【5A文】醫(yī)院試驗(yàn)室信息管理程序人民醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件人民醫(yī)院質(zhì)量管理體系文件

1、生化標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程臨床標(biāo)本采集程序1 .目的：規(guī)范臨床標(biāo)本的采集，減少實(shí)驗(yàn)前的影響因素。2 .范圍：適用于為協(xié)助疾病診斷和治療而進(jìn)行的臨床生化樣品采集活動(dòng)。臨床樣本包括血液、尿液、胸腹水等各種體液。3 .職責(zé)：臨床生化實(shí)驗(yàn)室：指導(dǎo)臨床各科室正確采集標(biāo)本，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4 .程序：4.1 靜脈血的采集：4.1.1 靜脈血標(biāo)本采集前病人應(yīng)注意的問題：4.1.1.1 避免劇烈運(yùn)動(dòng)，一般主張抽血前24小時(shí)不做劇烈運(yùn)動(dòng)，清晨取血，住院病人可在起床前抽血，匆忙趕到門診的人應(yīng)至少休息15分鐘后取血。4.1.1.2 注意合理飲食。除了急診或其它特殊原因外，一般主張?jiān)诮?2小時(shí)后空腹取血，延長(zhǎng)空腹時(shí)間（

2、饑餓）或餐后血液的化學(xué)成分都會(huì)變化.飲酒對(duì)實(shí)驗(yàn)亦有影響。4.1.1.3 藥物的影響。很多的藥物進(jìn)入人體后可影響某些化驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果，病人在化驗(yàn)前應(yīng)盡可能停服對(duì)實(shí)驗(yàn)有干擾的藥物。4.1.2 靜脈血標(biāo)本采集前醫(yī)生、護(hù)士應(yīng)注意的問題：4.1.2.1 .檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求：檢驗(yàn)申請(qǐng)單用鋼筆或黑筆填寫，使用正楷字，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：受檢者姓名、性別、年齡、臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。4.1.2.2 采用一次性真空采血管，多項(xiàng)化驗(yàn)時(shí)應(yīng)首先將血注入血常規(guī)管，然后是抗凝管（注意要正確使用抗凝劑），最后是非抗凝管。4.1.2.3 采血時(shí)的體位建議以坐位5分

3、鐘后取血為宜，止血帶使用應(yīng)少于1分鐘，以免引起血液淤滯，造成血管內(nèi)溶血或血液某些成分的改變。4.1.2.4 當(dāng)一側(cè)手臂輸液時(shí)應(yīng)從對(duì)側(cè)手臂取血，以降低對(duì)血糖、血鉀等實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。4.1.2.5 血標(biāo)本應(yīng)防止溶血，影響溶血的因素有：使用止血帶時(shí)間過長(zhǎng)；抗凝管使用不當(dāng)或抗凝混合時(shí)過度振蕩；容器污染；血液中泡沫注入試管；標(biāo)本放置時(shí)問過長(zhǎng)；突然受冷或受熱及離心力過大等。4.1.3 靜脈血標(biāo)本采集后實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意的問題：4.1.3.1 標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)分離血清，標(biāo)本應(yīng)盡快檢驗(yàn)。4.1.3.2 標(biāo)本應(yīng)避免光直接照射。4.1.3.3 實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)保持在15C-25C,防止標(biāo)本水分蒸發(fā)，標(biāo)本濃縮。4.1.4 血

4、脂測(cè)定標(biāo)本的采集4.1.4.1 除總膽固醇（）測(cè)定不一定用空腹血外，測(cè)定甘油三脂、脂蛋白與載脂蛋白時(shí)應(yīng)禁食（可少量飲水）至少12小時(shí)后抽血。4.1.4.2 24小時(shí)內(nèi)不飲酒，以免影響甘油三脂水平。4.1.4.3 對(duì)于體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有2周時(shí)間保持平時(shí)的飲食習(xí)慣，近期內(nèi)體重穩(wěn)定，無(wú)急性病、外傷、手術(shù)等意外情況。4.1.4.4 娠后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高，應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后3個(gè)月查血才能反映其基本血脂水平。4.1.4.5 注意有無(wú)應(yīng)用影響血脂的藥物，如降血脂藥、避孕藥、曝嗪類利尿劑、B受體阻滯劑、免疫抑制劑、某些降壓藥、降糖藥、胰島素及其它激素制劑等，在查血以前應(yīng)根據(jù)所用藥物的特性停止用藥數(shù)天或數(shù)周

5、，否則應(yīng)記錄有關(guān)藥物的情況。4.1.4.6 對(duì)體檢對(duì)象及作前瞻性觀察者，應(yīng)注意采血的季節(jié)，因?yàn)檠接屑竟?jié)性變動(dòng)。4.1.5 采血操作步驟：參見靜脈采血程序4.1.6 真空采血管的正確使用：肝功、腎功、血脂、電解質(zhì)、體免1、風(fēng)濕三項(xiàng)、心肌酶譜常規(guī)生化使用紅色管（沒有抗凝劑管）；血氨、糖化血紅蛋白、心肌損傷三項(xiàng)使用紫頭管（EDTA抗凝）。4.2 動(dòng)脈血標(biāo)本采集：用于血?dú)夥治?.2.1 用一次性肝素化注射器，從患者動(dòng)脈取血后，用一塊小橡皮塞針頭以隔絕空氣，并將注射器放在手中雙手來(lái)回搓動(dòng)，充分混勻。4.2.2 抽血過程中出現(xiàn)的小氣泡須在抽血后立即排出，血液不得放置過久，應(yīng)立即送檢，塑料注射器常溫下

6、在采血后15min內(nèi)完成檢測(cè)。若超時(shí)，就必須使用玻璃注射器，抽血后排除氣泡封閉，置于4-8C冰箱或冰水混合物中，可以穩(wěn)定1h。4.2.3 若自制肝素化注射器，應(yīng)避免注入過多的肝素溶液，使測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生偏差。4.2.4 請(qǐng)注明病人體溫、Hb含量、及吸氧流速。4.2.5 采血步驟：參見動(dòng)脈采血程序o4.3 門診常規(guī)生化檢查星期一到星期五抽取靜脈血，周末只采急診項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。4.4 尿液標(biāo)本的留取:4.4.1 24小時(shí)尿液標(biāo)本：4.4.1.1 準(zhǔn)備清潔干燥帶蓋的廣口容器。4.4.1.2 病人于晨7時(shí)將尿全部排盡棄去，然后開時(shí)留尿液，將24小時(shí)內(nèi)歷次所排尿液均留于容器中，包括次日晨7小時(shí)所排最后一次尿。

7、4.4.1.3 測(cè)量尿液總量（ml數(shù)）并記錄在化驗(yàn)單上，將全部尿液混勻后取10-20ml置于清潔干燥容器中立即送檢。4.4.1.4 若天氣炎熱，可根據(jù)檢驗(yàn)要求在第一次尿液倒入后再加入適量防腐劑甲苯（二甲苯）:用于尿液生化檢驗(yàn)，按甲苯0.5ml/100ml尿加入。4.4.1.5 24小時(shí)尿中不能混入異物。4.4.2 常規(guī)尿檢查標(biāo)本：4.4.2.1 使用清潔干燥容器，住院病人以清晨第一次尿?yàn)橹?，門、急診患者可隨時(shí)留取新鮮尿液10-20ml送檢。4.4.2.2 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢。4.4.2.3 尿中不能混入異物。4.5 腦脊液、漿膜腔積液：4.5.1 送檢和檢查必須及時(shí)。4.5.2 為防止凝固，加入1

