無菌制劑(滴眼劑)培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗證

1、培養(yǎng)基模擬灌裝驗證VPZ17001培養(yǎng)基模擬灌裝驗證文件編碼VPZ17001頒發(fā)部門制定部門： 制定人： 日期： 日期： 審核部門： 審核人： 日期： 日期： 批準人： 日期： 生效日期： 年 月 日分發(fā)部門質(zhì)量管理中心質(zhì)量保證部 質(zhì)量控制部生產(chǎn)技術(shù)部 設(shè)備工程部 采購部 財務部 行政人資部 研發(fā)部 銷售部 綜合無菌制劑車間 培 訓培訓部門： 培訓崗位： 驗證領(lǐng)導小組會簽項目負責人：日期： 驗證協(xié)調(diào)員：日期： QC負責人：日期： 質(zhì)量部負責人：日期： 生產(chǎn)部負責人：日期： 工程部負責人：日期： 變更歷史版本號修訂原因與內(nèi)容修訂后版本號生效日期驗證小組人員名單所在部門姓名職務主要職責生產(chǎn)技術(shù)部質(zhì)

2、量保證部質(zhì)量控制部儲運部設(shè)備工程部培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案文件編碼頒發(fā)部門制定部門： 制定人： 日期： 日期： 審核部門： 審核人： 日期： 日期： 批準人： 日期： 生效日期： 年 月 日分發(fā)部門質(zhì)量管理中心質(zhì)量保證部 質(zhì)量控制部生產(chǎn)技術(shù)部 設(shè)備工程部 采購部 財務部 行政人資部 研發(fā)部 銷售部 綜合無菌制劑車間 培 訓培訓部門： 培訓崗位： 驗證領(lǐng)導小組會簽項目負責人：日期： 驗證協(xié)調(diào)員：日期： QC負責人：日期： 質(zhì)量部負責人：日期： 生產(chǎn)部負責人：日期： 工程部負責人：日期： 變更歷史版本號修訂原因與內(nèi)容修訂后版本號生效日期目錄1 概 述2 驗證目的3 適用范圍4 相關(guān)部門職責5 驗證條

3、件6 驗證引用的文件7 培養(yǎng)基8 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗條件9 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的頻率10培養(yǎng)基模擬灌裝量和灌裝數(shù)量的確定11培養(yǎng)基模擬灌裝最差條件的設(shè)計12培養(yǎng)基配制和無菌灌裝操作過程13 取樣計劃14試驗樣品的培養(yǎng)15 試驗結(jié)果評價16環(huán)境監(jiān)控和微生物限度控制17清場與清潔18培養(yǎng)基灌裝過程監(jiān)控記錄19偏差調(diào)差20糾偏措施21異常情況處理程序22變更23擬定再驗證周期24驗證結(jié)果評定與結(jié)論附錄附錄1：人員培訓附錄2：系統(tǒng)驗證及設(shè)備驗證確認附錄3：純化水檢驗報告單 附錄4：注射用水檢驗報告單 附錄5：環(huán)境監(jiān)測報告單 附錄6：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基適應性實驗結(jié)果 附錄7：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度

4、檢查結(jié)果 附錄8：培養(yǎng)基及內(nèi)包材確認 附錄9：最差條件確認 附錄10：內(nèi)包材檢驗結(jié)果 附錄11：未參加培養(yǎng)灌裝瓶原因說明 附錄12：培養(yǎng)基的培養(yǎng)觀察記錄 附錄13：培養(yǎng)基的培養(yǎng)陽性結(jié)果和培養(yǎng)基灌裝失敗情況說明 附錄14：培養(yǎng)基灌裝過程中監(jiān)控統(tǒng)計表 附錄15：灌裝生產(chǎn)結(jié)束清潔記錄 附錄16：質(zhì)控過程監(jiān)控產(chǎn)品基本信息：產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基模擬灌裝產(chǎn)品代碼-規(guī)格-批量6000瓶/批記錄編碼驗證車間滴眼液車間本次驗證工藝關(guān)鍵步驟稱量、配制、過濾、洗瓶、洗塞蓋、灌裝（無菌轉(zhuǎn)運）1 概 述培養(yǎng)基模擬灌裝主要用的是胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基，適用于黑龍江天龍藥業(yè)江北新廠滴眼劑車間生產(chǎn)線。依據(jù)批準的滴眼劑車間培養(yǎng)基模擬灌

5、裝驗證方案，實施培養(yǎng)基模擬灌裝試驗；評價無菌生產(chǎn)工藝的可信限度達到可接受的合格標準，確認滴眼劑車間生產(chǎn)過程的可靠性，有效性。本方案規(guī)定了滴眼劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝的驗證方法和標準。 2 驗證目的通過對滴眼劑灌裝過程中采用與正常生產(chǎn)工藝相同的條件和操作方法（包括生產(chǎn)環(huán)境等），向8ml滴眼瓶內(nèi)灌裝經(jīng)過除菌過濾的無菌培養(yǎng)基，在適當條件下培養(yǎng)，并對培養(yǎng)品觀察、結(jié)果判定的驗證，來確定滴眼劑車間生產(chǎn)無菌灌裝工藝的無菌保證水平，判定無菌生產(chǎn)要素是否能夠達到可接受的合格標準的能力，以確認無菌生產(chǎn)工藝過程的可靠性。3 適用范圍 本驗證方案適用于本公司江北分廠滴眼劑車間滴眼液生產(chǎn)線。4 相關(guān)部門職責部 門職 責驗證

