藥物的鑒別試驗(yàn)課程課件(最終修改)

1、第二章第二章 藥物的鑒別試驗(yàn)藥物的鑒別試驗(yàn)分析檢測(cè)教研室分析檢測(cè)教研室2第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 藥物鑒別試驗(yàn)的意義與目的 問題：鑒別的定義是什么？3藥物的鑒別試驗(yàn)（identification test) 是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì),采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來證明已知藥物的真?zhèn)巍?是藥檢工作的首要任務(wù)，雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定的前提。4注意： 藥物鑒別試驗(yàn)是用來證實(shí)貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所標(biāo)示的藥物，而不是對(duì)未知物進(jìn)行定性分析，因?yàn)檫@些鑒別試驗(yàn)雖有一定的專屬性，但不具備進(jìn)行未知無確證的條件，故不能鑒別未知物5第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目 性狀性狀 一般鑒別試驗(yàn)一般鑒

2、別試驗(yàn) 專屬鑒別試驗(yàn)專屬鑒別試驗(yàn)6一、性狀一、性狀 外觀外觀：感觀規(guī)定，一般性的描述。：感觀規(guī)定，一般性的描述。 如二巰基丁二鈉的描述為如二巰基丁二鈉的描述為“本品為白色至微黃色的粉末；有本品為白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭類似蒜的特臭”。 溶解度溶解度：反映了在某種溶劑中的溶解性能。：反映了在某種溶劑中的溶解性能。 物理常數(shù)物理常數(shù): 評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，反映評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，反映藥品的純凈程度。藥品的純凈程度。 熔點(diǎn)、熔點(diǎn)、 比旋度、吸收系數(shù)、凝點(diǎn)、折光率、相對(duì)密度、餾程、比旋度、吸收系數(shù)、凝點(diǎn)、折光率、相對(duì)密度、餾程、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值等黏度、酸值、皂化值、羥值

3、、碘值等71.外觀：外觀：指藥品的外表感觀和色澤，指藥品的外表感觀和色澤， 包括聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味包括聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味如：如：維生素維生素B1“本品為白色本品為白色 結(jié)晶或結(jié)晶粉末；結(jié)晶或結(jié)晶粉末； 有微弱的特臭，味苦；有微弱的特臭，味苦； 干燥品在空氣中迅即吸收約干燥品在空氣中迅即吸收約4%的水分的水分”（色澤（色澤（聚集狀態(tài)）（聚集狀態(tài)）（臭）（臭）（味）（味）8極易溶解極易溶解 系指溶質(zhì)系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到能在溶劑不到1ml中溶解；中溶解；易溶易溶 系指溶質(zhì)系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑能在溶劑1不到不到10ml中溶解；中溶解；溶解溶解 系指溶質(zhì)系指溶

4、質(zhì)1g(ml)能在溶劑能在溶劑10不到不到30ml中溶解；中溶解；略溶略溶 系指溶質(zhì)系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑能在溶劑30不到不到100ml中溶解；中溶解；微溶微溶 系指溶質(zhì)系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑能在溶劑100不到不到1000ml中溶解中溶解;極微溶解極微溶解 系指溶質(zhì)系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑能在溶劑1000不到不到10000ml中溶解；中溶解；幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)在溶劑在溶劑10000ml中不能完全溶解。中不能完全溶解。 2.2.溶解度溶解度試驗(yàn)法：試驗(yàn)法：供試品準(zhǔn)確稱取研成細(xì)粉供試品準(zhǔn)確稱取研成細(xì)粉 在在252 ，加溶劑，加溶劑 每隔每隔5m

5、in振搖振搖30s 無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r(shí)，即視為完全溶解無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r(shí)，即視為完全溶解 9（1 1）熔點(diǎn)）熔點(diǎn) 1 1）定義：）定義：Ch.P Ch.P 規(guī)定規(guī)定, ,熔點(diǎn)系指一種物質(zhì)由熔點(diǎn)系指一種物質(zhì)由固體熔化成液體固體熔化成液體的溫度的溫度、熔融同時(shí)分解的溫度熔融同時(shí)分解的溫度，或在熔化時(shí)自初熔至全熔或在熔化時(shí)自初熔至全熔的一段溫度。的一段溫度。如：如：雌二醇：雌二醇：175180醋酸地塞米松醋酸地塞米松：223 233 3.物理常數(shù)樣品樣品發(fā)毛發(fā)毛收縮收縮 液滴液滴（初熔）（初熔） 澄清澄清（全熔）（全熔）10 2 2）測(cè)定方法）測(cè)定方法 分三法：第一法：測(cè)定易粉碎

