第二章蛋白質的基礎知識

1、成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 1 第二章 蛋白質的基礎知識成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 2成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 3第一節(jié)第一節(jié) 蛋白質概述蛋白質概述第二節(jié)第二節(jié) 氨基酸氨基酸第三節(jié)第三節(jié) 蛋白質基本結構蛋白質基本結構第四節(jié)第四節(jié) 蛋白質的基本性質蛋白質的基本性質授課時序：授課時序：第五節(jié)第五節(jié) 氨基酸代謝氨基酸代謝第六節(jié)第六節(jié) 氨基酸、多肽、蛋白質類藥物簡介氨基酸、多肽、蛋白質類藥物簡介成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 4 第一節(jié)第一節(jié) 蛋白質概述蛋白質概述一、蛋白質的化學概念一、蛋白質的化學概念二、蛋白質的生物學功能二、蛋白質的生物學功能三、蛋白質的元素組成三、蛋白質的元

2、素組成四、蛋白質的分類四、蛋白質的分類成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 5u“造物主造物主”最初帶給生命以幾種形式或一種形式，然后進化接最初帶給生命以幾種形式或一種形式，然后進化接著開始從如此簡單的形式開始，永不停息地產(chǎn)生出業(yè)已存在的最著開始從如此簡單的形式開始，永不停息地產(chǎn)生出業(yè)已存在的最美麗的最有價值的東西，而且今后仍將進化下去。美麗的最有價值的東西，而且今后仍將進化下去。物種起物種起源源 達爾文達爾文 u生命的起源必然是通過化學途經(jīng)實現(xiàn)的，只要把蛋白質的化學生命的起源必然是通過化學途經(jīng)實現(xiàn)的，只要把蛋白質的化學成份弄清楚以后，化學就能著手制造出活的蛋白質來，如果化學成份弄清楚以后，化學就

3、能著手制造出活的蛋白質來，如果化學有一天能用人工的方法制造蛋白質，那么這樣的蛋白質就一定會有一天能用人工的方法制造蛋白質，那么這樣的蛋白質就一定會顯示出生命現(xiàn)象。顯示出生命現(xiàn)象。反杜林論反杜林論 恩格斯恩格斯一一.蛋白質的化學概念蛋白質的化學概念Protein字源出自希臘文字源出自希臘文 它是它是“最初的最初的”“”“第一重要的第一重要的”意意思思蛋白質是生命存在的主要形式蛋白質是生命存在的主要形式! !定義：是由氨基酸組成的，具有復雜結構定義：是由氨基酸組成的，具有復雜結構的大分子物質。的大分子物質。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 6 二、蛋白質的生物學功能 生物體的組成成分生物體的組成成

4、分 酶酶 調(diào)節(jié)功能調(diào)節(jié)功能 運輸和儲存運輸和儲存 運動運動 防御防御 凝血凝血 基因的調(diào)控基因的調(diào)控 營養(yǎng)營養(yǎng)構成生物機體的結構成生物機體的結構蛋白，如肌動蛋構蛋白，如肌動蛋白、肌球蛋白白、肌球蛋白具有催化功能具有催化功能的蛋白質的蛋白質免疫球蛋白免疫球蛋白氮平衡氮平衡必需氨基酸必需氨基酸互補作用互補作用成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 7三、蛋白質的元素組成三、蛋白質的元素組成蛋白質是一類含氮有機化合物，除含有碳、氫、氧外，還有氮和少量的硫。某些蛋白質還含有其他一些元素，主要是磷、鐵、碘、鋅和銅等。這些元素在蛋白質中的組成百分比約為： C 5060 H 68 O 1924 N 16% S 0

5、4 其他 微 量NN的含量平均為的含量平均為16%16%凱氏（凱氏（KjadehlKjadehl） 定氮法定氮法的理論基礎。的理論基礎。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 8蛋白質含量的測定：蛋白質含量的測定： 凱氏定氮法凱氏定氮法(測定氮的經(jīng)典方法) 優(yōu)點：對原料無選擇性，儀器簡單， 方法也簡單； 缺點：易將其他氮都歸入蛋白質中,不精確。 一般，樣品含氮量平均在16%，取其倒數(shù)100/16=6.25，即為蛋白質換算系數(shù)，其含義是樣品中每存在1g元素氮，就說明含有6.25g 蛋白質；故： 單位樣品中蛋白質的含量=單位樣品中含氮量6.25成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 91 1、依據(jù)蛋白質的外形

