生化分析常見交叉污染探討與對(duì)策

1、生化分析常見交叉污染探討與對(duì)策生化分析常見交叉污染探討與對(duì)策徐國超徐國超 一如何理解交叉污染一如何理解交叉污染 在在A項(xiàng)目測(cè)定中所使用的試項(xiàng)目測(cè)定中所使用的試劑、樣本、反應(yīng)產(chǎn)物、清洗劑、樣本、反應(yīng)產(chǎn)物、清洗劑等對(duì)劑等對(duì)B項(xiàng)目的測(cè)定產(chǎn)生了項(xiàng)目的測(cè)定產(chǎn)生了不良影響的現(xiàn)象。不良影響的現(xiàn)象。A項(xiàng)目與項(xiàng)目與B項(xiàng)目不一定是相項(xiàng)目不一定是相鄰項(xiàng)目。鄰項(xiàng)目。測(cè)試項(xiàng)目A試劑、樣本等殘留 測(cè)試項(xiàng)目B引發(fā)交叉污染的原因生化儀的發(fā)展變化多項(xiàng)目,多樣本處理處理能力的提高(高速化)設(shè)計(jì)共用機(jī)械部分樣本針,試劑針比色杯攪拌棒生化儀狀態(tài)不良,使用不當(dāng)清洗力的低下(日常維護(hù)欠缺,儀器老化)生化儀內(nèi)污垢的積聚測(cè)試順序安排不當(dāng)常規(guī)

2、清洗不能有效消除污染二交叉污染的分類二交叉污染的分類v 樣本針攜帶污染樣本針攜帶污染v試劑針攜帶污染試劑針攜帶污染v攪拌棒攜帶污染攪拌棒攜帶污染v清洗系統(tǒng)攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染v比色杯污染比色杯污染v 試劑交叉污染試劑交叉污染三不同類型交叉污染的鑒別三不同類型交叉污染的鑒別方法及原因方法及原因 1. 樣本針攜帶污染：樣本針攜帶污染： 目前大多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀采用循環(huán)沖洗目前大多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀采用循環(huán)沖洗式樣本針吸取樣本，當(dāng)樣本針在清洗不完全，或黏附力增加時(shí)，樣本式樣本針吸取樣本，當(dāng)樣本針在清洗不完全，或黏附力增加時(shí)，樣本殘留可能會(huì)對(duì)下一相鄰樣本的檢測(cè)結(jié)果造成影響。殘留可能會(huì)對(duì)下一相鄰樣

3、本的檢測(cè)結(jié)果造成影響。原因：樣品針尖彎曲，特富龍涂層剝落，針堵塞，沖洗水沖洗不充分原因：樣品針尖彎曲，特富龍涂層剝落，針堵塞，沖洗水沖洗不充分?jǐn)y帶污染率主要是體現(xiàn)樣品之間的污染程度攜帶污染率主要是體現(xiàn)樣品之間的污染程度樣本針攜帶污染率試驗(yàn)（一）同一檢測(cè)項(xiàng)目濃度相差較大的a標(biāo)本（高濃度），b標(biāo)本（低濃度）。檢測(cè)順序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3計(jì)算：評(píng)價(jià)： 以q小于10%為判斷標(biāo)準(zhǔn)。局限性：結(jié)果與選擇的標(biāo)本濃度有關(guān)系例1：選擇高濃度的ALT樣本濃度值為2020 U/L，低濃度ALT 樣本第一次檢測(cè)結(jié)果40 U/L，第三次檢測(cè)結(jié)果20 U/L。通過計(jì)算攜帶污染率q = （40