6、的固體藥品分三法：第一法：測(cè)定易粉碎的固體藥品 如各種結(jié)晶型藥物 第二法：測(cè)定不易粉碎的固體藥品第二法：測(cè)定不易粉碎的固體藥品 如脂肪、石蠟、羊毛脂 第三法：測(cè)定凡士林或其他類似物質(zhì)第三法：測(cè)定凡士林或其他類似物質(zhì) （詳見：（詳見：Ch.P 2010Ch.P 2010年版二部年版二部 附錄附錄 C C ）11溫度計(jì)溫度計(jì) 分浸型，具有分浸型，具有0.5刻刻 度，度， 須先經(jīng)校正須先經(jīng)校正傳溫液傳溫液 m.p 80 水水 m.p 80 硅油或液狀石蠟硅油或液狀石蠟注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：12（2）相對(duì)密度）相對(duì)密度1)1)基本原理基本原理 相對(duì)密度系指在共同的特定條件相對(duì)密度系指在共同的特定條件下下

7、( (如同一溫度等如同一溫度等) )，某物質(zhì)的密度與，某物質(zhì)的密度與另一參考物質(zhì)的密度之比。另一參考物質(zhì)的密度之比。 3.物理常數(shù)13 中國(guó)藥典要求在相同條件下，液體藥中國(guó)藥典要求在相同條件下，液體藥物比純化水重的倍數(shù)，除另有規(guī)定外，溫物比純化水重的倍數(shù)，除另有規(guī)定外，溫度均指度均指2020時(shí)的比值。時(shí)的比值。 純藥物的相對(duì)密度在特定條件下為不變的純藥物的相對(duì)密度在特定條件下為不變的常數(shù)，藥物的純度改變，相對(duì)密度也隨之常數(shù)，藥物的純度改變，相對(duì)密度也隨之改變，所以測(cè)定相對(duì)密度，可以區(qū)別或檢改變，所以測(cè)定相對(duì)密度，可以區(qū)別或檢查藥物的純雜程度。查藥物的純雜程度。14比重瓶法比重瓶法韋氏比重秤法韋

8、氏比重秤法20 20 液體藥物密度液體藥物密度/ /水密度水密度供試品用供試品用量少量少 較常用較常用僅用于僅用于 易揮發(fā)液易揮發(fā)液體體1516新沸約新沸約 20的水的水 精密稱定重量精密稱定重量 20水浴水浴 放置放置 1020min 迅速精密稱定迅速精密稱定 比重瓶比重瓶 洗凈、干燥洗凈、干燥 帶塞帶塞 精密稱定精密稱定比重瓶比重瓶重量重量供試品供試品重量重量水重量水重量結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算1718應(yīng)用舉例：191.我國(guó)藥典規(guī)定我國(guó)藥典規(guī)定“熔點(diǎn)熔點(diǎn)”的含義系指固的含義系指固體體 A. 自熔化開始點(diǎn)到液化點(diǎn)自熔化開始點(diǎn)到液化點(diǎn) B. 自熔化開始點(diǎn)到崩坍點(diǎn)自熔化開始點(diǎn)到崩坍點(diǎn) C. 自收縮點(diǎn)到液

9、化點(diǎn)自收縮點(diǎn)到液化點(diǎn) D. 自崩坍點(diǎn)到液化點(diǎn)自崩坍點(diǎn)到液化點(diǎn) E. 自熔化開始點(diǎn)到熔化澄明點(diǎn)自熔化開始點(diǎn)到熔化澄明點(diǎn)練練 習(xí)習(xí)20 中國(guó)藥典規(guī)定中國(guó)藥典規(guī)定“熔點(diǎn)熔點(diǎn)”系指系指 A. 固體初熔時(shí)的溫度固體初熔時(shí)的溫度 B. 固體全熔時(shí)的溫度固體全熔時(shí)的溫度 C. 供試品在毛細(xì)管內(nèi)收縮時(shí)的溫度供試品在毛細(xì)管內(nèi)收縮時(shí)的溫度 D. 固體熔化時(shí)自初熔至全熔的一段固體熔化時(shí)自初熔至全熔的一段 溫度溫度 E. 供試品在毛細(xì)管內(nèi)開始局部液化時(shí)的溫度供試品在毛細(xì)管內(nèi)開始局部液化時(shí)的溫度211 1）基本原理）基本原理 反映手性藥物特性及其純度的主要指標(biāo)。反映手性藥物特性及其純度的主要指標(biāo)。（3）旋光度）旋光度不

