檢測系統(tǒng)及分析性能評價

1、 自建檢測系統(tǒng)及 分析性能評價河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院高高 社社 軍軍行業(yè)要求n國家衛(wèi)生行政管理部門，醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗室管理國家衛(wèi)生行政管理部門，醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗室管理辦法，第三章辦法，第三章2424條：條：20.120.1是否對檢測系統(tǒng)是否對檢測系統(tǒng)( (儀器設(shè)備、試劑、校準(zhǔn)品儀器設(shè)備、試劑、校準(zhǔn)品) )進(jìn)行了進(jìn)行了有效性的評價？包括對有效性的評價？包括對準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度、精密度精密度、分析測量范分析測量范圍圍、參考范圍參考范圍、分析干擾分析干擾等的評估。等的評估。認(rèn)可要求ISO15189認(rèn)可要求5.5 檢驗過程 5.5.1 檢驗程序的選擇、驗證和確認(rèn) 5.5.1.1 總則5.5

2、.1.2 檢驗程序驗證檢驗程序驗證 在常規(guī)應(yīng)用前，應(yīng)由實(shí)驗室對未加修改而使用的已確認(rèn)的檢驗程序進(jìn)行在常規(guī)應(yīng)用前，應(yīng)由實(shí)驗室對未加修改而使用的已確認(rèn)的檢驗程序進(jìn)行獨(dú)立驗證。獨(dú)立驗證。 實(shí)驗室應(yīng)從制造商或方法開發(fā)者獲得相關(guān)信息，以確定檢驗程序的性能實(shí)驗室應(yīng)從制造商或方法開發(fā)者獲得相關(guān)信息，以確定檢驗程序的性能特征。特征。 實(shí)驗室進(jìn)行的獨(dú)立驗證，應(yīng)通過獲取客觀證據(jù)（以性能特征形式）證實(shí)實(shí)驗室進(jìn)行的獨(dú)立驗證，應(yīng)通過獲取客觀證據(jù)（以性能特征形式）證實(shí)檢驗程序的性能與其聲明相符。驗證過程證實(shí)的檢驗程序的性能指標(biāo)，檢驗程序的性能與其聲明相符。驗證過程證實(shí)的檢驗程序的性能指標(biāo)，應(yīng)與檢驗結(jié)果的預(yù)期用途相關(guān)。應(yīng)與

3、檢驗結(jié)果的預(yù)期用途相關(guān)。 ISO15189認(rèn)可要求5.5 檢驗過程 5.5.1 檢驗程序的選擇、驗證和確認(rèn) 5.5.1.1 總則5.5.1.2 檢驗程序驗證驗證 5.5.1.3檢驗程序的確認(rèn)檢驗程序的確認(rèn)實(shí)驗室應(yīng)對以下來源的檢驗程序進(jìn)行確認(rèn)： a) 非標(biāo)準(zhǔn)方法； b) 實(shí)驗室設(shè)計或制定的方法； c) 超出預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法； d) 修改過的確認(rèn)方法。 概 念n評估（評估（EvaluationEvaluation）：實(shí)驗室通過實(shí)驗，測）：實(shí)驗室通過實(shí)驗，測量新方法的分析性能。量新方法的分析性能。n確認(rèn)（確認(rèn)（ValidationValidation）：通過提供客觀證據(jù)對特定的）：通過提供客觀