4、 20）/ 2000 * 100% = 1%。例2：選擇高濃度的Cl 樣本濃度值為140 mmol/L，低濃度Cl 樣本第一次檢測(cè)結(jié)果為86 mmol/L，第三次檢測(cè)結(jié)果為80 mmol/L。通過計(jì)算攜帶污染率q = （86 80）/ 60 * 100% = 10%。上例中，例1的攜帶污染率盡管只有1%，由于結(jié)果正好在醫(yī)學(xué)決定水平附近因此對(duì)臨床判斷有較大影響。例2的攜帶污 染率盡管達(dá)到了10%，但是對(duì)于臨床判斷不會(huì)產(chǎn)生大的影響。因此，使用該方法評(píng)價(jià)樣本針攜帶污染需考慮樣本的實(shí)際濃度。測(cè)試順序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L（注上述順序前的數(shù)字代表測(cè)試數(shù)量，如3

5、L代表連續(xù)測(cè)試3個(gè)低值樣本）定義：L L 值為緊跟在低值標(biāo)本后低值標(biāo)本的結(jié)果。H L 值為緊跟在高值標(biāo)本后低值樣本的結(jié)果攜帶污染指標(biāo)= H L結(jié)果的平均值 L L結(jié)果的平均值判斷標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)攜帶污染指標(biāo)小于 3SD SD是 ( L L ) 結(jié)果的SD值。樣本針攜帶污染率試驗(yàn)（二）試劑針攜帶污染全自動(dòng)生化分析儀一般采用雙試劑針，即所有項(xiàng)目的一試劑都共用試劑針R1，所有項(xiàng)目的二試劑都共用試劑針R2。試劑針R1或R2在每吸取一次試劑后都會(huì)進(jìn)行一次清洗，之后會(huì) 立即吸取下一個(gè)項(xiàng)目的試劑。當(dāng)自身清洗能力下降，試劑針在吸取試劑時(shí)會(huì)將部分殘留的前項(xiàng)目試劑成分帶入到后項(xiàng) 目反應(yīng)杯中，對(duì)后項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果造成影響。從

6、各個(gè)項(xiàng)目設(shè)置的參數(shù)可知，試劑體積量遠(yuǎn)大于樣本體積量。因此試劑針攜帶污染影響程度會(huì)高于樣本針攜帶污染。攜帶污染實(shí)驗(yàn)方案目前大部分實(shí)驗(yàn)室開展的生化檢測(cè)項(xiàng)目至少都有20項(xiàng)以上，評(píng)價(jià)全項(xiàng)目之間的攜帶污染會(huì)非常耗時(shí)，試劑成本消耗量大。且不同儀器的動(dòng)作原理不完全相同，設(shè)計(jì)一個(gè)較為簡單，合理的實(shí)驗(yàn)方法是需要重點(diǎn)考慮的 內(nèi)容。試劑針攜帶污染實(shí)驗(yàn)方案原理：通過設(shè)置特定的標(biāo)本檢測(cè)順序，每個(gè)樣本只做一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)，可以控制不同項(xiàng)目的先后吸取順序，實(shí)現(xiàn)任何一個(gè) 項(xiàng)目都能與其他項(xiàng)目相遇。為了有效評(píng)價(jià)項(xiàng)目之間攜帶污染影響程度，污染實(shí)驗(yàn)所用病人樣本的混合血清應(yīng)盡量包含醫(yī)學(xué)決定水平濃度試劑針攜帶污染實(shí)驗(yàn)方法攜帶污染初實(shí)驗(yàn)假設(shè)

7、本次實(shí)驗(yàn)以A, B, C, D, E五個(gè)項(xiàng)目來考察各個(gè)項(xiàng)目之間的試劑針攜帶污染,先在生化儀中輸入樣本測(cè)試號(hào)碼和選擇項(xiàng)目，每個(gè)樣本號(hào)碼只選擇一個(gè)項(xiàng)目，目的是使試劑針吸取項(xiàng)目的順序 完全按照樣本測(cè)試號(hào)碼的先后順序進(jìn)行，五個(gè)項(xiàng)目的測(cè)試 順序見表1。測(cè)試完成后，將數(shù)據(jù)輸入到處理表格2和表格3中，按照一定的判斷標(biāo)準(zhǔn)，尋找可能存在的污染項(xiàng)目組合。表3中顯示了試劑之間攜帶污染初實(shí)驗(yàn)后的結(jié)果:a 將表格內(nèi)測(cè)試順序號(hào)代表的位置處輸入該項(xiàng)目對(duì)應(yīng)的測(cè)試結(jié)果，b 對(duì)每個(gè)測(cè)試順序號(hào)下面對(duì)應(yīng)的測(cè)試結(jié)果和該項(xiàng)目單獨(dú)5次重復(fù)結(jié)果的均值相比比值以百分比形式表示，通過考察百分比的大小來初步判斷攜帶污染的可能性。目前的判斷標(biāo)準(zhǔn)以正

