病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)介紹

1、病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)介紹一、病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的性質(zhì)病理生理學(xué)既是一門(mén)理論性較強(qiáng)的學(xué)科，又使一門(mén)實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科。病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)主要在動(dòng)物身上進(jìn)行。通過(guò)人為的方法造成與人類疾病相似的病理過(guò)程或疾?。醇膊∧Ｐ偷膹?fù)制），觀察患病動(dòng)物的代謝和機(jī)能的變化，從而全面地了解疾病發(fā)展的整個(gè)過(guò)程或其中某些重要環(huán)節(jié)。在不影響病人康復(fù)，有利于疾病診治的原則下，病理生理學(xué)也可以對(duì)病人進(jìn)行臨床觀察性研究。為了在實(shí)驗(yàn)和臨床觀察中創(chuàng)造促進(jìn)康復(fù)，消除疾病發(fā)生的條件，病理生理學(xué)也進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性治療的研究。通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究，探究疾病發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)規(guī)的規(guī)律及其發(fā)生機(jī)制.因此病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)是本科教學(xué)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。二、病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的種

2、類病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)可分為急性實(shí)驗(yàn)和慢性實(shí)驗(yàn)兩類。這兩類實(shí)驗(yàn)都是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中所需要的，各有其優(yōu)缺點(diǎn)。為了配合理論課教學(xué)和根據(jù)實(shí)際條件，本教材所選用的實(shí)驗(yàn)都是在短時(shí)間內(nèi)就可以完成的急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。三、病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù)病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)的主要目的是培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生具有初步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究疾病的技能，通過(guò)教學(xué)實(shí)驗(yàn)達(dá)到：1、進(jìn)一步掌握常用的生理學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，以及分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果和書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的方法。2、掌握復(fù)制疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的一般原則和方法。3、通過(guò)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，幫助同學(xué)加深對(duì)基礎(chǔ)理論和基礎(chǔ)知識(shí)的了解和掌握。四、如何上好病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課（一）實(shí)驗(yàn)課前1、作好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模私鈱?shí)驗(yàn)方法和操作步驟，做到

3、心中有數(shù)。2、結(jié)合實(shí)驗(yàn)，復(fù)習(xí)有關(guān)的理論內(nèi)容。3、檢查實(shí)驗(yàn)儀器和藥品是否完好、齊全。（二）實(shí)驗(yàn)課時(shí)1、認(rèn)真聽(tīng)取老師的前言，特別是本次實(shí)驗(yàn)的目的、主要操作步驟及注意事項(xiàng)等。2、分工負(fù)責(zé)，密切配合。通過(guò)實(shí)驗(yàn)課，應(yīng)使每位同學(xué)都得到一定的技能訓(xùn)練。3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要膽大心細(xì)，規(guī)范操作。4、認(rèn)真、全面和敏銳地觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，準(zhǔn)確、及時(shí)和客觀地記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5、積極主動(dòng)思考，力求理解每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟和每個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的意義。（三）實(shí)驗(yàn)課后1、清洗、整理、檢查實(shí)驗(yàn)儀器并妥善安放器材藥品，做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生。2、整理、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告寫(xiě)作要求及格式實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)是一項(xiàng)重要的基本技能訓(xùn)練，它可以初步

4、地培養(yǎng)和鍛煉學(xué)生的邏輯思維能力、綜合分析能力和文字表達(dá)能力，是科學(xué)論文寫(xiě)作的基礎(chǔ)。因此，參加實(shí)驗(yàn)的每位學(xué)生，均應(yīng)及時(shí)認(rèn)真地書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。書(shū)寫(xiě)內(nèi)容應(yīng)實(shí)事求是，分析全面具體，文字簡(jiǎn)練通順，譽(yù)寫(xiě)清楚整潔。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式如下：（一）本次實(shí)驗(yàn)題目（二）主要操作者及合作者（三）實(shí)驗(yàn)日期（年、月、日）（四）動(dòng)物（種類、雌雄和體重）（五）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?shí)驗(yàn)步驟：只寫(xiě)主要操作步驟，不要照抄實(shí)習(xí)指導(dǎo)，要簡(jiǎn)明扼要。（七）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：包括實(shí)驗(yàn)所得到的原始資料（如血壓、呼吸曲線，測(cè)得的生化指標(biāo)等），動(dòng)物的反應(yīng)狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的描述，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理等。對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表述，一般有三種方法：1、文字?jǐn)⑹觯河煤?jiǎn)練的醫(yī)學(xué)術(shù)語(yǔ)客觀地描

5、述實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果，描述要有時(shí)間順序以及各項(xiàng)指標(biāo)時(shí)序關(guān)系。2、圖表：用表格或坐標(biāo)圖的方式使實(shí)驗(yàn)結(jié)果突出、清晰，便于相互比較，尤其適合于分組較多、各組觀察指標(biāo)一致的實(shí)驗(yàn)，使組間異同一目了然。3、曲線圖：應(yīng)用記錄食品描記出的曲線圖（如血壓、呼吸曲線和心電圖等），使這些指標(biāo)的變化趨勢(shì)形象生動(dòng)、直觀明了。在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中，可任選其中一種或三種方法并用，以得到最佳效果。（八）討論（分析）：根據(jù)已知的理論知識(shí)對(duì)所得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解釋和分析，如果所得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和預(yù)期的結(jié)果一致，那么它可以驗(yàn)證什么理論？本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果有什么意義？不能用已知的理論或生活經(jīng)驗(yàn)硬套在實(shí)驗(yàn)結(jié)果上，更不能由于所得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期的結(jié)果或理

6、論不符而隨意取舍甚至修改實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這時(shí)應(yīng)該分析其異常的原因或者本次實(shí)驗(yàn)失敗的原因，不要簡(jiǎn)單地復(fù)述課本上的理論而缺乏自己思考的內(nèi)容。另外，也可以寫(xiě)一些本次實(shí)驗(yàn)的心得以及提出一些問(wèn)題或建議等。（九）結(jié)論：結(jié)論不是具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果的羅列，也不是對(duì)今后研究的展望而是針對(duì)這一實(shí)驗(yàn)所能驗(yàn)證的概念、原則或理論的簡(jiǎn)明總結(jié)，是從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中歸納出的一般性、概括性的判斷，要簡(jiǎn)練、準(zhǔn)確、嚴(yán)謹(jǐn)、客觀。附一實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式題目 主要操作者： 實(shí)驗(yàn)日期： 合 作 者： 動(dòng) 物： 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 討論 結(jié)論六、常用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)（一）家兔的捉拿與固定家兔是病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的大動(dòng)物，多用于急性實(shí)驗(yàn)，也用于慢性實(shí)

7、驗(yàn)。家兔的抗空氣感染力強(qiáng)，術(shù)后不易感染。但家兔系草食動(dòng)物，在消化系統(tǒng)方面與人相差很遠(yuǎn)，此外家兔缺乏咳嗽和嘔吐反射，所以不適于這些問(wèn)題的研究。另外家兔心血管系統(tǒng)比較脆弱，常在手術(shù)時(shí)易反射性衰竭。兔自籠內(nèi)取出時(shí)，應(yīng)用拇指與其它四指抓住其部皮膚，提離籠底，再以另一手托住其臀部，將其重心承托在掌上（圖1）。切忌提其免試耳或某一肢體，強(qiáng)行從籠中拖出，以防兔爪抓傷。圖1 家兔捉拿法兔的固定常用背位交叉固定法?？捎糜诩毙詫?shí)驗(yàn)，如頸、胸、腹部手術(shù)以及觀察描記血壓、呼吸等。先在兔四肢綁好固定帶（前肢固定于腕關(guān)節(jié)上，后肢固定于踝關(guān)節(jié)以上），然后將兔仰臥位放在兔臺(tái)上，將兩前肢的固定帶在背部交叉后分別壓住對(duì)側(cè)前肢的前