4、證據(jù)對特定的預(yù)期用途或應(yīng)用要求已得到滿足的認(rèn)定。預(yù)期用途或應(yīng)用要求已得到滿足的認(rèn)定。n驗證（驗證（VerificationVerification）：提供客觀證據(jù)對規(guī)定要求）：提供客觀證據(jù)對規(guī)定要求得到滿足的認(rèn)定。得到滿足的認(rèn)定。系統(tǒng)的確認(rèn)和驗證檢測系統(tǒng)n什么是什么是檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)？ 完成一個項目檢測完成一個項目檢測涉及涉及的的儀器、試劑、校儀器、試劑、校準(zhǔn)品、準(zhǔn)品、測定方法、測定方法、質(zhì)量控制質(zhì)量控制、保養(yǎng)計劃等、保養(yǎng)計劃等的的（規(guī)定）組合（規(guī)定）組合。如果是手工操作，則還。如果是手工操作，則還必須包括操作人員。必須包括操作人員。檢測系統(tǒng)n檢測系統(tǒng)分類：貝克曼LX20生化儀貝克曼的檢測試劑

5、盒貝克曼的校準(zhǔn)品葡萄糖氧化酶法貝克曼LX20生化儀羅氏的檢測試劑盒貝克曼的校準(zhǔn)品葡萄糖氧化酶法標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)檢檢測測系系統(tǒng)統(tǒng)自自建建檢檢測測系系統(tǒng)統(tǒng)兩個不同的檢測系統(tǒng)兩個不同的檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)的要素檢測系統(tǒng)的要素校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品試劑試劑分析儀分析儀均值與真值相接近的程度偏倚 (Bias)系統(tǒng)誤差重復(fù)測定結(jié)果之間接近的程度標(biāo)準(zhǔn)差SD，CV隨機(jī)誤差儀器儀器n主要技術(shù)性能驗證主要技術(shù)性能驗證n建立相關(guān)檔案記錄建立相關(guān)檔案記錄n建立相關(guān)建立相關(guān)SOP并培訓(xùn)、授權(quán)并培訓(xùn)、授權(quán)n環(huán)境條件環(huán)境條件設(shè)備檔案 檢測系統(tǒng)支持文件檢測系統(tǒng)支持文件設(shè)備檔案大型儀器設(shè)備登記表大型儀器設(shè)備登記表： 儀器名稱、型號、序列號、購買時間

6、、價格、 附加說明、使用專業(yè)組等小型儀器設(shè)備登記表小型儀器設(shè)備登記表儀器和項目SOP儀器校驗行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院儀器校驗零點(diǎn)漂移吸光度準(zhǔn)確度吸光度重復(fù)性雜散光吸光度線性試劑艙溫度樣本針攜帶污染河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院儀器校驗河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院檢驗科試劑和校準(zhǔn)品試劑和校準(zhǔn)品n試劑三證試劑三證n試劑出入庫管理試劑出入庫管理n試劑開瓶時間試劑開瓶時間n試劑評價試劑評價溯源性溯源性n最準(zhǔn)確可靠的結(jié)果就是：最準(zhǔn)確可靠的結(jié)果就是： 在參考實(shí)驗室在參考實(shí)驗室, 用國際公認(rèn)的用國際公認(rèn)的參考方法參考方法對新鮮的血清標(biāo)對新鮮的血清標(biāo)本做出的值本做出的值n溯源性溯源性就是通過一條就是通過一條不間斷

7、的比較鏈不間斷的比較鏈（方法學(xué)比較）（方法學(xué)比較），使檢測結(jié)果或檢測標(biāo)，使檢測結(jié)果或檢測標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)一致與國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)一致.一級校準(zhǔn)品制造廠商在生產(chǎn)時所使用的校準(zhǔn)品一級參考方法一級參考方法二級參考方法二級參考方法制造廠商所推薦的測定操制造廠商所推薦的測定操作法作法二級校準(zhǔn)品制造廠商在銷售時所使用的校準(zhǔn)品制造廠商所常用的測定操制造廠商所常用的測定操作法作法用戶的日常檢驗法用戶的日常檢驗法日常樣品日常樣品測定結(jié)果測定結(jié)果SISI單位的定義單位的定義不準(zhǔn)確度的大小溯源的體系圖溯源的體系圖檢測系統(tǒng)性能評價的參考標(biāo)準(zhǔn)NC