6、小組負責驗證方案的審批。負責驗證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗證方案規(guī)定項目的順利實施。負責驗證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。負責對驗證中出現(xiàn)的問題提出指導意見、執(zhí)行偏差調(diào)查、批準變更等。負責驗證報告的審批。負責發(fā)放驗證證書。負責培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗證周期的批準。生產(chǎn)技術(shù)部負責驗證方案編制。培訓操作人員。負責設(shè)備的清潔、生產(chǎn)操作等工作并提供原始記錄安排滴眼劑車間進行培養(yǎng)基模擬灌裝實際生產(chǎn)。負責向驗證管理小組及時報告驗證中出現(xiàn)的問題。對檢測結(jié)果進行匯總分析。起草驗證報告。質(zhì)量管理部負責驗證方案的審核。負責制訂培養(yǎng)基模擬灌裝配制藥液中間產(chǎn)品和包裝成品的取樣及檢驗。負責對配制藥液中間產(chǎn)品和包裝成品進行檢測，并根據(jù)檢驗結(jié)

7、果出具檢驗報告單。負責驗證過程中的環(huán)境監(jiān)測。負責驗證過程中的標準操作規(guī)程執(zhí)行情況等確認。負責驗證報告的批準。5 驗證條件5.1所有相關(guān)設(shè)備及其工藝均要事先通過確認或驗證，并符合規(guī)定。如潔凈生產(chǎn)區(qū)內(nèi)環(huán)境須通過靜態(tài)、動態(tài)驗證（A級區(qū)域的風速、空氣的懸浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均要符合相應規(guī)定），操作人員的衛(wèi)生及其操作行為均須經(jīng)過嚴格的培訓，參加人員的更衣、行為規(guī)范、微生物知識、標準操作規(guī)程等經(jīng)過培訓，生產(chǎn)主要設(shè)備（如洗瓶機、洗塞蓋機、配液系統(tǒng)、灌裝加塞機旋蓋等）以及與生產(chǎn)相關(guān)的其它輔助工藝（如濕熱滅菌、干熱滅菌、除菌過濾等），均須通過確認或驗證。確認或驗證合格后方可進行培養(yǎng)基模擬灌裝驗證，

8、本實驗要模擬整個無菌操作過程，包括從工器具的滅菌直至完成灌裝和容器密封的整個過程，降低實際生產(chǎn)的無菌風險。本實驗要在滴眼劑車間生產(chǎn)中選擇最差合理條件進行評估，為實際生產(chǎn)提供依據(jù)。5.2 人員培訓對所有參加培養(yǎng)基模擬灌裝人員進行培訓。5.2.1 更衣、更鞋程序培訓培訓主要內(nèi)容：根據(jù)進入潔凈區(qū)更衣更鞋標準操作規(guī)程對進入潔凈區(qū)的工作人員進行培訓。合格標準：培訓人員掌握正確的洗手程序，確保手部的清潔；正確的潔凈服穿戴程序，防止對潔凈服的污染及將污染物帶入潔凈區(qū)。5.2.2 行為規(guī)范培訓內(nèi)容：對進入潔凈區(qū)的工作人員進行正確的行為規(guī)范培訓。合格標準：充分的認識到在潔凈區(qū)內(nèi)正確的行為的重要性。5.2.3 微

9、生物、清潔、消毒、滅菌知識的培訓內(nèi)容：對微生物的相關(guān)知識、清潔及消毒標準操作規(guī)程和滅菌知識進行培訓。合格標準：了解微生物的種類及生存條件，認識到微生物在藥品生產(chǎn)過程中的危害；明確清潔、消毒、滅菌在藥品的整個生產(chǎn)過程中的重要性。5.2.4 崗位標準操作規(guī)程培訓內(nèi)容：根據(jù)各崗位的標準操作規(guī)程進行培訓合格標準：各崗位操作人員能夠掌握相關(guān)的崗位知識，熟練的進行崗位操作。5.2.5培養(yǎng)基模擬灌裝實驗內(nèi)容的培訓內(nèi)容：詳細講解培養(yǎng)基模擬灌裝實驗內(nèi)容及各崗位的相關(guān)操作內(nèi)容。合格標準：掌握培養(yǎng)基模擬灌裝整個過程，包括培養(yǎng)基的配制、灌裝過程中所用管線器具的滅菌、管線的安裝、洗瓶、洗塞蓋、灌裝的操作。5.2.6 無

10、菌檢查人員對模擬灌裝產(chǎn)品的判定培訓內(nèi)容：講解培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識。合格標準：能準確的判斷培養(yǎng)基中是否有微生物的繁殖及受污染的原因。培訓人員名單培訓內(nèi)容受訓人員潔凈區(qū)更衣更鞋標準操作參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員潔凈區(qū)內(nèi)工作人員的行為規(guī)范參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員微生物、清潔、消毒、滅菌知識參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗內(nèi)容參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員灌裝崗位操作規(guī)程培訓參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員無菌檢查人員培訓參加培養(yǎng)基無菌灌裝檢查人員6 驗證引用的文件6.1 相關(guān)生產(chǎn)標準規(guī)程序號名稱文件

11、編號1滴眼劑原輔料稱量崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27001-002配制崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27002-003灌裝崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27003-004理瓶崗為標準操作規(guī)程SOPPZ27004-005洗瓶崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27005-006洗塞崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27006-007洗蓋崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27007-008燈檢崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27008-009包裝崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27009-0010滴眼劑車間過濾器完整性測試標準操作規(guī)程SOPPZ27010-006.2 相關(guān)生產(chǎn)標準操作規(guī)程序號名稱文件編號1綜合無菌制劑車間空氣凈化系統(tǒng)過濾器更換

12、標準操作規(guī)程SOPPZ7001-002綜合無菌制劑車間壓縮空氣過濾器更換標準操作規(guī)程SOPPZ7002-003綜合無菌制劑車間稱量衡器標準操作規(guī)程SOPPZ7003-004綜合無菌制劑車間酒度計使用標準操作規(guī)程SOPPZ7004-005綜合無菌制劑車間清潔劑、消毒液標準操作規(guī)程SOPPZ7005-006綜合無菌制劑車間紫外燈使用標準操作規(guī)程SOPPZ7006-007綜合無菌制劑車間傳遞窗（柜）標準操作規(guī)程SOPPZ7007-008綜合無菌制劑車間物料及其它物品進入車間（生產(chǎn)區(qū)）標準操作規(guī)程SOPPZ7008-009綜合無菌制劑車間濾芯完整性測試標準操作規(guī)程SOPPZ7009-0010綜合無菌制