8、00g/L的EDTA鈉鹽0.1ml可抗凝6ml。5 .相關(guān)文件靜脈采血程序動(dòng)脈采血程序生化室標(biāo)本管理程序不合格標(biāo)本登記表生化室儀器性能評(píng)價(jià)操作程序1 .目的：為了監(jiān)測(cè)生化分析儀的技術(shù)性能，評(píng)價(jià)其精密度、準(zhǔn)確度等是否能達(dá)到有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。2 .范圍：臨床生化分析儀器3 .評(píng)價(jià)指標(biāo)及方法：3.1儀器精密度評(píng)價(jià)：根據(jù)美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）EP5-A文件的要求分為如下步驟：3.1.1 儀器熟習(xí)階段：用5天時(shí)間熟習(xí)儀器的日常操作、調(diào)試、維護(hù)和保養(yǎng)等程序。3.1.2 熟習(xí)文件階段：熟習(xí)NCCLS文件關(guān)于精密度評(píng)價(jià)的內(nèi)容，時(shí)間5天，內(nèi)容包括評(píng)價(jià)目的、要求、方法、試驗(yàn)步驟、統(tǒng)計(jì)處理、注意事項(xiàng)和常規(guī)質(zhì)

9、量控制等。3.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段：根據(jù)文件要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案。包括在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，使用的試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品等等。3.1.4 實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)階段：3.1.4.1 初步的精密度試驗(yàn)：在熟習(xí)和設(shè)計(jì)工作結(jié)束后，進(jìn)行一次批內(nèi)初步試驗(yàn)。方法：連續(xù)測(cè)定一個(gè)適宜的試驗(yàn)物20次。計(jì)算結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。結(jié)果：如發(fā)現(xiàn)結(jié)果與期望結(jié)果嚴(yán)重不符，應(yīng)與制造商聯(lián)系在問題得到解決后再繼續(xù)下一步正式試驗(yàn)。3.1.4.2 正式精密度評(píng)價(jià)試驗(yàn)：根據(jù)設(shè)計(jì)的方案，選擇具有醫(yī)學(xué)決定水平正常和異常兩個(gè)濃度的混合血清樣本，該儀器測(cè)定項(xiàng)目選定以后，對(duì)每個(gè)項(xiàng)目、每個(gè)濃度的樣本進(jìn)行雙份測(cè)定；每天進(jìn)行2批試驗(yàn)，上、下午各測(cè)定一次，每個(gè)項(xiàng)目連續(xù)測(cè)定2

10、0天。每批同時(shí)作質(zhì)控品的測(cè)定。將所測(cè)定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算批內(nèi)、批間精密度和總精密度。3.1.5 結(jié)果計(jì)算：3.1.5.1 批內(nèi)精密度的評(píng)價(jià)按下公式計(jì)算：S批內(nèi)=Ss£陽(yáng)1=總天數(shù)（20天）j=一天內(nèi)的批數(shù)（2批）Giji=重復(fù)1次結(jié)果，j批在第i天Gij2=重復(fù)2次結(jié)果，j批在第i天3.1.5.2 總精密度評(píng)價(jià)按以下公式計(jì)算:E(%i-l21S批間2=A26批內(nèi)2/21 =天數(shù)（2批/天）6口.=第i天第1批的平均結(jié)果（平均重復(fù)2次）Gi2.=第i天第2批的平均結(jié)果（平均重復(fù)2次）t（X,-Kfg=±2N-iS天間2=B2-A2/2I=天數(shù)（2批/天）Gi-二第i天所

11、有結(jié)果的平均值G-=所有結(jié)果的平均值S總2=S批內(nèi)2+S批間2+S天間2=（2B2+A2+Swr2）/23.1.5結(jié)論：批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為美國(guó)臨床試驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)價(jià)允許誤差（TE）的1/4,天間標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為該允許誤差的1/3,對(duì)達(dá)到這樣要求的可認(rèn)為它的隨機(jī)誤差屬于可接受的低水平。3.2儀器準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：根據(jù)美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）EP9-A2文件的要求分為如下步驟：3.2.2熟習(xí)文件階段：用5天時(shí)間熟習(xí)儀器的日常操作、調(diào)試、維護(hù)和保養(yǎng)等程序。熟習(xí)NCCLS文件關(guān)于準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)的內(nèi)容，時(shí)間5天，內(nèi)容包括評(píng)價(jià)目的、要求、方法、試驗(yàn)步驟、統(tǒng)計(jì)處理、注意事項(xiàng)和常規(guī)質(zhì)量控制等。3.2.3設(shè)計(jì)階段

12、：根據(jù)文件要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案。包括在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，使用試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品等等。3.2.4 實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)階段：根據(jù)設(shè)計(jì)的方案，分析系統(tǒng)為評(píng)價(jià)儀器+配套的試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，作為試驗(yàn)方法，對(duì)比系統(tǒng)為對(duì)比儀器+與分析系統(tǒng)相同的試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，作為對(duì)比方法試驗(yàn)，收集分析物濃度在醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)均勻分布的當(dāng)天新鮮血清，不要使用已知對(duì)任一實(shí)驗(yàn)有干擾的樣本（如溶血），測(cè)5A版優(yōu)質(zhì)實(shí)用文檔定從低于參考范圍的低限到高于參考范圍的高限進(jìn)行。每個(gè)項(xiàng)目至少選擇40份臨床樣本，每天測(cè)8個(gè)樣本，將樣本按次序排列，分別在評(píng)價(jià)儀器和對(duì)比儀器上測(cè)試，先測(cè)試一遍，每個(gè)樣本測(cè)雙份，做雙份第2次測(cè)定時(shí)，樣本順序全部倒過來(lái)。第一

13、次序號(hào)為1、2、3、4、5、6、7、8,第2次序號(hào)為8、7、6、5、4、3、2、1連續(xù)測(cè)定5天時(shí)間。將評(píng)價(jià)儀器測(cè)定結(jié)果分別與對(duì)比儀器的測(cè)定結(jié)果作好記錄進(jìn)行比較，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，作預(yù)期偏差分析和相關(guān)回歸分析，并計(jì)算相關(guān)性和準(zhǔn)確度分析。3.2.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的收集和處理：3.2.5.1 對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的初步檢查：設(shè)參比方法測(cè)定結(jié)果為G值，試驗(yàn)方法測(cè)定結(jié)果為y值，40份樣本得到80個(gè)G和y對(duì)應(yīng)結(jié)果。檢查結(jié)果有無(wú)離群值表現(xiàn)。計(jì)算每一樣本每一方法成對(duì)結(jié)果的差值和差值的均值。以4倍的各方法的差值的均值為判斷限，各方法內(nèi)樣本的成對(duì)差值在限值內(nèi),說明雙份測(cè)定結(jié)果符合要求。若原始數(shù)據(jù)的40份樣本結(jié)果

14、，有剔除的數(shù)據(jù)應(yīng)另做實(shí)驗(yàn)補(bǔ)上。若最大差異超過臨床允許誤差，認(rèn)真查找原因，停止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.2.5.2 數(shù)據(jù)作圖：目視判斷作兩張圖。一張散點(diǎn)圖：Y軸：試驗(yàn)方法每樣本雙份測(cè)定的均值；G軸：對(duì)比方法每樣本雙份測(cè)定的均值。另一張作偏差圖：Y軸:每樣本兩種方法雙份測(cè)定的均值差；G軸：對(duì)比方法每樣本雙份測(cè)定的均值，以直線G=0作為水平中線作圖。從這兩張圖中了解線性關(guān)系、有無(wú)明顯的離群點(diǎn)、是否呈恒定變異等情況。若實(shí)驗(yàn)結(jié)果有良好的線性關(guān)系，則可繼續(xù)。若實(shí)驗(yàn)點(diǎn)分布呈非線性關(guān)系，則需尋找修正點(diǎn)修正后方可繼續(xù)進(jìn)行以下數(shù)據(jù)處理。3.2.5.3 相關(guān)性分析：根據(jù)以上得出的r值，用r值檢驗(yàn)G取值范圍是否適當(dāng)。要求r大于或