10、對(duì)稱碳原子不對(duì)稱碳原子 H RCR CH3手性碳原子手性碳原子具有光學(xué)活性具有光學(xué)活性3.物理常數(shù)22COHHCHOHCHOHCHCHOHCH2OHO葡萄糖葡萄糖23旋光度旋光度 直線偏振光通過含有某些光學(xué)活性的藥物液體時(shí)，直線偏振光通過含有某些光學(xué)活性的藥物液體時(shí)，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)，旋能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)的度數(shù)稱為旋光度。轉(zhuǎn)的度數(shù)稱為旋光度。偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針方向）為偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針方向）為右旋右旋，以，以“”符符號(hào)表示；號(hào)表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(反時(shí)針方向反時(shí)針方向) 為為左旋左旋，以，以“”符符號(hào)

11、表示號(hào)表示 24鈉光譜鈉光譜D線線（589.3nm） 比旋度比旋度 測(cè)定管長(zhǎng)為測(cè)定管長(zhǎng)為1dm1dm、濃度為、濃度為1g/ml1g/ml 時(shí)測(cè)得的旋光度時(shí)測(cè)得的旋光度 20D lctD 25計(jì)算計(jì)算 液體供試品液體供試品ld20D液體的液體的相對(duì)密度相對(duì)密度26 lctD lml/gctD lctD 100%固體供試品固體供試品272 2）旋光儀的檢定）旋光儀的檢定 旋光管旋光管 標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管基準(zhǔn)物基準(zhǔn)物 蔗糖蔗糖 28A A、比旋度的測(cè)定、比旋度的測(cè)定 中國(guó)藥典許多藥物（如硫酸奎中國(guó)藥典許多藥物（如硫酸奎寧、腎上腺素、葡萄糖等）的性狀寧、腎上腺素、葡萄糖等）的性狀項(xiàng)下規(guī)定了比

12、旋度的測(cè)定，既判別項(xiàng)下規(guī)定了比旋度的測(cè)定，既判別了藥物的真?zhèn)?，又檢查了藥物的純了藥物的真?zhèn)?，又檢查了藥物的純度度應(yīng)用舉例應(yīng)用舉例29B B、在雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用、在雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用 如硫酸阿托品中莨菪堿的檢查如硫酸阿托品中莨菪堿的檢查C C、在含量測(cè)定中的應(yīng)用、在含量測(cè)定中的應(yīng)用 如葡萄糖注射液的含量測(cè)定如葡萄糖注射液的含量測(cè)定 301：旋光計(jì)的檢定，中國(guó)藥典：旋光計(jì)的檢定，中國(guó)藥典 （2000年版）規(guī)定用年版）規(guī)定用 A、葡萄糖作基準(zhǔn)物、葡萄糖作基準(zhǔn)物 B、水楊醛作基準(zhǔn)物、水楊醛作基準(zhǔn)物 C、半乳糖作基準(zhǔn)物、半乳糖作基準(zhǔn)物 D、水合氯醛作基準(zhǔn)物、水合氯醛作基準(zhǔn)物 E、蔗糖作基準(zhǔn)物、蔗糖作基準(zhǔn)物

13、練練 習(xí)習(xí)312.測(cè)定鹽酸土霉素的比旋度時(shí)，若稱取供試測(cè)定鹽酸土霉素的比旋度時(shí)，若稱取供試品品0.5050g，置，置50ml量瓶中，加鹽酸液量瓶中，加鹽酸液（91000）稀釋至刻度，用）稀釋至刻度，用2dm長(zhǎng)的樣品管長(zhǎng)的樣品管測(cè)定，要求比旋度為測(cè)定，要求比旋度為188 200 。則測(cè)得。則測(cè)得的旋光度的范圍應(yīng)為的旋光度的范圍應(yīng)為 A、3.804.04 B、380404 C、1.902.02 D、190202 E、1.882.00 lctD 322505050. 0188 2505050. 0200 80. 3 04. 4333.測(cè)定某藥物的比旋度，配制的供試品溶液濃度為50.0mg/ml，樣品

14、溶液寬2dm，測(cè)得旋光度為+3.25，則比旋度為 A. +6.50 B. +32.5 C. +60.0 D. +16.25 E. +325 lctD 344. 旋光度測(cè)定法可檢測(cè)的藥物是旋光度測(cè)定法可檢測(cè)的藥物是 A. 具有立體結(jié)構(gòu)的藥物具有立體結(jié)構(gòu)的藥物 B. 含有共軛系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的藥物含有共軛系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的藥物 C. 脂肪族藥物脂肪族藥物 D. 結(jié)構(gòu)中含手性碳原子的藥物結(jié)構(gòu)中含手性碳原子的藥物 E. 結(jié)構(gòu)中含氫鍵的藥物結(jié)構(gòu)中含氫鍵的藥物355. 比旋度的符號(hào)應(yīng)是比旋度的符號(hào)應(yīng)是 A. B. C D. Pa E. dm 20D.C 366. 旋光計(jì)的檢定，中國(guó)藥典（旋光計(jì)的檢定，中國(guó)藥典（2010年