8、臂，然后將固定帶綁緊于兔臺(tái)兩側(cè)邊的金屬框上，然后將兔兩腿分開(kāi)將后肢綁緊于兔臺(tái)另一端兩側(cè)的金屬框上，最后用兔頭夾將兔的頭部固定（圖2）。要做到固定牢，體位正。圖2 兔臺(tái)固定（二）大白鼠的捉拿與固定大白鼠的繁殖力和抵抗力強(qiáng)于其它實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，適用于營(yíng)養(yǎng)、維生素及腫瘤等方面的研究。由于大白鼠價(jià)格較便宜，所以某些實(shí)驗(yàn)（如缺氧、失血性休克等），可以用大白鼠代替家兔而不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但實(shí)驗(yàn)技術(shù)的操作難度較家兔略大。大白鼠被激怒后易咬人，所以在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)盡量避免刺激它，捕捉時(shí)最好戴著棉手套捉拿而不用止血鉗鉗夾其皮膚。先捉住鼠的尾巴，將其從鼠籠提出置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，左手將大鼠壓住，食指放在左前肢前，中指放在左前肢后，拇

9、指置于右前肢前，將頭部和上肢固定在手中，再用手掌和其余手指的力量將鼠身握住，用右手拉住其尾部，將尾部拉緊，即可過(guò)行腹腔注射等（圖3），也可以用一手抓其頸部皮膚，另一手拉緊其尾部將其短時(shí)固定。若要作手術(shù)，則需在大白鼠全麻后行鼠板固定。圖3 大白鼠固定與腹腔注射法（1）大白鼠固定法 （2）腹腔注射法（三）小白鼠的捉拿與固定由于小白鼠繁殖周期短，產(chǎn)仔多，生長(zhǎng)快，飼料消耗少，價(jià)格低廉，溫順易捉，操作方便，又能復(fù)制出多種疾病模型，因此在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中被廣泛使用，在病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，主要用于病因?qū)W等實(shí)驗(yàn)。小白鼠較大白鼠溫和，一般不需戴手套捕捉，但也要提防被它咬傷?？捎糜沂肿プ∈笪矊⑵鋸幕\中提出并置于鼠籠，將鼠

10、尾略向后拉，然后以左手拇指與食指夾住頸后部皮膚，使鼠離開(kāi)鼠籠，用左手無(wú)名指和小指壓住鼠尾及后肢，小鼠即被固定，此時(shí)可用右手進(jìn)行技術(shù)操作，如腹腔注射等（圖4）。時(shí)間較長(zhǎng)的固定，則用棉線將小鼠固定于小鼠板上。（四）家兔的頸部手術(shù)包括氣管、頸總動(dòng)脈和頸外靜脈的暴露、分離和插管。圖4 小白鼠固定與腹腔注射法（1）小白鼠固定法 （2）腹腔注射法手術(shù)步驟：1、兔稱重、固定和剪毛：兔稱重后背位交叉固定于兔臺(tái)上，用粗剪剪去頸部毛。剪毛時(shí)要以左手把頸部皮膚繃緊（將皮膚提起反而易剪破皮膚），剪下的毛要放入盛毛盒內(nèi)。2、麻醉：在頸部正中線皮下注入10 g/L（1%）普魯卡因3-4ml行局部浸潤(rùn)麻醉（不要將麻醉藥注入

11、肌肉內(nèi)），麻醉范圍要略大于手術(shù)切口范圍。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求行全身麻醉，一般選用200g/L（20%）烏拉坦（氨基甲酸乙酯），自兔耳緣靜脈緩慢注入，劑量5ml/kg。當(dāng)動(dòng)物呼吸變深、變慢、角膜反射遲鈍、四肢無(wú)力、腹松軟無(wú)緊張時(shí)，即表明動(dòng)物已完全麻醉。3、皮膚切口：術(shù)者左手撐平兔皮膚，右手持手術(shù)刀，以提琴弓式或餐刀式作頸部正中線皮膚切口（不要傷及皮下肌肉組織），切口要正。切口范圍：上起甲狀軟骨，下達(dá)胸骨上緣。兔皮膚切口亦可不用手術(shù)刀而用手術(shù)剪沿正中線剪開(kāi)。4、暴露分離氣管并進(jìn)行插管（圖5）：氣管插管的目的主要是為了輔助呼吸、連接缺氧瓶以及描記呼吸曲線等。圖5 兔氣管插管法（1）氣管的暴露和分離：切開(kāi)

12、皮膚后，對(duì)氣管、血管和神經(jīng)的分離應(yīng)用分析鉗或鑷子進(jìn)行鈍性分離，只有在確認(rèn)沒(méi)有血管的情況下才允許用剪刀剪斷肌肉組織鈍性分離皮下組織，暴露頸部肌肉，分開(kāi)頸部正中肌群即可看到氣管。在甲狀腺下1處，用分析鉗將氣管后的軟組織稍加分離（注意切忌粗暴操作以免氣管充血），在氣管下穿一條較粗的線備結(jié)扎固定氣管插管之用，小心勿傷及甲狀腺及氣管兩側(cè)后方的靜脈。（2）氣管插管：在甲狀腺以下約1-2cm處用手術(shù)剪將氣管軟骨環(huán)節(jié)橫剪一口，剪開(kāi)氣管口徑約一半以上，向肺方向插入Y形氣管插管，用已穿好的粗線扎緊后，再在插管的側(cè)管上打結(jié)，以防插管脫出。選擇離甲狀腺稍遠(yuǎn)部位的軟骨環(huán)作氣管切口，其主要目的是為了遠(yuǎn)離營(yíng)養(yǎng)甲狀腺的血管以

13、防止出血。如仍有出血，可用紗布?jí)浩绕?，同時(shí)將兔臺(tái)后部抬高，使兔頭位低下，以防血液流人氣管造成窒息，出血停止后再作插管。在氣管插管的過(guò)程中應(yīng)隨時(shí)注意觀察動(dòng)物的呼吸變化。5、頸總動(dòng)脈的分離及插管：頸總動(dòng)脈插管主要是用來(lái)測(cè)量動(dòng)脈壓和放血。（1）頸總動(dòng)脈的分離：頸總動(dòng)脈位于氣管兩側(cè)的深部（圖6），一般先分離氣管再分離頸總動(dòng)脈。用左手拇，食指捏住切口一側(cè)的皮膚及其深部各層的軟組織，將頸部?jī)?nèi)層翻出，分離側(cè)面斜行的胸鎖乳突肌，暴露氣管旁側(cè)深出的血管神經(jīng)鞘，細(xì)心分離鞘膜，辨認(rèn)頸總動(dòng)脈（其特點(diǎn)是搏動(dòng)明顯，粉紅色,壁韌），小心將頸總動(dòng)脈從血管神經(jīng)艄中分離出來(lái)，長(zhǎng)約3-4cm，下穿兩根細(xì)線備結(jié)扎固定插管用。圖6

14、兔頸部氣管、血管和神經(jīng)分布（2）導(dǎo)管的準(zhǔn)備：取長(zhǎng)短適當(dāng)?shù)乃芰瞎芑蚬枘z管（也可用玻璃插管），插入端剪成斜面，另一端插入粗細(xì)適當(dāng)?shù)拟g針頭，針座上連接三通活塞，三通活塞和生理記錄儀的壓力傳感器相連。用盛有稀肝素生理鹽水（20U/m1）的注射器插入三通活塞，將肝素生理鹽水充滿導(dǎo)管（導(dǎo)管內(nèi)不能有氣泡），關(guān)閉活塞。（3）肝素化：自兔耳緣靜脈注入3g/L肝素，劑量5ml/kg，使動(dòng)物肝素化以抗凝血。一般按此劑量，于56h內(nèi)可保證抗凝效果。注意：一定要在氣管、血管（包括頸總動(dòng)脈和頸外靜脈）分離完成后，血管插管進(jìn)行之前進(jìn)行肝素化。（4）頸總動(dòng)脈插管（圖7）：將頸總動(dòng)脈下的一根線盡量向腦端（遠(yuǎn)心端）結(jié)扎，近心端動(dòng)