13、劑車間藥液過濾介質(zhì)標準操作規(guī)程SOPPZ7010-0011綜合無菌制劑車間潔凈區(qū)洗衣崗位操作規(guī)程SOPPZ7011-0012綜合無菌制劑車間剩余尾藥處理標準操作規(guī)程.SOPPZ7012-0013綜合無菌制劑車間清場標準操作規(guī)程SOPPZ7013-0014綜合無菌制劑車間生產(chǎn)用工具清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7014-0015綜合無菌制劑車間特殊清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7015-0016綜合無菌制劑車間水池、地漏清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7016-0017綜合無菌制劑車間潔凈區(qū)送、回風口清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7017-0018綜合無菌制劑車間空調(diào)機組清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7018-001

14、9綜合無菌制劑車間一般區(qū)周轉(zhuǎn)容器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7019-0020綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)設(shè)備清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7020-0021綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)清潔工具清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7021-0022綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)工作服清洗、更衣柜清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7022-0023綜合無菌制劑車間D級潔凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7023-0024綜合無菌制劑車間C級潔凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7024-0025綜合無菌制劑車間潔凈區(qū)清潔工具清潔操作規(guī)程SOPPZ7025-0026綜合無菌制劑車間人員進出一般生產(chǎn)區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ702

15、6-0027綜合無菌制劑車間人員進出D級潔凈區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ7027-0028綜合無菌制劑車間人員進出C級潔凈區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ7028-0029綜合無菌制劑車間傳遞窗清潔操作規(guī)程SOPPZ7029-0030綜合無菌制劑車間衛(wèi)生間清潔操作規(guī)程SOPPZ7030-0031綜合無菌制劑車間過濾器使用清潔操作規(guī)程SOPPZ7031-0032綜合無菌制劑車間人員進入生產(chǎn)區(qū)手清潔消毒操作規(guī)程SOPPZ7032-0033綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)洗衣崗位操作規(guī)程SOPPZ7033-0034綜合無菌制劑車間A/B級潔凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7034-0035綜合無菌制劑車間潔凈區(qū)清

16、潔標準操作規(guī)程SOPPZ7035-0036綜合無菌制劑車間一般區(qū)清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7036-0037綜合無菌制劑車間烘手器操標準操作規(guī)程SOPPZ7037-0038綜合無菌制劑車間烘手器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7038-0039綜合無菌制劑車間手消毒器標準操作規(guī)程SOPPZ7039-0040綜合無菌制劑車間手消毒器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7040-006.3 相關(guān)的設(shè)備標準操作規(guī)程序號名稱文件編號1全自動眼液外蓋（內(nèi)塞）清洗機標準操作規(guī)程SOPPZ23001-002高速小圓瓶理瓶機標準操作規(guī)程SOPPZ23002-003立式洗瓶機標準操作規(guī)程SOPPZ23003-004隧道式過氧化

17、氫滅菌烘箱標準操作規(guī)程SOPPZ23004-005灌裝加塞旋蓋機標準操作規(guī)程SOPPZ23005-006干熱滅菌柜標準操作規(guī)程SOPPZ23006-007脈動真空滅菌器（純蒸汽）標準操作規(guī)程SOPPZ23007-008FFU小推車一臺標準操作規(guī)程SOPPZ23008-009配液罐標準操作規(guī)程SOPPZ23009-0010燈檢工作臺標準操作規(guī)程SOPPZ23010-0011微波滅菌機標準操作規(guī)程SOPPZ23011-0012澄明度檢測儀標準操作規(guī)程SOPPZ23012-0013全自動眼液外蓋（內(nèi)塞）清洗機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23013-0014高速小圓瓶理瓶機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23

18、014-0015立式洗瓶機標清潔準操作規(guī)程SOPPZ23015-0016隧道式過氧化氫滅菌烘箱清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23016-0017灌裝加塞旋蓋機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23017-0018干熱滅菌柜清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23018-0019脈動真空滅菌器（純蒸汽）清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23019-0020FFU小推車一臺清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23020-0021配液罐清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23021-0022燈檢工作臺清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23022-0023微波滅菌機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23023-0024澄明度檢測儀標準操作規(guī)程SOPPZ23024-0

19、06.4 相關(guān)驗證文件序號文件名稱文件編碼空氣凈化系統(tǒng)驗證報告粉針生產(chǎn)線廠房驗證報告壓縮空氣系統(tǒng)驗證報告純化水制備系統(tǒng)驗證報告注射用水制備系統(tǒng)驗證報告KCZP型超聲波自動洗瓶機驗證報告GMS系列隧道式層流滅菌干燥機驗證報告GA55CP-10型固定式螺桿空氣壓縮機驗證報告CZQ-200純蒸汽發(fā)生器驗證報告RXH-1系列熱風循環(huán)烘箱驗證報告XG1.U型脈動真空滅菌器驗證報告GCXB型超聲波膠塞漂洗罐驗證報告工衣清洗存放驗證報告膠塞清洗存放驗證報告工器具清洗驗證報告玻瓶清洗驗證報告鋁蓋清洗驗證報告廠房清潔驗證報告KFC系列抗生素玻瓶螺桿分裝機驗證報告KFC系列抗生素玻瓶螺桿分裝機清潔驗證報告培養(yǎng)基灌

