高中生物全程復(fù)習(xí)方略配套：選修生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用ppt課件

1、專題4 生物技術(shù)在其他方面的運(yùn)用一、一、DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定1.1.提取原理提取原理DNADNA與雜質(zhì)的與雜質(zhì)的_不同，不同，DNADNA與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的_不同。不同。溶解度溶解度耐耐受性受性2.2.提取提取DNADNA的詳細(xì)步驟的詳細(xì)步驟(1)(1)實(shí)驗(yàn)資料的選取：本實(shí)驗(yàn)用實(shí)驗(yàn)資料的選?。罕緦?shí)驗(yàn)用_細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)資料。細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)資料。(2)(2)破碎細(xì)胞，釋放破碎細(xì)胞，釋放DNADNA：利用血細(xì)胞：利用血細(xì)胞_的原理，留意玻的原理，留意玻璃棒的璃棒的_向攪拌，過濾取濾液。向攪拌，過濾取濾液。(3)(3)溶解細(xì)胞核內(nèi)的溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNADN

2、A：在高濃度的：在高濃度的NaClNaCl溶液中，核蛋白容易溶液中，核蛋白容易集聚，游離出的集聚，游離出的DNADNA溶解。溶解。(4)DNA(4)DNA的析出：加蒸餾水降低的析出：加蒸餾水降低NaClNaCl溶液濃度，使溶液濃度，使DNA_DNA_。(5)DNA(5)DNA的初步純化：將的初步純化：將DNADNA絲狀物再溶解、過濾，向?yàn)V液中參與絲狀物再溶解、過濾，向?yàn)V液中參與體積分?jǐn)?shù)為體積分?jǐn)?shù)為95%95%的的_溶液進(jìn)展提純。溶液進(jìn)展提純。3.DNA3.DNA的鑒定的鑒定DNADNA在在_的條件下，與的條件下，與_呈呈_色。色。 雞血雞血吸水漲破吸水漲破單單析出析出冷酒精冷酒精沸水浴沸水浴二

3、苯胺二苯胺藍(lán)藍(lán)二、血紅蛋白的提取和分別實(shí)驗(yàn)二、血紅蛋白的提取和分別實(shí)驗(yàn)1.1.常用的分別方法：常用的分別方法：_法、凝膠電泳法等法、凝膠電泳法等2.2.根本原理根本原理(1)(1)凝膠色譜法的原理：相對分子質(zhì)量大的分子經(jīng)過多孔凝膠顆凝膠色譜法的原理：相對分子質(zhì)量大的分子經(jīng)過多孔凝膠顆粒的間隙，路程粒的間隙，路程_，流動，流動_；相對分子質(zhì)量小的分子穿過多孔；相對分子質(zhì)量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程凝膠顆粒內(nèi)部，路程_，流動，流動_。(2)(2)凝膠電泳法的原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、凝膠電泳法的原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、_、外形、外形和和_不同，在電場中遭到的作用力大小、不同，在電場中

4、遭到的作用力大小、_、阻力不同，、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動_和運(yùn)動和運(yùn)動_不同。不同。凝膠色譜凝膠色譜短短快快長長慢慢電量電量大小大小方向方向速度速度方向方向3.3.血紅蛋白的提取和分別程序血紅蛋白的提取和分別程序(1)(1)樣品處置：樣品處置：紅細(xì)胞的洗滌紅細(xì)胞的洗滌_的釋放的釋放分別血紅蛋白溶液分別血紅蛋白溶液(2)(2)粗分別粗分別_：除去樣品中相對分子質(zhì)量較：除去樣品中相對分子質(zhì)量較_的雜質(zhì)。的雜質(zhì)。(3)(3)純化：普通采用純化：普通采用_法對血紅蛋白進(jìn)展分別和純化。法對血紅蛋白進(jìn)展分別和純化。(4)(4)純度鑒定：普通用純度鑒定：普通用_法