8、負(fù)百分之五作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，超過范圍時(shí)懷疑有攜帶污染。試劑針攜帶污染確認(rèn)實(shí)驗(yàn)由攜帶污染初實(shí)驗(yàn)篩選出懷疑有污染的項(xiàng)目組合， 假設(shè) (AB) 同(DE)即A項(xiàng)目對(duì)B項(xiàng)目（A項(xiàng)目做好后緊接著做B項(xiàng)目），D項(xiàng)目對(duì)E項(xiàng)目（D項(xiàng)目做好后緊接著做E項(xiàng)目）懷疑有污染。由于初實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目交叉結(jié)果只是一次測(cè)試的結(jié)果， 可能有偶然因素，還必須進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。以(AB)為例，(DE)的情況相同先單獨(dú)做A項(xiàng)目，緊接著連續(xù)測(cè)試3次B項(xiàng)目，第一個(gè)B項(xiàng)目的結(jié)果受A項(xiàng)目影響最大，第三個(gè)B項(xiàng)目的結(jié)果因?yàn)橛?次自身沖洗，結(jié)果應(yīng)比較準(zhǔn)確。比較第一個(gè)B項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果同第三個(gè)B項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果，如果影響百分比同初試結(jié)果影響趨勢(shì)和程度相近，可以判斷 A

9、項(xiàng)目對(duì)B項(xiàng)目有攜帶污染。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)順序以(AB ）, (DE)為例確認(rèn)實(shí)驗(yàn)步驟（表4）A B1 B2 B3 D E1 E2 E3 攪拌棒污染：試劑與樣本、第一試劑與第二試劑的混攪拌棒污染：試劑與樣本、第一試劑與第二試劑的混 勻需要攪拌棒，而攪拌棒如果清洗不完全，或黏附力增勻需要攪拌棒，而攪拌棒如果清洗不完全，或黏附力增加時(shí)，殘留試劑可能會(huì)對(duì)下一檢測(cè)結(jié)果造成影響。加時(shí)，殘留試劑可能會(huì)對(duì)下一檢測(cè)結(jié)果造成影響。鑒別鑒別對(duì)同一份血清標(biāo)本重復(fù)測(cè)定對(duì)同一份血清標(biāo)本重復(fù)測(cè)定GGT 或或ALT或或AST20次以上，結(jié)果重復(fù)性較差且有走高趨勢(shì)。次以上，結(jié)果重復(fù)性較差且有走高趨勢(shì)。原因原因 攪拌棒特富龍涂層剝落

10、，攪拌棒表面有頑固性攪拌棒特富龍涂層剝落，攪拌棒表面有頑固性污漬，沖洗水沖洗不充分污漬，沖洗水沖洗不充分, 可用無水乙醇擦洗攪拌棒可用無水乙醇擦洗攪拌棒 攪拌棒攜帶污染攪拌棒攜帶污染 4.清洗系統(tǒng)攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染 鑒別：鑒別：在樣本測(cè)定過程中加做室內(nèi)質(zhì)控，部分項(xiàng)目在樣本測(cè)定過程中加做室內(nèi)質(zhì)控，部分項(xiàng)目測(cè)定異?；蛘呤Э販y(cè)定異?；蛘呤Э卦跇颖緶y(cè)定過程中以蒸餾水為樣本，多次測(cè)在樣本測(cè)定過程中以蒸餾水為樣本，多次測(cè)定定LDH、P、M、TBA，結(jié)果重復(fù)性不好。，結(jié)果重復(fù)性不好。原因：原因：干燥棒攜帶污染為多干燥棒攜帶污染為多5.比色杯污染比色杯污染 生化分析儀的比色杯大體分為兩種，一生化分析儀的