15、脈則用動(dòng)脈夾夾住，中間形成一段長(zhǎng)約23cm的動(dòng)脈盲管（注意：只有在動(dòng)脈盲管的情況下才允許進(jìn)行動(dòng)脈剪開(kāi)和插管?。２骞軙r(shí)，以左手拇指及中指輕拉腦端的 結(jié)扎線頭，食指輕扶血管，右手持眼科剪，使剪刀與血管呈45°角，在緊靠遠(yuǎn)心端結(jié)扎處向心方向剪開(kāi)動(dòng)脈壁的一半，放下 眼科剪，拿起事先已準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管向心方向插入動(dòng)脈內(nèi)，將導(dǎo)管送入約2cm，用另一細(xì)線扎緊并在側(cè)管上打結(jié)固定。如插管有困難，可有眼科鑷夾住入剪開(kāi)的動(dòng)脈開(kāi)口，輕輕提起，便于導(dǎo)管插入。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要時(shí)刻照看動(dòng)脈導(dǎo)管勿使其脫出。（開(kāi)始時(shí)家兔的固定一定要牢固，否則在實(shí)驗(yàn)中因動(dòng)物掙扎易使插管脫出，同時(shí)可用膠布將插管與兔頭固定鐵環(huán)固定在

16、一起。）6、頸外靜脈的分離和插管：頸外靜脈插管主要用于注射藥物、取血、輸液和中心靜脈壓的測(cè)量。頸外靜脈位于頸部?jī)蓚?cè)皮下（特點(diǎn)：壁薄粗大，呈暗紅色，無(wú)明顯搏動(dòng)），分離時(shí)應(yīng)細(xì)心，勿使用銳器，勿反復(fù)刺激（否則會(huì)使靜脈收縮變得非常細(xì)）。頸外靜脈插管一般用塑料軟管，內(nèi)充滿肝素生理鹽水，插管方法與動(dòng)脈插管相同，是向心插入。測(cè)量中心靜脈壓時(shí)，導(dǎo)管需插入右頸外靜脈5cm左右，此時(shí)導(dǎo)管口在上腔靜脈近右心房入口處。（五）家兔的腹股溝部手術(shù)主要目的是分離股動(dòng)脈，股靜脈并進(jìn)行插管，供放血，輸血，輸液及注射藥物之用。圖7 兔頸總動(dòng)脈插管法方法步驟如下：1、兔背位交叉固定、腹股溝部剪毛。2、在腹股溝中1/3與內(nèi)1/3交界

17、處用手指觸摸股動(dòng)脈搏動(dòng)，辨明動(dòng)脈走向，在該處作局麻及方向一致的切口（方法同頸部手術(shù)），切口長(zhǎng)約45cm。3、分開(kāi)切口，其下即為股三角區(qū)（股三角區(qū)上界為腹股溝韌帶，外界縫匠肌，內(nèi)界長(zhǎng)收股）股動(dòng)脈，股靜脈及股神經(jīng)即位于此三角區(qū)內(nèi)，由外而內(nèi)依次為股神經(jīng)、股動(dòng)脈、股靜脈，而股動(dòng)脈位置在中間偏后，恰被股神經(jīng)及股靜脈所遮著。（圖8）。（動(dòng)靜脈的辨認(rèn)方法見(jiàn)頸部手術(shù)）圖8 兔股三角部血管、神經(jīng)圖4、首先用分析鉗將股神經(jīng)細(xì)心分開(kāi)，然后再分離股動(dòng)脈與股靜脈之間的結(jié)締組織，清楚暴露靜脈，如需作靜脈插管可穿好兩根線備用。5、將股動(dòng)脈與其后部組織鈍性分離開(kāi)。整個(gè)過(guò)程要注意勿損傷動(dòng)脈分支，因股動(dòng)分支較多，不小心時(shí)易損傷出

18、血，一旦出血要及時(shí)止血，如為小量滲血，用溫?zé)猁}水紗布按壓即可，較大血管破裂時(shí)必須用血管鉗夾住出血點(diǎn)，少夾周圍組織。6、將股動(dòng)脈分出長(zhǎng)約2的一段，下穿兩根細(xì)線備用，動(dòng)物進(jìn)行肝素化后，在動(dòng)脈近心端用動(dòng)脈夾夾住，遠(yuǎn)心端用線結(jié)扎，牽引此結(jié)扎線，用眼科剪在靠近結(jié)扎處朝向心方向?qū)⒀芗糸_(kāi)一斜口，大小約為血管口徑的1/2（剪口盡量靠近血管遠(yuǎn)心端，以備一旦插管失敗時(shí)，剪口可前移，作為補(bǔ)救），從剪口處沿向心方向插入塑料管12cm左右，用線結(jié)扎固定以備放血或動(dòng)脈注射用，如用于動(dòng)脈注射，則塑料管插入動(dòng)脈前管內(nèi)應(yīng)充以理鹽水，以免注射時(shí)空氣進(jìn)入而導(dǎo)致空氣栓，如用于放血，則無(wú)需充液。股靜脈插管方法基本與股動(dòng)脈相同，但要避

19、免反復(fù)刺激以防靜脈收縮變細(xì)。同樣的，如用于靜脈輸液（血）時(shí)，塑料管插入的管內(nèi)應(yīng)事先充滿生理鹽水，以防管內(nèi)空氣進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)。七、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法動(dòng)物的給藥途徑和方法很多，這里僅介紹在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中所要用到動(dòng)物的給藥途徑和方法。1、皮下注射：以左手拇指和食指提起注射部位皮膚，將針頭以45°角度刺入皮下，回抽無(wú)回血后，將藥液注入。2、肌肉注射：肌肉注射應(yīng)選肌肉層較厚的部位，一般多選用臂部，注射時(shí)快速刺入，回抽無(wú)回血時(shí)注藥。3、腹腔注射：給小白鼠或豚鼠作腹腔注射時(shí)，左手抓住動(dòng)物（參看圖4）。并使其腹部向上，右手持注射器，注射部位應(yīng)選左（或右）下腹的外側(cè)1/2處，將針頭以垂直方向迅速刺入

20、腹腔（在針頭穿過(guò)腹壁進(jìn)入腹腔時(shí)，有落空感），將藥液緩慢注入。為避免傷及內(nèi)臟，可使動(dòng)物處于頭低位，以使內(nèi)臟上移。給豚鼠作腹腔注射，亦可將之固定在動(dòng)物臺(tái)上后進(jìn)行。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔，應(yīng)在左下腹外側(cè)1/3處，垂直進(jìn)針。注射時(shí)注意勿將藥物注入腸腔或膀胱內(nèi)。4、靜脈注射（1）兔耳處緣靜脈注射：兔耳的外緣靜脈表淺易于進(jìn)針、固定，為常用的靜脈注射部位。方法如下：圖9 小白鼠腹腔注射方法在一段較為平直的靜脈段作為進(jìn)針部位（應(yīng)選較靠近耳尖的部位，如一次進(jìn)針失敗，可在前一次進(jìn)針部位的近心端再次進(jìn)針）。先拔去注射部位的被毛，用手指輕彈兔耳、使靜脈充盈（如果技術(shù)熟練，可不拔耳毛，直接進(jìn)針），用左手食、中指夾住靜脈近心端

21、部位，拇指繃直靜脈遠(yuǎn)心端，無(wú)名指及小指墊在下面，右手持注謝器，從靜脈的遠(yuǎn)心端水平向刺入，針頭進(jìn)入血管后，放松夾緊的食、中指，用拇指按壓頭號(hào)以固定，待注完藥液拔出針頭后，用手指輕壓針眼處片刻，以防出血。（見(jiàn)圖10）圖10 兔耳外緣靜脈注射方法（2）蟾蜍（或蛙）腹壁靜脈注射：先將蟾蜍（或蛙）腦脊髓破壞，仰臥固定，在腹中線左側(cè)旁開(kāi)1cm處，剪開(kāi)一約3cm的縱向切口，暴露出腹腔，用左手外翻右側(cè)切口內(nèi)壁，即可見(jiàn)到。貼著腹壁的腹壁靜脈，注射沿血管走行方向，水平刺入即可（見(jiàn)圖11）圖11 蟾蜍（或蛙）腹壁靜脈注射方法八、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉方法1、局部麻醉：常用于局部皮膚切開(kāi)手術(shù)時(shí)，一般用1%普魯卡因（奴佛卡因