20、裝試驗報告BT-300型不干膠自動貼標機驗證報告7培養(yǎng)基7.1培養(yǎng)基的選擇為了盡可能地檢出無菌生產(chǎn)工藝系統(tǒng)中可能會給實際產(chǎn)品造成污染的微生物，所選用的培養(yǎng)基要盡可能適應廣譜微生物的生長，包括細菌、霉菌和酵母菌等。驗證試驗前，要鑒別驗證培養(yǎng)基的可行性。首先嚴格按照培養(yǎng)基生產(chǎn)商的要求進行配制和滅菌，然后將無菌培養(yǎng)基灌裝至8ml滴眼劑瓶內(nèi)。同時制備好三種微生物（枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌）的懸浮液，菌液濃度控制為1001000個菌/ml。將上述準備無菌培養(yǎng)基分成三等份，且每份至少兩瓶，分別加入上述菌懸液各0.1ml。將接枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基于3035下培養(yǎng)，接有白色念珠

21、菌的培養(yǎng)基于2025下培養(yǎng)。如果在7天內(nèi)，每種微生物培養(yǎng)基均至少有50長菌，則認為該培養(yǎng)基可用于無菌工藝驗證試驗。根據(jù)無菌制劑GMP實施指南提供胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基做上述試驗，適用于培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。7.2胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度檢查本次試驗均采用同批號的培養(yǎng)基，根據(jù)培養(yǎng)基的正確配制方法進行配制，按照中國藥典2010年版二部附錄中無菌檢查法中的培養(yǎng)基靈敏度檢查。7.2.1菌種培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代數(shù)不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0種），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)，以保證試驗菌株的生物學特性。金黃色葡萄球菌CMMCC（B）26003銅綠假單胞菌 CMMCC（B）10

22、104枯草芽孢桿菌 CMCC （B）63501生孢梭菌 CMCC （B）64941白色念珠菌 CMCC （F）98001黑曲霉菌 CMCC （F）98003本地菌（沉降菌）7.2.2菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、本地菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)1824小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，2328培養(yǎng)2448小時，接種本地菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，2328培養(yǎng)2448小時，上述培養(yǎng)物用0.9無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)小于100CFU的菌懸液。接種黑曲霉

23、的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，2328培養(yǎng)57天，加入35ml0.9無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，吸出孢子懸液（用管口帶有薄的無菌棉花或紗布能過濾菌絲的無菌毛細吸管）至無菌試管內(nèi)，用0.9無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)小于100CFU的孢子懸液。7.2.3培養(yǎng)基接種：取每管裝量為12ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基11支，分別接種1ml小于100 CFU的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、本地菌（沉降菌）各2支、另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基5支，分別接種1ml小于100CFU的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種

24、作為空白對照，培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果。7.2.4結(jié)果判斷：空白對照管應無菌生長，若加菌的培養(yǎng)基管均生長良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。7.3培養(yǎng)基微生物生長性試驗每一批的培養(yǎng)基在使用前都要做微生物的生長性試驗，以確認用于實驗的培養(yǎng)基的性能。7.3.1操作方法：按標準操作規(guī)程制備胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基并滅菌，將滅菌后的培養(yǎng)基分裝于20支無菌試管中，在10支試管中接種枯草桿菌，接種量小于100CFU；在另10支試管中接種白色念珠菌，接種量小于100CFU；接種后蓋塞、封口并分別在30-35和20-25培養(yǎng)7天。7.3.2 合格標準：7天內(nèi)至少50%以上接種的各試管的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中應出現(xiàn)

25、明顯的所接種的微生物的生長。7.4 培養(yǎng)基無菌性試驗每一批除菌后的培養(yǎng)基均要做無菌性試驗，以確定培養(yǎng)基的無菌性，防止出現(xiàn)假陽性的結(jié)果。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的結(jié)果受培養(yǎng)基無菌性的影響很大，若不能保證培養(yǎng)基在模擬灌裝試驗前的無菌性，則不能保證試驗結(jié)果的可信性。證明培養(yǎng)基的無菌性之后進行模擬灌裝的方法，以排除培養(yǎng)基無菌性對此項試驗的影響，從而確認模擬灌裝試驗中污染來源于灌裝過程。7.4.1操作方法：將除菌過濾后用于模擬灌裝的培養(yǎng)基灌裝于50ml無菌試管中，蓋塞、封口后在相應溫度下培養(yǎng)7天。7.4.2合格標準：7天內(nèi)各試管胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中應無任何微生物生長。若發(fā)現(xiàn)有污染，應明確記錄編號、數(shù)量，同時

26、檢查試管。7.5 影響培養(yǎng)基生長對試樣結(jié)果不利的風險分析培養(yǎng)基灌裝實驗，要求培養(yǎng)基在最適合的條件下進行，要防止由于操作條件等原因抑制微生物生長，從而降低實驗的可信度，對培養(yǎng)基微生物抑制風險評估如下：抑菌影響分析物料準備、儲存過程風險點解 釋控制方法配制溶液的注射用水溫度高于70高溫會抑制微生物生長將配制培養(yǎng)基的注射用水冷卻到室溫，在室溫下（20-25）配制正常生產(chǎn)溶液PH值偏高或偏低酸性或堿性環(huán)境不利于微生物生長培養(yǎng)基的PH調(diào)整到適合微生物生長的范圍配制好的溶液在低溫下保存低溫會抑制微生物生長培養(yǎng)基在儲存容器中常溫保存抑菌影響分析灌裝風險點解 釋控制方法生產(chǎn)工藝規(guī)程中使用惰性氣體（如氮氣）保護

27、產(chǎn)品大多數(shù)為需氧微生物，惰性氣體有一定抑菌作用用壓縮空氣或空氣來代替惰性氣體培養(yǎng)基灌裝量偏少滴眼劑瓶內(nèi)壁不能被完全接觸，微生物不能生長8ml滴眼劑瓶灌裝至少4ml培養(yǎng)基，以保證足夠量培養(yǎng)基用于培養(yǎng)抑菌影響分析中間過程風險點解 釋控制方法對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌消毒劑會殺滅微生物避免設(shè)備上的消毒劑殘留正常生產(chǎn)時消毒劑（如噴灑消毒酒精，對操作人員手部消毒）的使用消毒劑會殺滅微生物對于模擬試驗過程中消毒劑（如噴灑消毒酒精）的使用，應該注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上班次輪換，清場消毒消毒劑會殺滅微生物對于兩班次灌裝輪換期間不進行消毒清場8 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗條件培養(yǎng)基

