diǎn)所占的格數(shù)，即為樣品含脂肪的百分率。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)22v（2）蓋勃氏法在乳脂計(jì)中加入10mL硫酸 (頸口勿沾濕硫酸)，沿管壁緩緩地加入混勻的牛乳11mL，使樣品和硫酸不要混合，再加1mL異戊醇，用橡皮塞塞緊，用布包裹瓶口，將瓶口向外向下用力振搖成無(wú)顆粒棕色均勻液.瓶口向下靜置數(shù)分鐘后，于6570水浴中放5min，取出擦干，調(diào)節(jié)橡皮塞使脂肪柱在乳脂計(jì)的刻度內(nèi)，以8001000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min.取出乳脂計(jì)，再置6570水浴中(注意水浴水面應(yīng)高于乳脂計(jì)脂肪層).5min后取出立即讀數(shù)，脂肪層上下彎月形下緣數(shù)字之差，即為脂肪的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

16、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)23食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)24v2試劑濃硫酸、異戊醇v3儀器巴布科克氏乳脂瓶、蓋勃氏乳脂計(jì)、蓋勃氏離心機(jī)、17.6mL及11mL標(biāo)準(zhǔn)移乳管。 v4注意事項(xiàng)（1）硫酸必須按照規(guī)定濃度操作。（2）異戊醇的作用是促使脂肪析出，并能降低脂肪球的表面張力，以利于形成連續(xù)的脂肪層。（3）6570水浴和離心的目的是促使脂肪離析。（4）巴布科克法中采用17.6mL標(biāo)準(zhǔn)吸管取樣，實(shí)際上注入巴氏瓶中的樣品只有17.5mL，牛乳的相對(duì)密度為1.03，故樣品質(zhì)量為17.51.03=18g。蓋勃氏法所用移乳管為11mL，實(shí)際注入的樣品為10.9mL，樣品的質(zhì)量為11.25g。（6） 羅斯-哥特里氏法、巴布

17、科克法和蓋勃氏法都是測(cè)定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，其準(zhǔn)確度依次降低。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)25v（五）氯仿-甲醇提取法簡(jiǎn)介本法適合于結(jié)合態(tài)脂類，特別是磷脂含量高的食品，如魚、肉類、貝類、禽、蛋及制品。其方法是將樣品分散于氯仿-甲醇混合溶液，在水浴中輕微沸騰，氯仿、甲醇和試樣中的水分形成三種成分的溶劑，可以把全部脂類提取出來(lái)。經(jīng)過(guò)濾除去非脂成分，回收溶劑，再用石油醚提取殘留的脂類。蒸餾除去石油醚后定量稱重即可得到脂類含量。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)26v（六）儀器法簡(jiǎn)介1乳脂快速測(cè)定儀v是測(cè)定牛乳脂肪比較先進(jìn)的方法，其原理是螯合劑破壞牛乳中懸浮的酪蛋白膠束，使其溶解，故懸浮物中只有脂肪球，用均質(zhì)機(jī)將脂肪球大小調(diào)

18、整均勻 (2m以下)，再稀釋達(dá)到能夠應(yīng)用朗伯-比爾定律測(cè)定的濃度范圍，因而可以和通常的光吸收分析一樣測(cè)定脂肪的濃度。2牛乳成分綜合分析儀v利用紅外線分光分析儀同時(shí)測(cè)定牛乳中的脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖及固體成分和水分的儀器。此儀器的原理是，樣品在樣品池中恒溫、均化后，各成分均勻一致，由于各種成分在紅外光譜區(qū)域中有各自特定的吸收波長(zhǎng)，當(dāng)紅外光束通過(guò)不同的濾光片和樣品溶液時(shí)被選擇性吸收，通過(guò)電子轉(zhuǎn)換及參比值和樣品值的對(duì)比，直接顯示出樣品中各成分的百分含量。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)27項(xiàng)目二：測(cè)定食品中的DHA和EPAv一、案例v二、選用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.168-2003食品中二十碳五稀酸和二十二碳六稀

19、酸的測(cè)定氣相色譜法。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)28v三、測(cè)定方法v1皂化 取魚油制品或經(jīng)過(guò)處理的魚油脂1g于50mL具塞容量瓶中，加入10mL正己烷輕搖使之溶解，并定容，然后吸取1.005.00mL于另一10mL具塞比色管中，再加入2mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液1mL，振蕩10min,置于60水浴加熱12min，皂化完全后，冷卻到室溫。v2甲酯化將皂化后的樣品加入2mol/L鹽酸-甲醇溶液2mL，振蕩10min，于50水浴中加熱2min，進(jìn)行甲酯化，棄去下層液體，再加約2mL蒸餾水洗凈并除去水層，用滴管吸出正己烷層，移至另一裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗中脫水，將脫水后的溶液在70水浴上加熱濃縮，定容至1mL，