5、來測定蛋白質(zhì)法來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進(jìn)展純度鑒定。的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進(jìn)展純度鑒定。血紅蛋白血紅蛋白透析透析小小凝膠色譜凝膠色譜SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳【點(diǎn)撥】【點(diǎn)撥】 提純出的提純出的DNADNA的鑒定還可用甲基綠染色的方法進(jìn)展，的鑒定還可用甲基綠染色的方法進(jìn)展，甲基綠可將甲基綠可將DNADNA染成綠色。染成綠色。DNADNA聚合酶不能從頭合成聚合酶不能從頭合成DNADNA子鏈，只能從引物的子鏈，只能從引物的33端開場延端開場延伸，從子鏈的伸，從子鏈的55端開場所成。引物的端開場所成。引物的33端與子鏈的端與子鏈的55端交匯端交匯于一點(diǎn)，

6、屬于對模板和產(chǎn)物的描畫，兩種說法都正確。于一點(diǎn)，屬于對模板和產(chǎn)物的描畫，兩種說法都正確。SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳本質(zhì)上測定的是組成蛋白質(zhì)的多肽聚丙烯酰胺凝膠電泳本質(zhì)上測定的是組成蛋白質(zhì)的多肽鏈的相對分子質(zhì)量，電泳后構(gòu)成的兩條或多條帶并不一定是雜鏈的相對分子質(zhì)量，電泳后構(gòu)成的兩條或多條帶并不一定是雜質(zhì)，如血紅蛋白由兩條質(zhì)，如血紅蛋白由兩條鏈和兩條鏈和兩條鏈組成，本身就會構(gòu)成兩鏈組成，本身就會構(gòu)成兩條帶。條帶。 DNA DNA 和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)1.DNA1.DNA與蛋白質(zhì)在不同與蛋白質(zhì)在不同NaClNaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同2 mol/L2 mol/LNaClNaC

7、l溶液溶液 0.14 mol/L0.14 mol/LNaClNaCl溶液溶液溶解規(guī)律溶解規(guī)律DNADNA溶解溶解析出析出 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 部分發(fā)生部分發(fā)生鹽析沉淀鹽析沉淀 溶解溶解 NaClNaCl溶液從溶液從2 mol/L2 mol/L降低過程中，溶解度降低過程中，溶解度逐漸增大逐漸增大2.2.分別分別DNADNA和分別蛋白質(zhì)的比較和分別蛋白質(zhì)的比較分離分離DNADNA 分離蛋白質(zhì)分離蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理原理DNADNA在不同濃度在不同濃度NaClNaCl溶液中溶溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精解度不同，且不溶于冷酒精依據(jù)相對分子質(zhì)量的大依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小不同來分離蛋白質(zhì)小不同來分離蛋白質(zhì)

8、 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過程過程選取材料選取材料破碎細(xì)胞釋放破碎細(xì)胞釋放DNADNA除雜除雜DNADNA析出與鑒定析出與鑒定樣品處理樣品處理凝膠色譜操凝膠色譜操作作 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果 獲得較純凈的獲得較純凈的DNADNA相對分子質(zhì)量不同的蛋相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離白質(zhì)得以分離 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)意義意義 為為DNADNA研究打下基礎(chǔ)研究打下基礎(chǔ)為蛋白質(zhì)的研究和利用為蛋白質(zhì)的研究和利用提供了原材料提供了原材料 3.3.血紅蛋白的提取和分別方法血紅蛋白的提取和分別方法(1)(1)凝膠色譜法：凝膠色譜法：含義：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的方法。含義：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的方法。原理：原理：a.a.

9、相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，挪動速度較慢。較長，挪動速度較慢。b.b.相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部挪動，路程較短，挪動速度較快。在凝膠外部挪動，路程較短，挪動速度較快。(2)(2)電泳法：電泳法：含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。原理：利用了待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差別和分子原理：利用了待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差別和分子本身大小、外形不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度

10、，從而本身大小、外形不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。(3)(3)緩沖溶液：緩沖溶液：組成：組成：1 12 2種緩沖劑溶解于水中配制而成。種緩沖劑溶解于水中配制而成。作用：在一定范圍內(nèi)抵抗外界的酸和堿對溶液作用：在一定范圍內(nèi)抵抗外界的酸和堿對溶液pHpH的影響，維的影響，維持持pHpH根本不變，確保實(shí)驗(yàn)室條件下能準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的代謝根本不變，確保實(shí)驗(yàn)室條件下能準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的代謝過程。過程?！靖呖季剧姟俊靖呖季剧姟?比較瓊脂糖凝膠電泳和比較瓊脂糖凝膠電泳和SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳(1)(1)從載體上看

