生物：22《動物細(xì)胞工程》課件(新人教 版選修3)

1、動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)動物細(xì)胞與組織培養(yǎng) 燒傷病人圖片燒傷病人圖片異體皮膚移植圖片異體皮膚移植圖片動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合單克隆抗體制備單克隆抗體制備體細(xì)胞克隆體細(xì)胞克隆細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植動物動物細(xì)胞細(xì)胞工程工程技術(shù)技術(shù)動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)的基礎(chǔ)動物細(xì)胞培養(yǎng)1、概念（人教版）、概念（人教版） 動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。討論討論1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么？、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么？2、從動物機(jī)體中要取出哪些相關(guān)組織？并、從動物機(jī)體中要取出哪些相關(guān)組織？

2、并解釋原因。解釋原因。3、組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是什么？、組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是什么？其理論依據(jù)是什么？其理論依據(jù)是什么？4、動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足哪些條件？、動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足哪些條件？閱讀課本閱讀課本觀察圖片，觀察圖片，簡述動物簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的基本過的基本過程程動物動物胚胎胚胎或或幼齡幼齡動動物的組織、器官物的組織、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液制成制成細(xì)胞細(xì)胞懸浮懸浮液液10代代細(xì)胞細(xì)胞部分細(xì)胞部分細(xì)胞“癌變癌變”，遺傳物質(zhì)改變，無遺傳物質(zhì)改變，無限傳代限傳代動物細(xì)胞培養(yǎng)不能動物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動物體最終培養(yǎng)成動物體50代細(xì)胞代

3、細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁剝離、分瓶剝離、分瓶細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞細(xì)胞細(xì)胞系細(xì)胞系2、過程、過程動物細(xì)胞生長特性動物細(xì)胞生長特性細(xì)胞貼壁：細(xì)胞貼壁： 懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。稱為細(xì)胞貼壁。要求：要求： 培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。附。細(xì)胞的接觸抑制細(xì)胞的接觸抑制： 當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。制。 細(xì)胞貼壁過程3.有關(guān)

4、概念有關(guān)概念: 原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代培養(yǎng)。代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。稱為傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長停滯，代左右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到4050代，這

5、代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。細(xì)胞細(xì)胞懸浮懸浮液液1010代代細(xì)胞細(xì)胞5050代代細(xì)胞細(xì)胞無限無限傳代傳代原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代

6、培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞系細(xì)胞系如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細(xì)胞株和細(xì)如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細(xì)胞株和細(xì)胞系？胞系？多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長和分裂多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長和分裂。隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會停止分裂增殖隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會停止分裂增殖遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)改變思考討論思考討論1.動物細(xì)胞培養(yǎng)取材時(shí)，一般是取胚胎組織或幼齡動動物細(xì)胞培養(yǎng)取材時(shí)，一般是取胚胎組織或幼齡動物的組織或器官，請解釋原因。物的組織或器官，請解釋原因。細(xì)胞的衰老與動物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖細(xì)胞的衰老與動物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分能

7、力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，老齡動物則相反。所以，一般來說幼年動物的組織裂旺盛，老齡動物則相反。所以，一般來說幼年動物的組織細(xì)胞比老年動物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分細(xì)胞比老年動物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)?；潭仍降停瑒t增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。腫瘤組織或細(xì)胞腫瘤組織或細(xì)胞 正常組織或細(xì)胞正常組織或細(xì)胞 拓展拓展-動物組織或細(xì)胞培養(yǎng)的難易程度動物組織或細(xì)胞培養(yǎng)的難易程度幼體組織或細(xì)胞幼體組織或細(xì)胞 老齡組織或細(xì)胞老齡組織或細(xì)胞分化程度低的組織或細(xì)胞分化程度低的組織或細(xì)胞 分化程度高的組織或細(xì)胞分

8、化程度高的組織或細(xì)胞2、人類一般保存的是哪類細(xì)胞呢？為什么？、人類一般保存的是哪類細(xì)胞呢？為什么？ 保存保存10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)槠渖飳W(xué)特性未發(fā)生大代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)槠渖飳W(xué)特性未發(fā)生大的變化，最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長特性，很適合的變化，最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長特性，很適合用于藥物測試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。用于藥物測試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。3、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為什么要用胰蛋白酶對、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為什么要用胰蛋白酶對取出的動物組織進(jìn)行處理？取出的動物組織進(jìn)行處理？ 胰蛋白酶處理動物組織，可以使動物組織細(xì)胞胰蛋白酶處理動物組織，可以使動物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成

9、分酶解，獲得單間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞個(gè)細(xì)胞; ;成塊的組織細(xì)胞靠在一起成塊的組織細(xì)胞靠在一起,彼此限制了細(xì)彼此限制了細(xì)胞的生長和增殖胞的生長和增殖.植物組織培養(yǎng)過程將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的嗎？.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份？.細(xì)胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎？.既然胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉，那將動物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問題呢？能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？進(jìn)一步思考：進(jìn)一步思考：否否 胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)和磷脂蛋白質(zhì)和磷脂能能注意時(shí)間的控制注意時(shí)間的控制 不能，因?yàn)閮烧叩淖钸m不能