8、CLS (美國臨床實(shí)驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會 ) National Committee for Clinical Laboratory Standards CLSI(臨床實(shí)驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會) Clinical and Laboratory Standards Instituten準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度n精密度（精密度（ NCCLS EP5）n線性范圍（線性范圍（ NCCLS EP6）n參考區(qū)間參考區(qū)間 （NCCLS C-28A)n初步評價（初步評價（NCCLS EP10）n 抗干擾能力（抗干擾能力（ NCCLS EP7）n 基質(zhì)效應(yīng)（基質(zhì)效應(yīng)（ NCCLS EP14）n定性實(shí)驗方法的評價定性實(shí)驗方法的評價 （NC

9、CLS EP-12P）n 比對及偏差（比對及偏差（ NCCLS EP9）EP5-A（臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評價 核準(zhǔn)指南）-Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline EP6-P2(定量分析方法的線性評價：統(tǒng)計方法，提議指南 )-Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods: A Statistical Approach; Proposed Guideline EP7-P (臨床化學(xué)干擾化

10、學(xué)干擾試驗；建議指南) -Interference Testing in Clinical Chemistry; Proposed Guideline EP10-A (定量定量臨床實(shí)驗室方法的初步評價，核準(zhǔn)指南) -Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods; Approved Guideline EP12-P (用于定性定性實(shí)驗評價的用戶協(xié)議，提議指南) -User Protocol for Evaluation of Qualitative Test erformance; Proposed Guid

11、eline 精密度評價：EP5-A n概念：精密度概念：精密度n先做一個初步的批內(nèi)精密度測定，即一個標(biāo)本重復(fù)測定20次，計算出均值，標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。n分別準(zhǔn)備正常值血清和病理值血清，并分裝凍存。n每天分別取出正常值血清和病理值血清各一支，室溫復(fù)溶、混勻待測。EP5-An2個標(biāo)本每天測定2次(2次測定間隔不得少于2小時)，每次測定均作雙份，共測定20天。每次測定至少做一個質(zhì)控。n數(shù)據(jù)整理于精密度實(shí)驗方案表。n離群點(diǎn)的檢查： “離群點(diǎn)”應(yīng)棄去或重做。n統(tǒng)計分析： 數(shù)據(jù)錄入精密度實(shí)驗方案表后，按EP5-A文件中計算公式計算總精密度ST，批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差Swr，批間標(biāo)準(zhǔn)差Srr，日間標(biāo)準(zhǔn)差Sdd。精密度評

12、價實(shí)驗-基本方法分析物: 肌酐 樣本: 低/中/高值血清；HN1530/HE1532 儀器: Olympus AU400 試劑來源/批號: Lot 12-1218P校準(zhǔn)物來源/批號: Randox CAL2351 / Lot 476UE 以 肌酐酶法試劑為例，驗證EP5-A2基本方法精密度評價實(shí)驗-基本方法天數(shù)(I)第一批 Run 1第二批 Run 2日均值XiXi11Xi12批均值批均值Xi1Xi21Xi22批均值批均值Xi21220總均值 X 數(shù)據(jù)記錄表格數(shù)據(jù)記錄表格精密度評價實(shí)驗-基本方法肌酐酶法試劑肌酐酶法試劑 精密度評價精密度評價-低值血清低值血清 mol/l天數(shù)第一批第二批XiXi

13、11Xi12Xi1Xi21Xi22Xi2181.0 79.9 80.5 80.7 80.8 80.8 80.6 280.3 78.9 79.6 81.0 80.6 80.8 80.2 380.0 79.6 79.8 80.2 81.3 80.8 80.3 479.3 79.4 79.4 79.4 79.5 79.5 79.4 579.2 79.9 79.6 80.0 78.9 79.5 79.5 679.7 79.4 79.6 79.3 79.3 79.3 79.4 778.1 78.4 78.3 78.1 78.0 78.1 78.2 878.6 78.6 78.6 80.1 79.0 79