15、等于0.975（或r2大于或等于0.95）,則認(rèn)為G范圍是適合的；若r小于0.975,再多作實(shí)驗(yàn)，擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍。3.2.5.4 回歸分析：用直線回歸分析方法來(lái)估計(jì)斜率和截距。對(duì)40份樣本，80對(duì)（Gij、Yij）數(shù)據(jù)以回歸式y(tǒng)=bG+a表示這些數(shù)據(jù)的直線趨勢(shì)。理想的結(jié)果b=1、a=0,若bwl、a#0表示兩方法間在測(cè)定樣本時(shí)的系統(tǒng)誤差。根據(jù)臨床使用要求，b接近1,a接近0,可在各個(gè)臨床決定水平濃度Gc處，了解y方法引入后相對(duì)于G方法的系統(tǒng)誤差（SEE）,SE=|（b-1）Gc+a|。3.2.5.5 計(jì)算預(yù)期偏差Bc及其可信區(qū)間：估算測(cè)定項(xiàng)目在給定的醫(yī)學(xué)決定水平Gc處的預(yù)期偏差Bc,按下式計(jì)算：

16、Bc=a+（b-1）Gc,預(yù)期偏差95%的可信區(qū)問，按下式計(jì)算：Mx立皿;±203+32pN工工（七療的穌-2N72-或附.、N-2Bc為預(yù)期偏差SyG為回歸線標(biāo)準(zhǔn)差1.1.1 .6配對(duì)t檢驗(yàn)：試驗(yàn)方法測(cè)得的結(jié)果與對(duì)比方法測(cè)得的結(jié)果作配對(duì)t檢驗(yàn),求出t和p值。若p值大于0.05,說明兩方法測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著性差異，準(zhǔn)確性好，試驗(yàn)方法符合臨床要求，可接受。3.2.6 結(jié)論：以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)對(duì)室間評(píng)估的允許誤差為判斷依據(jù)，由方法學(xué)比較評(píng)估的系統(tǒng)誤差（SE）不大于允許誤差，認(rèn)為該儀器的系統(tǒng)誤差屬于可接受的低水平。3.3儀器攜帶污染率：3.3.1 目的：為了監(jiān)測(cè)測(cè)定含量高的樣本后在測(cè)定含

17、量低的樣本所產(chǎn)生的影響。3.3.2 方法：為避免測(cè)高值標(biāo)本后再測(cè)定低值標(biāo)本時(shí)所產(chǎn)生的影響，在做攜帶污染率試驗(yàn)前，先測(cè)一定數(shù)量標(biāo)本，使測(cè)定數(shù)值達(dá)到穩(wěn)定，然后取一份高值標(biāo)本，連續(xù)測(cè)定3次（ii、i2、i3）,隨后立即取一份低值標(biāo)本連續(xù)測(cè)定3次（ji、j2、j3）003.3.3 .結(jié)果計(jì)算：按Biouqnton法求出攜帶交叉污染率計(jì)算公式，然后算出平均攜帶污染率。攜帶污染率=（jl-j3）/（i3-j3）G100%3.3.4 結(jié)論：平均攜帶污染率根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)要求在一般生化分析儀在2%范圍內(nèi)屬于可接受，全直動(dòng)生化分析儀要求在0.5%范圍內(nèi)可接受。3. 4儀器線性評(píng)價(jià)：3.1.1 目的：評(píng)價(jià)該儀器線性范

18、圍。3.1.2 收集樣本：選擇與實(shí)際測(cè)定的樣本相一致的樣本作為線性評(píng)價(jià)的樣本（如病人的混合血清），用病人的混合樣本加入分析物作為高值樣本或臨界異常高值樣本，用臨床異常樣本選為低值樣本。3.1.3 濃度范圍的確定：以分析項(xiàng)目的線性要求為準(zhǔn)。線性評(píng)價(jià)選擇5個(gè)不同濃度，先選擇低值和高值樣本各一個(gè)，低值樣本為1號(hào)，高值樣本為5號(hào)，兩者3:1混勻?yàn)?號(hào)，等份混勻?yàn)?號(hào)，1:3混勻?yàn)?號(hào)，24號(hào)樣本的濃度按下式計(jì)算：樣本濃度S1V1+C5V5V1+V5C1代表1號(hào)低值樣本濃度V1代表所取1號(hào)低值樣本體積C5代表5號(hào)高值樣本濃度V5代表所取5號(hào)低值樣本體積3.4.4 .評(píng)價(jià)方法：5個(gè)不同濃度的樣本，分析當(dāng)天

19、完成。一天內(nèi)作2次測(cè)定，第一次從低濃度到高濃度樣，每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品作3次重復(fù)測(cè)定；第二次從高濃度到低濃度，每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品作3次重復(fù)測(cè)定。記錄所有的結(jié)果作數(shù)據(jù)處理。3.4.5 結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品的配制稀釋關(guān)系，計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物的濃度，為這些樣品的預(yù)期值。將這些樣品再經(jīng)測(cè)定方法檢測(cè)，得到個(gè)檢測(cè)值。按以上實(shí)驗(yàn)要求，對(duì)每個(gè)樣本作6次重復(fù)測(cè)定，得6個(gè)實(shí)測(cè)值，它們和預(yù)期值形成6對(duì)預(yù)期值、實(shí)測(cè)值。采用直線回歸方程對(duì)數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)，以預(yù)期值作橫坐標(biāo)，實(shí)測(cè)值作縱坐標(biāo)，得直線回歸Y=bG+ao3.4.6 結(jié)論：若b很接近1,a近于0,說明儀器的線性范圍較好，能滿足臨床要求，在線性范圍內(nèi)測(cè)定值和預(yù)期值相

20、關(guān)良好，相關(guān)系數(shù)大于0.975,線性評(píng)價(jià)處于可接受范圍。4.支持性文件NCCLS(EP5-A)文件NCCLS(EP9-A2)文件5A版優(yōu)質(zhì)實(shí)用文檔生化室試劑性能評(píng)價(jià)操作程序1 .目的：為了監(jiān)測(cè)生化試劑的性能指標(biāo)，評(píng)價(jià)試劑分析結(jié)果的準(zhǔn)確性、精密性等，確保檢質(zhì)量。2 .范圍：臨床生化實(shí)驗(yàn)室生化試劑3 .評(píng)價(jià)指標(biāo)及方法：3.1 試劑精密度評(píng)價(jià)：根據(jù)美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）EP5-A文件的要求分為如下步驟：3.1.1 試劑盒熟習(xí)階段：用5天時(shí)間熟習(xí)試劑盒，包括以下內(nèi)容：使用說明書、測(cè)定原理、試劑組成、適用儀器、樣本要求、測(cè)定定驟、計(jì)算公式、注意事項(xiàng)、儲(chǔ)存條件和有效期、參考范圍、參考文獻(xiàn)、

21、生產(chǎn)許可證、衛(wèi)藥準(zhǔn)字號(hào)、生產(chǎn)廠商、通訊地址、生產(chǎn)商電話號(hào)碼。3.1.2 熟習(xí)文件階段：熟習(xí)NCCLS文件關(guān)于精密度評(píng)價(jià)的內(nèi)容，時(shí)間5天，內(nèi)容包括評(píng)價(jià)目的、要求、方法、試驗(yàn)步驟、統(tǒng)計(jì)處理、注意事項(xiàng)和常規(guī)質(zhì)量控制等。3.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段：根據(jù)文件要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案。包括在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，使用的試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。3.1.4 實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)階段：3.1.4.1 初步的精密度試驗(yàn)：在熟習(xí)和設(shè)計(jì)工作結(jié)束后，進(jìn)行一次批內(nèi)初步試驗(yàn)。方法：連續(xù)測(cè)定一個(gè)適宜的試驗(yàn)物20次。計(jì)算結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。結(jié)果：如發(fā)現(xiàn)結(jié)果與期望結(jié)果嚴(yán)重不符，應(yīng)與制造商聯(lián)系在問題得到解決后再繼續(xù)下一步正式試驗(yàn)。3.1.4.2 正式精密度評(píng)

