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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)七實(shí)驗(yàn)七 藥物對(duì)離體腸運(yùn)動(dòng)的影響藥物對(duì)離體腸運(yùn)動(dòng)的影響一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理 本實(shí)驗(yàn)制備兔離體腸道標(biāo)本,與張力換能器相連,在BL-420型生物信號(hào)顯示與處理系統(tǒng)上顯示用藥后的腸運(yùn)動(dòng)狀態(tài)張力、幅度和節(jié)律),從而觀察藥物對(duì)離體腸運(yùn)動(dòng)的影響。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)兔離體腸道標(biāo)本的制備方法 觀察藥物對(duì)離體兔腸運(yùn)動(dòng)的影響三、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)材料(一動(dòng)物(一動(dòng)物 家兔家兔(二器材(二器材 BL-420型生物信號(hào)顯示與處理型生物信號(hào)顯示與處理系統(tǒng),數(shù)顯恒溫平滑肌槽,術(shù)剪,眼科鑷,系統(tǒng),數(shù)顯恒溫平滑肌槽,術(shù)剪,眼科鑷,注射器,培養(yǎng)皿,縫針,棉線。注射器,培養(yǎng)皿,縫針,棉線。(三藥品(三藥品 0.
2、05%硫酸新斯的明,硫酸新斯的明,0.01%腎腎上腺素,上腺素,0.05%硫酸阿托品,硫酸阿托品,0.001%乙酰乙酰膽堿,臺(tái)氏液膽堿,臺(tái)氏液四、實(shí)驗(yàn)步驟與觀察項(xiàng)目四、實(shí)驗(yàn)步驟與觀察項(xiàng)目離體兔腸段標(biāo)本的制備:離體兔腸段標(biāo)本的制備: 取空腹家兔取空腹家兔1只,左手持髂上部,右手握只,左手持髂上部,右手握木棒,猛擊枕骨部致死。木棒,猛擊枕骨部致死。迅速開腹,自幽門下迅速開腹,自幽門下6cm處剪取空腸,立處剪取空腸,立即置入盛有冷臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿中,剪去腸即置入盛有冷臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿中,剪去腸系膜,清洗腸內(nèi)容物,將腸管剪成系膜,清洗腸內(nèi)容物,將腸管剪成 2 3cm 的小段,兩端各穿一線備用。的小段,兩端
3、各穿一線備用。 2. 連接實(shí)驗(yàn)裝置連接實(shí)驗(yàn)裝置 標(biāo)本一端用線系于標(biāo)本一端用線系于Z型溝的彎鉤上,并置于數(shù)型溝的彎鉤上,并置于數(shù)顯恒溫肌槽的內(nèi)槽中,另一端系在已調(diào)好顯恒溫肌槽的內(nèi)槽中,另一端系在已調(diào)好的的BL-420型記錄儀的張力換能器上,緩緩型記錄儀的張力換能器上,緩緩?fù)ㄈ肟諝饷棵腌姎馀萃ㄈ肟諝饷棵腌姎馀?2個(gè))。個(gè))。浴槽的營養(yǎng)液以能浸沒標(biāo)本為宜。水浴溫度浴槽的營養(yǎng)液以能浸沒標(biāo)本為宜。水浴溫度為為380.5。3. 軟件操作軟件操作打開分機(jī),再開電腦。點(diǎn)擊打開打開分機(jī),再開電腦。點(diǎn)擊打開BL-420型生物信號(hào)顯示與處理系統(tǒng)型生物信號(hào)顯示與處理系統(tǒng)點(diǎn)擊點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”“消化實(shí)驗(yàn)消化實(shí)驗(yàn)”
4、“消消化道平滑肌的生理特性化道平滑肌的生理特性”,編輯標(biāo)記,編輯標(biāo)記條。條。4. 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1待離體腸適應(yīng)后收縮張力和頻待離體腸適應(yīng)后收縮張力和頻率規(guī)則后)率規(guī)則后),打開記錄儀描記一段離打開記錄儀描記一段離體小腸平滑肌的正常收縮曲線,注意體小腸平滑肌的正常收縮曲線,注意觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況。情況。2. 給藥記錄正常曲線后,在藥槽中加入0.05%硫酸新斯的明0.5ml,觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況,放掉藥槽中的臺(tái)氏液,加入預(yù)先準(zhǔn)備好的38新鮮臺(tái)氏液,重復(fù)更換23次新鮮臺(tái)氏液,待腸段活動(dòng)恢復(fù)至對(duì)照水平時(shí),進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。在藥槽中加入0
