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1、第第3章章 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)3.1 概述概述3.2 氨基酸氨基酸3.3 多肽多肽3.4 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)3.5 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)3.6 多肽的化學(xué)合成多肽的化學(xué)合成3.7 蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)3.1 概述概述3.1.1 蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)3.1.2 蛋白質(zhì)的元素組成蛋白質(zhì)的元素組成3.1.3 氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系3.2 氨基酸氨基酸3.2.1 氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類3.2.2 氨基酸的解離性質(zhì)氨基酸的解離性質(zhì)3.2.3 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì)3.2.4 氨基酸的化學(xué)合成氨基酸的化學(xué)合成練習(xí)
2、題練習(xí)題第第3章章 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求 1、理解蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ);、理解蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ);2、掌握氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系;掌握氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系;3、掌握氨基酸的結(jié)構(gòu)和氨基酸按酸堿性的分類情況;掌握氨基酸的結(jié)構(gòu)和氨基酸按酸堿性的分類情況;4、掌握等電點(diǎn)的概念和氨基酸的解離性質(zhì);掌握等電點(diǎn)的概念和氨基酸的解離性質(zhì);5、了解氨基酸的化學(xué)性質(zhì),、了解氨基酸的化學(xué)性質(zhì),掌握其中的茚三酮反應(yīng);掌握其中的茚三酮反應(yīng);6、了解氨基酸的來(lái)源和幾類化學(xué)合成方法的特點(diǎn)。、了解氨基酸的來(lái)源和幾類化學(xué)合成方法的特點(diǎn)。3.1.2 蛋白質(zhì)的元素組成蛋白質(zhì)的元素組
3、成碳碳 50-55% 氫氫 6.5-7.3 氧氧 19-24 氮氮 16% 硫硫 0-3 其他其他 微量微量 (磷、鐵、碘、鉬、鋅、銅等磷、鐵、碘、鉬、鋅、銅等)凱氏凱氏(Kjedahl)定定氮法氮法: : 蛋白質(zhì)含量蛋白質(zhì)含量= =樣品中含氮量樣品中含氮量 6.25 6.25v6.256.25: : 蛋白質(zhì)系數(shù),即蛋白質(zhì)系數(shù),即1 1克氮所代表的蛋白質(zhì)克數(shù)克氮所代表的蛋白質(zhì)克數(shù)3.1 概述概述三聚氰胺三聚氰胺 66%尿素 46 3.1.3 氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)三者之間的關(guān)系 氨基酸氨基酸 多肽多肽 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)肽鍵肽鍵共價(jià)鍵(二硫鍵)共價(jià)鍵(二硫鍵)非共價(jià)鍵
4、非共價(jià)鍵酸、堿、蛋白酶催化水解酸、堿、蛋白酶催化水解物理或化學(xué)法拆分物理或化學(xué)法拆分60003.1 概述概述20種基本氨基酸種基本氨基酸(1)可變部分:)可變部分: 甘氨酸甘氨酸 R=H ,脯氨酸,脯氨酸 R=環(huán)狀二級(jí)氨基環(huán)狀二級(jí)氨基(2)共同特點(diǎn):)共同特點(diǎn):手性手性-碳原子碳原子,氨基酸是,氨基酸是手性手性分子分子 L-氨基酸氨基酸 例外:甘氨酸例外:甘氨酸(3)比旋光度)比旋光度p.343.2.1 氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類 1. 氨基酸的結(jié)構(gòu)氨基酸的結(jié)構(gòu)共同結(jié)構(gòu)共同結(jié)構(gòu)可變部分可變部分COOHCHH2NR)(20溶劑D3.2 氨基酸氨基酸鈉光的鈉光的D線線589.3nm, 1