28、模擬灌裝試驗的條件是完全與實際的生產(chǎn)條件相同。8.1 環(huán)境監(jiān)測：對空氣懸浮粒子、表面微生物監(jiān)測、空氣浮游菌監(jiān)測、沉降菌監(jiān)測。監(jiān)測項目檢測合格標準監(jiān)測點空氣浮游菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準1個/m3；B級環(huán)境的測試標準10個/m3；C級環(huán)境的測試標準100個/m3；灌裝間沉降菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準1個/皿；B級環(huán)境的測試標準5個/皿；C級環(huán)境的測試標準50個/皿，灌裝間手指菌檢測A級環(huán)境的測試合格標準1個；B級環(huán)境的測試合格標準5個，為合格。灌裝間潔凈服接觸檢測A級環(huán)境的測試合格標準1個；B級環(huán)境的測試合格標準5個；為合格。灌裝間8.2 工藝用水及壓縮空氣的檢查，符合藥典標準。8.3 培養(yǎng)基、內(nèi)包

29、材的標準要符合。物料名稱物料代碼合格供應商胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基滴眼劑瓶原輔料、包裝材料的檢驗報告物料名稱批 號檢 驗 單 號結(jié) 論胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基第一批：第二批：第三批：滴眼劑瓶第一批：第二批：第三批：8.4 由受過培訓的無菌生產(chǎn)操作人員模擬實際的灌裝作業(yè)進行培養(yǎng)基灌裝。8.5培養(yǎng)基模擬灌裝試驗用滴眼劑瓶、塞、蓋的清洗、滅菌，灌裝設(shè)備的清洗、消毒及與產(chǎn)品接觸的灌裝設(shè)備部件的清洗、滅菌、安裝過程，均要遵守相應的標準操作規(guī)程。8.6確定參加培養(yǎng)基無菌灌裝試驗人員數(shù)量及調(diào)試灌裝機速度。進入無菌室的操作人員數(shù)量可為生產(chǎn)時的最多人數(shù)，灌裝速度以正常生產(chǎn)時最低、正常和最高速度分別進行，生產(chǎn)過程中模擬最

30、差生產(chǎn)條件。9 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的頻率滴眼劑車間必須每半年進行一批合格的培養(yǎng)基模擬灌裝試驗，并檢查培養(yǎng)結(jié)果，用以證明該工藝驗證結(jié)果的可靠性。10培養(yǎng)基模擬灌裝量和灌裝數(shù)量的確定10.1灌裝體積的確定：選擇的灌裝體積要使培養(yǎng)基能適當?shù)亟佑|容器的內(nèi)表面，并且適當?shù)姆D(zhuǎn)和旋轉(zhuǎn)，使培養(yǎng)基能充分的接觸到密封容器的內(nèi)表面。灌裝體積不得少于其容積的三分之一，這樣才能保證有足夠數(shù)量的培養(yǎng)基與容器的內(nèi)表面充分接觸并且易于觀察到微生物的生長狀況。灌裝容器為8ml滴眼劑瓶，確定的灌裝量為4.0ml。10.2灌裝數(shù)量的確定：應符合統(tǒng)計學要求，即95的置信限至少能檢出千分之一的污染率。公式：P（X0）1-（1-X）N

31、X表示被污染產(chǎn)品的比例，當X0.001，P95時，一次模擬分裝中至少應分裝瓶數(shù)N2995。根據(jù)上述公式并結(jié)合我公司生產(chǎn)批量為25000支/批，確定實際培養(yǎng)基模擬灌裝批量為6000瓶/批。11培養(yǎng)基模擬灌裝最差生產(chǎn)條件的設(shè)計為保證培養(yǎng)基灌裝能模擬出實際的生產(chǎn)狀況，在試驗時設(shè)計最差條件。在培養(yǎng)基無菌灌裝操作過程中模擬以下出現(xiàn)的異常情況進行無菌灌裝生產(chǎn)：11.1 增加灌裝前已滅菌器具的轉(zhuǎn)運時間（如已滅菌的器具取出、轉(zhuǎn)運、放置時間高于實際操作時間）。11.2 正常的培養(yǎng)基配制除菌過濾后，延長在移動儲罐中的儲存時間。11.3 延長灌裝室內(nèi)灌裝管線的連接時間（增加灌裝管線連接操作）。11.4 灌裝過程中模

32、擬多次出現(xiàn)倒瓶、缺塞現(xiàn)象，并進行取走倒瓶和加塞的操作。11.5 增加滴眼劑塞、蓋的添加次數(shù)。11.6 滴眼劑瓶在輸送過程中多次出現(xiàn)取缺瓶、碎瓶現(xiàn)象。11.7灌裝過程中灌裝針頭出現(xiàn)異常，更換針頭后繼續(xù)灌裝。11.8 灌裝過程中出現(xiàn)裝量差異，重新調(diào)整裝量，確認后繼續(xù)灌裝（檢查裝量不低于正常生產(chǎn)時的次數(shù)）。11.9 塞、蓋振蕩器出現(xiàn)故障，維修人員進行維修。排除故障后繼續(xù)灌裝。11.10滴眼劑瓶軌道出現(xiàn)故障。11.11在灌裝過程中停機，增加培養(yǎng)基存放時間。12 培養(yǎng)基配制和無菌灌裝操作過程12.1生產(chǎn)設(shè)備及設(shè)施序號設(shè)備名稱設(shè)備編號設(shè)備型號位置1組合式空氣處理機組JK-105-012TMC1518CHW

