苯并[a]芘的測定

1、江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回食品中苯并a芘的測定一、苯并一、苯并a芘的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)芘的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 簡稱為簡稱為BaP 江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回針狀結(jié)晶，沸點(diǎn)針狀結(jié)晶，沸點(diǎn)310320 溶解特性：水中溶解度為溶解特性：水中溶解度為0.0040.012mg/L 易溶于石油醚、環(huán)已烷、已烷、苯、甲苯、易溶于石油醚、環(huán)已烷、已烷、苯、甲苯、 二甲苯、丙酮二甲苯、丙酮 稍溶于乙醇、甲醇稍溶于乙醇、甲醇 化學(xué)性質(zhì)：穩(wěn)定，常溫下不與硫酸作用，能與硝酸、化學(xué)性質(zhì)：穩(wěn)定，常溫下不與硫酸作用，能與硝酸、 高氯酸高氯酸 反應(yīng)反應(yīng) 堿性條件下穩(wěn)定堿性條件下穩(wěn)定 熒光特性：

2、紫外線（熒光特性：紫外線（360nm）下產(chǎn)生典型紫色熒光）下產(chǎn)生典型紫色熒光江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回二、食品中苯并二、食品中苯并a芘的來源芘的來源 BaP是含碳燃料及有機(jī)化合物熱解過程中的產(chǎn)物，是是含碳燃料及有機(jī)化合物熱解過程中的產(chǎn)物，是煤、石油、天然氣、木材等不完全燃燒的產(chǎn)物。煤、石油、天然氣、木材等不完全燃燒的產(chǎn)物。 空氣中空氣中BaP含量為含量為0.01100g/m3; 地表水中地表水中BaP含量為含量為0.030.1g/L; 土壤中土壤中BaP含量為含量為0400g/kg江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回在熏烤、烘烤過程中形成在熏烤、烘烤過程中

3、形成 燃燒產(chǎn)物與食品的直接接觸、煙塵與食品的直接接觸燃燒產(chǎn)物與食品的直接接觸、煙塵與食品的直接接觸 糧食烘干糧食烘干 高溫下脂肪、膽固醇等成分的熱解或熱聚（高溫下脂肪、膽固醇等成分的熱解或熱聚（1070倍）倍） 高溫下食品的焦化或炭化高溫下食品的焦化或炭化 淀粉淀粉390時(shí)產(chǎn)生時(shí)產(chǎn)生 0.7g/kg 650 時(shí)產(chǎn)生時(shí)產(chǎn)生17g/kg 650 下葡萄糖產(chǎn)生下葡萄糖產(chǎn)生7mg/kg、脂肪酸產(chǎn)生、脂肪酸產(chǎn)生88mg/kg江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回 加工環(huán)節(jié)的污染加工環(huán)節(jié)的污染 設(shè)備管道設(shè)備管道 醬油、醋、酒、飲料醬油、醋、酒、飲料 包裝材料包裝材料 糖果、面包、冷飲包裝用蠟紙

4、糖果、面包、冷飲包裝用蠟紙 潤滑油等潤滑油等 工業(yè)廢水、廢氣的污染工業(yè)廢水、廢氣的污染 三廢的排放三廢的排放 瀝青的利用（瀝青中苯并芘含量為瀝青的利用（瀝青中苯并芘含量為2.53.5%） 細(xì)菌、原生生物、淡水藻類及某些高等植物的組織內(nèi)細(xì)菌、原生生物、淡水藻類及某些高等植物的組織內(nèi)合成合成 藻類、水生植物藻類、水生植物BaP含量為含量為0.005 g/kg 植物植物BaP含量含量0.010.02g/kg江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回部分食品中的部分食品中的Bap含量（含量（g/kg）種類種類含量含量種類種類含量含量熏奶酪熏奶酪0.015.6臘肉臘肉0.8627.6熏魚熏魚1.

5、315.2烤牛肉烤牛肉0.411.58熏香腸熏香腸0.82.5烤羊肉串烤羊肉串12.84熏火腿熏火腿3.2烤鴨皮烤鴨皮0.752.39熏排骨熏排骨0.345.0烤鴨烤鴨0.06炸油條炸油條1.411香腸香腸0.30.5烘大餅烘大餅3.07.0蛋清腸蛋清腸0.180.3江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回三、三、BaP的危害的危害 BaP為致癌、致突變化學(xué)物質(zhì)，可致多種癌癥，并具有致為致癌、致突變化學(xué)物質(zhì)，可致多種癌癥，并具有致畸性和遺傳毒性?；院瓦z傳毒性。四、限量標(biāo)準(zhǔn)四、限量標(biāo)準(zhǔn)1、國家標(biāo)準(zhǔn)允許限量標(biāo)準(zhǔn)、國家標(biāo)準(zhǔn)允許限量標(biāo)準(zhǔn)品種品種指標(biāo)指標(biāo)品種品種指標(biāo)指標(biāo)肉肉制制品品燒烤豬肉、