15、版）規(guī)定用年版）規(guī)定用 A. 葡萄糖作基準(zhǔn)物葡萄糖作基準(zhǔn)物 B. 水楊醛作基準(zhǔn)物水楊醛作基準(zhǔn)物 C. 半乳糖作基準(zhǔn)物半乳糖作基準(zhǔn)物 D. 水合氯醛作基準(zhǔn)物水合氯醛作基準(zhǔn)物 E. 標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管377.可用旋光度法測(cè)定的藥物是可用旋光度法測(cè)定的藥物是 A、對(duì)氨基水楊酸、對(duì)氨基水楊酸 B、氯丙嗪、氯丙嗪 C、氯氮卓、氯氮卓 D、葡萄糖注射液、葡萄糖注射液 E、鹽酸利多卡因、鹽酸利多卡因38 （4）吸收系數(shù)： 在給定的波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱為吸收系數(shù)。 表示方法：摩爾吸收系數(shù) 百分吸收系數(shù) 用 途： 檢查純度 測(cè)定制劑含量%1cm1E3.

16、物理常數(shù)39二、一般鑒別試驗(yàn)二、一般鑒別試驗(yàn) （general identification test） Ch.P附錄附錄中有：中有：40一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn) （general identification test） 是指依據(jù)是指依據(jù)某一類某一類藥物的共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)或藥物的共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)或 相同的理化特性，來鑒別藥物的真?zhèn)?。相同的理化特性，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?有機(jī)藥物有機(jī)藥物-官能團(tuán)官能團(tuán) 無機(jī)藥物無機(jī)藥物-陰離子、陽離子陰離子、陽離子 一般鑒別試驗(yàn)用于證實(shí)藥物是哪一類，一般鑒別試驗(yàn)用于證實(shí)藥物是哪一類，要進(jìn)一步證實(shí)是哪一種藥物，還需要結(jié)合要進(jìn)一步證實(shí)是哪一種藥物，還需要結(jié)合專屬鑒別試驗(yàn)

17、專屬鑒別試驗(yàn) 411.1.有機(jī)氟化物有機(jī)氟化物有機(jī)氟有機(jī)氟氧瓶燃燒氧瓶燃燒無機(jī)氟離子無機(jī)氟離子pH4.3 茜素氟藍(lán)茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸亞鈰藍(lán)紫色藍(lán)紫色絡(luò)合物絡(luò)合物堿液吸收堿液吸收42藥典原文藥典原文432. 有機(jī)酸鹽有機(jī)酸鹽(1)(1) 水楊酸鹽水楊酸鹽P65水楊酸水楊酸 + FeCl3中性條件中性條件弱酸性條件弱酸性條件紅色配位化合物紅色配位化合物紫色配位化合物紫色配位化合物6 + 4FeCl3+ 12HCl水楊酸鹽水楊酸鹽+稀鹽酸稀鹽酸水楊酸（白色沉淀）水楊酸（白色沉淀）溶于醋酸銨溶于醋酸銨 44堿式苯甲酸鐵鹽（堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀赭色沉淀）COOH稀鹽酸 白色45供試品供試品+ 稀鹽

18、酸稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉亞硝酸鈉堿性堿性 - -萘酚試液萘酚試液橙黃色橙黃色到到猩紅色猩紅色沉淀沉淀3.3.芳香第一胺類芳香第一胺類 46反應(yīng)原理：-奈酚試液要現(xiàn)奈酚試液要現(xiàn)用現(xiàn)配用現(xiàn)配 不同的供試品，不同的供試品，會(huì)生成橙黃色到會(huì)生成橙黃色到猩紅色沉淀猩紅色沉淀 47藥典原文 鑒別方法：取供試品約取供試品約50mg50mg，加稀鹽酸，加稀鹽酸1ml1ml，必，必要時(shí)緩緩煮沸使溶，放冷，加要時(shí)緩緩煮沸使溶，放冷，加亞硝酸鈉亞硝酸鈉溶液溶液（0.1mol/L0.1mol/L）數(shù)滴，滴加）數(shù)滴，滴加堿性堿性-萘酚萘酚試液數(shù)滴，視試液數(shù)滴，視供試品不同，生成供試品不同，生成橙黃色到猩紅色沉淀