11、比色杯大體分為兩種，一 種是循環(huán)使用的（如石英比色杯種是循環(huán)使用的（如石英比色杯等），另一種是需要定期更換的（如塑料比色杯等），每個(gè)比色杯檢測(cè)完畢等），另一種是需要定期更換的（如塑料比色杯等），每個(gè)比色杯檢測(cè)完畢后，進(jìn)行清洗，然后繼續(xù)下一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)。當(dāng)由于后，進(jìn)行清洗，然后繼續(xù)下一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)。當(dāng)由于 各種原因?qū)е履硞€(gè)各種原因?qū)е履硞€(gè)比色杯清洗不完全或該比色杯老化時(shí)，吸附在比色杯上的上一個(gè)項(xiàng)目的殘留比色杯清洗不完全或該比色杯老化時(shí)，吸附在比色杯上的上一個(gè)項(xiàng)目的殘留試劑可能會(huì)對(duì)在這個(gè)比色杯中進(jìn)行的下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果造成影響。試劑可能會(huì)對(duì)在這個(gè)比色杯中進(jìn)行的下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果造成影響

12、。 根據(jù)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，比色杯的污染對(duì)結(jié)果影響最大，因?yàn)楸壬铍y以清洗干凈，且在實(shí)經(jīng)驗(yàn)，比色杯的污染對(duì)結(jié)果影響最大，因?yàn)楸壬铍y以清洗干凈，且在實(shí)際工作中難以判斷該比色杯上一測(cè)試的項(xiàng)目。際工作中難以判斷該比色杯上一測(cè)試的項(xiàng)目。 鑒別：鑒別：在每日早晨剛開機(jī)時(shí)對(duì)所有項(xiàng)目做試劑空白測(cè)定，在每日早晨剛開機(jī)時(shí)對(duì)所有項(xiàng)目做試劑空白測(cè)定， 試劑空白吸光度高（終點(diǎn)法）或者試劑空白吸光度變化率高（速率法）試劑空白吸光度高（終點(diǎn)法）或者試劑空白吸光度變化率高（速率法） TBA（循環(huán)酶速率法）經(jīng)常出現(xiàn)負(fù)值（循環(huán)酶速率法）經(jīng)常出現(xiàn)負(fù)值 蛋白項(xiàng)目、血脂項(xiàng)目結(jié)果偏高蛋白項(xiàng)目、血脂項(xiàng)目結(jié)果偏高 膽紅素（釩酸鹽法）易出現(xiàn)異常

13、值膽紅素（釩酸鹽法）易出現(xiàn)異常值原因：原因：比色杯劃痕較深較多，清洗系統(tǒng)清洗不徹底比色杯劃痕較深較多，清洗系統(tǒng)清洗不徹底比色杯污染實(shí)驗(yàn)方法以項(xiàng)目A對(duì)BCDE 4個(gè)項(xiàng)目比色杯污染不同類型的交叉污染的發(fā)生幾率由高到低排列：不同類型的交叉污染的發(fā)生幾率由高到低排列：試劑針攜帶污染試劑針攜帶污染攪拌棒攜帶污染攪拌棒攜帶污染比色杯污染比色杯污染樣本針攜帶污染樣本針攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染用排除法鑒別不同類型的交叉污染的排列順序（在保證試用排除法鑒別不同類型的交叉污染的排列順序（在保證試劑質(zhì)量沒有任何問題的前提下）：劑質(zhì)量沒有任何問題的前提下）：樣本針攜帶污染樣本針攜帶污染比色杯污染比色杯