11、，利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳，從載體上看，利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳，利用利用SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電聚丙烯酰胺凝膠電泳。泳。(2)(2)從根據(jù)上看，利用了分子帶電性質(zhì)差別和分子大小的是瓊脂從根據(jù)上看，利用了分子帶電性質(zhì)差別和分子大小的是瓊脂糖凝膠電泳，僅利用了分子大小的是糖凝膠電泳，僅利用了分子大小的是SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳。(3)(3)從優(yōu)點(diǎn)上看，瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品從優(yōu)點(diǎn)上看，瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需處置，電泳圖譜

12、明晰，分辨率高，反復(fù)性好；不需處置，電泳圖譜明晰，分辨率高，反復(fù)性好；SDS-SDS-聚丙烯聚丙烯酰胺凝膠電泳消除了凈電荷對遷移率的影響，使電泳遷移率完酰胺凝膠電泳消除了凈電荷對遷移率的影響，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。全取決于分子的大小?！镜淅?xùn)練】【典例訓(xùn)練】(2021(2021江蘇高考江蘇高考) )某生物興趣小組開展某生物興趣小組開展DNADNA粗提取粗提取的相關(guān)探求活動。詳細(xì)步驟如下：的相關(guān)探求活動。詳細(xì)步驟如下：資料處置：稱取新穎的花菜、辣椒和蒜黃各資料處置：稱取新穎的花菜、辣椒和蒜黃各2 2份。每份份。每份10 g10 g。剪。剪碎后分成兩組，一組置于碎后分成兩組，一組置于2

13、0 20 、另一組置于、另一組置于-20 -20 條件下保管條件下保管24 h24 h。DNADNA粗提?。捍痔崛。旱谝徊剑簩⑸鲜鲑Y料分別放入研缽中，各參與第一步：將上述資料分別放入研缽中，各參與15 mL15 mL研磨液，充研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向第二步：先向6 6只小燒杯中分別注入只小燒杯中分別注入10 mL10 mL濾液，再參與濾液，再參與20 mL20 mL體體積分?jǐn)?shù)為積分?jǐn)?shù)為9595的冷酒精溶液，然后用玻璃棒漸漸地沿一個(gè)方向的冷酒精溶液，然后用玻璃棒漸漸地沿一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。攪拌，使絮狀物纏繞在

14、玻璃棒上。第三步：取第三步：取6 6支試管，分別參與等量的支試管，分別參與等量的2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液溶解上溶液溶解上述絮狀物。述絮狀物。DNADNA檢測：在上述試管中各參與檢測：在上述試管中各參與4 mL4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱置于沸水中加熱5 min5 min，待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺，結(jié)，待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺，結(jié)果如下表。果如下表。 ( (注：注：“+ +越多表示藍(lán)色越深越多表示藍(lán)色越深) )材料保存溫度材料保存溫度 花菜花菜 辣椒辣椒 蒜黃蒜黃 20 20 + + + + -20 -20 +分析

15、上述實(shí)驗(yàn)過程，回答以下問題：分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答以下問題：(1)(1)該探求性實(shí)驗(yàn)課題稱號是該探求性實(shí)驗(yàn)課題稱號是_。(2)(2)第二步中第二步中“漸漸地?cái)嚢枋菫榱藴p少漸漸地?cái)嚢枋菫榱藴p少_。(3)(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論結(jié)論1 1：與：與20 20 相比，一樣實(shí)驗(yàn)資料在相比，一樣實(shí)驗(yàn)資料在-20 -20 條件下保管，條件下保管，DNADNA的提取量較多。的提取量較多。結(jié)論結(jié)論2 2：_。針對結(jié)論針對結(jié)論1 1，請給出合理的解釋：，請給出合理的解釋：_。(4)(4)氯仿密度大于水，能使蛋白量變性沉淀，與水和氯仿密度大于水，能使蛋白量變性沉淀，與水