33、空調(diào)室2組合式空氣處理機組JK-105-013TMC1015CHW空調(diào)室3組合式空氣處理機組JK-105-014TMC1016CHW空調(diào)室4空壓機AZ56031/空調(diào)室5純化水設(shè)備AZ541213m3/h純化水室6多效蒸餾水機AZ550111500L/h注射用水室7純蒸汽發(fā)生器AZ55021300L/h注射用水室8立式超聲波清洗機05-003KQCL60洗瓶洗塞室9冷卻段在線滅菌干燥機05-004KSZ620/60-M洗瓶洗塞室10直線灌裝加塞機05-006KGS10-X3灌裝壓塞室11全自動濕法氣沖式膠塞清洗機05-005KJQS-4ES洗瓶洗塞室12配液罐05-002150L凍干稀配室14

34、配液罐05-001100L凍干濃配室17真空冷凍干燥機05-007LYO-7.5凍干室20軋蓋機05-009ZG400(F)軋蓋室21鋁蓋清洗機05-008KJSL-4ES洗蓋室22臭氧發(fā)生器05-016OSR-80H空調(diào)室12.2 滴眼劑瓶、塞、蓋清洗操作與正常生產(chǎn)一致。12.3 培養(yǎng)基的配制12.3.1工作人員對C級區(qū)的環(huán)境進行檢查，符合實際生產(chǎn)條件后進行培養(yǎng)基的配制。生產(chǎn)處方物料名稱胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基物料代碼：批號12.2.2在稀配室內(nèi)向稀配罐中加入處方量的注射用水和培養(yǎng)基，完全溶解后用蠕動泵經(jīng)兩次0.22µm膜除菌過濾至灌裝室B級區(qū)域的移動儲罐內(nèi)。8.2.2.1 配制過程：

35、向已滅菌的稀配罐中加入54kg，注射用水調(diào)節(jié)至溫度（20-25）。將1620g胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基投到54kg注射用水中，開啟攪拌20min，調(diào)節(jié)pH值在6.5-7.5，開啟蠕動泵將培養(yǎng)基液經(jīng)滅菌的0.45µm百褶裙筒式濾器和兩道已滅菌的0.22µm圓盤過濾器除菌過濾到無菌灌裝室的移動儲罐中（在常溫下進行）。準備進行無菌灌裝。8.2.2.2嚴格按培養(yǎng)基的配制要求，在稀配室用注射用水配制培養(yǎng)基，配液過程要遵守相應的標準操作規(guī)程，控制溫度pH值。8.2.3 除菌過濾前用一無菌瓶取50ml培養(yǎng)基溶液，用做除菌過濾前培養(yǎng)基溶液的微生物污染水平檢測。8.2.4 除菌過濾后用一無菌瓶取

36、100ml經(jīng)過除菌過濾的培養(yǎng)基溶液，用做除菌過濾后培養(yǎng)基溶液的無菌性實驗與培養(yǎng)基微生物生長性試驗。8.2.5 除菌過濾操作完全模擬實際生產(chǎn)。8.3 準備無菌灌裝加塞：與實際生產(chǎn)一致8.3.1 操作人員按照進入B級區(qū)的程序進入工作區(qū)。8.3.2 打開濕熱和干熱滅菌柜，將灌裝過程中使用的圓盤過濾器、移動儲罐、灌裝針頭、管線、鑷子等已滅菌器具放到垂直層流小車上，在百級層流下轉(zhuǎn)運到無菌灌裝間內(nèi)，將兩端連有硅膠管的圓盤過濾器一端接到稀配輸液管線上，另一端和移動儲罐的上端進液口連接，下端出液口用硅膠管與十二頭分裝器連接，分裝器分液頭由輸液管線和針頭連接。將管線分別夾到輸液蠕動泵上。固定灌裝針頭。8.3.3

37、 用75%酒精、已滅菌的綢布將丁基膠塞振蕩器內(nèi)壁及下塞軌道仔細擦拭消毒（按實際生產(chǎn)酒精用量與操作方法執(zhí)行），檢查調(diào)整真空吸塞是否對準瓶口及振蕩器輸送膠塞是否正常。將已滅菌（在效期內(nèi)）的不銹鋼桶放于垂直層流小車內(nèi)，接料斗放在出塞口處，按丁基膠塞清洗滅菌機出塞按鈕出塞。出塞完畢后關(guān)閉出塞口，用垂直層流小車將裝有膠塞的不銹鋼桶轉(zhuǎn)運到膠塞震蕩器處，打開隔離器門，不銹鋼桶轉(zhuǎn)移到隔離器內(nèi)升降器上，關(guān)閉隔離器門。用舀子將不銹鋼桶內(nèi)的無菌膠塞加到膠塞料斗內(nèi)。8.3.4 灌裝加塞操作人員將灌注器、管路、針頭及移動儲罐內(nèi)的注射用水排凈。8.3.5灌裝加塞操作人員將經(jīng)過兩道0.22m除菌濾膜過濾的培養(yǎng)基溶液裝入移動

38、儲罐內(nèi)（不加惰性氣體保護）。8.3.6灌裝量調(diào)節(jié)：灌裝加塞操作人員進行裝量調(diào)節(jié)控制在4.0-6.0ml。8.3.7開動機器給藥，設(shè)定灌裝速度為50瓶/min、70瓶/min、100瓶/min進行。8.3.8灌裝操作人員將已灌裝的壓半塞培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到凍干箱內(nèi)，灌裝結(jié)束后關(guān)閉凍干箱門，通知凍干組開啟冷凍干燥機。8.3.9灌裝過程中，操作人員每20min用75%酒精對雙手進行消毒，用量、頻次與實際生產(chǎn)相符。8.3.10灌裝加塞結(jié)束后，操作人員對環(huán)境按不更換品種清潔清場。8.4培養(yǎng)基模擬凍干凍干工序操作人員保持凍干箱內(nèi)的溫度處于常溫，輕微真空（500Kba）使空氣流動（注意不能使藥液沸騰），通過抽真空引