10、，因?yàn)閮烧叩淖钸mPH不同，而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與不同，而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適胰蛋白酶的最適PH較接近較接近 多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的知識，認(rèn)為體外培養(yǎng)細(xì)胞學(xué)的知識，認(rèn)為體外培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些內(nèi)容呢？應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些內(nèi)容呢？動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：1、無菌、無毒的環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、必須的營養(yǎng)物質(zhì)、必須的營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、核酸、（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、核酸、

11、嘌呤、嘧啶、激素、生長因子、動物血清等。嘌呤、嘧啶、激素、生長因子、動物血清等。）保證細(xì)胞順利的保證細(xì)胞順利的生長增殖生長增殖3、適宜的溫度、適宜的溫度 36.5+（-）0.5度4、充足的氧氣和適宜的酸堿度、充足的氧氣和適宜的酸堿度 O2和和CO2（95%空氣和空氣和5% CO2 ）問題：問題：1、培養(yǎng)基的類型、培養(yǎng)基的類型（1）天然培養(yǎng)基：營養(yǎng)價(jià)值高，成分復(fù)雜）天然培養(yǎng)基：營養(yǎng)價(jià)值高，成分復(fù)雜（2）合成培養(yǎng)基：成分明確，便于控制試驗(yàn)條件）合成培養(yǎng)基：成分明確，便于控制試驗(yàn)條件2、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組織培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？較植物組織培養(yǎng)基有

12、何獨(dú)特之處？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。素和動物血清等。獨(dú)特之處有：獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基（、液體培養(yǎng)基（動物體細(xì)胞動物體細(xì)胞大都生活在大都生活在液體液體的環(huán)境的環(huán)境） 2、成分中有動、成分中有動物血清等物血清等獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體植物體培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果或細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞產(chǎn)物快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動葡萄糖、動物血清物血清蔗糖、植物蔗糖、植物激素激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性

13、質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原理原理動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物組織和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物組織和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用 大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）單克隆抗體） 獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮 培養(yǎng)的動物細(xì)胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷培養(yǎng)的動物細(xì)胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性某種物質(zhì)的毒性 為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)課堂小結(jié)課堂小結(jié) 動物細(xì)胞和組織培養(yǎng)（原理、材料

14、動物細(xì)胞和組織培養(yǎng)（原理、材料選擇及原因、一般過程、培養(yǎng)條件、選擇及原因、一般過程、培養(yǎng)條件、主要應(yīng)用）主要應(yīng)用）注意：注意：概念理解：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細(xì)胞株概念理解：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細(xì)胞株 、細(xì)胞系細(xì)胞系胰蛋白酶處理的原因、目的和注意事項(xiàng)胰蛋白酶處理的原因、目的和注意事項(xiàng)動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的區(qū)別動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的區(qū)別思考與探究：如何用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，為燒傷病人植皮？ 取該患者的皮膚進(jìn)行取該患者的皮膚進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),獲得足量的細(xì)獲得足量的細(xì)胞后再移植胞后再移植 1 1、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是 -（

15、 ） A A細(xì)胞系細(xì)胞系 B B細(xì)胞株細(xì)胞株 C C原代細(xì)胞原代細(xì)胞 D D傳代細(xì)胞傳代細(xì)胞2 2、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 -（ ） A.A.動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合 B.B.單克隆抗體單克隆抗體 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)AD課堂反饋練習(xí)課堂反饋練習(xí)3 3、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞這樣的組織細(xì)胞 （ ）A.A.容易產(chǎn)生各種變異容易產(chǎn)生各種變異 B B具有更強(qiáng)的全能性具有更

16、強(qiáng)的全能性C.C.取材十分方便取材十分方便 D D分裂增殖的能力強(qiáng)分裂增殖的能力強(qiáng)D4、下列屬于動物細(xì)胞工程中的工具是（、下列屬于動物細(xì)胞工程中的工具是（ ） A限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶 BDNA連接酶連接酶 C胰蛋白酶胰蛋白酶 D果膠酶果膠酶C5、在動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中，正確的是（、在動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中，正確的是（ ）A動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細(xì)胞分動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白泌蛋白B動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中D培養(yǎng)至培

17、養(yǎng)至50代后繼續(xù)傳代的細(xì)胞是細(xì)胞株代后繼續(xù)傳代的細(xì)胞是細(xì)胞株6、在動物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下、在動物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱之為（無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱之為（ ）A原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) B傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) C細(xì)胞株細(xì)胞株 D細(xì)胞系細(xì)胞系BD 7、動物細(xì)胞培養(yǎng)的正確過程是（ ）A.原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系 B. 原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞系細(xì)胞株C.傳代培養(yǎng)細(xì)胞系原代培養(yǎng)細(xì)胞株 D. 原代培養(yǎng)細(xì)胞系傳代培養(yǎng)細(xì)胞株8、下列與動物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是（ ）A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清B原代培養(yǎng)的細(xì)胞

18、一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯C動物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變D動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞AC 動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。右圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影右圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息可以響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息可以獲得的正確結(jié)論有獲得的正確結(jié)論有( )A正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同 B有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)培養(yǎng) D培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大養(yǎng)影響不大BCD 9、07年江蘇高考題年江蘇高考題1010、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答 (1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自_。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是_，然后用 酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做