6、禽肉燒烤豬肉、禽肉5植植物物油油豆油、花生油豆油、花生油植物油植物油10叉燒肉、羊肉串叉燒肉、羊肉串5茶油茶油10火腿、板鴨火腿、板鴨5其它油其它油10煙熏魚煙熏魚5糧糧食食稻谷稻谷5熏雞、熏馬肉熏雞、熏馬肉5小麥小麥5熏紅腸、香腸熏紅腸、香腸5大麥大麥5江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回2、其它一些國家、地區(qū)標(biāo)準(zhǔn)、其它一些國家、地區(qū)標(biāo)準(zhǔn) 歐共體歐共體 調(diào)料調(diào)料 0.03ug/kg 德國德國 肉及肉制品肉及肉制品 1.0ug/kg 意大利意大利 食品及飲料食品及飲料 0.03ug/kg 荷蘭荷蘭 肉制品肉制品 1.0ug/kg 北歐國家北歐國家 肉制品肉制品 1.0ug/kg3

7、、一些國家的每日允許攝入量、一些國家的每日允許攝入量(ug) 美國美國 0.161.6 英國英國 0.48 德國德國 0.020.14 荷蘭荷蘭 0.120.42 意大利意大利 0.10.3 奧地利奧地利 0.36江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回五、防治措施五、防治措施加強(qiáng)環(huán)境治理加強(qiáng)環(huán)境治理改變生產(chǎn)方式改變生產(chǎn)方式改進(jìn)烹調(diào)和加工方法改進(jìn)烹調(diào)和加工方法改變飲食習(xí)慣改變飲食習(xí)慣去毒處理去毒處理江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回六、測定方法（一）分配柱層析凈化熒光測定法（一）分配柱層析凈化熒光測定法1.原理原理 樣品先用樣品先用有機(jī)溶劑提取有機(jī)溶劑提取，或經(jīng)，或經(jīng)

8、皂化后提取皂化后提取，再將提，再將提取液經(jīng)取液經(jīng)液液分配或色譜柱凈化液液分配或色譜柱凈化，然后在，然后在乙?；癁V紙上乙?；癁V紙上分離苯并分離苯并(a)(a)芘芘，因苯并，因苯并(a)(a)芘在紫外光照射下呈藍(lán)紫色芘在紫外光照射下呈藍(lán)紫色熒光斑點(diǎn)，將分離后有苯并熒光斑點(diǎn)，將分離后有苯并(a)(a)芘的濾紙部分剪下，用芘的濾紙部分剪下，用溶劑浸出后，用熒光分光光度計(jì)溶劑浸出后，用熒光分光光度計(jì)測熒光強(qiáng)度測熒光強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)比較與標(biāo)準(zhǔn)比較定量定量。樣品樣品皂化提取皂化提取溶劑提取溶劑提取柱層析柱層析液液分配液液分配熒光分析熒光分析紙層析紙層析江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回2、試劑、試

9、劑 試劑需重蒸，并檢查其熒光特性試劑需重蒸，并檢查其熒光特性 吸附劑：硅鎂型吸附劑吸附劑：硅鎂型吸附劑 水洗并活化，加水洗并活化，加5%水減活水減活 中性氧化鋁中性氧化鋁 活化（活化（120 4h） 乙?；癁V紙制備：乙?；癁V紙制備： 濾紙（濾紙（30cm4cm）乙酰化（乙?；?80mL苯：苯：130mL乙乙酸酐：酸酐：0.1mL硫酸）硫酸）6h,并浸泡過夜并浸泡過夜取出風(fēng)干取出風(fēng)干 苯并苯并a芘標(biāo)準(zhǔn)液芘標(biāo)準(zhǔn)液 苯并苯并a芘標(biāo)準(zhǔn)貯備液：芘標(biāo)準(zhǔn)貯備液：100ug/mL 苯并苯并a芘標(biāo)準(zhǔn)使用液：芘標(biāo)準(zhǔn)使用液：1ug/mL, 0.1ug/mL江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回3、儀器