14、污染試劑針攜帶污染試劑針攜帶污染攪拌棒攜帶污染攪拌棒攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染清洗系統(tǒng)攜帶污染試劑交叉污染-類型1. 試劑成分間的直接影響2.試劑成分間的間接影響3.反應(yīng)進(jìn)程相同4.影響反應(yīng)條件試劑交叉污染1. 試劑成分間的直接影響前一個(gè)測(cè)定試劑中直接含有后一個(gè)測(cè)試試劑所要測(cè)定的項(xiàng)目。例如：通常在AMY的R1試劑中含有Ca離子（酶活化劑）,當(dāng)某樣品作AMY和Ca這兩個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目時(shí)，檢測(cè)的順序是先檢測(cè)AMY，接著檢測(cè)Ca。因吸取過AMY的R1試劑針上可能沾有殘留的R1試劑，所以當(dāng)R1試劑針再吸取Ca試劑時(shí)，會(huì)引入AMY的R1試劑中含有的Ca離子，這樣對(duì)Ca項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果就可能造成正誤差試劑交叉污染常

15、見試劑成分間的直接影響葡萄糖（GLU）（氧化酶法）、總蛋白 （TP）與酸性磷酸酶（ACP）試劑中含有較高濃度的鉀（K + ）；膽堿酯酶（ChE）、總膽固醇（CHOL）、GLU（GOD法）、尿酸（UA）（尿酸酶法）、乳酸脫氫酶（LD）（IFCC法）、羥丁酸脫氫酶 （HBDH）（DGKC法）等試劑中含有磷酸緩沖液；CHOL、TG試劑及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑中含有膽酸鈉；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （ALT）（IFCC法）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）（IFCC法）試劑中含有高活性的LD；以上試劑的交叉污染就分別會(huì)對(duì)、K+（紫外酶法）、磷（P）、總膽汁酸（TBA）及LD的測(cè)定結(jié)果造成干擾試劑交叉

16、污染2.試劑成分間的間接影響試劑成分參與反 應(yīng)：上一個(gè)試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測(cè)定的底物有作用，因而干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果。如：Mg 2+測(cè)定試劑的絡(luò)合 劑亦能與鐵（Fe）結(jié)合，影響鐵與鐵絡(luò)合劑的結(jié)合；直接膽紅素（DBil）（重氮法）試劑含有EDTA，Mg 2+試劑中含有 EDTA，均能與Ca結(jié)合，從而影響Ca的測(cè)定；以甘油作為酶保護(hù)劑的試劑，會(huì)對(duì)TG的測(cè)定帶來干擾；鈣（MTB法）試劑對(duì)K+有 負(fù)干擾；CHOL試劑中含有膽固醇酯酶，可水解膽固醇酯形成游離膽固醇，而引起對(duì)游離膽固醇測(cè)定的干擾。試劑交叉污染（3）反應(yīng)進(jìn)程相同：上一個(gè)試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對(duì)下 一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干

17、擾，下一項(xiàng)目所測(cè)定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。如：當(dāng)上一反應(yīng)產(chǎn)物為H2O2時(shí)，則對(duì)以Trinder反應(yīng)產(chǎn)生 顏色的測(cè)定結(jié)果引起干擾，如UA對(duì)CHOL結(jié)果的影響，CHOL對(duì)肌酐（CREA）（酶法）測(cè)定結(jié)果的影響，GLU（氧化酶法）對(duì)CREA測(cè)定結(jié)果的影 響；CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）試劑中含有GLU成分，其分析方法的原理中包含GLU的己糖激酶（HK）反應(yīng)過程，因此可能對(duì)GLU的測(cè)定 帶來干擾，尤其對(duì)GLU的HK法測(cè)定可能帶來嚴(yán)重干擾。試劑交叉污染（4）影響反應(yīng)條件：如上一試劑緩沖液成分改變了下一反應(yīng)的pH環(huán)境，從而改變反應(yīng)速率，如 TP（雙縮脲法）測(cè)定需在pH89時(shí)，蛋白肽