5、dm 1g/ml 3.2.1 氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類 2. 氨基酸的分類氨基酸的分類 根據(jù)根據(jù)R基側(cè)鏈的酸堿性基側(cè)鏈的酸堿性分類分類(1)酸性氨基酸)酸性氨基酸 2(2)堿性氨基酸)堿性氨基酸 3(3)中性氨基酸)中性氨基酸 15脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸6芳香族氨基酸芳香族氨基酸3含硫氨基酸含硫氨基酸 2含羥基含羥基氨基酸氨基酸2含酰胺氨基酸含酰胺氨基酸23.2 氨基酸氨基酸+H3NCOO-HCH2COO-Aspartate (Asp)Glutamate(Glu)門 冬 氨 酸谷 氨 酸+H3NCOO-HCH2CH2COO-4. Negatively charged R grou
6、ps (2)(1 1)酸性氨基酸的結(jié)構(gòu))酸性氨基酸的結(jié)構(gòu)側(cè)鏈側(cè)鏈pKa 3.86 4.25+H3NC O O-HC H2C H2L y sin e (L y s)A r g in in e (A r g )賴 氨 酸精 氨 酸+H3NC O O-HC H2C H2C H25 . P o sitiv e ly c h a r g e d R g r o u p s (3 )C H2C H2N H3+N HCN H2N H2+H3NC O O-HH2CH NN Hg u a n id in oim id a z o leH istid in e組 氨 酸(2 2)堿性氨基酸的結(jié)構(gòu))堿性氨基酸的結(jié)構(gòu)
7、胍基胍基咪唑基咪唑基+H3NC O O-HC H2C H2L ysine (L ys)A rginine (A rg)賴 氨 酸精 氨 酸+H3NC O O-HC H2C H2C H25. Positively charged R groups (3)C H2C H2N H3+N HCN H2N H2+H3NC O O-HH2CH NN Hguanidinoim idazoleH istidine組 氨 酸+H3NCOO-HCH2CH2Lysine (Lys)Arginine (Arg)賴 氨 酸精 氨 酸+H3NCOO-HCH2CH2CH25. Positively charged R gr
8、oups (3)CH2CH2NH3+NHCNH2NH2+H3NCOO-HH2CHNNHguanidinoim idazoleHistidine組 氨 酸側(cè)鏈側(cè)鏈pKa 10.53 12.48 6.00 7.35反應(yīng)活性大反應(yīng)活性大+H3NCOO-HCH2CH2Lysine (Lys)Arginine (Arg)賴氨酸精氨酸+H3NCOO-HCH2CH2CH25. Positively charged R groups (3)CH2CH2NH3+NHCNH2NH2+H3NCOO-HH2CHNNHguanidinoimidazoleHistidine組氨酸*1禽流感的致病力禽流感的致病力+H3NC
9、OO-HH+H2NCOO-+H3NCOO-HCH3+H3NCOO-HCH(CH3)2+H3NCOO-HCH2CH-CH3+H3NCOO-HCH-CH3CH2Glycine (Gly)Alanine (Ala)Valine (Val)Leucine (Leu)Isoleucine (Ile)Proline (Pro)甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸異亮氨酸脯氨酸1. Nonpolar, aliphalic R groups (6)CH3CH3H(3 3)中性氨基酸的結(jié)構(gòu))中性氨基酸的結(jié)構(gòu) 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸(6)剛性結(jié)構(gòu)*2*3*4肽鏈的骨架變化肽鏈的骨架變化仲+H3NC O O-HC H2+H3
