細(xì)胞工程練習(xí)題

1、細(xì)胞工程限時(shí)練習(xí)時(shí)間 2017-12-51、如圖是植物組織培養(yǎng)示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）該項(xiàng)技術(shù)所運(yùn)用的基本原理是植物細(xì)胞具有 （2）細(xì)胞全能性的原因： （3）圖中A、B分別代表 過(guò)程，培養(yǎng)基中常常要添加的植物激素是 （4）若要制備人工種子，需要將 經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到；若該技術(shù)用于培育脫毒苗，外植體應(yīng)該選取 ，原因是 （5）若該技術(shù)用于單倍體育種，外植體應(yīng)該選取 ，且需對(duì)幼苗進(jìn)行_ 處理，實(shí)現(xiàn)染色體數(shù)目加倍，得到穩(wěn)定遺傳的植株。2、白菜、甘藍(lán)均為二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18“白菜一甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。如圖是

2、“白菜一甘藍(lán)”的雜交過(guò)程示意圖，回答以下問(wèn)題：（1）為了得到原生質(zhì)體需先用_ _ 方法來(lái)處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán) 細(xì)胞。（2）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有多種，常用的物理方法是_ ，融合完成的標(biāo)志是 ，由雜種細(xì)胞得到白菜一甘藍(lán)還需要經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)，其中需要避光培養(yǎng)的步驟是 （3）如圖通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜一甘藍(lán)”體細(xì)胞染色體數(shù)為 ；通常情況下，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的，原因是_ ，若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代應(yīng)含_ 條染色體。（4）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)得到的雜種植株屬于 倍體。3、如圖1是“白菜-甘藍(lán)”雜種植株的培育過(guò)程（已知兩種植物均為二倍體）。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)

3、問(wèn)題：（1）過(guò)程所用的化學(xué)試劑為 （2）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理是 ，這種育種方法的優(yōu)點(diǎn)是 （3）某同學(xué)提出，用上圖所示方法不能獲得純種，若用白菜和甘藍(lán)的花粉細(xì)胞代替圖 中的體細(xì)胞，再采用上圖所示的過(guò)程即可獲得純種該同學(xué)的方案中有缺陷，請(qǐng)對(duì)該方案加以完善： （4）在上圖1中階段所用培養(yǎng)基中含有植物激素X和植物激素Y。逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖2所示。據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系：當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時(shí)，未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成 當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比 時(shí)，未分化細(xì)胞群分化形成芽。當(dāng)植物激素X與植物激

4、素Y的濃度比 時(shí)，未分化細(xì)胞群分化形成根。（5）圖中將雜種細(xì)胞培育成雜種植株用到了植物的組織培養(yǎng)技術(shù)，請(qǐng)列舉該技術(shù)在作物新品種培育方面的另一用途： 4、（2013年天津理綜）（15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖：據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）過(guò)程所需的酶是_ 。（2）過(guò)程后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的_存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度

5、的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是_。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。（4）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定不是雜種植株的有_。（5）對(duì)雜種植株進(jìn)行 接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株5、科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬?；玖鞒淌牵簭臒晒馑钢蝎@取目的基因，與有關(guān)載體重組，將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中，最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。（1）成纖維

6、細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)分裂到表面相互接觸時(shí)，就會(huì)停止分裂，這種現(xiàn)象叫做細(xì)胞的_ 。 若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，操作時(shí)首先用_ 處理成細(xì)胞懸液。（2）作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在_ 期。供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，常通過(guò)_ （物理方法）激活重組細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。（3）培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為_(kāi) 培養(yǎng)基，但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的_ 等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的主要作用是_ 。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的 。6、如圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物

7、（二倍體）的流程回答下列問(wèn)題：（1）圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為 。 過(guò)程表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用 的方法。代表的過(guò)程是 （2）經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中 的穩(wěn)定性會(huì)降低，因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)，一般選取傳代 代以內(nèi)的細(xì)胞。（3）若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 （4）圖中“代孕個(gè)體”為 的雌性動(dòng)物，移植后的胚胎能在“代孕個(gè)體”子宮中存活的生理基礎(chǔ)是 （5）與克隆羊“多莉（利）”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了 （6）該“流程”中采用了哪 些生物工程技術(shù)： （