22、）溶液在手術(shù)部位作皮下浸潤(rùn)麻醉。注射時(shí)，循切口方向邊進(jìn)針邊將藥液注入皮下，用藥量視手術(shù)范圍而定，作兔頸部手術(shù)時(shí)約需56亳升。2、全身麻醉：常用于較深部位或較廣泛的手術(shù)時(shí)。在病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用注射麻醉（靜脈或腹腔內(nèi)注藥）的方法，常用藥物有戊巴比妥鈉、烏拉坦等。在休克等實(shí)驗(yàn)中，常選用靜脈注射麻醉，其優(yōu)點(diǎn)是作用發(fā)生快，沒(méi)明顯的興奮期，幾乎立即生效。進(jìn)行麻醉時(shí)，常先緩慢注入麻醉藥總量的3/4，如已達(dá)到完全麻醉（動(dòng)物癱軟、呼吸變深變慢、角膜反射遲頓、四肢肌肉松馳。）不再注藥；如尚未達(dá)完全麻醉，應(yīng)停一分鐘后，再緩慢將藥注完，或靜脈注藥過(guò)快常導(dǎo)致動(dòng)物立即死亡。在病理生理急性實(shí)驗(yàn)中，局麻加全身麻醉的方

23、法較廣泛采用。九、急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的手術(shù)方法病理生理學(xué)急性實(shí)驗(yàn)常以動(dòng)物血壓、呼吸、體溫等為觀察指標(biāo)，以靜脈注身，動(dòng)物放血等為實(shí)驗(yàn)方法，常需分離出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的頸總動(dòng)脈、頸外靜脈、股靜脈等血管，及暴露氣管，并作相應(yīng)的插管。手術(shù)主要在頸、胸、腹、股部等處進(jìn)行。在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的手術(shù)方法，詳見(jiàn)實(shí)驗(yàn)一。十、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常生理、生化數(shù)值常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常生理、生化數(shù)值單 位兔豚 鼠大 鼠小 鼠蛙 類體重(成年)Kg(cm)380250(g)2025(g)30(g)體溫3739變溫動(dòng)物心跳次/分1502401403002805005207803060呼吸次/分50100801301101501402107

24、0120(室溫)血壓mmHg801307080100130102±22060血紅蛋白%7881100801004566克131616NPNmg %2851365131383689尿酸克尿素克壽命年45682323-性成熟月5862323妊娠天30533021十一、教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的儀器、器械及使用 1、水銀檢壓計(jì)及使用方法水銀檢壓計(jì)，為U形玻璃管，其內(nèi)裝以水銀，用與描記血壓。U形管左側(cè)水銀面上浮以“浮標(biāo)”，上接描筆以作為描記用；右側(cè)有二個(gè)開(kāi)口與二根橡皮相接，分別聯(lián)于動(dòng)物相應(yīng)部位和加壓瓶。檢壓計(jì)固定于鋁制的板上，板上有刻度，以液面波動(dòng)范圍，讀取相應(yīng)的壓力值。（每一小隔為4mmHg）。加壓

25、瓶?jī)?nèi)盛有3.8%枸櫞酸鈉溶液（肝素化動(dòng)物亦可盛生理鹽水）。瓶?jī)?nèi)與液面不接觸的玻管與氣球相聯(lián)，插入液中的玻管通過(guò)一長(zhǎng)橡皮管與水銀檢壓計(jì)彎管之上面開(kāi)口相聯(lián)（圖12）。圖12 水銀檢壓計(jì)加壓瓶及使用方法示意圖（1）水銀檢壓計(jì) （2）橡皮管上的夾 （3）加壓瓶 （4）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物水銀檢壓計(jì)用以檢測(cè)動(dòng)物血壓。如圖12所示，水銀檢壓計(jì)通過(guò)橡皮管和動(dòng)脈套管（或插管）相連。另一橡皮管與加壓瓶連接。動(dòng)脈插管前，用氣球緩慢打氣，使加壓瓶?jī)?nèi)液體充滿橡皮管道和動(dòng)脈套管內(nèi)，將動(dòng)脈套管一端舉高，排除氣泡，然后用止血鉗夾往動(dòng)脈套管前的橡皮管，再繼續(xù)加壓，使檢壓計(jì)上的壓力近與動(dòng)物的血壓水平（免約80-130mmHg），然后夾住檢

26、壓計(jì)與壓力瓶間的橡皮管。將備好的動(dòng)脈套管插入頸總動(dòng)脈并結(jié)扎固定后，打開(kāi)動(dòng)脈夾，放開(kāi)與動(dòng)脈套管相連的橡皮管上的止血鉗，即可見(jiàn)水銀柱液面波動(dòng)，所指數(shù)值即為所測(cè)動(dòng)物動(dòng)脈血壓。2、氣管插管及呼吸描記氣管插管為“Y”形的玻璃物品，插好氣管插管后，將“Y”形上的一支用橡皮管與馬利氏氣鼓相連即可插記呼吸?！癥”形的另一支可作為呼吸備用通道，通常用盲端的橡皮管封閉住。在通氣量較小時(shí)，需將出氣導(dǎo)管部分夾閉，否則難以描記出呼吸曲線。在有條件的情況下，采用張力換能器生理記錄儀記錄頻率和幅度變化較為理想。3、三通管的使用方法看圖13圖13 三通管使用方法示意圖1、接注射器針頭處 2、開(kāi)關(guān)通道 3、開(kāi)關(guān)手柄 4、相通方

27、向4、多導(dǎo)生理記錄儀多導(dǎo)生理記錄儀可連續(xù)動(dòng)態(tài)記錄某些生理參數(shù)的改變，其工作原理是通過(guò)各種不同的換能器，將壓力、位移、聲音等轉(zhuǎn)化為電訊號(hào)，再通過(guò)放大裝置將訊號(hào)放大，然后在筆式記錄儀或示波器上顯示。多導(dǎo)生理記錄儀有各種型號(hào)，如二道、三道十六道等，即可同時(shí)記錄2個(gè)、3個(gè)16個(gè)等生理參數(shù)。在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中，主要用于動(dòng)脈血壓、呼吸頻率和深度等生理觀測(cè)指標(biāo)的測(cè)試，以及心電圖的描記。病理生理學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一 急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用操作訓(xùn)練【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、基本掌握家兔頸部、股部的常用手術(shù)操作技術(shù)，為以后的實(shí)驗(yàn)和科研打基礎(chǔ)。2、掌握暴露氣管，頸總動(dòng)脈、頸外靜脈、股動(dòng)脈并作相應(yīng)插管的手術(shù)方法?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔（一只）

28、【藥品與器材】25%烏拉坦溶液，1%普魯卡因，3.8%枸椽酸鈉，0.5%肝素,生理鹽水。兔手術(shù)臺(tái)一個(gè)，兔急性實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械一套（包括毛剪、手術(shù)刀、組織剪、線剪、眼科剪、粗剪、持針器、外科鑷、眼科鑷、有齒鑷各一把，大號(hào)直、變止血鉗及小號(hào)直，彎止血鉗各二把）。手術(shù)器械方盤(pán)、腎形盤(pán)各一個(gè)，動(dòng)脈夾、動(dòng)脈套管、Y形玻璃氣管插管、三通管各一個(gè)，水銀檢壓裝置一套（包括加壓瓶，）輸液裝置一套，手術(shù)燈一臺(tái)，500ml燒杯、毛盒各一個(gè)，5ml、10ml、50ml注射器各一個(gè)，針頭數(shù)個(gè)，圓形縫合針二個(gè)，動(dòng)物固定帶五條，紗布四塊，粗、細(xì)絲線少許?！緦?shí)驗(yàn)步驟與觀察】將家兔稱重，仰臥或固定于兔臺(tái)上。剪去頸正中部及一側(cè)股部的