14、.6 79.1 979.1 80.0 79.6 81.0 80.0 80.5 80.0 1080.7 80.1 80.4 79.2 79.5 79.4 79.9 1178.4 78.8 78.6 81.4 81.1 81.3 79.9 1281.8 81.0 81.4 81.9 81.6 81.8 81.6 1381.1 79.9 80.5 82.9 81.3 82.1 81.3 1479.8 81.6 80.7 81.0 80.0 80.5 80.6 1580.0 79.5 79.8 79.4 80.1 79.8 79.8 1679.8 80.7 80.3 79.7 79.5 79.6 79

15、.9 1780.3 81.1 80.7 79.4 79.9 79.7 80.2 1880.1 80.6 80.4 79.3 78.6 79.0 79.7 1978.2 78.2 78.2 78.6 78.6 78.6 78.4 2079.9 80.3 80.1 78.0 76.7 77.4 78.7 總均值79.8 精密度評價實(shí)驗-基本方法天數(shù)第一批第二批（第一批均數(shù)第二批均數(shù)）2（每天均數(shù)-總均數(shù)）2（Xi11-Xi12）2（Xi21-Xi22）2（Xi1-Xi2）2（Xi-X）211.210.010.09 0.60 21.960.161.44 0.14 30.161.210.90 0.20

16、 40.010.010.01 0.18 50.491.210.01 0.11 60.0900.06 0.16 70.090.010.04 2.81 801.210.90 0.57 90.8110.90 0.04 100.360.091.10 0.00 110.160.097.02 0.01 120.640.090.12 3.05 131.442.562.56 2.17 143.2410.04 0.60 150.250.490.00 0.01 160.810.040.42 0.01 170.640.251.10 0.12 180.250.491.96 0.03 19000.16 2.04 200

17、.161.697.56 1.22 求和12.7711.6126.42 14.06 （1）（2）（3）（4）精密度評價實(shí)驗-基本方法n重復(fù)性 其中： I總的運(yùn)行天數(shù)（通常為20） j 為每日的批次（1或者2） Xij1為第i日第j批第1次的結(jié)果 Xij2為第i日第j批第2次的結(jié)果=0.55精密度評價實(shí)驗-基本方法n室內(nèi)精密度評價 I 總的運(yùn)行天數(shù)（有兩個批次）Xi1第i日第1批運(yùn)行結(jié)果的均值Xi2 第i日第2批運(yùn)行結(jié)果的均值 =0.81精密度評價實(shí)驗-基本方法n室內(nèi)精密度評價 I 總的運(yùn)行天數(shù)Xi 第i日所有結(jié)果的均值X 所有結(jié)果的均值 =0.86精密度評價實(shí)驗-基本方法n室內(nèi)精密度評價=0.6

18、42=0.712精密度評價實(shí)驗-基本方法n室內(nèi)精密度評價其中： Sdd 為日間標(biāo)準(zhǔn)差 Srr 為批間標(biāo)準(zhǔn)差 Sr 為重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差（批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差）222TddrrrSSSS=1.11舉例-酶法肌酐精密度評價肌酐酶法試劑 精密度評價-低值血清 mol/l 天數(shù)I20批均值標(biāo)準(zhǔn)差A(yù)0.81 日均值標(biāo)準(zhǔn)差B0.86 總均值 mean X 79.8 CV重復(fù)性重復(fù)性 RepeatabilitySr0.55 0.7%批間精密度 Between-runSrr0.71 0.9%日間精密度 Between-daySdd0.64 0.8%室內(nèi)精密度室內(nèi)精密度 Within-laboratoryST1.11 1.4%