8、至少寫(xiě)出三個(gè)）7、（2013年海南單科）（15分） 單純皰疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV-1?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過(guò)程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗_ 的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了_ 反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮腳 中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的_ _細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_ 。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的_ 中使其增殖，再?gòu)腳 中提取、純化獲得。 (

9、3)通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有_ 和 等特性。8、人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷下圖是抗HCG單克隆抗體的制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答：（1）制備單克隆抗體過(guò)程中要用到 和 技術(shù)（2）制備單克隆抗體過(guò)程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于 ，使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng) 的淋巴細(xì)胞，此過(guò)程屬于特異性免疫中的 免疫。（3）融合細(xì)胞經(jīng)HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)目的是 ，克隆化培養(yǎng)并進(jìn)行專一性抗體檢驗(yàn)篩選的目的是 。最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是 。（4）圖中誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的促融劑一般

10、是 （5）培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的條件包括：無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)， ， （6）此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與 特異性結(jié)合，從而診斷早孕。9、（2016年北京理綜）（14分）人感染埃博拉病毒（EV）會(huì)引起致命的出血熱。為了尋找治療EV病的有效方法，中外科學(xué)家進(jìn)行了系列研究。（1）EV表面的糖蛋白（EV-GP）作為_(kāi)刺激機(jī)體產(chǎn)生_性免疫反應(yīng)。（2）科學(xué)家采集了多年前感染EV并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)抗EV-GP抗體的水平。據(jù)圖1，應(yīng)選取_的血液分離記憶B細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。（3）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)圖2，抑制效果最好的兩種單抗是_。（4）EV

11、-GP具有多個(gè)與抗體結(jié)合的位點(diǎn)。為了研究上述兩種單抗（分別稱為A、B）與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)是否相同，可按圖3所示簡(jiǎn)要流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)將圖3中應(yīng)使用的抗體填入下表i、ii、iii、iv處（填“A”或“B”或“無(wú)關(guān)抗體”），完成實(shí)驗(yàn)方案（一種即可）。抗體組別未標(biāo)記抗體熒光標(biāo)記抗體實(shí)驗(yàn)組i_ii_對(duì)照組1iii_iv_對(duì)照組2同ii同ii若A、B與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)不同，與對(duì)照組1、2分別比較，實(shí)驗(yàn)組的熒光值應(yīng)_（5）中國(guó)科學(xué)家用分子結(jié)構(gòu)成像技術(shù)證實(shí)了A、B與EV-GP結(jié)合的位點(diǎn)不同?；谏鲜鱿盗醒芯?，請(qǐng)你為治療EV病毒提供兩種思路_。10、（2014福建理綜）（10分）Rag2基因缺失小鼠不能

12、產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：（1）步驟中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的 。（2）步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到 期時(shí)， 可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。（3）步驟中，需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體。可以根據(jù)Rag2基因的 設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用Hind和Pst限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有 酶的酶切位點(diǎn)。（4）為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的 ，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。11、美國(guó)新希望生殖醫(yī)

13、學(xué)中心張進(jìn)團(tuán)隊(duì)于2016年10月19日在美國(guó)生殖醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)議上正式宣布，世界首個(gè)細(xì)胞核移植“三父母”男嬰已于2016年4月誕生如圖是該男嬰的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）由于女性自然周期產(chǎn)生的卵子太少，捐獻(xiàn)者在取卵前通常需要注射 激素，促使一次有更多的卵泡發(fā)育。（2）過(guò)程中防止多精入卵的屏障有 和卵細(xì)胞膜反應(yīng)。判斷卵子受精的重要標(biāo)志是 （3）上述“三親嬰兒”技術(shù)的好處之一是可避免母親甲 （填“細(xì)胞核”或“細(xì)胞質(zhì)”）中的缺陷基因傳給下一代過(guò)程為 ，過(guò)程為_(kāi) 技術(shù)，對(duì)移植前的胚胎采用ARY-PCR的方法進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期的 細(xì)胞。（4）PCR技術(shù)可用于產(chǎn)前基因診斷，若某雙鏈DN