10、NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2P h e n y la la n in e ( P h e )T y r o s in e ( T y r ) T r y p t o p h a n ( T r y )苯 丙 氨 酸酪 氨 酸色 氨 酸2 . A r o m a t ic R g r o u p s ( 3 )NHO H 芳香族氨基酸芳香族氨基酸(3)(3 3)中性氨基酸的結(jié)構(gòu))中性氨基酸的結(jié)構(gòu)吲哚基吲哚基+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2P h e n y la la n in e ( P h e )T y r
11、o s in e ( T y r )T r y p t o p h a n ( T r y )苯 丙 氨 酸酪 氨 酸色 氨 酸2 . A r o m a t ic R g r o u p s ( 3 )NHO H+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2P h e n y la la n in e ( P h e )T y r o s in e ( T y r ) T r y p t o p h a n ( T r y )苯 丙 氨 酸酪 氨 酸色 氨 酸2 . A r o m a t ic R g r o u p s ( 3 )NHO H(T
12、rp)*5*6分子識(shí)別黑色素細(xì)胞:酪氨酸酶280nm(3 3)中性氨基酸的結(jié)構(gòu))中性氨基酸的結(jié)構(gòu) 含硫氨基酸含硫氨基酸(2)+H3NCOO-HCH2OH+H3NCOO-HCH OHCH3+H3NCOO-HCH2SH+H3NCOO-HCH2CH2SCH3+H3NCOO-HCH2CONH2+H3NCOO-HCH2CH2CONH2Serine (Ser)Threonine (Thr)Cysteine (Cys)M ethionine (M et)Asparagine (Asn)Glutam ine (Gln)絲 氨 酸蘇 氨 酸半 胱 氨 酸甲 硫 氨 酸 ( 蛋 氨 酸 )門 冬 酰 胺谷 氨 酰
13、 胺3. Polar, uncharged R groups (6)+H3NC O O-HC H2O H+H3NC O O-HC H O H+H3NC O O-HC H2S H+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2C H2S C H3C O N H2Serine (Ser)T hreonine (T hr)C ysteine (C ys)M ethionine (M et)A sparagine (A sn)G lutam ine (G ln)絲 氨 酸蘇 氨 酸半 胱 氨 酸甲 硫 氨 酸 ( 蛋 氨 酸 )門 冬 酰 胺谷 氨 酰 胺3. Polar, uncharg
14、ed R groups (6)C H3+H3NC O O-HC H2C H2C O N H2CysssCysl蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)l常出現(xiàn)在酶的活性中心常出現(xiàn)在酶的活性中心*7解毒保肝解毒保肝(3 3)中性氨基酸的結(jié)構(gòu))中性氨基酸的結(jié)構(gòu)l 氫鍵氫鍵l 出現(xiàn)在大多數(shù)酶的活性中心出現(xiàn)在大多數(shù)酶的活性中心l糖鏈往往與糖鏈往往與Ser和和Thr的的-OH相連,形成糖蛋白。相連,形成糖蛋白。 含羥基含羥基氨基酸氨基酸+H3NC O O-HC H2O H+H3NC O O-HC H O H+H3NC O O-HC H2S H+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2C H2S C H3C
15、 O N H2S e r in e ( S e r )T h r e o n in e ( T h r )C y s t e in e ( C y s )M e t h io n in e ( M e t )A s p a r a g in e ( A s n )G lu t a m in e ( G ln )絲 氨 酸蘇 氨 酸半 胱 氨 酸甲 硫 氨 酸 ( 蛋 氨 酸 )門 冬 酰 胺谷 氨 酰 胺3 . P o la r , u n c h a r g e d R g r o u p s (6 )C H3+H3NC O O-HC H2C H2C O N H2*8(3 3)中性氨基酸的結(jié)