19、舉例-酶法肌酐精密度評價研發(fā)4度試劑 精密度評價 (mol/l)Serum PrecisionHN1530HE1532Serum 1Serum 2 Serum 3NO.of Data Points8080808080Mean(mol/l)128.3375.879.8184.1379.5 Within-RunSD0.84 2.130.55 1.17 2.15 CV%0.70.60.70.60.6Within-LaboratorySD1.343.531.111.924.17CV%1.00.91.41.01.1依據(jù)EP-5A2文件要求，測定試劑精密度臨床實(shí)驗室精密度驗證結(jié)果判定n與廠家聲明的批內(nèi)不精

20、密度和室內(nèi)不精密與廠家聲明的批內(nèi)不精密度和室內(nèi)不精密度比較度比較n與國家標(biāo)準(zhǔn)比較與國家標(biāo)準(zhǔn)比較n與與CLIA88CLIA88推薦的允許總誤差比較推薦的允許總誤差比較n實(shí)驗室自定標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室自定標(biāo)準(zhǔn)線性評價：EP6-P2 n概念：線性范圍、可報告范圍、臨床可報告范圍概念：線性范圍、可報告范圍、臨床可報告范圍n將H和L樣品按：5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關(guān)系各自配制混合，形成系列評價樣品。n一天內(nèi)做兩次實(shí)驗，第一次實(shí)驗由低到高重復(fù)測定3次，第二次實(shí)驗由高到低重復(fù)測定3次，即每個實(shí)驗樣品做6次重復(fù)測定。綜合所有結(jié)果作統(tǒng)計學(xué)處理。EP6-P2EP6-P2n依照稀釋關(guān)系，計算

21、各實(shí)驗樣品的預(yù)期值。按實(shí)驗要求，每個樣品做6次重復(fù)測定，得6個實(shí)測值，它們和預(yù)期值形成6對數(shù)據(jù)。 n用直線回歸對6對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計，得直線回歸方程Y=bX+a，若b在0.971.03范圍內(nèi)，a接近于0，則可直接判斷測定方法可報告范圍在實(shí)驗已涉及濃度。n若不符合，可去除某點(diǎn)，縮小分析范圍作為真實(shí)的可報告范圍。準(zhǔn)確度評價n準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度：檢測結(jié)果與被測量物真值之間的一致程度。檢測結(jié)果與被測量物真值之間的一致程度。n方法學(xué)比對：EP-9A （標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；標(biāo)準(zhǔn)方法比對；回收試驗）n回收試驗n室間質(zhì)評n準(zhǔn)確度確認(rèn)n若采用某項目的Cal當(dāng)樣品進(jìn)行檢測，該校準(zhǔn)品的檢測值與靶值間的差異，可認(rèn)為該項目的不準(zhǔn)確度。準(zhǔn)

22、確度確認(rèn)準(zhǔn)確度確認(rèn)回收實(shí)驗回收實(shí)驗n回收率%=回收濃度/加入濃度100% 標(biāo)準(zhǔn)液體積n加入濃度=標(biāo)準(zhǔn)液濃度 基礎(chǔ)樣本體積+標(biāo)準(zhǔn)液體積 n回收濃度=樣本最終測定濃度-基礎(chǔ)樣本濃度參考范圍參考范圍的建立：參考范圍的建立： 新分析物或新分析方法新分析物或新分析方法參考范圍的轉(zhuǎn)移與驗證：參考范圍的轉(zhuǎn)移與驗證： 已獲得測量的、可靠性公認(rèn)的分析物已獲得測量的、可靠性公認(rèn)的分析物 項目項目參考范圍參考范圍來源來源紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)男：（4.005.50）1012/L女：（3.505.00）1012/L全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版），第8頁血紅蛋白(Hb)男：120160 g/L女：110150 g/L全國