29、被毛，用25%烏拉坦（按4ml/kg），經(jīng)耳外緣靜脈緩慢注射，進(jìn)行全身麻醉。（達(dá)到完全麻醉的指征及麻醉注意事項(xiàng)，參看第15頁(yè)有關(guān)內(nèi)容。）一、氣管、頸總動(dòng)脈、頸外靜脈分離術(shù)用1%普魯卡因，5-6ml作頸部切口部位皮下浸潤(rùn)麻醉。1、氣管分離術(shù)：局麻后，用手術(shù)刀沿頸正中線，從甲狀軟骨處向下至胸骨上緣作一長(zhǎng)約5-6cm的縱形切口，用小號(hào)彎鉗向下分離，分開(kāi)頸部正中的肌群后即可看到氣管，分離氣管并在下面穿一根粗絲線，插管結(jié)扎時(shí)用。2、頸總脈分離術(shù)：頸總動(dòng)脈位于氣管兩側(cè)。分離出氣管后，在其兩側(cè)可見(jiàn)到搏動(dòng)著的頸部動(dòng)脈，用眼科鑷或小彎鉗細(xì)心分離出左側(cè)的頸總動(dòng)脈（游離長(zhǎng)度需3-4cm），在下面穿細(xì)線兩根備用。若有

30、頸總動(dòng)脈的分支，應(yīng)將分枝兩端結(jié)扎，在其中間剪斷。圖11 家兔頸部血管神經(jīng)解剖位置示意圖3、頸外靜脈分離術(shù)：頸外靜脈表淺，位于頸部皮下。用手將右側(cè)切口處外翻，將組織輕輕頂起；在胸鎖乳突肌外緣，可見(jiàn)到粗大、呈暗紫色的頸外靜脈（圖1-3）。沿其走向，將右頸外靜脈分離出3-4cm，穿二根線備用。注意將靜脈周圍的結(jié)締組織分離干凈，不然插管較為困難。二、氣管及頸部血管插管術(shù)1、氣管插管術(shù)-1cm處，用組織剪沿兩個(gè)軟骨環(huán)的間隙剪一約達(dá)氣管口徑一半以上的橫切口，再向頭側(cè)剪斷2個(gè)氣管軟骨，使切口呈“”形，向下端方向插入氣管插管，結(jié)扎、固定（為防滑脫，應(yīng)再將線固定在插管分叉處）。氣管插管再與馬利氏氣鼓相連，即可描

31、記呼吸曲線。2、頸總動(dòng)脈插管術(shù)頸總動(dòng)脈插管的目的在于測(cè)量血壓或放血。插管前，先將動(dòng)脈套管與血壓描記裝置連接好，打氣加壓，使導(dǎo)管及動(dòng)脈套管內(nèi)充滿抗凝液。閾將管內(nèi)氣泡排除，夾閉管道。把血壓計(jì)的水銀柱打到100mmHg的水平后，夾閉與加壓瓶相連的橡皮管（水銀柱的零點(diǎn)與心臟應(yīng)位于同一高度。水銀檢壓裝置及使用方法，參看第17頁(yè)中的有關(guān)內(nèi)容及圖示）。用動(dòng)脈夾夾住左頸總動(dòng)脈近心端，結(jié)扎其遠(yuǎn)心端，再端間距離3cm左右。用左手小拇指或用眼科鑷之柄墊起這段游離的動(dòng)脈，用眼科剪在靠近遠(yuǎn)心端結(jié)扎處剪一小口，將充滿抗凝液體的動(dòng)脈套管頭端向心方向插入動(dòng)脈內(nèi)圖1-2中、圖，用備好的細(xì)線結(jié)扎固定，為防止插頭滑出，應(yīng)將結(jié)扎線再

32、固定于套管的側(cè)管上。打開(kāi)動(dòng)脈夾、緩慢打開(kāi)與氣管套管相連的橡皮管上的止血鉗，即可從水銀柱上觀測(cè)到兔的動(dòng)脈血壓。3、頸外靜脈插管術(shù)頸外靜脈插管用于注射藥液，輸血輸液和測(cè)量中心靜脈壓。將靜脈周圍的結(jié)締組織分離干凈后，用動(dòng)脈夾夾住游離段的近心端，結(jié)扎其遠(yuǎn)心端，用眼科剪在靠結(jié)扎線處剪一小口（約為管徑的1/3或1/2），插入與輸液裝置相連的、充滿肝素溶液的塑料導(dǎo)管，進(jìn)入3-4cm，作結(jié)扎固定。打開(kāi)動(dòng)脈夾即可注藥或輸液。（注藥或輸液前須事先排出輸液管道中的氣泡）。若插管用于測(cè)量中心靜脈壓，導(dǎo)管插入深度應(yīng)為5-8cm。（1）兔頸部正中切口，暴露氣管，分離頸總動(dòng)脈并分別穿線 （2）行氣管插管（3）結(jié)扎氣管插管

33、（4）用動(dòng)脈夾夾頸閉總動(dòng)脈向心端，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，并剪開(kāi)（5）行動(dòng)脈插管 （6）結(jié)扎動(dòng)脈插管圖12 家兔氣管和頸總動(dòng)脈分離術(shù)及其插管術(shù)圖13 家兔頸外靜脈解剖位置示意圖三、股動(dòng)脈分離術(shù)與插管術(shù)1、股動(dòng)脈插管的目的在于放血。先在股部用手指角摸股動(dòng)脈搏動(dòng)，以辨明其走向，在該處作局麻，沿動(dòng)脈走向作長(zhǎng)約4-5cm的手術(shù)切口，用小彎鉗小心分離肌肉及深部筋膜即可見(jiàn)到暴露出的股三角區(qū)，股動(dòng)脈、股靜脈及股神經(jīng)由此三角區(qū)通過(guò)，股神經(jīng)位于外側(cè)、股靜脈位于內(nèi)側(cè)，股動(dòng)脈位于中間偏深處。（圖14）圖14 股動(dòng)脈、股靜脈、股神經(jīng)解剖位置示意2、用眼科鑷小心地將股動(dòng)脈與股神經(jīng)、股神經(jīng)間的結(jié)締組織分離開(kāi)，游離出2-3cm的股動(dòng)脈

34、段（分離時(shí)要小心，勿傷及股動(dòng)脈分支），在動(dòng)脈下方穿二根線備用。3、用動(dòng)脈夾夾住分離出的動(dòng)脈段近心端，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在遠(yuǎn)心端處剪口并將充滿肝素液的導(dǎo)管插入，結(jié)扎固定，打開(kāi)動(dòng)脈夾即可放血。【注意事項(xiàng)】1、應(yīng)分工明確，各盡其責(zé)，又密切配合。2、全身麻醉時(shí)，切勿注藥過(guò)快，防止動(dòng)物因呼吸抑制立即死亡。具體方法可參看前面有關(guān)內(nèi)容。3、手術(shù)動(dòng)作應(yīng)輕柔，有出血時(shí)應(yīng)及時(shí)結(jié)扎止血，分離頸總動(dòng)脈及插管時(shí)要特別小心，防止出血。4、動(dòng)脈套管內(nèi)宜加少量肝素溶液，以防凝血。實(shí)驗(yàn)二 條件在疾病發(fā)生上的意義原因?yàn)榧膊“l(fā)生所必須并決定疾病的特異性。疾病發(fā)生，還取決于機(jī)體所處的內(nèi)部與外部條件，條件可通過(guò)增強(qiáng)或削弱原因的致病性，改變機(jī)

35、體對(duì)疾病原因的耐受性，促進(jìn)或延緩疾病的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)改變機(jī)體的內(nèi)部與外部條件，觀察小白鼠對(duì)缺氧耐受性的變化。【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)觀察機(jī)體內(nèi)部因素與外部條件在疾病發(fā)生中的意義。2、學(xué)習(xí)缺氧瓶?jī)?nèi)空氣容積測(cè)量法和計(jì)算耗氧率的方法?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】小白鼠、新生鼠（35天）?！舅幤放c器材】1%咖啡因，10%烏拉坦、生理鹽水、鈉石灰、啐冰塊、熱水、粗鹽。小白鼠缺氧瓶7個(gè)（其中磨口瓶4個(gè)、帶有橡皮管的缺氧瓶3個(gè)）、溫度計(jì)1支、500毫升燒杯2個(gè)、粗天平1臺(tái)、100毫升量筒1個(gè)、1毫升注射器4個(gè)、青霉素小瓶1個(gè)。【實(shí)驗(yàn)步驟與觀察】1、外界環(huán)境溫度對(duì)缺氧耐受性的影響。 取500毫升燒杯兩個(gè)，一個(gè)燒杯加入啐