22、價(jià)試驗(yàn)：根據(jù)設(shè)計(jì)的方案，選擇具有醫(yī)學(xué)決定水平正常和異常兩個(gè)濃度的混合血清樣本，該儀器測(cè)定項(xiàng)目選定以后，對(duì)每個(gè)項(xiàng)目、每個(gè)濃度的樣本進(jìn)行雙份測(cè)定；每天進(jìn)行2批試驗(yàn)，上、下午各測(cè)定一次，每個(gè)項(xiàng)目連續(xù)測(cè)定20天。每批同時(shí)作質(zhì)控品的測(cè)定。將所測(cè)定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算批內(nèi)、批間精密度和總精密度。3.1.5 結(jié)果計(jì)算：3.1.5.1 批內(nèi)精密度的評(píng)價(jià)按下公式計(jì)算：tE%-XJC-I卜】S批內(nèi)=、41=總天數(shù)（20天）j=一天內(nèi)的批數(shù)（2批）Gij1=重復(fù)1次結(jié)果，j批在第i大Gij2=重復(fù)2次結(jié)果，j批在第i天3.1.5.2總精密度評(píng)價(jià)按以下公式計(jì)算：f網(wǎng)，-2A=.121S批間2=A26批內(nèi)2/2I=

23、天數(shù)（2批/天）6口.=第i天第1批的平均結(jié)果（平均重復(fù)2次）Gi2.=第i天第2批的平均結(jié)果（平均重復(fù)2次）£(X.-xfS天間2=B2-A2/2I=天數(shù)（2批/天）Gi-二第i天所有結(jié)果的平均值G-=所有結(jié)果的平均值S總2=S批內(nèi)2+S批間2+S天間2=（2B2+A2+Swr2）/23.1.5結(jié)論：批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為美國(guó)臨床試驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)價(jià)允許誤差（TE）的1/4,天間標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為該允許誤差的1/3,對(duì)達(dá)到這樣要求的可認(rèn)為它的隨機(jī)誤差屬于可接受的低水平。3.2試劑準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：根據(jù)美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）EP9-A2文件的要求分為如下步驟：3.2.1 熟習(xí)文件階段：用

24、5天時(shí)間熟習(xí)試劑盒，包括以下內(nèi)容：使用說明書、測(cè)定原理、試劑組成、適用儀器、樣本要求、測(cè)定定驟、計(jì)算公式、注意事項(xiàng)、儲(chǔ)存條件和有效期、參考范圍、參考文獻(xiàn)、生產(chǎn)許可證、衛(wèi)藥準(zhǔn)字號(hào)、生產(chǎn)廠商、通訊地址、生產(chǎn)商電話號(hào)碼。3.2.2 熟習(xí)文件階段：熟習(xí)NCCLS文件關(guān)于準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)的內(nèi)容，時(shí)間5天，內(nèi)容包括評(píng)價(jià)目的、要求、方法、試驗(yàn)步驟、統(tǒng)計(jì)處理、注意事項(xiàng)和常規(guī)質(zhì)量控制等。3.2.3 設(shè)計(jì)階段：根據(jù)文件要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案。包括在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，使用的試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。3.2.4 實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)階段：根據(jù)設(shè)計(jì)的方案，分析系統(tǒng)為評(píng)價(jià)試劑+配套的儀器、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，作為試驗(yàn)方法，對(duì)比系統(tǒng)為對(duì)比試劑+與分析系統(tǒng)相同

25、的儀器、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，作為對(duì)比方法試驗(yàn)，收集分析物濃度在醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)均勻分布的當(dāng)天新鮮血清，不要使用已知對(duì)任一實(shí)驗(yàn)有干擾的樣本（如溶血），測(cè)定從低于參考范圍的低限到高于參考范圍的高限進(jìn)行。每個(gè)項(xiàng)目至少選擇40份臨床樣本，每天測(cè)8個(gè)樣本，將樣本按次序排列，分別在評(píng)價(jià)儀器和對(duì)比儀器上測(cè)試，先測(cè)試一遍，每個(gè)樣本測(cè)雙份，做雙份第2次測(cè)定時(shí)，樣本順序全部倒過來(lái)。第一次序號(hào)為1、2、3、4、5、6、7、8,第2次序號(hào)為8、7、6、5、4、3、2、1。連續(xù)測(cè)定5天時(shí)間。將評(píng)價(jià)儀器測(cè)定結(jié)果分別與對(duì)比儀器的測(cè)定結(jié)果作好記錄進(jìn)行比較，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，作預(yù)期偏差分析和相關(guān)回歸分析，并計(jì)算相

26、關(guān)性和準(zhǔn)確度分析。3.2.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的收集和處理：3.2.5.1 對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的初步檢查：設(shè)參比方法測(cè)定結(jié)果為G值，試驗(yàn)方法測(cè)定結(jié)果為y值，40份樣本得到80個(gè)G和y對(duì)應(yīng)結(jié)果。檢查結(jié)果有無(wú)離群值表現(xiàn)。計(jì)算每一樣本每一方法成對(duì)結(jié)果的差值和差值的均值。以4倍的各方法的差值的均值為判斷限，各方法內(nèi)樣本的成對(duì)差值在限值內(nèi),說明雙份測(cè)定結(jié)果符合要求。若原始數(shù)據(jù)的40份樣本結(jié)果，有剔除的數(shù)據(jù)應(yīng)另做實(shí)驗(yàn)補(bǔ)上。若最大差異超過臨床允許誤差，認(rèn)真查找原因，停止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.2.5.2 數(shù)據(jù)作圖：目視判斷作兩張圖。一張散點(diǎn)圖：Y軸：試驗(yàn)方法每樣本雙份測(cè)定的均值；G軸：對(duì)比方法每樣本雙份測(cè)定的均值。另一張作偏差圖：Y

27、軸:每樣本兩種方法雙份測(cè)定的均值差；G軸：對(duì)比方法每樣本雙份測(cè)定的均值，以直線G=0作為水平中線作圖。從這兩張圖中了解線性關(guān)系、有無(wú)明顯的離群點(diǎn)、5A版優(yōu)質(zhì)實(shí)用文檔是否呈恒定變異等情況。若實(shí)驗(yàn)結(jié)果有良好的線性關(guān)系，則可繼續(xù)。若實(shí)驗(yàn)點(diǎn)分布呈非線性關(guān)系，則需尋找修正點(diǎn)修正后方可繼續(xù)進(jìn)行以下數(shù)據(jù)處理。3.2.5.3 相關(guān)性分析：根據(jù)以上得出的r值，用r值檢驗(yàn)G取值范圍是否適當(dāng)。要求r大于或等于0.975（或r2大于或等于0.95）,則認(rèn)為G范圍是適合的；若r小于0.975,再多作實(shí)驗(yàn)，擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍。3.2.5.4 回歸分析：用直線回歸分析方法來(lái)估計(jì)斜率和截距。對(duì)40份樣本，80對(duì)（Gij、Yij）數(shù)

28、據(jù)以回歸式y(tǒng)=bG+a表示這些數(shù)據(jù)的直線趨勢(shì)。理想的結(jié)果b=1、a=0,若bwl、a#0表示兩方法間在測(cè)定樣本時(shí)的系統(tǒng)誤差。根據(jù)臨床使用要求，b接近1,a接近0,可在各個(gè)臨床決定水平濃度Gc處，了解y方法引入后相對(duì)于G方法的系統(tǒng)誤差（SEE）,SE=|（b-1）Gc+a|。3.2.5.5 計(jì)算預(yù)期偏差Bc及其可信區(qū)間：估算測(cè)定項(xiàng)目在給定的醫(yī)學(xué)決定水平Gc處的預(yù)期偏差Bc,按下式計(jì)算：Bc=a+（b-1）Gc,預(yù)期偏差95%的可信區(qū)問，按下式計(jì)算：但3或即=立土2除”居十段可_1%刀=g廠一）口國(guó)收市二i或的"VN-2Bc為預(yù)期偏差SyG為回歸線標(biāo)準(zhǔn)差1.1.1 .6配對(duì)t檢驗(yàn)：試驗(yàn)方