16、和DNADNA均不相均不相溶，且對溶，且對DNADNA影響極小。為了進(jìn)一步提高影響極小。為了進(jìn)一步提高DNADNA純度，根據(jù)氯仿的純度，根據(jù)氯仿的特性，在特性，在DNADNA粗提取第三步的根底上繼續(xù)操作的步驟是：粗提取第三步的根底上繼續(xù)操作的步驟是：_。然后用體積分?jǐn)?shù)為然后用體積分?jǐn)?shù)為9595的冷酒精溶液使的冷酒精溶液使DNADNA析出。析出。 【解析】此題主要調(diào)查的是實(shí)驗(yàn)探求的才干，包括明確實(shí)驗(yàn)課【解析】此題主要調(diào)查的是實(shí)驗(yàn)探求的才干，包括明確實(shí)驗(yàn)課題、處置和解釋實(shí)驗(yàn)步驟、設(shè)計(jì)可行的實(shí)驗(yàn)步驟等。題、處置和解釋實(shí)驗(yàn)步驟、設(shè)計(jì)可行的實(shí)驗(yàn)步驟等。(1)(1)據(jù)題意，該探求實(shí)驗(yàn)的自變量有實(shí)驗(yàn)資料的種

17、類和溫度，因據(jù)題意，該探求實(shí)驗(yàn)的自變量有實(shí)驗(yàn)資料的種類和溫度，因變量為變量為DNADNA提取量，那么該探求性實(shí)驗(yàn)課題稱號是探求不同資料提取量，那么該探求性實(shí)驗(yàn)課題稱號是探求不同資料和不同保管溫度對和不同保管溫度對DNADNA提取量的影響。提取量的影響。(2)(2)攪拌過程中經(jīng)常會發(fā)生攪拌過程中經(jīng)常會發(fā)生DNADNA的斷裂，因此該步驟需求的斷裂，因此該步驟需求“漸漸地漸漸地進(jìn)展。進(jìn)展。(3)(3)據(jù)表分析不同自變量條件下的因變量情況，那么可得結(jié)論據(jù)表分析不同自變量條件下的因變量情況，那么可得結(jié)論2 2：等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)資料，在一樣的保管溫度下，從蒜黃中提：等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)資料，在一樣的保管溫度下

18、，從蒜黃中提取的取的DNADNA量最多。量最多。低溫能使低溫能使DNADNA酶的活性遭到抑制，從而降低了酶的活性遭到抑制，從而降低了DNADNA的降解速率，的降解速率，使使DNADNA提取量增多。提取量增多。(4)(4)根據(jù)氯仿的理化性質(zhì)，可采用氯仿與提取液混合，然后汲取根據(jù)氯仿的理化性質(zhì)，可采用氯仿與提取液混合，然后汲取上清液。上清液。答案：答案：(1)(1)探求不同資料和不同保管溫度對探求不同資料和不同保管溫度對DNADNA提取量的影響提取量的影響(2)DNA(2)DNA斷裂斷裂(3)(3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)資料，在一樣的保管溫度下，從蒜黃中等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)資料，在一樣的保管溫度下，從蒜黃中

19、提取的提取的DNADNA量最多量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性，低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNADNA降解速度慢降解速度慢(4)(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，汲取上清液汲取上清液【變式訓(xùn)練】【變式訓(xùn)練】(2021(2021江蘇高考江蘇高考) )在利用雞血進(jìn)展在利用雞血進(jìn)展“DNADNA的粗提取的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是( )( )A.A.用蒸餾水將用蒸餾水將NaClNaCl溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L0.14 mol/L，濾去析出物，濾去析出物B.

20、B.調(diào)理調(diào)理NaClNaCl溶液濃度或參與木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)溶液濃度或參與木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C.C.將絲狀物溶解在將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液中，參與二苯胺試劑即呈溶液中，參與二苯胺試劑即呈藍(lán)色藍(lán)色D.D.用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)資料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟一樣用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)資料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟一樣【解析】選【解析】選B B。A A項(xiàng)，用蒸餾水將項(xiàng)，用蒸餾水將NaClNaCl溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L,0.14 mol/L,使使DNADNA析出。析出。B B項(xiàng)，項(xiàng)，NaClNaCl溶液濃度為溶液濃度為2mol/L2m