36、冰塊及少許冷水，將水溫調(diào)至0左右，如水溫仍高，可加入少許粗鹽促使水溫下降，另一個(gè)燒杯中加入熱水并調(diào)節(jié)水溫為40左右。 三個(gè)缺氧瓶中均裝入鈉石灰5克，蓋瓶塞。 稱取體重相近小白鼠3只，分別放入三個(gè)缺氧瓶中，同時(shí)將瓶蓋緊，使瓶嚴(yán)密封閉，計(jì)時(shí)，并立即將其中一個(gè)瓶置于0冰水燒杯中，另一個(gè)置于40左右的熱水中，第三個(gè)置于室溫環(huán)境中。 持續(xù)觀察各鼠在瓶中活動(dòng)情況，耳殼和尾部顏色，呼吸變化，待小白鼠死亡后計(jì)算存活時(shí)間，并立即從燒杯中取出缺氧瓶，置室溫中平衡15分鐘（勿打開(kāi)瓶塞）。 測(cè)定小白鼠的總耗氧量（采用負(fù)壓原理），（原理及方法見(jiàn)附錄）。（附錄）（一）原理：小白鼠在密閉的缺氧瓶?jī)?nèi)，不斷消耗氧氣，而產(chǎn)生的C

37、O2又被鈉石灰吸收，瓶?jī)?nèi)氧分壓逐漸降低產(chǎn)生負(fù)壓。當(dāng)缺氧瓶與測(cè)耗氧量裝置相連時(shí)，裝置的移液管內(nèi)液面因瓶?jī)?nèi)負(fù)壓而上升，量筒內(nèi)液面下降的毫升數(shù)即為消耗氧的總量。（二）方法： 向量筒內(nèi)充水至100ml刻度處，然后將玻璃管接頭與缺氧瓶塞上的一個(gè)橡皮管相連。 打開(kāi)上述像皮管的螺旋夾，此時(shí)，移液管內(nèi)水平面上升移，而量筒內(nèi)液面下降，穩(wěn)定后，從量筒上讀出液面下降的毫升數(shù)，即為小白鼠在存活時(shí)間內(nèi)的總耗氧量（A）。 計(jì)算耗氧率（R）R（毫升/克/分）=A÷體重（克）÷存活時(shí)間（分）【注意事項(xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)中缺氧瓶一定要密閉2、鈉石灰勿在空氣中暴露過(guò)久，以免失效。3、在造成小白鼠缺氧的過(guò)程中，瓶外溫度

38、應(yīng)持續(xù)恒定。4、待動(dòng)物死亡后，應(yīng)將放入溫水和冰水中的兩只缺氧瓶子取出，在室溫中平衡1015分鐘左右，再測(cè)總耗氧量。2、神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能狀態(tài)對(duì)缺氧耐受性的影響。10克10克10克體重） 待上述兩鼠出現(xiàn)興奮和抑制狀態(tài)后，再將上述三只小白鼠分別裝入缺氧瓶中（每只瓶中應(yīng)裝有5克鈉石灰），同時(shí)將瓶塞塞緊密封、記時(shí)。 持續(xù)觀察各鼠在瓶中的活動(dòng)情況和呼吸變化，注意何時(shí)死亡，記錄其存活時(shí)間。3、成年鼠及新生鼠對(duì)氧耐受性的影響 先取新生鼠一只放入青霉素小瓶?jī)?nèi)（防止被成年鼠咬傷）再放入磨口缺氧瓶中。然后取一只成年鼠，放入同一缺氧瓶中、密閉，記時(shí)。 觀察兩鼠的活動(dòng)及呼吸情況，記錄其存活時(shí)間，分析其存活時(shí)間為何不同?！舅?/p>

39、考題】1、何謂原因？何謂條件？2、本次實(shí)驗(yàn)有何意義？實(shí)驗(yàn)三 水 腫當(dāng)血液和組織間液體的動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)時(shí)，組織液的生成量大于回量，過(guò)多的液體潴留在組織間隙或體腔則形成水腫或積液，血管內(nèi)，外液體交換的平衡受以下因素的影響，組織液生成力量與組織液回流力量對(duì)比，毛細(xì)血管壓和組織間液膠體滲透壓促進(jìn)組織液的生成，血管膠體滲透壓和組織間液流體靜壓促進(jìn)組織液的回流，毛細(xì)血管通透性；淋巴加流。上述一個(gè)或幾個(gè)因素同時(shí)或相繼失調(diào)，都可能成為水腫發(fā)生的重要原因?！緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、學(xué)習(xí)蟾蜍下肢灌流標(biāo)本的制作和灌流方法。2、觀察血漿膠體滲透壓，晶體滲透壓及血管內(nèi)壓的改變對(duì)水腫的形成影響?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】蟾蜍或青蛙。【藥品與器材】

40、0.3%肝素、任氏液、20%葡萄糖溶液、蛙板一塊毀髓針一支、外科組織剪一把，外科鑷一把，眼科剪一把，眼科鑷一把，普通粗剪一把，1毫升注射器一付，1號(hào)針頭一個(gè)，蛙后肢灌流裝置一套，天平帶砝碼一付，膠片一張，彎盤(pán)一個(gè)，棉球數(shù)個(gè)，細(xì)絲線，紗布。【實(shí)驗(yàn)步驟與觀察】1、灌流裝置的準(zhǔn)備： 向蟾蜍后肢灌流裝置的兩個(gè)分液漏斗中分別加入任氏液，20%葡萄糖溶液各50100毫升。 將放任氏液的分液漏斗活塞旋開(kāi)，使任氐液充滿灌流系統(tǒng)，排出橡皮管和細(xì)塑料管中的空氣，關(guān)閉活塞，調(diào)整液面高度，使之保持于2025厘米之間（由標(biāo)本插管處計(jì)算）。2、蟾蜍下肢灌流標(biāo)本的準(zhǔn)備： 取大蟾蜍一只，由枕骨大孔插毀髓針，毀壞大腦和脊髓。

41、將蟾蜍仰臥于蛙板上，行左旁正中切口，打開(kāi)腹腔，找到腹壁靜脈，注入0。3%肝素1毫升。（圖31）圖31 蛙腹靜脈注射法 將蟾蜍的內(nèi)臟推向其右側(cè)，沿左腎外緣小心剪開(kāi)后腹膜，暴露腹膜后神經(jīng)及血管，找出背主動(dòng)脈。 將背主動(dòng)脈與周圍組織分離，在其下穿兩根細(xì)絲線，提起近心端側(cè)的穿線結(jié)扎（結(jié)扎部位應(yīng)盡量靠近心端；遠(yuǎn)心端側(cè)穿線留結(jié)扎固定插管之用），然后用粗剪將結(jié)扎部位以上的軀干橫斷，棄去，并將內(nèi)臟全部清除，清除時(shí)注意不要損傷結(jié)扎部位以下的動(dòng)脈，也不要使動(dòng)脈扭轉(zhuǎn)。 用眼科剪于結(jié)扎部位下方剪開(kāi)背主動(dòng)脈，剪口應(yīng)距髂動(dòng)脈分叉處1厘米左右，向下肢方向?qū)⒐嗔餮b置下端充滿任氏液的細(xì)塑料插管插入背主動(dòng)脈，用遠(yuǎn)心端側(cè)穿線結(jié)扎固

42、定。 將膠片傾斜放置在天平盤(pán)上（以免水存留于盤(pán)中影響結(jié)果）調(diào)節(jié)天平達(dá)到平衡，再將制備好的標(biāo)本置于膠片上，開(kāi)始灌流。3、灌流： 將盛放任氏液的分液漏斗活塞旋開(kāi)，用任氏液沖洗標(biāo)本，待標(biāo)本內(nèi)殘血全部沖出后，開(kāi)始稱取重量，并記下此時(shí)的時(shí)間及灌流速度（滴數(shù)/分鐘）以后每隔5分鐘稱重一次，共三次，觀察其重量及觀形態(tài)。 15分鐘后，停止任氏液灌流，打開(kāi)盛放20%葡萄糖溶液的分液漏斗活塞，用20%葡萄糖溶液沖洗一分鐘，調(diào)節(jié)液面高度于2025厘米處，記下時(shí)間和灌流速度，然后再同樣每隔5分鐘稱重一次，共三次，觀察其重量及外觀形態(tài)?！咀⒁馐马?xiàng)】1、在尋找背主動(dòng)脈時(shí)，要注意與其它動(dòng)脈相區(qū)別。2、細(xì)塑料插管插入部位應(yīng)選