23、臨床檢驗操作規(guī)程（第二版），第8頁白細(xì)胞計數(shù)(WBC)男：（4.010.0）109/L女：（4.010.0）109/L河北省臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程，第64頁我們的參考范圍從哪里來的？我們的參考范圍從哪里來的？建立參考范圍的要點(diǎn)建立參考范圍的要點(diǎn)n納入標(biāo)準(zhǔn)（供參考）納入標(biāo)準(zhǔn)（供參考） 沒有影響檢測結(jié)果的生理指征沒有影響檢測結(jié)果的生理指征 無服用藥物或進(jìn)行飲食治療無服用藥物或進(jìn)行飲食治療 發(fā)育正常，無器質(zhì)性疾病發(fā)育正常，無器質(zhì)性疾病 3 3個月內(nèi)無輸血、手術(shù)史個月內(nèi)無輸血、手術(shù)史 婦女不在妊娠期及哺乳期婦女不在妊娠期及哺乳期n選取人數(shù)（隨機(jī)至少選取人數(shù)（隨機(jī)至少120120個觀察對象）個觀察對象）

24、 確定參考范圍的最小樣本量確定參考范圍的最小樣本量n檢測：檢測：n統(tǒng)計分析：統(tǒng)計分析： 參考對象群體值的特定百分?jǐn)?shù)（通常是參考對象群體值的特定百分?jǐn)?shù)（通常是9595） 非參數(shù)和參數(shù)分析：是否正態(tài)分布非參數(shù)和參數(shù)分析：是否正態(tài)分布參考范圍的轉(zhuǎn)移和確認(rèn)參考范圍的轉(zhuǎn)移和確認(rèn) p使用相同類型的分析體系使用相同類型的分析體系p使用不同分析體系使用不同分析體系同一實(shí)驗室內(nèi)同一實(shí)驗室內(nèi)從一個實(shí)驗室到另一個實(shí)驗室從一個實(shí)驗室到另一個實(shí)驗室檢測對象相同的地理區(qū)域和相同的統(tǒng)計學(xué)總體檢測對象相同的地理區(qū)域和相同的統(tǒng)計學(xué)總體 觀測對象及方法學(xué)是一致或可比的觀測對象及方法學(xué)是一致或可比的 基于已確立的有效參考范圍，轉(zhuǎn)移

25、是基于已確立的有效參考范圍，轉(zhuǎn)移是 可行、節(jié)約的可行、節(jié)約的參考范圍轉(zhuǎn)移參考范圍轉(zhuǎn)移拿來主義拿來主義 通過調(diào)查評估轉(zhuǎn)移的可接受性，無需確認(rèn)而進(jìn)行轉(zhuǎn)移通過調(diào)查評估轉(zhuǎn)移的可接受性，無需確認(rèn)而進(jìn)行轉(zhuǎn)移 檢測較小參考個體的樣本量（檢測較小參考個體的樣本量（n n2020）評估確認(rèn)轉(zhuǎn)移）評估確認(rèn)轉(zhuǎn)移 檢測參考個體（檢測參考個體（n n6060）評估和確認(rèn)轉(zhuǎn)移）評估和確認(rèn)轉(zhuǎn)移 p 三種基本方法三種基本方法轉(zhuǎn)移有前提轉(zhuǎn)移有前提對象的一致性對象的一致性方法的一致性方法的一致性不多于不多于2 2個落在參考限值外個落在參考限值外確認(rèn)有效確認(rèn)有效3 3個以上結(jié)果落在參考限值之外個以上結(jié)果落在參考限值之外重新取重新取

26、2020個樣本個樣本不多于不多于2 2個落在參考限值之外個落在參考限值之外3 3個或更多的值落在限值外個或更多的值落在限值外生物學(xué)特性不同生物學(xué)特性不同建立參考范圍建立參考范圍2020個檢測值個檢測值確認(rèn)有效確認(rèn)有效初步性能評價：EP10-AEP9-A（用（用患者患者樣本進(jìn)行樣本進(jìn)行方法對比及偏差評估方法對比及偏差評估批準(zhǔn)指南）批準(zhǔn)指南） -Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline 方法對比試驗方法對比試驗 目的：目的： 方法對比試驗的主要目的是獲得方法對比試驗的主要目的是獲得