19、橙黃色到猩紅色沉淀。484.4.無機(jī)金屬鹽無機(jī)金屬鹽（Na, K, Ca, NH4+)P1112 焰色反應(yīng)：焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色顯鮮黃色；K顯紫色顯紫色；CaCa顯磚紅色顯磚紅色 銨鹽：銨鹽： 供試品供試品 + NaOH 氨氣氨氣使?jié)駶?rùn)的使?jié)駶?rùn)的紅色紅色石蕊石蕊試紙變?cè)嚰堊兯{(lán)藍(lán)使硝酸亞汞試液濕使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的濾紙顯潤(rùn)的濾紙顯黑色黑色49505. 無機(jī)酸根無機(jī)酸根 氯化物：氯化物：Cl- + Ag+ AgCl 白色乳狀白色乳狀 Cl- + MnO2 Mn2+ + Cl2 硫酸鹽：硫酸鹽： SO42- + Ba2+ BaSO4 白色白色 SO42- + Pb2+ PbSO4 白色白色 加鹽酸

20、，無白色沉淀加鹽酸，無白色沉淀 H2SO4使?jié)駶?rùn)的使?jié)駶?rùn)的KI_ _淀淀粉試紙粉試紙變藍(lán)變藍(lán)51三、專屬鑒別試驗(yàn) （specific identification test） 是證實(shí)是證實(shí)某一種某一種藥物的依據(jù)。藥物的依據(jù)。 根據(jù)根據(jù)同同類藥物中類藥物中每一種每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異理化特性，藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異理化特性，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)?。選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?方法收載于方法收載于藥典藥典正文或國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)各藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文或國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)各藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)鑒別項(xiàng)下。鑒別項(xiàng)下。52共性丙二酰脲-CONHCONHCO- 可與某些金屬離子（Ag+、

21、Cu2+、Hg2+等）反應(yīng)呈色或產(chǎn)生沉淀巴比妥類藥物巴比妥類藥物R+2AgNO3+2HNO3一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)53與Pb2+反應(yīng)生成黑色PbS甲醛硫酸反應(yīng)碘取代反應(yīng) 專屬鑒別試驗(yàn) 硫噴妥鈉硫噴妥鈉司可巴司可巴比妥比妥苯巴苯巴比妥比妥 5455第三節(jié) 鑒別方法一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法二、光譜鑒別法二、光譜鑒別法 三、色譜鑒別法三、色譜鑒別法56一、化學(xué)鑒別法 供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，通過產(chǎn)生可觀測(cè)到的明顯現(xiàn)象，來鑒別藥物真?zhèn)蔚姆椒ā?化學(xué)鑒別法特點(diǎn) 操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)快速、實(shí)驗(yàn)成本低、應(yīng)用廣 但專屬性比儀器分析法差分為：1.呈色反應(yīng)鑒別法2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法3.

22、熒光反應(yīng)鑒別法4.氣體生成反應(yīng)鑒別法5.試劑褪色的鑒別法 57一、化學(xué)鑒別法1.呈色反應(yīng)鑒別法 供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭谝欢l件下，反應(yīng)生成有色產(chǎn)物三氯化鐵三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）呈色反應(yīng)（酚羥基） 有機(jī)氟化物的茜素氟藍(lán)法有機(jī)氟化物的茜素氟藍(lán)法 芳香第一胺類重氮化芳香第一胺類重氮化-偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)582.沉淀生成反應(yīng)鑒別法 供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，反應(yīng)生成沉淀還原性基團(tuán)的銀鏡反應(yīng)還原性基團(tuán)的銀鏡反應(yīng)丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)氯化物的銀鹽沉淀氯化物的銀鹽沉淀苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)生成氧化亞銅紅色沉淀反應(yīng)生成氧化亞銅紅色沉淀反應(yīng)與重金屬離

23、子的沉淀反應(yīng)與重金屬離子的沉淀反應(yīng)一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法59 3.熒光反應(yīng)鑒別法藥物本身在可見光下發(fā)射熒光如：維生素B2溶液顯藍(lán)色熒光藥物與適當(dāng)試劑反應(yīng)后發(fā)射熒光如： VB1硫色素（藍(lán)色熒光）硫色素（藍(lán)色熒光）堿性堿性K3Fe(CN)6一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法604.氣體生成反應(yīng)鑒別法大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰尿類以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣。紅色石蕊試紙變藍(lán)硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的試紙顯黑色一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法61化學(xué)結(jié)構(gòu)含硫藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體硫鳥嘌呤硫鳥嘌呤7H2O強(qiáng)酸強(qiáng)酸H2S（臭雞蛋氣味）（臭雞蛋氣味）使醋酸鉛試紙變黑使醋酸鉛試紙變黑6