43、在近背主動(dòng)脈結(jié)扎處，一般應(yīng)距髂動(dòng)脈分叉1厘米左右，以免插管插入髂動(dòng)脈，其次，還可在第一次插管失敗后再行插管。3、灌流時(shí)必須檢查血管是否扭曲。4、灌流時(shí)液面高度必須保持在距離標(biāo)本插管2025厘米左右，每次換液后均需要調(diào)整液面高度。5、操作過(guò)程中動(dòng)作要輕，勿使血管斷裂，勿使插管掉出血管?！舅伎碱}】1、20%GS起什么作用？2、本實(shí)驗(yàn)會(huì)出現(xiàn)怎樣的結(jié)果？為什么？3、任氏液由什么組成？實(shí)驗(yàn)四 缺 氧當(dāng)供應(yīng)組織的氧不足，或組織利用氧障礙時(shí)，機(jī)體的機(jī)能和代謝可發(fā)生異常變化，這種情況稱為缺氧。根據(jù)缺氧的原因可分為乏氧性缺氧、血液性缺氧、循環(huán)性缺氧和組織中毒性缺氧四種類型。本實(shí)驗(yàn)主要是復(fù)制缺氧動(dòng)物模型，并觀察缺

44、氧過(guò)程中機(jī)體的機(jī)能和代謝變化?！緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、在動(dòng)物身上復(fù)制乏氧性、血液性和組織中毒性缺氧，了解缺氧的分類。2、觀察不同類型的缺氧時(shí)，小鼠的呼吸、皮膚粘膜及肝臟顏色的變化，探討其發(fā)生機(jī)理?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】小白鼠（七只）【藥品與器材】10%氫氧化鈉、甲酸、濃硫酸、5%亞硝酸鈉、1%美蘭、0.1氰化鉀、生理鹽水、鈉石灰。小白鼠磨口缺氧瓶2個(gè)、CO發(fā)生裝置一套（圖4-1），1毫升注射器3支、酒精燈1個(gè)、組織剪1把、粗鑷子1把、蛙板1塊、吸管1支?！緦?shí)驗(yàn)步驟與觀察】一、乏氧性缺氧1、取一只成年小白鼠放入磨口缺氧瓶中（瓶中放入鈉石灰5g），觀察動(dòng)物的一般情況、呼吸頻率（次/10秒）、深度、皮膚、口唇及尾部顏

45、色，然后蓋上瓶塞，塞緊，記錄存活時(shí)間。2、每5分鐘觀察記錄上述指標(biāo)一次（如有其它變化隨時(shí)記錄），直到小白鼠死亡為止。3、小白鼠尸體保留待后面幾個(gè)小實(shí)驗(yàn)做完后，依次打開(kāi)腹腔，比較肝臟顏色，并與正常小鼠肝臟顏色比較。二、血液性缺氧1、CO中毒（1）如圖裝好CO發(fā)生裝置。（2）取甲酸約3ml放入CO發(fā)生裝置的試管中，加入深硫酸約2ml，甲瓶中放入氫氧化鈉溶液約15ml。圖41 一氧化碳發(fā)生裝置（3）取小鼠兩只，一只放放一氧化碳發(fā)生裝置中的乙瓶中，瓶上有一個(gè)管口與大氣相通；另一只鼠放入敞口的缺氧瓶中做為對(duì)照。（4）點(diǎn)燃酒精燈加熱盛有甲酸和濃硫酸溫合液的試管，即產(chǎn)生出CO。產(chǎn)生的CO先進(jìn)入盛有Na0H溶

46、液的甲瓶中，將氣體中的硫酸除去，純凈的CO便進(jìn)入裝有小白鼠的乙瓶中。HCOOHH2O+COH2SO4+2NaOHNa2SO4+H2O（5）密切、及時(shí)觀察小鼠情況，觀察指標(biāo)同乏氧性缺氧實(shí)驗(yàn)。2、亞硝酸鈉中毒10g），注定后立即再給其中一只腹腔內(nèi)注入1%美藍(lán)1ml，另一只注入生理鹽水1ml，記時(shí)。（2）觀察各項(xiàng)指標(biāo)（同乏氧性缺氧實(shí)驗(yàn)），比較注入美藍(lán)的小鼠和注入生理鹽水的小鼠有何不同；注射亞硝酸鈉溶液后經(jīng)過(guò)不同處理的兩只小白鼠的存活時(shí)間等情況又有何不同。三、組織中毒性缺氧氰化鉀中毒：10g體重），另一只作對(duì)照。（2）密切觀察小鼠狀況，觀察指標(biāo)同本次實(shí)驗(yàn)中的實(shí)驗(yàn)一。【注意事項(xiàng)】1、造成乏氧時(shí)，缺氧瓶一

47、定要密閉。2、用酒精燈加熱甲酸、濃硫酸混合液時(shí)，火力切勿太猛，以防酸液噴出傷人，同時(shí)，若CO產(chǎn)生過(guò)多過(guò)快，易使動(dòng)物迅速死亡，而不出現(xiàn)典型的顏色改變。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)打開(kāi)門(mén)窗，使室內(nèi)空氣流通。3、小白鼠腹腔注射。應(yīng)規(guī)范操作（見(jiàn)講義第一部分實(shí)驗(yàn)介紹中有關(guān)內(nèi)容），防止將藥物注入膀胱、腸管或傷及內(nèi)臟。4、氰化鉀有劇毒、勿沾染皮膚、粘膜、特別是破損處。5、鈉石灰勿在空氣中暴露過(guò)久，以免失效。【思考題】1、鈉石灰的作用是什么？2、你能說(shuō)出以上幾種缺氧時(shí)的血氧變化特點(diǎn)嗎？實(shí)驗(yàn)五 失血性休克休克是由于急性循環(huán)障礙使組織血液灌流量嚴(yán)重不足，以致各重要生命器官機(jī)能代謝發(fā)生嚴(yán)重障礙的一個(gè)全身性病理過(guò)程。休克的微循環(huán)學(xué)說(shuō)，認(rèn)

48、為各種不同原因引起的休克都可導(dǎo)致微循環(huán)障礙，休克發(fā)病的關(guān)鍵不在于血壓，而在于血流，因而提出在改善微循環(huán)、保證組織有效灌流的基礎(chǔ)上采用血管活性藥物治療休克。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制失血性休克，觀察休克過(guò)程中機(jī)體的變化，通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解搶救休克的治療原則。【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、學(xué)習(xí)失血性休克動(dòng)物模型的復(fù)制方法。2、觀察在失血性休克后，動(dòng)脈血壓等生理指標(biāo)的變化；加深對(duì)休克各期的主要臨床表現(xiàn)及其發(fā)生機(jī)制的理解和認(rèn)識(shí)。3、觀察實(shí)驗(yàn)兔在休克后腸系膜微循環(huán)的變化，分析其發(fā)生機(jī)制。4、通過(guò)輸液治療，了解輸血輸液是治療休克的一項(xiàng)重要措施。【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔?！舅幤放c器材】25%烏拉坦溶液，0.5%肝素溶液，1%普魯卡因，生理鹽水。手