29、法測(cè)得的結(jié)果與對(duì)比方法測(cè)得的結(jié)果作配對(duì)t檢驗(yàn),求出t和p值。若p值大于0.05,說明兩方法測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著性差異，準(zhǔn)確性好，試驗(yàn)方法符合臨床要求，可接受。3.2.6 結(jié)論：以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)對(duì)室間評(píng)估的允許誤差為判斷依據(jù)，由方法學(xué)比較評(píng)估的系統(tǒng)誤差（SE）不大于允許誤差，認(rèn)為該儀器的系統(tǒng)誤差屬于可接受的低水平。3.3試劑穩(wěn)定性評(píng)價(jià)：3.3.1 目的：觀察試劑的穩(wěn)定性3.3.2 方法：將試劑密閉避光貯存在28c和放在室溫下25C,用該試劑（如凍干試劑復(fù)溶后）在不同時(shí)間（開瓶后、復(fù)溶后和在儀器試劑倉(cāng)內(nèi)）分別測(cè)定穩(wěn)定性好、均勻性好的樣品（如質(zhì)控血清）各參數(shù)，穩(wěn)定觀察12個(gè)月，記錄測(cè)定結(jié)果。3.3

30、.3 根據(jù)測(cè)定結(jié)果，計(jì)算出均值、cv值，根據(jù)時(shí)間和測(cè)定結(jié)果相關(guān)性分析和方差分析來(lái)分析試劑的穩(wěn)定性。3.3.4 結(jié)論：根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)要求，試劑2c8c避光密閉儲(chǔ)存穩(wěn)定12個(gè)月，開蓋試劑在試劑倉(cāng)內(nèi)至少可穩(wěn)定2周。3. 4試劑線性評(píng)價(jià)：3.1.1 目的：它是評(píng)價(jià)該試劑檢測(cè)線性范圍。3.1.2 收集樣本：作為線性評(píng)價(jià)的樣本應(yīng)與實(shí)際測(cè)定的樣本相一致（如血清），可用病人的混合樣本加入分析物作為高值樣本或臨異常高值樣本，用臨床異常低值樣本選為低值樣本。3.1.3 濃度范圍的確定：應(yīng)以分析項(xiàng)目的線性要求為準(zhǔn)。線性評(píng)價(jià)應(yīng)有5個(gè)不同濃度，可選擇低值和高值樣本各一個(gè)，低值樣本為1號(hào)，高值樣本為5號(hào)，然后兩者3:1混勻

31、為2號(hào)，等份混勻?yàn)?號(hào)，1:3混勻?yàn)?號(hào)，24號(hào)樣本的濃度按下式計(jì)算：樣本濃度二V1+VEC1代表1號(hào)低值樣本濃度V1代表所取1號(hào)低值樣本體積C5代表5號(hào)高值樣本濃度V5代表所取5號(hào)低值樣本體積3.1.4 評(píng)價(jià)方法：5個(gè)不同濃度的樣本，分析要求當(dāng)天完成。建議一天內(nèi)作2次測(cè)定，第一次從低濃度到高濃度，每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品作3次重復(fù)測(cè)定；第二次從高濃度到低濃度，每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品作3次重復(fù)測(cè)定。綜合所有的結(jié)果作數(shù)據(jù)處理。3.1.5 結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品的配制稀釋關(guān)系，可以計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物的濃度，為這些樣品的預(yù)期值。將這些樣品再經(jīng)測(cè)定方法檢測(cè)，得到檢測(cè)值。按以上實(shí)驗(yàn)要求，對(duì)每個(gè)樣品作6次重復(fù)測(cè)

32、定，得6個(gè)實(shí)測(cè)值，它們和預(yù)期值形成6對(duì)預(yù)期值、實(shí)測(cè)值。采用直線回歸方式采用直線回歸方程對(duì)數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)，以預(yù)期值作橫坐標(biāo)，實(shí)測(cè)值作縱坐標(biāo)，得直線回歸Y=bG+a。3.1.6 結(jié)論：若b很接近1,a近于0,說明試劑的線性范圍較好，能滿足臨床要求，在線性范圍內(nèi)測(cè)定值和預(yù)期值相關(guān)良好，相關(guān)系數(shù)大于0.975,線性評(píng)價(jià)處于可接受范圍。3. 5試劑干擾試驗(yàn)：3.1.1 目的：評(píng)價(jià)試劑盒是否受非分析物的影響及影響程度。3.1.2 干擾物的試驗(yàn)濃度：內(nèi)源性干擾物應(yīng)為臨床樣本中可能出現(xiàn)的最高濃度。藥物和某些代謝產(chǎn)物以治療量10倍的濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3.1.3 確定干擾的標(biāo)準(zhǔn)：以配對(duì)t檢驗(yàn)0.05判斷允許范圍。3.1.

33、4 實(shí)驗(yàn)方法：采用配對(duì)t檢驗(yàn)，選擇一份樣本一分為二，一份加入凝似干擾物作為測(cè)定樣本（T）,另一分不加作為對(duì)照樣本（C）,如加入的干擾物為液體，對(duì)照樣本應(yīng)加同樣體積的水，配制成5種濃度，最高濃度樣本為T,最低濃度樣本為C,5個(gè)系列濃度為：C、（3C+T）/4、（C+T）/2、（C+3T）/4,做系列干擾值=Gt-Gc,列出所有結(jié)果供分析，計(jì)算95%可信區(qū)間:%95可信范圍=±1.96*25S為方法批內(nèi)不精密度n為重復(fù)次數(shù)定量扁!，用樣僅干擾物濃度不一,其它均相同，所有樣品一起隨機(jī)排列在一批內(nèi)進(jìn)行，測(cè)定按下列順序C1、T1、C2、T2、C3、T3、C4、T4:Cn、Tn,重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)

34、算平均值。3.1.5 干擾分析：對(duì)測(cè)定和對(duì)照組各自進(jìn)行G和S的計(jì)算3：5：6配對(duì)t檢驗(yàn)：測(cè)定樣本和對(duì)照樣本作配對(duì)t檢驗(yàn)，算出t值和p值大小。若p值大于0.05,說明無(wú)顯著干擾，該試劑不受非分析物的影響；若p值小于0.01,說明有顯著干擾，該試劑受非分析物的影響。3.5.7 結(jié)論：干擾值在對(duì)照組1.96s（95%可信限）范圍內(nèi)為無(wú)顯著干擾，可滿足臨床實(shí)驗(yàn)要求，若該試劑受非分析物干擾，可根據(jù)不同濃度測(cè)定的干擾值作直線回歸，分析濃度和干擾的關(guān)系，最佳可信區(qū)間在干擾物濃度的中間水平。3.6試劑回收試驗(yàn)：3.6.1 目的：是測(cè)定比例系統(tǒng)誤差。樣品的制備：制備樣品時(shí)，樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)液后，總的濃度必在測(cè)定方

35、法的分析范圍內(nèi)，制作高、中、低不同濃度的樣本作回收試驗(yàn)，計(jì)算平均回收率。加入標(biāo)準(zhǔn)液后，實(shí)驗(yàn)樣品中被測(cè)濃度要達(dá)到醫(yī)學(xué)上具有決定意義的濃度。加入標(biāo)準(zhǔn)液的體積在整個(gè)樣品中要少，在10%以內(nèi)。低值基礎(chǔ)樣品：血清2ml+蒸儲(chǔ)水0.1ml;高值分析樣品：血清2ml+高值分析純品標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml;中值分析樣品：血清2ml+中值分析純品標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml.3.6.3 方法：將被分析的純品標(biāo)準(zhǔn)液加入病人樣品中，制成高、中、低不同濃度5A版優(yōu)質(zhì)實(shí)用文檔的分析樣品，然后用兩種分析方法分別測(cè)定3次，計(jì)算均值，根據(jù)兩者測(cè)定結(jié)果的差值計(jì)算回收率。3.6.4 回收率的計(jì)算：標(biāo)準(zhǔn)濃度x標(biāo)準(zhǔn)液量(ml)加入濃度=血清量ml+標(biāo)準(zhǔn)