24、2含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱可生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺類的藥物，經(jīng)硫酸水解后，含醋酸酯和乙酰胺類的藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。63一、化學(xué)鑒別法5.5.試劑退色試劑退色 維生素維生素C C與二氯靛酚反應(yīng)與二氯靛酚反應(yīng)64（6 6）測(cè)定生成物熔點(diǎn)法）測(cè)定生成物熔點(diǎn)法 制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)法制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)法 藥物試劑藥物試劑 新化合物有一新化合物有一定定mp;mp; 藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。 操作繁瑣費(fèi)時(shí)間，應(yīng)用較少。操作繁瑣費(fèi)時(shí)間，應(yīng)用較少。一、化學(xué)鑒別法651.紫外光譜紫外光譜（UV）2.紅外光譜紅外光譜（

25、IR）二、光譜鑒別法二、光譜鑒別法66二、光譜鑒別法二、光譜鑒別法1.紫外光譜紫外光譜 是通過測(cè)定藥物在紫處-可見光區(qū)（200760nm）的吸收光譜特征對(duì)藥物進(jìn)行鑒別的方法。用紫外光源測(cè)定無色物質(zhì)的方法-紫外分光光度法；紫外光的波長(zhǎng)范圍是200400nm 用可見光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法-可見光光度法?？梢姽?00760nm 671）測(cè)定原理： 含有共軛體系的有機(jī)藥物在紫外-可見光區(qū)有特征吸收，可根據(jù)藥物的吸收光譜特征，如吸收光譜的形狀、最大吸收波長(zhǎng)、吸收峰數(shù)目、各吸收峰的位置、強(qiáng)度和相應(yīng)的吸收系數(shù)等進(jìn)行分析，最大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)是鑒別藥物的常用參數(shù)。 紫外光譜法操作簡(jiǎn)便、快速。 用作鑒別的專

26、屬性遠(yuǎn)不如紅外光譜法。 紫外光譜相同的物質(zhì)不一定是同一種物質(zhì)。682）紫外光譜法紫外光譜法鑒別鑒別常常用用的方法的方法 測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)，或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)；測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)，或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)； 規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度；規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法； 經(jīng)化學(xué)處理后經(jīng)化學(xué)處理后, 測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性以上方法可單用，也可幾個(gè)結(jié)合起來使用，以提高專屬性以上方法可單用，也可幾個(gè)結(jié)合起來使用，以提高專屬性 69測(cè)定最大吸

27、收波長(zhǎng)測(cè)定最大吸收波長(zhǎng), ,或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)布洛芬全波長(zhǎng)掃描圖布洛芬全波長(zhǎng)掃描圖70 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法兩性霉素在兩性霉素在362nm362nm、381nm381nm、405nm405nm波長(zhǎng)處有最大吸收波長(zhǎng)處有最大吸收. . 規(guī)定規(guī)定362nm362nm/ /381nm381nm處吸光度比值不大于處吸光度比值不大于0.60.6 381nm381nm/ /405nm405nm波長(zhǎng)比值不大于波長(zhǎng)比值不大于0.90.9VBVB1212 361nm/278nm 1.70 361nm/278nm 1.701.881.88 361nm/550

28、nm 3.15 361nm/550nm 3.15 3.453.45 71 與對(duì)照品比較與對(duì)照品比較, ,對(duì)比吸收光譜的一致性對(duì)比吸收光譜的一致性72規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度；規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度；Ch.P示例示例一一 鹽酸布比卡因的鑒別試驗(yàn)鹽酸布比卡因的鑒別試驗(yàn)0.40mg/ml ：max: 263nm、271nm A: 0.530.58;0.430.48規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度示例二示例二 地蒽酚的鑒別試驗(yàn)地蒽酚的鑒別試驗(yàn)max: 257nm、289nm、 356nmA257/ A289=1.