20、待上機(jī)測(cè)試用。v標(biāo)準(zhǔn)溶液系列食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)29v3氣相色譜分析色譜柱：玻璃柱1m4mm（id），填充涂有10%DEGS/Chromosorb W DMCS80100目的擔(dān)體。氣體及氣體流速：氮?dú)?0mL/min、氫氣70mL/min、空氣100mL/min。系統(tǒng)溫度：色譜柱185、進(jìn)樣口210、檢測(cè)器210。v4測(cè)定（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：分別吸取處理后的標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0L，注入色譜儀，測(cè)得不同濃度EPA甲酯、DHA甲酯的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)峰高響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）測(cè)定樣液：把處理后的樣品溶液1.05.0L注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間定性，以測(cè)得的峰高響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。

21、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)30v5結(jié)果計(jì)算v式中vX試樣中二十碳五稀酸或二十二碳六稀酸的含量，mg/g；vA被測(cè)定樣液中二十碳五稀酸或二十二碳六稀酸的含量，mg/g；vV1魚油或海魚類試樣皂化前定容體積，mL；vV2魚油或海魚類試樣用于皂化樣液體積，mL；vV3樣液最終定容體積，g；vm樣品的質(zhì)量，g。213100VmVVAX食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)31v6試劑正己烷、甲醇、2mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液、2mol/L鹽酸-甲醇溶液、二十碳五稀酸和二十二碳六稀酸標(biāo)準(zhǔn)溶液v7儀器氣相色譜儀（附有氫火焰離子化檢測(cè)器）、索氏提取器、氯化氫發(fā)生系統(tǒng)（啟譜發(fā)生器）、刻度試管（帶分刻度2、5、10mL ）、組織搗碎機(jī)、

22、旋渦式振蕩混合器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)32v四、相關(guān)知識(shí)（一）食品中EPA和DHA含量測(cè)定氣相色譜法原理v油脂經(jīng)過(guò)皂化處理后產(chǎn)生的游離脂肪酸中的EPA和DHA經(jīng)過(guò)甲酯化后揮發(fā)性高，通過(guò)色譜柱有效分離，用氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，然后用外標(biāo)法定量可得樣液中二者的含量。v本法摘自GB/T5009.82-2003，適用于海魚類食品，魚油產(chǎn)品和添加EPA和DHA的食品中二者含量的測(cè)定，本方法檢出限為0.1mg/kg。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)33v（二）注意事項(xiàng)1.對(duì)于食品中添加EPA和DHA的測(cè)定v（1）樣品制備：稱取樣品10g，置于60mL分液漏斗中，用60mL正己烷分三次萃取（每次振蕩萃取10m

23、in），合并提取液，在70水浴揮發(fā)至近干備用。v（2）皂化：正己烷23mL分兩次將處理的濃縮液小心轉(zhuǎn)移到10mL具塞比色管中，再加入2mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液1mL，振蕩10min,置于60水浴加熱12min，皂化完全后，冷卻到室溫即可。v（3）甲酯化：同上操作。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)34v2結(jié)果計(jì)算（食品添加劑）式中X試樣中二十碳五稀酸或二十二碳六稀酸的含量，mg/g；A被測(cè)定樣液中二十碳五稀酸或二十二碳六稀酸的含量，mg/gV3樣液最終定容體積，g；m樣品的質(zhì)量，g。mVAX3食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)35項(xiàng)目三：測(cè)定食品中磷脂v一、案例v二、選用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T21493-2008大豆磷脂中磷脂

24、酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的測(cè)定高效液相色譜法。食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)36v三、測(cè)定方法1液相系統(tǒng)的平衡v在進(jìn)樣分析前，用流動(dòng)相平衡液相系統(tǒng)，控制流速為0.5mL/min，保持基線平穩(wěn)，樣品保留時(shí)間穩(wěn)定。2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制v配制濃度為2mg/mL的磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和1mg/mL的磷脂酰肌醇標(biāo)準(zhǔn)混合液：分別精確稱取約20mg磷脂酰膽堿、磷脂腺乙醇胺和10mg磷脂酰肌醇，用體積比為8:8:1的正己醇、異丙醇和1%乙酸混合液溶解并定容至10mL，即成標(biāo)準(zhǔn)混合液。v配制不同濃度標(biāo)準(zhǔn)混合液：食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)37v3制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線分別取上述不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液各10L注入液相色譜，以各組濃度為橫坐標(biāo)，各組峰值面積為縱坐標(biāo)，繪制磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。v4 樣品預(yù)處理稱取樣品1550mg，用體積比為8:8:1的正己醇、異丙醇和1%乙酸混合液溶解并定容至5mL，于低于-