36、液量ml回收濃度=分析樣品測(cè)得濃度一基礎(chǔ)樣品測(cè)得濃度回收濃度回收率()=X100%加入濃度3.6.5 結(jié)論：理想的結(jié)果期望回收率達(dá)到100%，但實(shí)際測(cè)得的回收率有一定的比例誤差，根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)要求，平均回收率的標(biāo)準(zhǔn)誤差小于允許誤差，可接受。4.支持性文件NCCLS(EP5-A)文件NCCLS(EP9-A2)文件5A版優(yōu)質(zhì)實(shí)用文檔生化室校準(zhǔn)程序1 .目的1.1 保證測(cè)定值的誤差在允許范圍內(nèi)；1.2 實(shí)現(xiàn)測(cè)定結(jié)果的溯源性。2 .范圍適用于AU2700、強(qiáng)生干式(VTROS350)全自動(dòng)生化分析儀。3 .職責(zé)3.1 操作者：負(fù)責(zé)校準(zhǔn)的實(shí)施和記錄。3.2 室組長(zhǎng)：負(fù)責(zé)安排校準(zhǔn)，檢查校準(zhǔn)記錄。3.3 質(zhì)量

37、負(fù)責(zé)人：負(fù)責(zé)檢查并監(jiān)督校準(zhǔn)記錄。4 .名詞概念4.1 校準(zhǔn)：在一定條件下的一系列操作來(lái)確定檢測(cè)儀器和檢測(cè)系統(tǒng)所指示的量值，或者某一物質(zhì)，或者參考物質(zhì)所代表的值，與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)所認(rèn)識(shí)量之間的關(guān)系。4.2 校準(zhǔn)物/校準(zhǔn)品：準(zhǔn)備用于建立一個(gè)或多個(gè)定量值的任何物質(zhì)。4.3 溯源性：通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的真值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的一種特性。5 .校準(zhǔn)程序5.1 儀器校準(zhǔn)條件：5.1.1 儀器光路系統(tǒng)經(jīng)過光路保養(yǎng)或更換光源等重要部件后。5.1.2 儀器經(jīng)過大保養(yǎng)后。5.1.3 挪動(dòng)儀器的安裝地點(diǎn)。5.1.4 更換試劑批號(hào)。5.1.5 室

38、內(nèi)質(zhì)控失控。5.2 校準(zhǔn)品5.2.1 校準(zhǔn)品種類：見附表。5.2.2 AU2700校準(zhǔn)品準(zhǔn)備：5.2.2.1 校準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：具體見附表，生化采用的定標(biāo)品種類相對(duì)較多，有干粉的、液體的。干粉的定標(biāo)品按照其要求進(jìn)行復(fù)溶，復(fù)溶后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行定標(biāo)，所剩的分裝凍存，穩(wěn)定的項(xiàng)目可以使用凍存的進(jìn)行定標(biāo)，不穩(wěn)定的項(xiàng)目可以使用其對(duì)結(jié)果進(jìn)行粗略的驗(yàn)證。液體的標(biāo)準(zhǔn)品在按照其規(guī)定保存溫度中進(jìn)行保存至效期，每次定標(biāo)前需按規(guī)定于室溫中放置相應(yīng)時(shí)間，以保證校準(zhǔn)結(jié)果的可靠性。失效的標(biāo)準(zhǔn)品不能用于定標(biāo)校正。5.2.2.2 定標(biāo)液的位置：藍(lán)色樣本架的1號(hào)位置放蒸儲(chǔ)水，黃色架子用于試劑項(xiàng)目定標(biāo)架，各個(gè)項(xiàng)目的位置由專業(yè)組長(zhǎng)或質(zhì)量

39、管理員設(shè)置，具體參見附表，如需改變定標(biāo)品或定標(biāo)位置需經(jīng)過專業(yè)組長(zhǎng)決定。5.2.3 強(qiáng)生干式生化儀(VTROS350)校準(zhǔn)品準(zhǔn)備5.2.3.1 現(xiàn)在我室采用的是強(qiáng)生配套的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定標(biāo)，總共包括四套標(biāo)準(zhǔn)品，分別為KIT1(BUN,Ca,CREA,GLU,Mg,PHOS,URIC)、KIT2(CHOL,CL-,ECO2,K+,Na+,TRIG)、KIT3(ALKP,ALT,AMYL,AST,GGT)、KIT4(ALB,BuBc,TBIL,TP)。5.2.3.2 強(qiáng)生配套定標(biāo)品是干粉試劑，于其配套的5ml的緩沖液中取3ml復(fù)溶,復(fù)溶后于儀器上編程，按照儀器編程指定的位置放上定標(biāo)品，進(jìn)行定標(biāo)。5.2.

40、4 工作程序：參見各儀器和項(xiàng)目的SOP文件。5.2.5 校準(zhǔn)的有效性檢查5.2.5.1 強(qiáng)生干式生化儀檢查定標(biāo)結(jié)果有無(wú)報(bào)警，然后根據(jù)報(bào)警提示檢查定標(biāo)是否有效。AU2700需要觀察定標(biāo)曲線和定標(biāo)因子是否與以前的定標(biāo)結(jié)果一致。5.2.5.2 通過測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控來(lái)判斷和分析校準(zhǔn)結(jié)果是否有效。如果室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控，說明校準(zhǔn)成功。如果質(zhì)控失控尋找失控原因，如果為定標(biāo)失敗，按照定標(biāo)時(shí)報(bào)處理。5.2.6 校準(zhǔn)失敗的處理首先分析、確認(rèn)并記錄校準(zhǔn)失敗原因，按下列步驟排除異常情況后，再校準(zhǔn)。5.2.6.1 檢查試劑：試劑狀態(tài)（顏色、沉淀物）、批號(hào)、有效期、保存條件。5.2.6.2 校準(zhǔn)品：復(fù)溶狀態(tài)、保存時(shí)間、保存條

41、件及其有效期。5.2.6.3 儀器原因：光路（燈泡壽命）、比色杯及保養(yǎng)情況。6 .相關(guān)文件AU2700操作規(guī)程、強(qiáng)生干式生化VTROS350操作規(guī)程、AU2700校準(zhǔn)記錄表、強(qiáng)生干式生化VTROS350校準(zhǔn)記錄表附表校準(zhǔn)品種類及使用儀器項(xiàng)目校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品準(zhǔn)備校準(zhǔn)品位置AU2700AST、ALT、TP、ALB、TG、CHOL、UA、CREA、BUN、中能復(fù)合標(biāo)準(zhǔn)品3mL蒸儲(chǔ)水復(fù)溶，分裝后-20C保存黃色架8號(hào)位置CA、P、MG、TBA、C3、C4、Ig類、CO2各試劑配套標(biāo)準(zhǔn)品液體，2-8C保存黃色架相應(yīng)位置TBIL、DBIL、HDL-C、LDL-C配套標(biāo)準(zhǔn)品1mL蒸儲(chǔ)水復(fù)溶，復(fù)溶后，24h內(nèi)使用

42、黃色架相應(yīng)位置Lp-a、APOA、APOB配套定標(biāo)液1ml蒸儲(chǔ)水復(fù)溶，然后對(duì)比稀釋，總共6點(diǎn)。黃色架相應(yīng)位置ALP、GGT、LDH、HBDH、CK無(wú)定標(biāo)液使用廠家給予的酶學(xué)反應(yīng)常數(shù)強(qiáng)生干式生化儀BUN,Ca,CREA,GLU,Mg,PHOS,URIC強(qiáng)生原裝定標(biāo)液KIT13m稀釋液復(fù)溶，分裝后-20C保存儀器自動(dòng)生成CHOL,CL-,ECO2,K+,Na+,TRIG強(qiáng)生原裝定標(biāo)液KIT23m稀釋液復(fù)溶，分裝后-20C保存儀器自動(dòng)生成ALKP,ALT,AMYL,AST,GGT強(qiáng)生原裝定標(biāo)液KIT33m稀釋液復(fù)溶，分裝后-20C保存儀器自動(dòng)生成ALB,BuBc,TBIL,TP強(qiáng)生原裝定標(biāo)液KIT4