29、061.10A356/ A289=0.900.94規(guī)定最大吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法規(guī)定最大吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法73示例示例 氯貝丁酯的鑒別試驗(yàn)氯貝丁酯的鑒別試驗(yàn) 0.10mg/ml max: 280nm、288nm 10g/ml max: 226nm規(guī)定一定濃度下的供試液的最大吸收波長(zhǎng)規(guī)定一定濃度下的供試液的最大吸收波長(zhǎng)74USP USP 采用對(duì)照品法采用對(duì)照品法 供試藥與其對(duì)照品按同一方法處理，在同樣條件下供試藥與其對(duì)照品按同一方法處理，在同樣條件下紫外光譜圖一致。紫外光譜圖一致。BP BP 規(guī)定一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)，僅有一個(gè)最大或最小吸規(guī)定一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)，僅有一個(gè)最大或最小吸收收 JP JP 與

30、與Ch.PCh.P相似相似 3）各國(guó)紫外鑒別法比較）各國(guó)紫外鑒別法比較752.紅外光譜法1）原理IR光譜法是有機(jī)藥物分子的振動(dòng)-轉(zhuǎn)動(dòng)光譜，能反映藥物分子的 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，分子中每個(gè)基團(tuán)一般都由相應(yīng)的吸收峰，且特征性強(qiáng)，（除光學(xué)異構(gòu)體及長(zhǎng)鏈烷烴同系物外）幾乎沒有兩種化合物具有完 全相同的紅外吸收光譜，即紅外吸收光譜具有“指紋性” ，被廣泛地應(yīng)用于化合物的鑒別。 專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)，應(yīng)用廣（固、液、氣） 主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥以及結(jié)構(gòu)相近的同類物質(zhì)。二、光譜鑒別法二、光譜鑒別法76特征區(qū) 4000 1300cm-1疏，易辨認(rèn)指紋區(qū) 1300400cm-1密，高度敏感77 標(biāo)準(zhǔn)圖譜法：

31、Ch.P要求按指定條件繪制供試品的紅外光吸收?qǐng)D譜，與藥品紅外光譜集中的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)比，如果峰位、峰形、相對(duì)強(qiáng)度都一致時(shí)，即為同一種藥物。 對(duì)照品法：將供試品與對(duì)照品在同樣的條件下繪制紅外圖譜，彼此對(duì)比是否一致的方法?？上煌瑑x器和操作條件造成的誤差。2）紅紅外光譜法外光譜法鑒別鑒別常常用用的方法的方法783）試樣的制備方法試樣的制備方法 壓片法壓片法供試品（約供試品（約1mg) + 干燥干燥KBr/KCl (約約200mg) 研磨均勻研磨均勻 （瑪瑙研缽）（瑪瑙研缽） 置壓膜中置壓膜中真空真空加壓至加壓至0.8-1GPa2-3min均勻透明片均勻透明片無明顯顆粒無明顯顆粒供試片供試片同法制

32、空白同法制空白KBr/KCl片，做空白校正，扣除背景干擾片，做空白校正，扣除背景干擾79 糊法糊法供試品（約供試品（約5mg ）,滴加少量液體石蠟或其他液體滴加少量液體石蠟或其他液體制成糊狀物制成糊狀物瑪瑙研缽瑪瑙研缽 取適量取適量 夾于兩個(gè)夾于兩個(gè)KBr片片（150mg/片）片）之間之間供試片供試片KBr（約（約300mg）制成空白片，作背景校正）制成空白片，作背景校正80 4 4）各國(guó)紅外光譜法比較各國(guó)紅外光譜法比較Ch.P Ch.P 采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法BP BP 采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法、對(duì)照品法采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法、對(duì)照品法USP USP 采用對(duì)照品法采用對(duì)照品法JP JP

33、規(guī)定條件下測(cè)定一定波長(zhǎng)處特征吸收峰。規(guī)定條件下測(cè)定一定波長(zhǎng)處特征吸收峰。81三、色譜鑒別法三、色譜鑒別法 利用不同物質(zhì)在不同的色譜條件下，產(chǎn)生各自的特利用不同物質(zhì)在不同的色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（保留時(shí)間，比移值）進(jìn)行的鑒別試驗(yàn)。征色譜行為（保留時(shí)間，比移值）進(jìn)行的鑒別試驗(yàn)。 常采用對(duì)比法常采用對(duì)比法 與對(duì)照品、已知藥品，在相同條件下進(jìn)行色譜分離與對(duì)照品、已知藥品，在相同條件下進(jìn)行色譜分離并比較。并比較。lTLClHPLClGC82三、色譜鑒別法三、色譜鑒別法 1 1. .薄層色譜鑒別法薄層色譜鑒別法(TLC) (TLC) 1)1)原理原理 薄層色譜法具有專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)成本

34、低等優(yōu)點(diǎn)。薄層色譜法具有專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。 在鑒別試驗(yàn)中，薄層色譜法是色譜法中應(yīng)用最廣的一種方法。在鑒別試驗(yàn)中，薄層色譜法是色譜法中應(yīng)用最廣的一種方法。Ch.pCh.p（20201010）一部，）一部，40004000項(xiàng)左右。項(xiàng)左右。 通過通過R Rf f值，斑點(diǎn)顏色進(jìn)行定性。值，斑點(diǎn)顏色進(jìn)行定性。832 2）薄層色譜鑒別基本操作薄層色譜鑒別基本操作薄層板的制備：薄層板涂鋪要求：均勻、平整、無氣泡引起的凹坑和龜裂。薄層板活化：不同薄層活化條件略有不同，如：硅膠 110 1h氧化鋁 110 30min點(diǎn)樣：藥典規(guī)定：點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑24mm，點(diǎn)間距離約為1.