18、鍵才都能與堿性銅溶液作用生成紫色反應(yīng)，若pH8時(shí)，則會(huì)導(dǎo)致TP結(jié)果偏低，還直接影響球蛋白、白蛋白/ 球蛋白的結(jié)果；酶活性測(cè)定有最適pH，大多數(shù)酶反應(yīng)pH在6.07.5之間，ALP、-GT、LDH則在堿性條件下最適宜；CREA（苦味酸速率法） 反應(yīng)條件為堿性，果糖胺（動(dòng)力學(xué)法）反應(yīng)條件為酸性，受到污染后反應(yīng)速率會(huì)減慢。CREA（酶法）試劑中含有抗壞血酸氧化酶，影響了氧化還原反應(yīng)的進(jìn)程， 會(huì)對(duì)TBA（酶循環(huán)法）測(cè)定結(jié)果有影響。DBil（釩酸鹽氧化法）試劑中含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液會(huì)影響ALT活性，對(duì)測(cè)定結(jié)果有負(fù)干擾。如何消除試劑間的化學(xué)污染（1）為減少試劑間的化學(xué)污 染，應(yīng)定期對(duì)儀器進(jìn)行適當(dāng)

19、的保養(yǎng)，如更換管道，用去污劑、酸性洗液清洗比色杯，用去污劑擦清試劑針，用無水乙醇擦洗攪拌棒等。（2）合理安排檢測(cè)項(xiàng)目的順 序：一般在安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)目，由于各廠商試劑盒原理不同，內(nèi)含成分不同，故無固定的測(cè)定順序格式，需要自己摸索。較好 的做法是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前，以消除干擾發(fā)生的可能。一般檢測(cè)順序有以下原則：不受上一試劑的干擾；不影響下一試劑測(cè)定；不影響測(cè)試速 度；充分運(yùn)用剩余試劑位開展新項(xiàng)目；利用好儀器的功能。（3）當(dāng)合理設(shè)置測(cè)試順序無法消除交叉污染時(shí)，可使用生化分析儀的試劑針、比色杯清洗程序，對(duì) 試劑針、比色杯進(jìn)行2次或多次清洗。用堿性清洗液及酸性

20、清洗液交叉沖洗試劑針可以有效地避免攜帶污染。（4）選用具有抗交叉污染的試劑盒：如在游離膽固醇 試劑中添加膽固醇酯酶抑制劑，以減少膽固醇酯酶水解膽固醇酯而引起對(duì)游離膽固醇測(cè)定的污染。（5）部分大型全自動(dòng)生化分析儀有多個(gè)模塊或通道，可以將有化 學(xué)污染干擾的項(xiàng)目排在不同的模塊或通道中檢測(cè)。第一類：前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中含有緊跟其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。第一類：前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中含有緊跟其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。此時(shí)殘留的污染物被帶入下一測(cè)試中，與該測(cè)試的試劑反應(yīng)，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果異常。引起這類交叉污染此時(shí)殘留的污染物被帶入下一測(cè)試中，與該測(cè)試的試劑反應(yīng)，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果異常。引起這類交叉污染產(chǎn)生的物質(zhì)明

21、確，并且可以定量分析。主要項(xiàng)目有：產(chǎn)生的物質(zhì)明確，并且可以定量分析。主要項(xiàng)目有： 1. ALT(IFCC1. ALT(IFCC法法),AST(IFCC),AST(IFCC法法) )含高活性的含高活性的LDH,LDH,會(huì)影響其后的會(huì)影響其后的LDHLDH結(jié)果。結(jié)果。 2. CK-NAC2. CK-NAC、CK-MB-NACCK-MB-NAC酶偶聯(lián)測(cè)定試劑含高濃度酶偶聯(lián)測(cè)定試劑含高濃度Glucose,Glucose,會(huì)干擾其后的血糖測(cè)定，尤其對(duì)會(huì)干擾其后的血糖測(cè)定，尤其對(duì)HKHK法干擾嚴(yán)法干擾嚴(yán)重。重。 3. Glu(GOD3. Glu(GOD法法) )、UA(UA(尿酸酶法尿酸酶法) )、a-H