39、入空氣流動，再通無菌空氣以平衡氣壓，重復三次。制品在凍干箱內(nèi)放置6小時。8.5 操作過程注意控制：消毒劑不可在設(shè)備上有殘留；模擬試驗過程中消毒劑（如噴灑消毒酒精）的使用，注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上。批次間清場要按照正常清場程序進行，不得特意增加操作。8.6在整個培養(yǎng)基模擬灌裝過程中模擬最差生產(chǎn)條件。 最差條件如下表：最差條件模擬方式處 理 方 式頻 次增加灌裝前已滅菌器具裝卸次數(shù)和轉(zhuǎn)運時間轉(zhuǎn)運時比正常時間加5分鐘一次延長培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中的存儲時間延長30min。先將培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中停放30分一次灌裝管線在安裝前暴露在無菌環(huán)境下20min一次倒瓶

40、操作人員進行倒瓶的移出操作十次缺塞操作人員進行加塞操作十次增加膠塞添加的次數(shù)五次玻璃瓶多次破碎操作人員進行碎瓶玻璃屑的移出清理操作三次灌裝針頭灌裝異常操作人員進行更換針頭操作三次取樣按取樣方法取樣六次裝量差異操作人員重新調(diào)節(jié)裝量四次加塞振蕩器出現(xiàn)異常維修人員進行維修一次增加壓全塞培養(yǎng)基在水平層流小車的裝卸次數(shù)西林瓶軌道出現(xiàn)故障維修人員進行維修三次增加培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運到凍干箱的操作次數(shù)在灌裝過程中停機，增加培養(yǎng)基存放時間8.7 軋蓋操作8.7.1 工作人員對B級區(qū)的環(huán)境進行檢查，符合實際生產(chǎn)條件后進行軋蓋。8.7.2 生產(chǎn)操作過程8.7.2.1 軋蓋操作人員出蓋，將鋁蓋放入振蕩器內(nèi)。8.7.2.2 檢

41、查振蕩送蓋系統(tǒng)運行正常后，開機空運轉(zhuǎn)5分鐘，無異常情況。8.7.2.3灌裝操作人員進入灌裝室內(nèi)，打開凍干箱門，將經(jīng)過模擬凍干并壓全塞的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運到水平層流小車上。經(jīng)氣鎖室轉(zhuǎn)運到軋蓋室，在軋蓋室軋鋁塑蓋完成封口。8.7.2.4如有軋蓋不良者不可丟棄，要把蓋起開防止培養(yǎng)基從西林瓶中泄露，重新軋蓋。8.8軋蓋結(jié)束，將全部產(chǎn)品交給化驗室進行培養(yǎng)。（生產(chǎn)過程記錄見附件四）8.9在灌裝全部結(jié)束后對物料進行物料平衡計算。13 取樣計劃13.1 環(huán)境監(jiān)測 培養(yǎng)基灌裝試驗前，對于潔凈區(qū)需要進行環(huán)境監(jiān)測，監(jiān)測合格后，再進行培養(yǎng)基模擬灌裝。13.1.1 沉降菌監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)在灌裝過程中全程監(jiān)測，每

42、4小時更換一次沉降碟。13.1.2 懸浮粒子監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)全程在線監(jiān)測。13.1.3 浮游菌監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)在灌裝過程中監(jiān)測。13.1.4 表面微生物：生產(chǎn)結(jié)束后，用棉簽沾滅菌的生理鹽水選取主要設(shè)備、易產(chǎn)生死角的角落擦拭，涂在培養(yǎng)基上。13.2 內(nèi)包材取樣13.2.1滴眼劑瓶要求崗位操作人員檢測可見異物，每次取20支進行檢測，QA人員取20支進行檢測可見異物。13.2.2洗塞水檢測：在取樣口取洗塞水檢測可見異物。QA人員取樣進行檢測可見異物。13.2.3滅菌后滴眼劑塞取20支用比色管檢測可見異物。QA人員取樣進行檢測可見異物。13.2.4滅菌后滴眼劑蓋取20支

43、用比色管檢測可見異物。QA人員取樣進行檢測可見異物。13.2.5滴眼瓶的取樣：清洗滅菌后的滴眼瓶進行取樣，檢測細菌內(nèi)毒素。13.2.6 滴眼塞取樣：清洗滅菌后的滴眼劑塞進行取樣，檢測細菌內(nèi)毒素。13.2.7 滴眼劑蓋取樣：清洗滅菌后的滴眼劑蓋進行取樣，檢測細菌內(nèi)毒素。13.3 中間產(chǎn)品取樣13.3.1培養(yǎng)基全部在配液罐中溶解，攪拌均勻，保證培養(yǎng)基溶液將整個罐接觸，過濾到藥液暫存中，分別在過濾前段、中段、后段分別取樣各取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩部分分開培養(yǎng)，一部分先在23-28培養(yǎng)7天，再拿到30-35培養(yǎng)基7天。另一部分相反培養(yǎng)。將培養(yǎng)基溶液留40L于配液罐中，放置1小時

44、后，取樣進行取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩部分分開培養(yǎng)，一部分先在23-28培養(yǎng)7天，再拿到30-35培養(yǎng)基7天。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度配液罐過濾前段P120ml23-2830-35配液罐過濾前段P220ml30-3523-28配液罐過濾中段P320ml23-2830-35配液罐過濾中段P420ml30-3523-28配液罐過濾后段P520ml23-2830-35配液罐過濾后段P620ml30-3523-28配液罐過濾放置P720ml23-2830-35配液罐過濾放置P820ml30-3523-2813.3.3培養(yǎng)基除菌過濾到藥液儲罐中，保證培養(yǎng)基溶液將整