21、ol/L，過濾除去不溶的雜，過濾除去不溶的雜質(zhì)，木瓜蛋白酶可以分解蛋白質(zhì)。質(zhì)，木瓜蛋白酶可以分解蛋白質(zhì)。C C項(xiàng)，在沸水浴的條件下，項(xiàng)，在沸水浴的條件下，DNADNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。遇二苯胺會被染成藍(lán)色。D D項(xiàng)，假照實(shí)驗(yàn)資料是植物細(xì)胞，項(xiàng)，假照實(shí)驗(yàn)資料是植物細(xì)胞，需求先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。需求先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。1.1.以下關(guān)于以下關(guān)于DNADNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正確的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正確的選項(xiàng)是的選項(xiàng)是( )( )A.A.前者選擇雞血細(xì)胞作為資料較好，后者選擇哺乳動物成熟的紅前者選擇雞血細(xì)胞作為資料較好，后者選擇哺乳動物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)

22、資料較好細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)資料較好B.B.樣品預(yù)處置時(shí)，前者靜置樣品預(yù)處置時(shí)，前者靜置1 1天處置除去上清液；后者需求參與天處置除去上清液；后者需求參與清水，反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無黃色清水，反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無黃色C.C.在在DNADNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，往粗提取實(shí)驗(yàn)中，往2 mol/L2 mol/L氯化鈉溶液中參與蒸餾水析出氯化鈉溶液中參與蒸餾水析出DNADNA時(shí)，應(yīng)該緩慢參與，直到出現(xiàn)黏稠物為止時(shí)，應(yīng)該緩慢參與，直到出現(xiàn)黏稠物為止D.D.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽等洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽等【解析】選【解析】選A A。此題調(diào)查了實(shí)驗(yàn)資料

23、的選取與實(shí)驗(yàn)操作過程。雞。此題調(diào)查了實(shí)驗(yàn)資料的選取與實(shí)驗(yàn)操作過程。雞血細(xì)胞有細(xì)胞核，適于提取血細(xì)胞有細(xì)胞核，適于提取DNADNA；哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核；哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，適于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，洗和眾多細(xì)胞器，適于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，洗滌紅細(xì)胞時(shí)，不能加清水，應(yīng)該參與生理鹽水，否那么細(xì)胞提早滌紅細(xì)胞時(shí)，不能加清水，應(yīng)該參與生理鹽水，否那么細(xì)胞提早釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合，加大提取難度。釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合，加大提取難度。DNADNA初次析出時(shí)，初次析出時(shí)，加清水至黏稠物不再添加為止。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，加清水至黏稠物不再

24、添加為止。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分別和純化。以利于血紅蛋白的分別和純化。2.(20212.(2021鎮(zhèn)江模擬鎮(zhèn)江模擬) )知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖，以下有關(guān)白質(zhì)分子，分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖，以下有關(guān)蛋白質(zhì)分別的表達(dá)正確的選項(xiàng)是蛋白質(zhì)分別的表達(dá)正確的選項(xiàng)是( )( )A.A.假設(shè)將樣品以假設(shè)將樣品以2 000 r/min2 000 r/min的速度離心的速度離心10 min10 min，分子戊在沉淀，分子戊在沉淀中，那么丙也一定在沉淀中中，那么丙也一定在沉淀中B

25、.B.假設(shè)用凝膠色譜法分別樣品中的蛋白質(zhì)，那么分子甲挪動速度假設(shè)用凝膠色譜法分別樣品中的蛋白質(zhì)，那么分子甲挪動速度最快最快C.C.將樣品裝入透析袋中透析將樣品裝入透析袋中透析12 h12 h，假設(shè)分子丙保管在袋內(nèi)，那么，假設(shè)分子丙保管在袋內(nèi)，那么乙也一定保管在袋內(nèi)乙也一定保管在袋內(nèi)D.D.假設(shè)用假設(shè)用SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分別樣品中的蛋白質(zhì)分子，那聚丙烯酰胺凝膠電泳分別樣品中的蛋白質(zhì)分子，那么分子甲和分子丁構(gòu)成的電泳帶相距最遠(yuǎn)么分子甲和分子丁構(gòu)成的電泳帶相距最遠(yuǎn)【解析】選【解析】選A A。分子丙的相對分子質(zhì)量大于戊，所以，在離心時(shí)。分子丙的相對分子質(zhì)量大于戊，所以，在離心時(shí)分子戊假