10、、儀器 脂肪抽提器脂肪抽提器 層析柱（層析柱（10cm350cm） 層析缸層析缸 K-D濃縮器濃縮器 紫外燈紫外燈 熒光分光光度計(jì)熒光分光光度計(jì)江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回4、操作方法、操作方法（1）樣品提?。悠诽崛?糧食及低水分含量食品糧食及低水分含量食品 回流抽提，堿皂化回流抽提，堿皂化68h（90下）下） 皂化液趁熱轉(zhuǎn)移至分液濾斗皂化液趁熱轉(zhuǎn)移至分液濾斗 洗滌接收瓶（洗滌接收瓶（50mL95%乙醇）乙醇） 加水（加水（100mL）振搖提?。┱駬u提取 靜置分層靜置分層 下層二次提取（下層二次提?。?0mL環(huán)已烷）環(huán)已烷） 合并環(huán)已烷合并環(huán)已烷 洗滌環(huán)已烷層（水，洗滌

11、環(huán)已烷層（水，100mL3） 洗滌水環(huán)已烷提?。ㄏ礈焖h(huán)已烷提?。?0mL2） 濃縮至濃縮至40mL（60 水浴中）水浴中）江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回植物油植物油稱樣稱樣20g分液濾斗分液濾斗環(huán)已烷環(huán)已烷100mL提取提取DMF40mL3環(huán)已烷層環(huán)已烷層DMF層層DMF層層提取提取環(huán)已烷環(huán)已烷40mL環(huán)已烷層環(huán)已烷層DMF層層棄去分液濾斗分液濾斗2%硫酸鈉硫酸鈉240mL混勻混勻提取提取環(huán)已烷環(huán)已烷100mL2江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回魚、肉及其制品魚、肉及其制品 稱樣，稱樣， 加無水硫酸鈉（加無水硫酸鈉（1：1或或1：2）攪拌）攪拌 環(huán)已烷抽提

12、取環(huán)已烷抽提取蔬菜蔬菜 稱樣、晾干、加丙酮（稱樣、晾干、加丙酮（150mL）搗碎，）搗碎， 過濾至分液濾斗過濾至分液濾斗 加水、加水、 環(huán)已烷提取環(huán)已烷提取 環(huán)已烷重復(fù)提取環(huán)已烷重復(fù)提取 環(huán)已烷層洗滌（水，環(huán)已烷層洗滌（水，125mL2） 濃縮至濃縮至25mL 江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回（2）凈化）凈化 裝柱裝柱 加樣吸附加樣吸附 洗脫（苯洗脫（苯30mL） 減壓濃縮至減壓濃縮至0.10.5mL江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回（3）分離）分離 點(diǎn)樣點(diǎn)樣 展開（展開（95%乙醇：二氯甲烷乙醇：二氯甲烷=2：1） 觀察（紫外燈照射）觀察（紫外燈照射）剪下斑

13、點(diǎn)，加苯浸泡溶解。剪下斑點(diǎn)，加苯浸泡溶解。江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回（4）測定）測定 測定標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)及樣品斑點(diǎn)的熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜測定標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)及樣品斑點(diǎn)的熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜 讀取讀取F401nm、F406nm、F411nm（）計(jì)算（）計(jì)算相對熒光強(qiáng)度相對熒光強(qiáng)度120411401406)(2/ )(VVmFFFmxFFFFis江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回（二）（二）HPLC法法、原理、原理用用KOH-甲醇水（甲醇水（1:1）溶液皂化樣品中脂肪，環(huán)已烷提）溶液皂化樣品中脂肪，環(huán)已烷提取多環(huán)芳烴（取多環(huán)芳烴（PAH），再經(jīng)），再經(jīng)60%硫酸凈化，

14、硫酸凈化，Sephadex LH-20色譜柱富集樣品中色譜柱富集樣品中PAH，用高效液相色譜儀檢測。，用高效液相色譜儀檢測。、操作方法、操作方法（）皂化（）皂化 稱取稱取100g樣品直接皂化樣品直接皂化（）提取、凈化（）提取、凈化環(huán)已烷萃取，甲醇水洗滌、水洗滌環(huán)已烷萃取，甲醇水洗滌、水洗滌濃縮濃縮60%硫酸洗滌、水洗滌硫酸洗滌、水洗滌過濾（過硅膠、無水硫酸鈉）、濾液濃縮過濾（過硅膠、無水硫酸鈉）、濾液濃縮江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回（）富集（）富集 加樣于加樣于Sephadex LH-20柱上，柱上，異丙醇洗脫異丙醇洗脫濃縮至干濃縮至干甲醇溶解、定容（甲醇溶解、定容（mL）（）測定（）測定色譜條件：流動相甲醇：水（色譜條件：流動相甲醇：水（75:25）流速）流速1.5mL/min 色譜柱色譜柱ODS 4.6mm250mm柱溫柱溫30 紫外檢測器（紫外檢測器（287nm）進(jìn)樣測定峰面積，比較定量。進(jìn)樣測定峰面積，比較定量。江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室回目錄返回江蘇省糧油品質(zhì)控制及深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)