PCR技術(shù)及PCR儀

1、PCR技術(shù)簡史DNA的復(fù)制核酸體外擴增的設(shè)想聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35解旋酶解鏈酶DNA解旋解鏈合成引物子鏈延長PCR技術(shù)簡史DNA的復(fù)制核酸體外擴增的設(shè)想聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35DNA解旋解鏈合成引物子鏈延長GGAUCG5AUCGCG5引物酶引物酶RNA引物RNA引物PCR技術(shù)簡史DNA的復(fù)制核酸體外擴增的設(shè)想聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTA

2、GC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35DNA解旋解鏈合成引物子鏈延長GGAUCG5AUCGCG5TAGCGCTATCGCATCGACGCT3ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG3DNA聚合酶DNA聚合酶PCR技術(shù)簡史DNA的復(fù)制核酸體外擴增的設(shè)想聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明PCR技術(shù)簡史DNA的復(fù)制核酸體外擴增的設(shè)想聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明 Mullis開車的時候開車的時候, 瞬間感覺兩排路燈就是瞬間感覺兩排路燈就是DNA的兩條鏈，自己的車和對面的兩條鏈，自己的車和對面開來的車象是開來的車象是DNA聚合酶，面對面地合成著聚合酶，面對面地合成著DNA， 引物引物引物引物引物引物

3、XX()40 50 60 70 80 90 100100 80 60 40 20PCR的基本原理PCR反應(yīng)條件PCR過程PCR的特點1234522557294時間（min）溫度（）PCR的基本原理PCR反應(yīng)條件PCR過程PCR的特點適溫延伸3高溫變性1低溫退火2重復(fù)13步2530輪目的DNA片段擴增100萬倍以上DNA雙螺旋DNA單鏈與引物復(fù)性DNA變性形成2條單鏈子鏈延伸DNA加倍1234522557294時間（min）溫度（）適溫延伸3高溫變性1低溫退火2重復(fù)13步2530輪目的DNA片段擴增100萬倍以上DNA雙螺旋DNA單鏈與引物復(fù)性子鏈延伸DNA加倍DNA變性形成2條單鏈模板DNA9

4、550引物1引物2DNA引物引物1引物2DNA引物72Taq酶Taq酶第1輪結(jié)束95第2輪開始955072TaqTaqTaqTaq72第2輪結(jié)束模板DNA第1輪擴增第2輪擴增第3輪擴增第4輪擴增第5輪擴增第6輪擴增PCR 動畫動畫過過 程程PCR的基本原理PCR反應(yīng)條件PCR過程PCR的特點樣品樣品正對照正對照 負(fù)對照負(fù)對照標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)準(zhǔn)分子量3 logDNACycleslogDNACyclesPCR的類型和應(yīng)用 研究基因克隆，DNA測序，分析突變 診斷細(xì)菌、病毒、寄生蟲檢測，診斷 人類基因組工程遺傳圖譜的構(gòu)建，DNA測序，表達圖譜 法醫(yī)犯罪現(xiàn)場標(biāo)本分析 腫瘤各種腫瘤檢測 其他 已知靶基因片段兩測的序列 人類染色體端粒人類染色體端粒DNA的熒光原位雜交照片的熒光原位雜交照片 逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶mRNAmRNAcDNAcDNA雜化雙鏈雜化雙鏈PCR擴增logDNACycles10ng0.001ngA正常人A病 人病原微生物基因正常人 (-