49、術(shù)器械一套（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)一），兔臺(tái)一個(gè)，血壓描記裝置一套，輸液裝置一套，微循環(huán)觀察裝置（包括顯微鏡一臺(tái)、灌流盒一個(gè)），手術(shù)燈一臺(tái)，接線板一個(gè)，氣管插管、動(dòng)脈套管、靜脈導(dǎo)管各一個(gè)，三通管一個(gè)，酒精溫度計(jì)一支，5ml、10ml、50ml注射器各一個(gè)，針頭4個(gè)，紗布三塊，棉花少許，白紗帶4-5根?！緦?shí)驗(yàn)步驟與觀察】1、取兔稱體重后，由耳緣靜脈緩慢注射25%烏拉坦溶液麻醉。劑量按4ml/kg，注藥過(guò)程中要注意觀察動(dòng)物反應(yīng)，注意勿因注藥過(guò)快造成動(dòng)物死亡（參看前面有關(guān)部分），2、將動(dòng)物仰臥位固定于兔臺(tái)上，剪去頸部、一側(cè)股部手術(shù)部位的毛。（一個(gè)實(shí)驗(yàn)小組還要將兔右側(cè)中腹部的被毛剪去，以準(zhǔn)備作觀察腸系膜微循環(huán)的手術(shù)切

50、口）。3、用1%普魯卡因局麻后，在甲狀軟骨下切開(kāi)頸正中皮膚約6cm，分離出氣管、左側(cè)頸總動(dòng)脈和右側(cè)頸外靜脈。4、作左側(cè)頸總動(dòng)脈插管以描記血壓：作氣管插管描記呼吸；于右頸外靜脈處插入連接輸液裝置的靜脈導(dǎo)管（插入3-4左右即可。輸液管內(nèi)的氣泡須事先排除），以備搶救時(shí)輸液用。為防止發(fā)生凝血可慢速滴入生理鹽水（5-10滴/分，只要維持輸液通暢即可）。5、局麻后，于股部股動(dòng)脈行走處，做約3-4cm皮膚切口，分離皮下組織，暴露分離股動(dòng)脈。用充滿0.5%肝素溶液，并帶有三通管的塑料插管做股動(dòng)脈插管，放血時(shí)用。6、局麻后，在右側(cè)腹直肌旁作6-7cm縱形的中腹部切口，用止血鉗夾住切口下兩側(cè)對(duì)稱部位的皮下組織，輕

51、輕提起并剪開(kāi)一個(gè)小口，剪開(kāi)切口下各層組織，包括腹膜層。（小心勿夾住或損傷腸管），用圓頭組織剪將切口剪至所需要的長(zhǎng)度。若有出血應(yīng)及時(shí)止血。7、打開(kāi)腹腔后，推開(kāi)大網(wǎng)膜，先找出飽滿的盲腸，將盲腸輕輕提起，沿著盲腸找出一段游離度較大的小腸腸袢，輕輕從腹腔中拉出，放置在裝有38生理鹽水的微循環(huán)灌流盒內(nèi)，將腸系膜平鋪在凸形觀察臺(tái)上，蓋上固定板，使液面剛剛蓋過(guò)腸系膜表面。（注意，在尋找和拉出小腸時(shí)，動(dòng)作應(yīng)輕柔，以免腸系膜血管收縮，血流減慢或停止）。8、打開(kāi)手術(shù)燈，光源對(duì)準(zhǔn)顯微聚光鏡，用顯微鏡觀察動(dòng)物在放血前后的腸系膜微循環(huán)變化過(guò)程。觀察前應(yīng)將外溢的其他腸管部分，用濕紗布包囊著輕輕放回腹腔內(nèi)，用止血鉗夾閉切口

52、兩端，并用濕紗布覆蓋在腹腔外的腸管上。9、于放血前觀察和記錄以下指標(biāo)：一般狀況、皮膚粘膜顏色、血壓、呼吸、心率、心音強(qiáng)度、肛溫和腸系膜微循環(huán)狀況（注意觀察血流速度、血管口徑、毛細(xì)血管數(shù)及血細(xì)胞流動(dòng)狀況）。10、打開(kāi)三通管，從股動(dòng)脈處放血，同時(shí)密切觀察血壓，使血壓維持在40mmHg，在停止放血后若血壓回升，應(yīng)再次放血，使血壓在40mmHg上下持續(xù)15分鐘左右后，再觀察記錄上述各項(xiàng)指標(biāo)。【注意事項(xiàng)】1、組內(nèi)應(yīng)分工明確，各盡其責(zé)，密切配合，以保證手術(shù)順利進(jìn)行。2、手術(shù)時(shí)，動(dòng)作要敏捷、輕柔，應(yīng)盡量減少創(chuàng)傷和出血。牽拉腸系膜，要用濕紗布包住后輕輕提出，切勿亂翻或用力牽拉，盡量減輕局部損傷，避免造成手術(shù)性

53、腸系膜微循環(huán)障礙。3、微循環(huán)灌流盒內(nèi)，生理鹽水應(yīng)保持在38左右。腸系膜上要經(jīng)常滴加生理鹽水，以保持濕潤(rùn)。4、動(dòng)脈套管、放血用的塑料管內(nèi)，應(yīng)事先加一定量的肝素溶液，在股動(dòng)脈處放血后，應(yīng)給放血管道內(nèi)注入肝素液，以防凝血。5、尿量變化為休克中一項(xiàng)重要觀察指標(biāo)，因條件限制，本實(shí)驗(yàn)未進(jìn)行測(cè)定。6、腸系膜微循環(huán)觀察方法：選好視野后，應(yīng)在鏡下分清動(dòng)脈（包括小動(dòng)脈、微動(dòng)脈）、靜脈（微靜脈和小靜脈）和真毛細(xì)血管。動(dòng)、靜脈的辨別：動(dòng)脈色淺紅，血流速度快，由粗變細(xì)逐漸分支；靜脈色暗紅，血流速度較慢，由小支匯成大支，由細(xì)變粗。真毛細(xì)血管一般僅通過(guò)一個(gè)紅細(xì)胞?！舅伎碱}】1、在失血性休克發(fā)展過(guò)程中，血壓和微循環(huán)變化有何特

54、點(diǎn)？血壓變化與微循環(huán)變化有何聯(lián)系？心率、呼吸、尿量、體溫等有怎樣的變化？簡(jiǎn)述其原因及機(jī)制。2、為什么輸血、輸液是搶救休克的一項(xiàng)重要措施？它有什么重要意義？實(shí)驗(yàn)六 氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中的作用肝性腦病是指由嚴(yán)重的肝疾病引起機(jī)體代謝紊亂，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的精神神經(jīng)綜合癥。氨中毒學(xué)說(shuō)是其主要的發(fā)病機(jī)制。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中的作用，從而加深對(duì)氨中毒學(xué)說(shuō)的理解?！緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中的作用，加深對(duì)氨中毒學(xué)說(shuō)的理解。2、了解肝臟強(qiáng)大的解毒功能。3、學(xué)習(xí)暴露肝臟、肝葉大部切除和十二指腸置管的方法?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔（體重、健康狀況相近的家兔三只）?！舅幤?/p>

55、與器材】1%普魯卡因，1%肝素，2.5%復(fù)方氯化銨溶液，復(fù)方氯化鈉溶液。（后面二種溶液的配制方法見(jiàn)附錄）。兔臺(tái)三個(gè)，兔急性手術(shù)器械三套，帶有三通管的塑料導(dǎo)管三根，5ml、10ml、50ml注射器各三支，7號(hào)針頭數(shù)個(gè)，小圓針三枚，持針器三把，粗、細(xì)絲線各少許，紗布六塊，磅稱一臺(tái)?！緦?shí)驗(yàn)步驟與觀察】1、甲、乙、丙三個(gè)實(shí)驗(yàn)小組分別取甲、乙、丙三只兔稱重，然后仰臥固定于兔臺(tái)，剪去上腹部正中部分的被毛，用1%普魯卡因溶液6-8ml作皮下浸潤(rùn)麻醉，自劍突起作上腹部正中縱向切口，長(zhǎng)約6-8cm，充分暴露肝臟，操作時(shí)如有出血應(yīng)立即結(jié)扎出血。2、左手將肝臟壓向背側(cè)，用圓頭剪小心剪斷肝與橫膈之間的薄膜樣鐮狀韌帶（切勿用銳器尖對(duì)準(zhǔn)膈肌，以防動(dòng)物掙扎時(shí)，刺破膈肌，造成動(dòng)物死亡），再將肝葉上翻、剝離肝、胃間的肝胃韌帶，使肝葉完全游離。3、辯認(rèn)肝臟各葉