27、候選方法的系統(tǒng)誤差的偏倚估計，即候選方法的系統(tǒng)誤差的偏倚估計，即準(zhǔn)準(zhǔn)確度的評估。確度的評估。n方法應(yīng)是參考方法或推薦方法方法應(yīng)是參考方法或推薦方法,如該測定沒有參考如該測定沒有參考方法或推薦方法，亦可以用公認(rèn)的常規(guī)方法。但方法或推薦方法，亦可以用公認(rèn)的常規(guī)方法。但須具備須具備: (1)比對試驗方法有更好的精密度。比對試驗方法有更好的精密度。 (2)干擾影響已知。干擾影響已知。 (3)與試驗方法使用相同的計量單位。與試驗方法使用相同的計量單位。對比方法的選擇對比方法的選擇 應(yīng)有足夠的時間熟悉所用的儀器、應(yīng)有足夠的時間熟悉所用的儀器、 試驗方法、比較方法及比較方案。試驗方法、比較方法及比較方案。比

28、對前的準(zhǔn)備工作比對前的準(zhǔn)備工作實(shí)驗標(biāo)本的選擇實(shí)驗標(biāo)本的選擇1 1）收集新鮮的正常和異常的臨床標(biāo)本）收集新鮮的正常和異常的臨床標(biāo)本, ,樣品大小至樣品大小至 少為少為4040個標(biāo)本個標(biāo)本。2 2）足夠?qū)挼臐舛确秶銐驅(qū)挼臐舛确秶? ,各濃度應(yīng)有合適的比例各濃度應(yīng)有合適的比例（部分項目見表（部分項目見表1 1）。）。 注意：注意：盡可能使盡可能使50%50%的實(shí)驗標(biāo)本分析物含量不在參考范圍內(nèi)，分析物的實(shí)驗標(biāo)本分析物含量不在參考范圍內(nèi)，分析物 含量分布越寬越好。含量分布越寬越好。 若不能及時測定需保存標(biāo)本，應(yīng)確保它們的穩(wěn)定性。只能使用若不能及時測定需保存標(biāo)本，應(yīng)確保它們的穩(wěn)定性。只能使用 一種能符合

29、兩個方法要求的保存條件，以免因條件不一引出新一種能符合兩個方法要求的保存條件，以免因條件不一引出新 的變異。的變異。 項目項目 A組組 B組組 C組組 D組組 E組組 Glu(mg/dl) 50(10%) 51110(40%) 111-150(30%) 151-251(10%) 251-SL(10%) BUN(mg/dl) 15(10%) 1225(40%) 26-50(20%) 51-100(20%) 101-SL(10%) Cr(mg/dl) 1.0(20%) 1.12.5(30%) 2.6-5.0(20%) 5.1-10(20%) 10-SL(10%) Na(mmol/L) 120130

30、(20%)131140(40%) 141-150(30%) 151-160(10%) K(mmol/L) 6(10%) Cl(mol/L) 8095(30%) 96105(40%) 106-120(30%) TP(g/L) 90(10%) Alb(g/L) 50(10%) GGT(U/L) 0NL(40%) NL 2NL(40%) 2NL4NL(10%) 4NL SL(10%) 表表1：部分項目濃度范圍建議：部分項目濃度范圍建議注注SL=可測范圍上限可測范圍上限NL=正常范圍上限正常范圍上限 1 1）每天測定每天測定8 8個標(biāo)本個標(biāo)本, ,雙份測定時第一次按順序雙份測定時第一次按順序1,27,