22、BDHa-HBDH、 TG TG、 Ca( Ca(偶氮胂偶氮胂IIIIII法法) )、 TC(CHOD- PAP) TC(CHOD- PAP)等均采用磷酸鹽緩等均采用磷酸鹽緩沖液沖液, ,會(huì)干擾位于其后無機(jī)鹽會(huì)干擾位于其后無機(jī)鹽(P)(P)的結(jié)果。的結(jié)果。 4. ALP(IFCC-AMP4. ALP(IFCC-AMP法法) )，CK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPOCK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPO法法) )試劑均含高濃度試劑均含高濃度Mg2+Mg2+會(huì)影響緊隨其后的會(huì)影響緊隨其后的Mg2+Mg2+的結(jié)的結(jié)果。果。 5. TC5. TC、HDL-CHDL-C、HDL-CHD

23、L-C、LDL-CLDL-C采用膽固醇氧化酶法的試劑含膽酸鈉，會(huì)干擾緊跟其后的采用膽固醇氧化酶法的試劑含膽酸鈉，會(huì)干擾緊跟其后的TBATBA結(jié)果，致假結(jié)果，致假性偏高。性偏高。 6. 6. 以對(duì)一硝基苯麥芽七糖苷法以對(duì)一硝基苯麥芽七糖苷法(4NP-G4)(4NP-G4)為底物的為底物的AMYAMY試劑含試劑含Ca2+Ca2+濃度高會(huì)影響其后測(cè)濃度高會(huì)影響其后測(cè)Ca2+Ca2+的準(zhǔn)確性。的準(zhǔn)確性。 7. TG7. TG，TCTC試劑中有試劑中有LIPLIP，會(huì)導(dǎo)致，會(huì)導(dǎo)致LIPLIP的測(cè)試結(jié)果不真實(shí)。的測(cè)試結(jié)果不真實(shí)。 該種類型的交叉污染單試劑終點(diǎn)法的受污染項(xiàng)目測(cè)試結(jié)果的抬高或降低反映的是攪拌桿

24、的攜帶污染。因該種類型的交叉污染單試劑終點(diǎn)法的受污染項(xiàng)目測(cè)試結(jié)果的抬高或降低反映的是攪拌桿的攜帶污染。因?yàn)樵噭┽様y帶進(jìn)來的上一個(gè)測(cè)試的干擾物會(huì)和下一個(gè)試劑發(fā)生反應(yīng)，由于攜帶量小，一般在試劑空白段為試劑針攜帶進(jìn)來的上一個(gè)測(cè)試的干擾物會(huì)和下一個(gè)試劑發(fā)生反應(yīng)，由于攜帶量小，一般在試劑空白段（2min2min）即反應(yīng)平衡。而雙試劑項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果反映的是試劑針和攪拌桿的綜合污染。）即反應(yīng)平衡。而雙試劑項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果反映的是試劑針和攪拌桿的綜合污染。第二類：前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中的某種（些）成份干擾緊隨其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。第二類：前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中的某種（些）成份干擾緊隨其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。引

25、起這類交叉污染產(chǎn)生的物質(zhì)明確，但和第一類不同的是，前一測(cè)試殘留并帶入下一測(cè)試的污染物引起這類交叉污染產(chǎn)生的物質(zhì)明確，但和第一類不同的是，前一測(cè)試殘留并帶入下一測(cè)試的污染物并非待測(cè)物本身，而是能與待測(cè)物進(jìn)行其他的反應(yīng)或顯色物質(zhì)波段重疊或引起測(cè)試條件的變化如并非待測(cè)物本身，而是能與待測(cè)物進(jìn)行其他的反應(yīng)或顯色物質(zhì)波段重疊或引起測(cè)試條件的變化如PHPH值改變等，從而帶來對(duì)測(cè)試過程的干擾，這種干擾作用不易進(jìn)行定量分析。主要項(xiàng)目有：值改變等，從而帶來對(duì)測(cè)試過程的干擾，這種干擾作用不易進(jìn)行定量分析。主要項(xiàng)目有： 1. TC1. TC、HDL-CHDL-C、HDL-CHDL-C、LDL-CLDL-C最終反應(yīng)都