5、.01%腎上腺素24滴,觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況。后續(xù)處理同上。在藥槽中加入0.001%乙酰膽堿24滴,觀察后續(xù)處理同上。觀察及后續(xù)處理同上。在藥數(shù)顯恒溫平滑肌槽中加入0.05%阿托品24滴,待作用明顯后,描記變化情況,立即加入0.001%乙酰膽堿24滴,后續(xù)處理同上。五五.實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 對(duì)圖形進(jìn)行分析,比較給藥前和給藥后離體腸收縮曲線的張力、強(qiáng)度幅度)、頻率次/10分鐘),分析討論藥物對(duì)離體腸作用的特點(diǎn)和機(jī)理。 打印曲線并粘貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。六本卷須知六本卷須知1. 游離及取出腸段時(shí),動(dòng)作要快,要輕柔。為保持離體腸段的活性,游離腸段及穿線在預(yù)冷的營養(yǎng)液中進(jìn)行。2. 懸掛腸段不宜
6、在空氣中暴露過久,以免影響其活性。3. 加藥時(shí)不要把藥液直接加到腸管上,以免影響結(jié)果。4. 記錄電位時(shí),要保持安靜,避免振動(dòng)實(shí)驗(yàn)臺(tái),以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。七七.思考題思考題1進(jìn)行哺乳類動(dòng)物離體組織器官實(shí)驗(yàn)時(shí),進(jìn)行哺乳類動(dòng)物離體組織器官實(shí)驗(yàn)時(shí),需控制哪些條件需控制哪些條件?2. 加入阿托品后再加入乙酰膽堿,腸段活動(dòng)加入阿托品后再加入乙酰膽堿,腸段活動(dòng)將如何變化,為什么將如何變化,為什么?加入阿托品后再加加入阿托品后再加入乙酰膽堿,可觀察到加入阿托品后腸斷入乙酰膽堿,可觀察到加入阿托品后腸斷收縮力不變,再加入乙酰膽堿腸段的收縮收縮力不變,再加入乙酰膽堿腸段的收縮不再被促進(jìn);同時(shí)加入一定量的阿托品和不再
7、被促進(jìn);同時(shí)加入一定量的阿托品和乙酰膽堿,曲線上升,但不如單純加入相乙酰膽堿,曲線上升,但不如單純加入相同濃度乙酰膽堿時(shí)上升的那么明顯。這說同濃度乙酰膽堿時(shí)上升的那么明顯。這說明阿托品是乙酰膽堿的抑制劑,其主要的明阿托品是乙酰膽堿的抑制劑,其主要的作用機(jī)理是:乙酰膽堿與腸道的平滑肌細(xì)作用機(jī)理是:乙酰膽堿與腸道的平滑肌細(xì)胞上的特殊位點(diǎn)結(jié)合,促進(jìn)鈣離子在肌漿胞上的特殊位點(diǎn)結(jié)合,促進(jìn)鈣離子在肌漿網(wǎng)中的傳遞,從而增強(qiáng)平滑肌的收縮;當(dāng)網(wǎng)中的傳遞,從而增強(qiáng)平滑肌的收縮;當(dāng)加入阿脫品后,阿脫品與平滑肌細(xì)胞上的加入阿脫品后,阿脫品與平滑肌細(xì)胞上的乙酰膽堿結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,競爭性阻礙了乙乙酰膽堿結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,競爭性阻礙了乙酰膽堿與平滑肌細(xì)胞的結(jié)合,從而抑制了酰膽堿與平滑肌細(xì)胞的結(jié)合,從而抑制了乙酰膽堿的作用,但只加如阿脫品時(shí)對(duì)平乙酰膽堿的作用,但只加如阿脫品時(shí)對(duì)平滑肌的收縮沒有影響?;〉氖湛s沒有影響。介紹數(shù)顯恒溫平滑肌槽介紹數(shù)顯恒溫平滑肌槽1.控氧:打開供氧開關(guān),調(diào)節(jié)通氣量,以每秒鐘氣泡12個(gè)為宜;2.控溫:打開設(shè)定開關(guān),設(shè)定為37,調(diào)節(jié)恒溫開關(guān)加熱;關(guān)閉設(shè)定開關(guān),打開測量開關(guān),檢測溫度,當(dāng)溫度顯示為37時(shí),將恒溫旋鈕調(diào)至最低,此時(shí)開始保持恒溫。由于很多儀器的數(shù)顯不很準(zhǔn)確,為避免影響實(shí)驗(yàn),用溫度計(jì)進(jìn)行監(jiān)控是可靠的辦法。3.沖洗:(1放出內(nèi)槽中的溶液:用夾子夾緊保溫液和營
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