31、8,1,27,8, 第二次第二次,8,8，72,1,72,1,共測共測5 5天。天。 ）整理數(shù)據(jù)成表）整理數(shù)據(jù)成表2 2（以（以ALTALT測定為例）。測定為例）。實(shí)驗操作實(shí)驗操作樣品樣品 實(shí)驗方法實(shí)驗方法 比較方法比較方法 實(shí)驗方法實(shí)驗方法 比較方法比較方法 結(jié)果結(jié)果1 1 結(jié)果結(jié)果2 2 結(jié)果結(jié)果1 1 結(jié)果結(jié)果2 2 結(jié)果結(jié)果1-21-2（ DYiDYi） 結(jié)果結(jié)果1-2 1-2 （DXiDXi）1 14 15 16 15 1 12 20 22 21 23 2 23 35 37 32 35 2 3 3 57 56 59 56 1 34 80 82 79 76 2 35 245 240 2

32、32 240 5 86 7 8 6 7 1 17 33 30 31 33 3 2.40 151 148 156 150 3 6 表表2 實(shí)驗方法與比較方法測定實(shí)驗方法與比較方法測定ALTALT結(jié)果比較結(jié)果比較結(jié)果處理結(jié)果處理n方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢查n方法間離群點(diǎn)的檢查n作圖n線性相關(guān)的目測檢查nX取值范圍檢查n線性回歸n計算預(yù)期偏差和相對偏差n結(jié)論方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢查方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢查n1、絕對偏差界限的計算 X-對比儀器結(jié)果 Y-實(shí)驗儀器結(jié)果 4 ： 離群點(diǎn)n2、相對的絕對偏差界限的計算 4 ： 離群點(diǎn)方法間離群點(diǎn)的檢查方法間離群點(diǎn)的檢查n1、絕對偏差界限計算 4 為離群點(diǎn)n2、相對的絕對偏差界限

33、計算 4 為離群點(diǎn) 離離 群群 點(diǎn)點(diǎn) 處處 理理n如果只有一個離群點(diǎn)，可將此樣品的全部數(shù)據(jù)(X、Y) 進(jìn)行刪除，繼續(xù)進(jìn)行下面的分析。如果超過兩個以上的離群點(diǎn)，則需查找原因，如果僅僅是樣品的因素，則替換這些離群點(diǎn)數(shù)據(jù)或重新分析所有數(shù)據(jù)。1、 對 的散點(diǎn)圖 YiYiYiYiYiYi2、所有結(jié)果的散點(diǎn)圖 以每次測定的Y值為Y軸，雙份測定的X的均值為X軸3、偏差圖以每個樣本兩種儀器雙份測定的均值差(Yi 一Xi)為Y軸；對比儀器每樣本雙份測定的均值(Xi)為x 軸，以直線X=0為水平中線作圖 4. 偏差圖 以每個樣本兩種儀器每次測定的差(Yi 一Xi)為Y軸；對比儀器每樣本雙份測定的 均值(Xi)為X

34、軸，以直線X=0為水平中線作圖 作為比較方法作為比較方法, ,理論上要求應(yīng)該沒有誤差理論上要求應(yīng)該沒有誤差, , 但在臨床實(shí)驗但在臨床實(shí)驗室這是不可能達(dá)到的室這是不可能達(dá)到的, EP9A, EP9A文件指出文件指出, , 可用相關(guān)系數(shù)可用相關(guān)系數(shù)(r)(r)來粗來粗略估計略估計X X取值范圍是否足夠?qū)?。取值范圍是否足夠?qū)?。r0.975(r0.975(或者是或者是r r2 20.95)0.95)則則認(rèn)為認(rèn)為X X范圍適合。范圍適合。用相關(guān)系數(shù)用相關(guān)系數(shù)r r的計算公式的計算公式附注：如附注：如r0.975,則使用部分個別差異法計則使用部分個別差異法計 算平均偏差。算平均偏差。X取值范圍檢查取值范圍檢查計算預(yù)期偏差和相對偏差預(yù)期偏差（Bc） Bc=a+(b-1)Xc 例：Xc取醫(yī)學(xué)決定水平的兩個端點(diǎn)和衛(wèi)生部要求的線性范圍應(yīng)達(dá)到 的水平。（B