43、3m稀釋液復(fù)溶，分裝后-20C保存儀器自動(dòng)生成生化室室內(nèi)質(zhì)控操作程序1室內(nèi)質(zhì)控的目的室內(nèi)質(zhì)控是由實(shí)驗(yàn)室的工作人員采用一系列統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法，連續(xù)地評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室測(cè)定工作的可靠程度，判斷檢驗(yàn)報(bào)告是否可發(fā)出的過程。室內(nèi)質(zhì)控的目的是檢測(cè)、控制本室測(cè)定工作的精密度，并檢測(cè)準(zhǔn)確度的改變，提高常規(guī)測(cè)定工作的批問、批內(nèi)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的一致性。2、室內(nèi)質(zhì)控的適用范圍：適用于我室開展的所有生化檢測(cè)項(xiàng)目。3、職責(zé)3.1 操作者：負(fù)責(zé)室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)施和記錄。3.2 室組長(zhǎng)：負(fù)責(zé)質(zhì)控計(jì)劃制定及失控時(shí)糾正措施及改進(jìn)，負(fù)責(zé)審核。3.3 質(zhì)量監(jiān)督員：監(jiān)督本組內(nèi)是否按照程序文件和作業(yè)指導(dǎo)書有關(guān)檢驗(yàn)過程質(zhì)量控制程序的要求進(jìn)行。3.4 質(zhì)

44、量負(fù)責(zé)人：負(fù)責(zé)審核、批準(zhǔn)和發(fā)布本程序文件；負(fù)責(zé)對(duì)室組長(zhǎng)匯報(bào)的本文件操作和質(zhì)量管理情況做出評(píng)價(jià)和決策。4.名詞定義4.1 室內(nèi)質(zhì)控：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)為達(dá)到質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動(dòng)。4.2 控制限：判斷質(zhì)控品測(cè)定結(jié)果的允許范圍的上、下限，通常以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)表小04.3 質(zhì)控規(guī)則：從質(zhì)控品的測(cè)定數(shù)據(jù)分析該批操作是否合格的判斷標(biāo)準(zhǔn)。4.4 精密度：在一定條件下進(jìn)行多次測(cè)定時(shí)，所得測(cè)定結(jié)果之間的符合程度，通常表示測(cè)量結(jié)果中隨機(jī)誤差的大小。4.5 偏差：指測(cè)定結(jié)果與真值的偏離程度。4.6 準(zhǔn)確度：是測(cè)量結(jié)果中系統(tǒng)誤差與隨機(jī)誤差的綜合，表示測(cè)量結(jié)果與真值的一致程度。4.7 變異系數(shù)：測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差與平均值的百分比

45、值，通常用CV%表示。4.8 在控：質(zhì)控結(jié)果在控制限之內(nèi)。4.9 失控：質(zhì)控結(jié)果在控制限之外。5、開展室內(nèi)質(zhì)控前的準(zhǔn)備工作：具體參見生化室檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量保證管理程序6、室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)際操作6.1、 質(zhì)控品6.1.1、 質(zhì)控品的選擇質(zhì)控品是保證質(zhì)控工作的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。根據(jù)質(zhì)控品物理性狀可有凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清等；根據(jù)有無(wú)測(cè)定值可有定值質(zhì)控品和非定值質(zhì)控品。實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況選用以上任何一種質(zhì)控品作為室內(nèi)質(zhì)控品。我們根據(jù)我室具體情況選擇使用朗道公司生產(chǎn)的凍干質(zhì)控品，本質(zhì)控品的穩(wěn)定期較長(zhǎng)，復(fù)溶后較穩(wěn)定，2-8C時(shí)不少于24小時(shí)，-20C時(shí)不少于20天,其有效期在1年以上。衛(wèi)生部室內(nèi)質(zhì)控品

46、：為凍干粉狀。作室內(nèi)質(zhì)控室問比對(duì)。自制質(zhì)控物：糖化血清蛋白、糖化血紅蛋白，將病人剩余的標(biāo)本(除外溶血、脂血、黃疸)混合在一起，分裝后-20。C保存。6.1.2、 質(zhì)控品的正確使用與保存在使用和保管質(zhì)控品時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)方面：(1)嚴(yán)格按質(zhì)控品說明書操作；(2)凍干質(zhì)控品的復(fù)溶要確保所用溶劑的質(zhì)量；(3)凍干質(zhì)控品復(fù)溶時(shí)所加溶劑的量要準(zhǔn)確，并盡量保持每次加入量的一致性；(4)凍干質(zhì)控品復(fù)溶時(shí)應(yīng)輕輕搖勻，使內(nèi)容物完全溶解，切忌劇烈振搖；(5)質(zhì)控品應(yīng)嚴(yán)格按使用說明書規(guī)定的方法保存，不使用超過保質(zhì)期的質(zhì)控品；(6)質(zhì)控品要在與患者標(biāo)本同樣測(cè)定條件下進(jìn)行測(cè)定。6.1.3、 我室具體使用的質(zhì)控品6.1.

47、3.1、 常規(guī)及急診生化項(xiàng)目：使用柏樂液體質(zhì)控品，包含項(xiàng)目：肝功能全套、腎功能全套、電解質(zhì)、血脂全套、體液免疫、風(fēng)濕檢查、心肌酶譜、胰腺檢查等所有項(xiàng)目，其中糖化血清蛋白自制混合血清。AU2700采用雙水平質(zhì)控(包括45612/45613),BS-400采用單水平質(zhì)控(45613,出現(xiàn)失控時(shí)，同時(shí)檢測(cè)45612),VITROS350采用單水平質(zhì)控(45612,同樣在定標(biāo)后及失控時(shí)需要同時(shí)測(cè)定45613)。6.1.3.2、 特殊檢測(cè)項(xiàng)目：血?dú)夥治鍪褂肎emPremier3000血?dú)夥治鰞x代理廠家提供的配套質(zhì)控品，雙水平；糖化血紅蛋白使用PrimusUltraII糖化分析儀廠家提供的指控品，雙水平；

48、心肌損傷三項(xiàng)及腦納肽前體使用ELC20XX發(fā)光分析儀代理廠家提供的配套質(zhì)控品，雙水平。6.2、 設(shè)定質(zhì)控圖的中心線(均值)在開始室內(nèi)質(zhì)控時(shí)，首先要設(shè)定質(zhì)控品的靶值。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)新批號(hào)的質(zhì)控品的各個(gè)測(cè)定項(xiàng)目自行確定靶值。靶值必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用自己現(xiàn)行的測(cè)定方法進(jìn)行確定。定值質(zhì)控品的標(biāo)定值只能做為確定靶值的參考。6.2.1、 暫定靶值的設(shè)定為了確定靶值，新批號(hào)的質(zhì)控品應(yīng)與當(dāng)前使用的質(zhì)控品一起進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)20或更多獨(dú)立批獲得的至少20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行離群值檢驗(yàn)（剔除超過3s外的數(shù)據(jù)），計(jì)算出平均數(shù)，作為暫定靶值。以此暫定靶值作為下一個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控圖的靶值進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控；一個(gè)月結(jié)束后，將該月的