35、5-2.0cm。要求配制樣品的溶劑高度揮發(fā)性和盡可能非極性，否則易使斑點(diǎn)擴(kuò)展。 飽和及展開：點(diǎn)樣并將樣品點(diǎn)晾或吹干后，先將板放入展開室內(nèi)，但不要浸入展開劑，預(yù)先飽和一段時(shí)間，再放入展開劑展開（一般上行），薄層板水平角度以75為最佳。展開距離一般為10-15cm。（5）檢視：物理方法紫外光下顯示熒光或熒光淬滅 化學(xué)方法加化學(xué)試劑顯色，要求顯色穩(wěn)定、持久、專屬、靈敏、線性良好。84三、色譜鑒別法三、色譜鑒別法2 2. .HPLCHPLC、GCGC色譜分析法色譜分析法 供試品和對(duì)照色譜峰保留時(shí)間一致。供試品和對(duì)照色譜峰保留時(shí)間一致。在鑒別試驗(yàn)中，通常含量測(cè)定同時(shí)用于鑒別的一種方法。在鑒別試驗(yàn)中，通常

36、含量測(cè)定同時(shí)用于鑒別的一種方法。85色譜譜鑒別法小結(jié)色譜譜鑒別法小結(jié) 適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒別適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒別, ,具具有分離、分析同時(shí)進(jìn)行的特點(diǎn)有分離、分析同時(shí)進(jìn)行的特點(diǎn). . 高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)(HPLC)、氣相色譜法、氣相色譜法(GC)(GC)供試品和對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間一致供試品和對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間一致. . 薄層掃描法薄層掃描法(TLC)(TLC)對(duì)照品比較法，供試品對(duì)照品比較法，供試品斑點(diǎn)與對(duì)照品的斑點(diǎn)與對(duì)照品的R Rf f值及斑點(diǎn)的顏色應(yīng)一致值及斑點(diǎn)的顏色應(yīng)一致. .色譜法（色譜法（ HPLC GC TLC)HPLC G

37、C TLC)86四、四、藥物鑒別方法新動(dòng)向藥物鑒別方法新動(dòng)向1 1、儀器方法用于藥物鑒別的數(shù)量大大增加，、儀器方法用于藥物鑒別的數(shù)量大大增加， USP USP、BP BP 儀器鑒別法：化學(xué)鑒別法（儀器鑒別法：化學(xué)鑒別法（2:12:1） BP BP ：主要用：主要用TLCTLC USP USP：HPLCHPLC2 2、原料原料廣泛采用廣泛采用IRIR法鑒別法鑒別87第四節(jié)第四節(jié) 鑒別試驗(yàn)條件鑒別試驗(yàn)條件一、溶液的濃度一、溶液的濃度 溶液的濃度溶液的濃度主要指被鑒別物質(zhì)的濃度，其大小影響結(jié)果的判斷。主要指被鑒別物質(zhì)的濃度，其大小影響結(jié)果的判斷。 （如化學(xué)法中要觀察沉淀、顏色；（如化學(xué)法中要觀察沉淀、顏色；UV法中法中max, A, E1%1cm)二、溶液的溫度二、溶液的溫度 溫度溫度過高過高可使產(chǎn)物分解，導(dǎo)致顏色變淺，沉淀溶解，甚至觀察可使產(chǎn)物分解，導(dǎo)致顏色變淺，沉淀溶解，甚至觀察 不到結(jié)果，故試驗(yàn)中應(yīng)注意溫度的控制。不到結(jié)果，故試驗(yàn)中應(yīng)注意溫度的控制。88 三、溶液的酸堿度三、溶液的酸堿度 許多鑒別反應(yīng)都需要在一定酸堿度的條件下進(jìn)行，溶液的酸許多鑒別反應(yīng)都需要在一定酸堿度的條件下進(jìn)行，溶液的酸堿度能夠使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于活化狀態(tài)、使反應(yīng)產(chǎn)物處堿度能夠使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于活化狀態(tài)、使反應(yīng)