16、構(gòu))中性氨基酸的結(jié)構(gòu) 含酰胺基氨基酸含酰胺基氨基酸+H3NC O O-HC H2O H+H3NC O O-HC H O H+H3NC O O-HC H2S H+H3NC O O-HC H2+H3NC O O-HC H2C H2S C H3C O N H2Serine (Ser)T hreonine (T hr)C ysteine (C ys)M ethionine (M et)A sparagine (A sn)G lutam ine (G ln)絲 氨 酸蘇 氨 酸半 胱 氨 酸甲 硫 氨 酸 ( 蛋 氨 酸 )門 冬 酰 胺谷 氨 酰 胺3. Polar, uncharged R grou
17、ps (6)C H3+H3NC O O-HC H2C H2C O N H2l 轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)轉(zhuǎn)氨基反應(yīng) 從營(yíng)養(yǎng)學(xué)角度分類從營(yíng)養(yǎng)學(xué)角度分類 Met Trp Lys Val Ile Leu Phe Thr Met Trp Lys Val Ile Leu Phe Thr 假假 設(shè)設(shè) 來(lái)來(lái) 寫寫 一一 兩兩 本本 書書 根據(jù)是否組成蛋白質(zhì)分類根據(jù)是否組成蛋白質(zhì)分類必需氨基酸必需氨基酸非必需氨基酸非必需氨基酸20種基本氨基酸種基本氨基酸不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸非蛋白氨基酸非蛋白氨基酸3.2 氨基酸氨基酸3.2.1 氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類 2. 氨基酸的分類氨基酸的分類300 不常見(jiàn)
18、蛋白質(zhì)氨基酸不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸 膠原蛋白中的膠原蛋白中的羥脯氨酸羥脯氨酸及及羥賴氨酸羥賴氨酸 甲狀腺球蛋白中甲狀腺球蛋白中碘代酪氨酸碘代酪氨酸 某些蛋白質(zhì)分子中的某些蛋白質(zhì)分子中的胱氨酸胱氨酸u 來(lái)源:蛋白質(zhì)生物合成之后來(lái)源:蛋白質(zhì)生物合成之后( (或合成過(guò)程中或合成過(guò)程中) ),相,相應(yīng)的氨基酸殘基被修飾形成的。應(yīng)的氨基酸殘基被修飾形成的。u 在生物體內(nèi)無(wú)相應(yīng)的遺傳密碼在生物體內(nèi)無(wú)相應(yīng)的遺傳密碼611.作為細(xì)菌細(xì)胞壁中肽聚糖的組分:作為細(xì)菌細(xì)胞壁中肽聚糖的組分:D-Glu D-Ala2.作為一些重要代謝物的前體或中間體作為一些重要代謝物的前體或中間體: -丙氨酸(丙氨酸(VB3)鳥(niǎo)氨酸(鳥(niǎo)氨
19、酸(Orn) 、瓜氨酸(瓜氨酸(Cit) (尿素循環(huán)尿素循環(huán)) 3.作為神經(jīng)傳導(dǎo)的化學(xué)物質(zhì):作為神經(jīng)傳導(dǎo)的化學(xué)物質(zhì): -氨基丁酸氨基丁酸4. 作為作為N素的轉(zhuǎn)運(yùn)和貯藏載體素的轉(zhuǎn)運(yùn)和貯藏載體: 刀豆氨酸刀豆氨酸5.調(diào)節(jié)生長(zhǎng)作用調(diào)節(jié)生長(zhǎng)作用6.殺蟲(chóng)防御作用殺蟲(chóng)防御作用絕大部分非蛋白氨基酸的功能不清楚絕大部分非蛋白氨基酸的功能不清楚非蛋白氨基酸存在的意義非蛋白氨基酸存在的意義3.2 氨基酸氨基酸堿性L-氨基酸,8% 3.2.2 氨基酸的解離性質(zhì)氨基酸的解離性質(zhì)氨基酸的兩個(gè)重要通性:氨基酸的兩個(gè)重要通性:白色晶體,熔點(diǎn)很高;白色晶體,熔點(diǎn)很高;溶于水,水溶液具有較高的介電常數(shù)。溶于水,水溶液具有較高的
20、介電常數(shù)。3.2 氨基酸氨基酸(1)氨基酸是兩性分子)氨基酸是兩性分子兩性分子兩性分子:即含有酸性基團(tuán)即含有酸性基團(tuán),又含有堿性基團(tuán)的分子。又含有堿性基團(tuán)的分子。兩性分子的性質(zhì)兩性分子的性質(zhì):-pK1+H+H+-pK1+H+H+H+H+pK2H+H+K -COO-CHH2NRCOOCHH2NRCOOHCHH3N+RCOOHCHH3N+R3.2 氨基酸氨基酸完全解離完全解離酸酸 堿堿/ /酸酸 堿堿 正離子正離子 電中性電中性(兩性離子兩性離子) 負(fù)離子負(fù)離子 低低pH值值 合適的合適的pH值值 高高pH值值 等電點(diǎn)等電點(diǎn)pI二元弱酸二元弱酸 二元弱堿二元弱堿pK1 pI pK22.34 5.9