49、在控結(jié)果與前20個(gè)質(zhì)控測(cè)定結(jié)果匯集在一起，計(jì)算累積平均數(shù)（第一個(gè)月），以此累積的平均數(shù)做為下一個(gè)月質(zhì)控圖的靶值。重復(fù)上述操作過程，連續(xù)三至五個(gè)月。6.2.2、 常用靶值的設(shè)立以最初20個(gè)數(shù)據(jù)和三至五個(gè)月在控?cái)?shù)據(jù)匯集的所有數(shù)據(jù)計(jì)算的累積平均數(shù)作為質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用靶值，并以此作為以后室內(nèi)質(zhì)控圖的平均數(shù)。對(duì)個(gè)別在有效期內(nèi)濃度水平不斷變化的項(xiàng)目，則需不斷調(diào)整靶值。6.3、 設(shè)定控制限對(duì)新批號(hào)質(zhì)控品應(yīng)確立控制限，控制限通常是以標(biāo)準(zhǔn)差倍數(shù)表示。6.3.1、 暫定標(biāo)準(zhǔn)差的設(shè)定為了確定標(biāo)準(zhǔn)差，新批號(hào)的質(zhì)控品應(yīng)與當(dāng)前使用的質(zhì)控品一起進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)20或更多獨(dú)立批獲得的至少20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)差，并

50、作為暫定標(biāo)準(zhǔn)差。以此暫定標(biāo)準(zhǔn)差作為下一個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控；一個(gè)月結(jié)束后，將該月的在控結(jié)果與前20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果匯集在一起，計(jì)算累積標(biāo)準(zhǔn)差（第一個(gè)月），以此累積的標(biāo)準(zhǔn)差作為下一個(gè)月質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差。重復(fù)上述操作過程，連續(xù)三至五個(gè)月。6.3.2、 常用標(biāo)準(zhǔn)差的設(shè)定以最初20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果和三至五個(gè)月在控質(zhì)控結(jié)果匯集的所有數(shù)據(jù)計(jì)算的累積標(biāo)準(zhǔn)差作為質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用標(biāo)準(zhǔn)差，并以此作為以后室內(nèi)質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差。6.3.3、 控制限的設(shè)定控制限通常是以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)表示。臨床實(shí)驗(yàn)室不同項(xiàng)目（定量測(cè)定）的控制限的設(shè)定要根據(jù)其采用的控制規(guī)則來(lái)決定。6.4、 特殊情況的處理（Grubbs法）對(duì)于某些

51、不是每天開展的項(xiàng)目、有效期較短的試劑盒的項(xiàng)目，如我室現(xiàn)在所檢測(cè)的糖化血清蛋白及糖化血紅蛋白等，用上述方法計(jì)算獲得平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差有很大的難度。因此我們采用Grubbs法，只需連續(xù)測(cè)定3次，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)和控制。具體計(jì)算方法如下：（1）計(jì)算出測(cè)定結(jié)果（至少3次）的平均值（G）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）0（2）計(jì)算SI上限值和SI下限值：SI上限=（G最大值-G）/sSI下限=（G-G最小值）/s（3）查SI值表，將SI上限和SI下限與SI值表中的數(shù)值進(jìn)行比較SI值表:Nn3sn2sNn3sn2s31.151.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.

52、662.3761.941.82152.702.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.53當(dāng)SI上限和SI下限值n2s時(shí)，表示處于控制范圍內(nèi)，可以繼續(xù)進(jìn)行測(cè)定，并重復(fù)以上計(jì)算；當(dāng)SI上限和SI下限有一值處于n2s和n3s值之間時(shí)，說明該值在2s3s范圍，處于“警告”狀態(tài)；當(dāng)SI上限和SI下限值有一值n3s時(shí)，說明該值已在3s范圍之外，屬“失控”。數(shù)字處于“警告”和“失控”狀態(tài)應(yīng)舍去，重新測(cè)定該項(xiàng)質(zhì)控品和病人樣本。舍去的只是失控的這次數(shù)值，其它

53、次測(cè)定值仍可繼續(xù)使用。當(dāng)檢測(cè)的數(shù)據(jù)超過20個(gè)以后，可轉(zhuǎn)入使用常規(guī)的質(zhì)控方法進(jìn)行質(zhì)控。6.5、 更換質(zhì)控品擬更換新批號(hào)的質(zhì)控品時(shí)，應(yīng)在"舊"批號(hào)質(zhì)控品使用結(jié)束前與"舊"批號(hào)質(zhì)控品一起測(cè)定，重復(fù)4.1和4.2的過程，設(shè)立新的靶值和控制限。6.6、 繪制質(zhì)控圖及記錄質(zhì)控結(jié)果根據(jù)質(zhì)控品的靶值和控制限繪制Levey-Jennings控制圖，將原始質(zhì)控結(jié)果記錄在質(zhì)控圖表上。保留打印的原始質(zhì)控記錄。6.7、 質(zhì)控方法（規(guī)則）的應(yīng)用將設(shè)計(jì)的質(zhì)控規(guī)則應(yīng)用于質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，判斷每一分析批是在控還是失控。我室根據(jù)具體情況現(xiàn)使用12s/13s/22S/R4S。6.8、 質(zhì)控品的測(cè)定6

54、.8.1、 質(zhì)控品準(zhǔn)備：將分裝好的朗道質(zhì)控品或自制質(zhì)控品從-20C低溫冰箱取出后，室溫平衡30分鐘。6.8.2、 質(zhì)控品檢測(cè)：6.8.2.1、 AU2700檢測(cè)系統(tǒng)：將柏樂質(zhì)控品兩個(gè)水平質(zhì)控物直接放在綠色樣本架上1至2號(hào)位，上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。自制質(zhì)控品根據(jù)具體情況確定編號(hào)，使用白色架子進(jìn)行檢測(cè)或則設(shè)定于綠色架子上進(jìn)行檢測(cè)。質(zhì)控檢測(cè)頻率為每天檢測(cè)。6.8.2.2、 VITOR350強(qiáng)生干化檢測(cè)系統(tǒng)：將柏樂質(zhì)控品正常值水平（在定標(biāo)或則失控時(shí)使用兩個(gè)水平）置于樣本架上，如常規(guī)標(biāo)本樣上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。質(zhì)控物對(duì)應(yīng)的樣本編號(hào)分別為8881-8882、9991-9992、612-613。啟動(dòng)儀器進(jìn)行檢測(cè)。質(zhì)控頻率為

55、每天檢測(cè)。6.8.2.3、 邁瑞B(yǎng)S400全自動(dòng)生化分析儀：將柏樂質(zhì)控品異常值水平（在定標(biāo)或則失控時(shí)使用兩個(gè)水平）置于樣品盤上所設(shè)定的位置，申請(qǐng)質(zhì)控測(cè)定。質(zhì)控頻率為開機(jī)檢測(cè)就必須進(jìn)行質(zhì)控測(cè)定。6.8.2.4、 GemPremier3000血?dú)夥治鰞x：先把雙水平質(zhì)控品取出放于水浴箱中溫育30分鐘，使溫度接近37C,然后把質(zhì)控品按照樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)后數(shù)據(jù)使用LIS操作平臺(tái)轉(zhuǎn)換為質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。質(zhì)控頻率為試劑包更換、試劑包報(bào)警堵塞后、正常情況下每周兩次。6.8.2.5、 PrimusUltraII糖化分析儀：把雙水平質(zhì)控用稀釋液1:200稀釋溶解，然后放于質(zhì)控位1、2,選擇質(zhì)控檢測(cè)即可。質(zhì)控頻率為柱子更換、儀器故障維護(hù)后、正常情況下每周兩次質(zhì)控。6.8.2.6、 ELC20XX發(fā)光分析儀：兩種方式進(jìn)行質(zhì)控測(cè)定，一為掃描質(zhì)控條碼，直接把質(zhì)控放入樣品盤進(jìn)行測(cè)定；一為把質(zhì)控品按照樣品樣測(cè)定編號(hào)，然后在LIS上把數(shù)據(jù)進(jìn)行轉(zhuǎn)換即可。質(zhì)控頻率為試劑更換、儀器故障維護(hù)保養(yǎng)、正常情況下每周兩次。質(zhì)控具體操作檢測(cè)參見各儀器操作規(guī)程。6.8.3、 質(zhì)控結(jié)果的處理質(zhì)控結(jié)果出來(lái)后，把原始結(jié)果輸入我室