45、個罐接觸，經(jīng)終端過濾器過濾到緩沖罐中，取樣各取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩部分分開培養(yǎng)，一部分先在23-28培養(yǎng)7天，再拿到30-35培養(yǎng)基7天。另一部分相反培養(yǎng)。每隔2小時進行取樣，取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩部分分開培養(yǎng)，一部分先在23-28培養(yǎng)7天，再拿到30-35培養(yǎng)基7天。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度藥液儲罐（0小時）G120ml23-2830-35藥液儲罐（0小時）G220ml30-3523-28藥液儲罐（2小時）G320ml23-2830-35藥液儲罐（2小時）G420ml30-3523-28藥液儲罐（4小時）G520ml23-

46、2830-35藥液儲罐（4小時）G620ml30-3523-28藥液儲罐（6小時）G720ml23-2830-35藥液儲罐（6小時）G820ml30-3523-28藥液儲罐（8小時）G920ml23-2830-35藥液儲罐（8小時）G1020ml30-3523-28藥液儲罐（10小時）G1120ml23-2830-35藥液儲罐（10小時）G1220ml30-3523-2813.3.4灌裝完成后，將所有樣有QA將所有樣品全部取走，送到化驗室培養(yǎng)。將樣品進行分別分類。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度成品1G1323-2830-35成品2G1430-3523-2813.4人員監(jiān)測 操作人員

47、操作結(jié)束后，QA對每個操作人員進行手指菌，潔凈服表面微生物監(jiān)測。14 試驗樣品的培養(yǎng)14.1培養(yǎng)前將培養(yǎng)基無菌灌裝全部樣品上下顛倒三次，使培養(yǎng)基與塞及整個滴眼劑瓶內(nèi)壁充分接觸后，在化驗室培養(yǎng)箱置于較低溫度2025下培養(yǎng)7天，然后在較高溫度3035培養(yǎng)7天，共培養(yǎng)14天。14天時后由經(jīng)過培訓有資質(zhì)的人員檢查培養(yǎng)的全部樣品的微生物生長情況，檢查時將每瓶培養(yǎng)基在燈檢儀下進行目檢，透明、澄清、無混濁的培養(yǎng)基判為無微生物生長；若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基混濁或有懸浮的菌絲或菌落，則需作進一步的微生物生長檢查，以確定培養(yǎng)基是否真正染菌。如染菌要記錄瓶號、瓶數(shù)，同時要檢查塞、蓋的密封情況；若有破損要記錄并檢查其破損原因。對

48、于微生物污染的樣品要進行鑒別試驗，鑒別的內(nèi)容至少要包括菌落、細胞形態(tài)學及革蘭染色特性等。14.2無密封缺陷的瓶均要培養(yǎng)，任何不作培養(yǎng)的瓶子都要說明不作培養(yǎng)的原因，如果有書面規(guī)程規(guī)定，灌裝過程由于進行干擾操作而丟棄的培養(yǎng)基可以不培養(yǎng),灌裝過程丟棄程序必須與實際生產(chǎn)一致。14.3培養(yǎng)及讀數(shù)過程原則上不可遺漏，如丟棄要有很明確的理由（要盡量避免）。14.4無法培養(yǎng)的制品包括壓碎瓶、在灌裝時掉到地上無法培養(yǎng)的，要在記錄中說明。15 試驗結(jié)果評價15.1培養(yǎng)基灌裝實驗的合格標準：15.1.1灌裝量<5000瓶時，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查，并重新驗證（3批）。15.1.2灌裝量為5000-10000

49、瓶時，若有1瓶污染，視調(diào)查結(jié)果決定是否需要重新進行1批培養(yǎng)基灌裝實驗：若有兩瓶污染，必須重新驗證（3批），同時進行徹底調(diào)查。15.1.3灌裝量>10000瓶時，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查；若有兩瓶污染，必須進行徹底調(diào)查，并重新驗證（3批）。15.2我公司確定培養(yǎng)基模擬灌裝試驗批量為6000支/批。合格標準：6000支均不得有染菌灌裝產(chǎn)品存在為合格標準。如已灌裝的批量經(jīng)過按培養(yǎng)條件培養(yǎng)后經(jīng)檢查均陰性（即全部灌裝數(shù)量無細菌生長），則判定驗證符合要求；如發(fā)生陽性（有細菌生長）則需全面調(diào)查后找出染菌原因，進行再驗證。15.3培養(yǎng)結(jié)果陽性調(diào)查15.3.1當培養(yǎng)基灌裝出現(xiàn)陽性結(jié)果時，不管是否符合合格標

50、準，都必須進行調(diào)查。15.3.2制定的CAPA，需要針對污染的原因或不良無菌操作行為做出糾正。15.3.3分離到的微生物要鑒別到種，調(diào)查過程中要詳細分析可能的產(chǎn)生陽性結(jié)果的原因，如果是系統(tǒng)產(chǎn)生的則要對系統(tǒng)進行驗證，以確定系統(tǒng)的穩(wěn)定性；如是人員產(chǎn)生的則要做針對性的改進。15.3.4科學評估工藝的可靠性以及上市產(chǎn)品可能存在的風險。15.3.5對于超出標準的結(jié)果，要在調(diào)查清楚原因后再次進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。15.4 如果未達到接受標準： 15.4.1在明確糾偏行動前，需考慮暫停生產(chǎn)。在工藝重新確認前的產(chǎn)品不得放行。15.4.2在本次培養(yǎng)基灌裝之后生產(chǎn)的到下一次成功的培養(yǎng)基灌裝之間的產(chǎn)品都需要被進行回顧，評估其無菌失敗的風險。15.4.3在該次培養(yǎng)基灌裝和上一次成功的培養(yǎng)基灌裝之間的產(chǎn)品也需要被進行回顧