26、設(shè)在沉淀中，丙也一定在沉淀中，分子戊假設(shè)在沉淀中，丙也一定在沉淀中，A A項(xiàng)正確。用凝膠色項(xiàng)正確。用凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時(shí)，甲相對分子質(zhì)量最小，容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部，譜法分別蛋白質(zhì)時(shí)，甲相對分子質(zhì)量最小，容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部，那么挪動速度最慢，那么挪動速度最慢，B B項(xiàng)錯(cuò)誤。分子丙的相對分子質(zhì)量大于乙，項(xiàng)錯(cuò)誤。分子丙的相對分子質(zhì)量大于乙，假設(shè)丙保管在袋內(nèi)，乙能夠在袋外，假設(shè)丙保管在袋內(nèi)，乙能夠在袋外，C C項(xiàng)錯(cuò)誤。項(xiàng)錯(cuò)誤。SDS-SDS-聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)蛋白質(zhì)的遷移速度取決于分子的大小，因此，分子甲凝膠電泳時(shí)蛋白質(zhì)的遷移速度取決于分子的大小，因此，分子甲與丙構(gòu)成的電泳帶相距最遠(yuǎn)，與丙構(gòu)成

27、的電泳帶相距最遠(yuǎn)，D D項(xiàng)錯(cuò)誤。項(xiàng)錯(cuò)誤。3.3.將經(jīng)處置破裂后的紅細(xì)胞混合液以將經(jīng)處置破裂后的紅細(xì)胞混合液以2 000 r/min2 000 r/min的速度離心的速度離心10 min10 min后，離心管中的溶液分為后，離心管中的溶液分為4 4層，從上到下的順序依次層，從上到下的順序依次是是( )( )A.A.血紅蛋白、甲苯層、脂類物質(zhì)層、沉淀層血紅蛋白、甲苯層、脂類物質(zhì)層、沉淀層B.B.甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂類物質(zhì)層甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂類物質(zhì)層C.C.脂類物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層脂類物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層D.D.甲苯層、脂類物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層甲苯層、脂

28、類物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層【解析】選【解析】選D D?；旌弦航?jīng)離心后，按密度大小陳列，在離心管中。混合液經(jīng)離心后，按密度大小陳列，在離心管中從上到下的順序依次是：第從上到下的順序依次是：第1 1層為無色透明的甲苯層；第層為無色透明的甲苯層；第2 2層為白層為白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層；第色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層；第3 3層為紅色透明液體，層為紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液；第這是血紅蛋白的水溶液；第4 4層為暗紅色沉淀物，主要是紅細(xì)胞層為暗紅色沉淀物，主要是紅細(xì)胞破碎物沉淀。破碎物沉淀。4.4.以下表達(dá)中錯(cuò)誤的選項(xiàng)是以下表達(dá)中錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( )( )A.A.改動改動NaCl

29、NaCl溶液的濃度只能使溶液的濃度只能使DNADNA溶解而不能使其析出溶解而不能使其析出B.B.在沸水浴中，在沸水浴中，DNADNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色C.C.用電泳法可分別帶電性質(zhì)、分子大小和外形不同的蛋白質(zhì)用電泳法可分別帶電性質(zhì)、分子大小和外形不同的蛋白質(zhì)D.D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)【解析】選【解析】選A A。在不同濃度的氯化鈉溶液中。在不同濃度的氯化鈉溶液中DNADNA的溶解度不同，在的溶解度不同，在0.14 mol/L0.14 mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最小的氯化鈉溶液中溶解度最小,DNA,DNA析出析

30、出, ,呈絲狀呈絲狀, ,過濾后過濾后存在于黏稠物中存在于黏稠物中; ;在在2 mol/L2 mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最大，所以的氯化鈉溶液中溶解度最大，所以DNADNA呈溶解形狀，過濾后存在于濾液中。呈溶解形狀，過濾后存在于濾液中。5.(20215.(2021蘇州模擬蘇州模擬) )關(guān)于紅細(xì)胞的洗滌過程的表達(dá)正確的選項(xiàng)是關(guān)于紅細(xì)胞的洗滌過程的表達(dá)正確的選項(xiàng)是( )( )A.A.低速長時(shí)間離心，如低速長時(shí)間離心，如500 r/min,12 min500 r/min,12 min，以保證到達(dá)很好的分別，以保證到達(dá)很好的分別效果效果B.B.離心后用膠頭吸管吸出下層透明的紅色血漿離心后用膠頭吸管