26、是過氧化氫和最終反應(yīng)都是過氧化氫和4-4-氨基安替比林在過氧化酶的作用下產(chǎn)生醌氨基安替比林在過氧化酶的作用下產(chǎn)生醌亞胺顯色（亞胺顯色（505nm505nm），因此這些項(xiàng)目間會(huì)相互干擾。），因此這些項(xiàng)目間會(huì)相互干擾。 2. TP2. TP的檢測(cè)原理是蛋白質(zhì)與銅離子生成紫藍(lán)色復(fù)合物，該顯色物質(zhì)在的檢測(cè)原理是蛋白質(zhì)與銅離子生成紫藍(lán)色復(fù)合物，該顯色物質(zhì)在546nm546nm有吸收峰，在波段有吸收峰，在波段500nm600nm500nm600nm都有較大吸收；因此都有較大吸收；因此TPTP試劑可能影響試劑可能影響500nm -600nm500nm -600nm波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定（如波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定

27、（如TCTC，TGTG，UAUA等）。另外，等）。另外，TBILTBIL（重氮法）和（重氮法）和DBILDBIL（重氮法）生成的偶氮物在（重氮法）生成的偶氮物在546 nm 546 nm 下有吸收峰，因此下有吸收峰，因此TBILTBIL（重氮法）或（重氮法）或D-BILD-BIL（重氮法）會(huì)和（重氮法）會(huì)和TPTP相互干擾。相互干擾。 3. ALB3. ALB（BCGBCG）檢測(cè)原理是形成的藍(lán)綠色復(fù)合物在）檢測(cè)原理是形成的藍(lán)綠色復(fù)合物在578nm578nm有強(qiáng)吸收，且在整個(gè)有強(qiáng)吸收，且在整個(gè)500nm-700nm500nm-700nm都有較強(qiáng)都有較強(qiáng)吸收，因此吸收，因此ALBALB試劑會(huì)干擾緊

28、隨其后的試劑會(huì)干擾緊隨其后的500nm-700nm500nm-700nm波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定（如波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定（如UAUA等）。等）。 4. ALT4. ALT的的R2R2（含（含NADHNADH）及）及 CRCR的的R2R2試劑（苦味酸，呈深黃色）在試劑（苦味酸，呈深黃色）在340nm340nm有很強(qiáng)的吸收，會(huì)干擾緊隨其有很強(qiáng)的吸收，會(huì)干擾緊隨其后的后的340nm340nm免疫比濁終點(diǎn)法的測(cè)定（如免疫比濁終點(diǎn)法的測(cè)定（如PAPA，CRPCRP等），且免疫比濁法的終點(diǎn)吸光度越低干擾越嚴(yán)重。等），且免疫比濁法的終點(diǎn)吸光度越低干擾越嚴(yán)重。 該種類型的交叉污染無法分出是試劑針還是攪拌桿攜帶進(jìn)的污染對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，是兩者的綜合該種類型的交叉污染無法分出是試劑針還是攪拌桿攜帶進(jìn)的污染對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，是兩者的綜合影響。影響。 四解決方案四解決方案1. 當(dāng)交叉污染程度較輕時(shí)，設(shè)置防交叉污染清洗程序，增當(dāng)交叉污染程度較輕時(shí)，設(shè)置防交叉污染清洗程序，增加對(duì)樣本針、試劑針、比色杯的清洗次數(shù)。加對(duì)樣本針、試劑針、比色杯的清洗次數(shù)。2 合理設(shè)置實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的排列順序，避免試劑交叉污染。合理設(shè)置實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的排列順序，避免試劑交叉污染。ALT ALT