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1、 第二節(jié)第二節(jié) 培養(yǎng)基及其配制培養(yǎng)基及其配制6酒精擦拭酒精擦拭旋轉(zhuǎn)灼燒旋轉(zhuǎn)灼燒取外植體取外植體 接接 種種蓋好瓶塞蓋好瓶塞修剪外植體修剪外植體外植體接種全過程外植體接種全過程酒精擦拭手酒精擦拭手外植體消毒外植體消毒浸泡浸泡5 min器械消毒器械消毒酒精燈灼燒酒精燈灼燒酒精擦拭培養(yǎng)皿酒精擦拭培養(yǎng)皿初代培養(yǎng)(初代培養(yǎng)(Primary culture):):指外植體的最初指外植體的最初培養(yǎng)。培養(yǎng)。繼代培養(yǎng)(繼代培養(yǎng)(Subculture):):愈傷組織在培養(yǎng)基上愈傷組織在培養(yǎng)基上生長一段時間后,由于營養(yǎng)物質(zhì)的枯竭、水分生長一段時間后,由于營養(yǎng)物質(zhì)的枯竭、水分的散失、以及一些組織代謝產(chǎn)物的積累,必須的
2、散失、以及一些組織代謝產(chǎn)物的積累,必須將初代培養(yǎng)得到的培養(yǎng)體移植于新鮮的培養(yǎng)基將初代培養(yǎng)得到的培養(yǎng)體移植于新鮮的培養(yǎng)基上,這種轉(zhuǎn)移過程,稱為繼代培養(yǎng)。一般每隔上,這種轉(zhuǎn)移過程,稱為繼代培養(yǎng)。一般每隔4 6 周進行一次繼代培養(yǎng)。周進行一次繼代培養(yǎng)。試管苗試管苗外植體外植體愈傷組織愈傷組織根、芽根、芽芽芽根根 芽芽根根途徑途徑1(愈傷組織發(fā)生途徑):外植體經(jīng)誘導后(愈傷組織發(fā)生途徑):外植體經(jīng)誘導后先形成愈傷組織,然后形成根和芽,再進而形先形成愈傷組織,然后形成根和芽,再進而形成完整的植物體。成完整的植物體。 途徑途徑2(胚狀體發(fā)生途徑):外植體先形成胚狀(胚狀體發(fā)生途徑):外植體先形成胚狀體(可從器官、愈傷組織、游離單細胞、小孢體(可從器官、愈傷組織、游離單細胞、小孢子發(fā)生),再發(fā)育成完整的植株。子發(fā)生),再發(fā)育成完整的植株。 途徑途徑3(器官發(fā)生途徑):外植體經(jīng)誘導后直接(器官發(fā)生途徑):外植體經(jīng)誘導后直接形成根和芽,進而形
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