21、7 9.60H3N+CH2COOH H3N+CH2COO- - H2NCH2COO- - gly+ gly gly- - 酸酸 堿堿/ /酸酸 堿堿共軛共軛lgpKapH酸堿glyglylgpKapH pKapHpKapHglyglyglygly 1010pH5.972.341.340.34.正電荷/M00.510/11100/101.11M gly溶液在不同pH條件下帶電量情況(2)氨基酸有專一的等電點(diǎn))氨基酸有專一的等電點(diǎn)(isoeletric point, pI)u等電點(diǎn)的定義:等電點(diǎn)的定義:兩性分子處于兩性離子狀態(tài)兩性分子處于兩性離子狀態(tài), 分子內(nèi)分子內(nèi)部正負(fù)電荷數(shù)目相等,凈電荷為零,
22、此時(shí)溶液的部正負(fù)電荷數(shù)目相等,凈電荷為零,此時(shí)溶液的pH值即為其等電點(diǎn)。值即為其等電點(diǎn)。(兩性分子凈電荷為零時(shí)溶液的兩性分子凈電荷為零時(shí)溶液的pH值值)u等電點(diǎn)時(shí)兩性分子的性質(zhì):等電點(diǎn)時(shí)兩性分子的性質(zhì):(1) 表觀電中性,內(nèi)部酸堿性基團(tuán)完全解離,呈兩性離表觀電中性,內(nèi)部酸堿性基團(tuán)完全解離,呈兩性離子狀態(tài);子狀態(tài); 溶液溶液pHpI,帶凈負(fù)電荷;,帶凈負(fù)電荷; pHpI,帶凈正電荷。,帶凈正電荷。 在一定在一定pH范圍中,溶液的范圍中,溶液的pH離氨基酸等電點(diǎn)愈遠(yuǎn),離氨基酸等電點(diǎn)愈遠(yuǎn),氨基酸帶凈電荷愈多。氨基酸帶凈電荷愈多。(2) 溶解度最小溶解度最小3.2 氨基酸氨基酸(3)氨基酸等電點(diǎn)的計(jì)算
23、)氨基酸等電點(diǎn)的計(jì)算兩性離子兩邊的兩性離子兩邊的pK值值的算術(shù)平均值的算術(shù)平均值中性氨基酸:中性氨基酸: pI = (pK1 + pK2)/2 酸性氨基酸:酸性氨基酸: pI= (pK1 + pK R-COO- )/2 堿性氨基酸:堿性氨基酸: pI= (pK2 + pKR-NH2 )/2 例:門冬氨酸例:門冬氨酸pK1=2.09, pK2=9.82, pKR-COO- =3.86pI=(2.09+3.86)/2=2.973.2 氨基酸氨基酸一般一般酸性氨基酸酸性氨基酸pI為:為:2.83.2中性氨基酸中性氨基酸pI為:為:5.06.5堿性氨基酸堿性氨基酸pI為:為:7.5810.8P.364
24、3-45為什么中性氨基酸的等電點(diǎn)為什么中性氨基酸的等電點(diǎn)7?(4)氨基酸的分離分析)氨基酸的分離分析l 電泳法電泳法l 離子交換色譜法離子交換色譜法 磺酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂磺酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 SO3_ _H+氨基酸自動(dòng)分析儀氨基酸自動(dòng)分析儀1.000.51.07pK1=2.34pK2=9.600.5pI=5.97pH1mol/L1mol/L甘氨酸的滴定曲線甘氨酸的滴定曲線l氨基酸的可電離基團(tuán)氨基酸的可電離基團(tuán)的的pK的定量的定量值值l氨基酸具有兩個(gè)(或氨基酸具有兩個(gè)(或以上)具有緩沖作用以上)具有緩沖作用的區(qū)域的區(qū)域 氨基酸的滴定曲線氨基酸的滴定曲線 丙氨酸的滴定曲線:丙氨酸的滴定曲線: 13
25、 NaOH1 0.5 0 0.5 1963HCl Gly Gly = Gly Gly Gly Gly = Gly Gly Gly Gly酸酸 堿堿/ /酸酸 堿堿pK1pK23.2.3 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì)COOHCHH2NR甲醛羥甲基化甲醛羥甲基化亞硝酸反應(yīng)亞硝酸反應(yīng)酰化反應(yīng)?;磻?yīng)烴基化反應(yīng)烴基化反應(yīng)西佛堿反應(yīng)西佛堿反應(yīng)脫氨基反應(yīng)脫氨基反應(yīng)成鹽成鹽成酯反應(yīng)成酯反應(yīng)成酰氯反應(yīng)成酰氯反應(yīng)疊氮反應(yīng)疊氮反應(yīng)脫羧基反應(yīng)脫羧基反應(yīng)茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng)成肽反應(yīng)成肽反應(yīng)3.2 氨基酸氨基酸側(cè)鏈反應(yīng)側(cè)鏈反應(yīng)巰基巰基羥基羥基咪唑基咪唑基甲硫基甲硫基芳香環(huán)芳香環(huán)茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng)廣泛用于各種氨基酸