14、A分子擴(kuò)增過(guò)程中消耗引物分子14個(gè)，則DNA擴(kuò)增了 次。12、根據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟報(bào)告，在最近的10年中，全世界糖尿病的發(fā)生率呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)糖尿病是由多種因素引起的代謝紊亂疾病，已成為繼腫瘤、心腦血管疾病之后威脅人類健康和生命安全的第三位重大疾病如圖是研究人員提出的治療方法請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）核移植的受體細(xì)胞一般選用_ 細(xì)胞。進(jìn)行相關(guān)顯微操作時(shí)，一般用微型吸管一并吸出細(xì)胞核和_ 。（2）細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，除培養(yǎng)液提供必需的營(yíng)養(yǎng)條件、適宜的溫度和pH、氣體環(huán)境外，還需要有無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，為保證無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，在培養(yǎng)液中通常要加入_ 。此外，還應(yīng)定期_ ，以便清除代謝廢物。（3）現(xiàn)有一段人工合成

15、的正常胰島素基因的脫氧核苷酸序列，可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正常胰島素基因，該技術(shù)的原理是 ，將正常胰島素基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞通常采用_ 法。（4）“定向誘導(dǎo)”的本質(zhì)是使重組細(xì)胞B 13、如圖是用兩種不同的方法制備單克隆抗體的流程圖回答下列問(wèn)題：（1）甲圖中從產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠體內(nèi)得到了抗_ 的抗體，說(shuō)明小鼠 體內(nèi)已形成了相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。設(shè)法將B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、_ 、電激等。（2）甲圖中經(jīng)選擇性培養(yǎng)的_ 細(xì)胞，還需進(jìn)行 培養(yǎng)和_ 檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞。（3）乙圖中構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使_ 在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳治下一代將重組

16、DNA導(dǎo)入煙草細(xì)胞采用最多的方法是 （4）乙圖中將煙草細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因煙草植株涉及的最基本技術(shù)是_ ，這項(xiàng)技術(shù)依據(jù)的原理是 細(xì)胞工程限時(shí)練習(xí)答案1、（1）全能性（2）每個(gè)細(xì)胞都具有本物種的全套遺傳信息（3）脫分化、再分化生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素（4）胚狀體、不定芽 莖尖莖尖的病毒極少，甚至無(wú)病毒（5）花藥（或花粉）秋水仙素（或低溫誘導(dǎo)）2、（1）酶解法（2）離心、振動(dòng)、電激 再生出新的細(xì)胞壁 脫分化（3）38 存在生殖隔離 19（4）四3、（1）聚乙二醇（PEG）（2）細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙（3）應(yīng)該對(duì)得到的白菜-甘藍(lán)幼苗用秋水仙素處理后再篩選（4）愈傷組織大于

17、1小于1（5）單倍體育種或突變體的利用（體細(xì)胞誘變育種）4、（1）纖維素酶和果膠酶 （2）葉綠體 （3）保持原生質(zhì)體的完整性 (4）3 (5）黑腐病菌5、（1）接觸抑制 胰蛋白酶或膠原蛋白酶（2）M中（減數(shù)第二次分裂中） 電脈沖（或電激）（3）合成 血清（或血漿） 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH 抗生素6、（1）XX或XY顯微操作（去核法）胚胎移植（2）遺傳物質(zhì)10（3）卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響（4）同種 受體子宮對(duì)外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)（5）已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性（6）核移植 早期胚胎培養(yǎng)（或動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)） 胚胎移植7、（15分） (1) HSV1蛋白（1分） 體

18、液免疫（1分，其他合理答案也給分）脾臟（1分，其他合理答案也給分） 骨髓瘤（1分）無(wú)限增值且產(chǎn)生專一抗體（3分，其他合理答案也給分）(2) 腹腔 腹水（每空2分，共4分）(3) 純度高（2分） 特異性強(qiáng)（2分，其他合理答案也給分）8、（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合（2）抗原 抗體 體液（3） 獲得雜交瘤細(xì)胞 獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖并能分泌特異性抗體（4）聚乙二醇（或PEG）（5）溫度和PH 氣體環(huán)境（6）人絨毛膜促性腺激素（或HCG）9、（1）抗原 特異（2）甲（3）和(4）方案一：B, A, 無(wú)關(guān)抗體，A方案二：A, B, 無(wú)關(guān)抗體，B (5）思路一：?jiǎn)为?dú)或共同使用A、B進(jìn)行治療思路二：