31、吸出下層透明的紅色血漿C.C.將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯，再參與五倍體積的蒸餾水將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯，再參與五倍體積的蒸餾水D.D.直至上清液中沒有黃色，闡明紅細(xì)胞已洗滌干凈直至上清液中沒有黃色，闡明紅細(xì)胞已洗滌干凈【解析】選【解析】選D D。紅細(xì)胞洗滌過程中，應(yīng)做低速短時(shí)間離心，以防。紅細(xì)胞洗滌過程中，應(yīng)做低速短時(shí)間離心，以防止白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等一同沉淀，影響血紅蛋白的提純；離心后止白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等一同沉淀，影響血紅蛋白的提純；離心后血漿在上層，并呈現(xiàn)黃色；洗滌紅細(xì)胞時(shí)運(yùn)用生理鹽水而不用蒸血漿在上層，并呈現(xiàn)黃色；洗滌紅細(xì)胞時(shí)運(yùn)用生理鹽水而不用蒸餾水，否那么，將導(dǎo)致紅細(xì)胞破

32、裂影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此餾水，否那么，將導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此A A、B B、C C均錯(cuò)誤。均錯(cuò)誤。6.(6.(多項(xiàng)選擇多項(xiàng)選擇)(2021)(2021鎮(zhèn)江模擬鎮(zhèn)江模擬) )以下以下DNADNA粗提取的實(shí)驗(yàn)操作中，粗提取的實(shí)驗(yàn)操作中，經(jīng)過離心或過濾后，取上清液或?yàn)V液的有經(jīng)過離心或過濾后，取上清液或?yàn)V液的有( )( )A.A.在新穎雞血中參與適量的檸檬酸鈉，混合均勻后離心在新穎雞血中參與適量的檸檬酸鈉，混合均勻后離心B.B.在盛有血細(xì)胞的塑料燒杯中加蒸餾水，快速攪拌后過濾在盛有血細(xì)胞的塑料燒杯中加蒸餾水，快速攪拌后過濾C.C.在在2 mol/L2 mol/L的氯化鈉溶液中放入絲狀物，悄然攪

33、拌后過濾的氯化鈉溶液中放入絲狀物，悄然攪拌后過濾D.D.在溶有在溶有DNADNA的氯化鈉溶液中漸漸參與蒸餾水，悄然攪拌后過濾的氯化鈉溶液中漸漸參與蒸餾水，悄然攪拌后過濾【解析】選【解析】選B B、C C。檸檬酸鈉可以防止血液凝固，新穎雞血經(jīng)過離。檸檬酸鈉可以防止血液凝固，新穎雞血經(jīng)過離心后，上清液中血細(xì)胞較少。在血細(xì)胞中參與蒸餾水，細(xì)胞吸水心后，上清液中血細(xì)胞較少。在血細(xì)胞中參與蒸餾水，細(xì)胞吸水而漲破，而漲破，DNADNA在濾液中。含有在濾液中。含有DNADNA的絲狀物溶于的絲狀物溶于2 mol/L2 mol/L的氯化鈉的氯化鈉溶液中，那么溶液中，那么DNADNA在濾液中。當(dāng)氯化鈉溶液濃度為在

34、濾液中。當(dāng)氯化鈉溶液濃度為0.14 mol/L0.14 mol/L時(shí)，時(shí)，DNADNA溶解度最低而析出，雜質(zhì)在濾液中。溶解度最低而析出，雜質(zhì)在濾液中。7.(20217.(2021廣州模擬廣州模擬) )某生物興趣小組在某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分別蛋白質(zhì)的提取和分別實(shí)驗(yàn)中，預(yù)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)中，預(yù)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的“血紅蛋血紅蛋白提取、分別流程圖如下：白提取、分別流程圖如下：請回答以下有關(guān)問題：請回答以下有關(guān)問題：(1)(1)樣品處置中紅細(xì)胞的洗滌要用樣品處置中紅細(xì)胞的洗滌要用_反復(fù)沖洗、離心。向反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中參與一定量的低濃度紅細(xì)胞懸液中參與一定量的低濃度pH=7.0pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁梢云扑榧t細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是可以破碎紅細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是_。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備純化、純蛋白質(zhì)樣品處理(配制緩度鑒定(洗滌、破粗