26、的定性或定量測(cè)定廣泛用于各種氨基酸的定性或定量測(cè)定(微克級(jí)微克級(jí))CCCOOO茚三酮茚三酮CCCOOOHOHH2OH2O弱酸弱酸藍(lán)紫色藍(lán)紫色脯氨酸脯氨酸黃色黃色氨基酸自動(dòng)分析儀氨基酸自動(dòng)分析儀采集指紋采集指紋CCCOOO HO HH2OH2O+NH3水合茚三酮水合茚三酮還原茚三酮還原茚三酮3.2.4 氨基酸的化學(xué)合成氨基酸的化學(xué)合成 水解蛋白質(zhì)法水解蛋白質(zhì)法 微生物發(fā)酵法微生物發(fā)酵法 化學(xué)合成法化學(xué)合成法(1) 經(jīng)典化學(xué)合成法經(jīng)典化學(xué)合成法 外消旋體外消旋體 拆分:化學(xué)法和酶解法拆分:化學(xué)法和酶解法(2) 不對(duì)稱合成法不對(duì)稱合成法 光學(xué)純氨基酸光學(xué)純氨基酸 不對(duì)稱前體合成法和不對(duì)稱催化劑合成法
27、不對(duì)稱前體合成法和不對(duì)稱催化劑合成法3.2 氨基酸氨基酸氨基酸的來(lái)源氨基酸的來(lái)源L-氨基酸氨基酸例例1:現(xiàn)在有四個(gè)氨基酸:現(xiàn)在有四個(gè)氨基酸:苯丙氨酸苯丙氨酸pI=5.5、脯氨酸、脯氨酸pI=6.3、天冬氨酸天冬氨酸pI=2.8和賴氨酸和賴氨酸pI=9.7,請(qǐng)問(wèn)在以下,請(qǐng)問(wèn)在以下pH條件條件下進(jìn)行電泳,各氨基酸的主要存在形式是什么?在下進(jìn)行電泳,各氨基酸的主要存在形式是什么?在外電場(chǎng)作用下,移向陽(yáng)極還是陰極?外電場(chǎng)作用下,移向陽(yáng)極還是陰極? 苯丙氨酸苯丙氨酸 脯氨酸脯氨酸 門冬氨酸門冬氨酸 賴氨酸賴氨酸(1)pH=7.0(2)pH=6.0(3)pH=5.0(4)pH=2.0+ + 陰極陰極 +
28、+ 陰極陰極 - - 陽(yáng)極陽(yáng)極 + + 陰極陰極- - 陽(yáng)極陽(yáng)極 - - 陽(yáng)極陽(yáng)極 - - 陽(yáng)極陽(yáng)極 + + 陰極陰極+ + 陰極陰極 + + 陰極陰極 + + 陰極陰極 + + 陰極陰極- - 陽(yáng)極陽(yáng)極 + + 陰極陰極 - - 陽(yáng)極陽(yáng)極 + + 陰極陰極將將Lys, Arg, Asp, Glu, Tyr,Leu,Thr和和Ala的的8種氨基酸種氨基酸混合物在混合物在pH3.0下加到下加到磺酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂磺酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂中,然中,然后用提高后用提高pH和鹽濃度的洗脫劑進(jìn)行洗脫,試預(yù)計(jì)它和鹽濃度的洗脫劑進(jìn)行洗脫,試預(yù)計(jì)它們被洗脫下來(lái)的順序。們被洗脫下來(lái)的順序。u 作用力:(作用力:(1
29、)離子交換;()離子交換;(2)氨基酸側(cè)鏈與樹(shù))氨基酸側(cè)鏈與樹(shù)脂基質(zhì)脂基質(zhì)(聚苯乙烯聚苯乙烯)之間的作用力。之間的作用力。uAsp Glu Tyr Thr Leu Ala Lys Arg 2.77 3.22 5.66 5.87 5.98 6.02 9.74 10.76 Asp, Thr, Glu, Ala, Leu, Tyr, Lys, Arg。 例例2:例例3:向向1L 1mol/L的處于等電點(diǎn)的的處于等電點(diǎn)的gly溶液加入溶液加入0.3 mol HCl,問(wèn)所得溶液的,問(wèn)所得溶液的pH是多少?如果加入是多少?如果加入0.3 mol NaOH以代替以代替HCl時(shí),時(shí),pH將是多少?將是多少?23937060960960H712370342342H. 0.70.3lg glu - glulg9p0.30.7lg glu glulg2.34p解:已知解:已知pK1=2.34, pK2=9.60 ,pI=5.97 H3N+CH2COOH H3N+CH2COO- H2NCH2COO- 酸酸 堿堿/ /酸酸 堿堿gly+ gly gly-例
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