6、分類：、依據(jù)蛋白質的外形分類：（globular proteinglobular protein） ：外形接近球形或橢圓形，：外形接近球形或橢圓形，溶解性較好，大多數(shù)蛋白質屬于這一類。溶解性較好，大多數(shù)蛋白質屬于這一類。（fibrous proteinfibrous protein） ：分子類似纖維或細棒，：分子類似纖維或細棒，大多數(shù)不溶于水和稀鹽，堅韌物質。大多數(shù)不溶于水和稀鹽，堅韌物質。2、按照蛋白質的化學組成分：(simple protein)：又稱為單純蛋白質；這類蛋白質只含氨基酸，不含其它成分。(conjugated protein) ：又稱為復合蛋白質；由簡單蛋白與其它非蛋白成分結

7、合而成分。四、蛋白質的分類成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 103、按照生物功能分類：參與代謝反應的蛋白質。：對生物體起保護和支持作用的蛋白質。4、按營養(yǎng)價值分類：含有人體所必須的各種氨基酸：缺乏人體所必須的某些氨基酸四、蛋白質的分類成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 11 第二節(jié) 氨基酸一、氨基酸的概念一、氨基酸的概念二、氨基酸的結構特點二、氨基酸的結構特點三、氨基酸的分類三、氨基酸的分類四、氨基酸的理化性質四、氨基酸的理化性質五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式六、生物活性肽六、生物活性肽成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 12 氨基酸是蛋白質的基本結構單位。 氨基酸是具有氨基（-NH2）

8、或亞氨基（-NH-）和羧基（-COOH）的有機分子。 一、氨基酸的概念一、氨基酸的概念（Amino Acid）成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 13不帶電形式不帶電形式 H2NCHCOOHR組成蛋白質的天然氨基酸主要有組成蛋白質的天然氨基酸主要有2020種，除種，除脯氨脯氨酸酸外，其他外，其他1919種都具有種都具有-型氨基酸的通式型氨基酸的通式二、氨基酸的結構特點二、氨基酸的結構特點成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 142、兩性電解質不帶電形式不帶電形式 H2NCHCOOHR +H3NCHCOO-R兩性離子形式兩性離子形式 二、氨基酸的結構特點二、氨基酸的結構特點成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟

9、 制 153 3、手性分子：旋光性、手性分子：旋光性 除除甘氨酸甘氨酸外，目前已知的天然蛋白質中的氨基酸外，目前已知的天然蛋白質中的氨基酸均為的均為的L-L-氨基酸氨基酸二、氨基酸的結構特點二、氨基酸的結構特點成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 16三、氨基酸的分類三、氨基酸的分類根據(jù)氨基酸分子中所含氨基和羧基數(shù)目的n中性氨基酸：分子中含一個氨基，一個羧基n酸性氨基酸：分子中含一個氨基，兩個羧基n堿性氨基酸：分子中含兩個氨基，一個羧基根據(jù)R基的物理性質分n親水氨基酸：極性n疏水氨基酸：非極性8種人體必須氨基酸： Met Trp Lys Val Ile Leu Phe Thr 假 設 來 寫 一

10、兩 本 書 +H3NCHCOO-R兩性離子形式兩性離子形式成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 17n外觀形狀：無色晶體或粉末狀外觀形狀：無色晶體或粉末狀n熔點高：熔點高：200200300300n溶解性：水中溶解度差別較大，不溶于有溶解性：水中溶解度差別較大，不溶于有機溶劑。機溶劑。 n光學性質：紫外吸收性（光學性質：紫外吸收性（酪、色、苯丙酪、色、苯丙）、）、旋光性（旋光性（L-L-型型）1 1、一般物理性質、一般物理性質四、氨基酸的理化性質四、氨基酸的理化性質成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 182 2、一般化學性質、一般化學性質四、氨基酸的理化性質四、氨基酸的理化性質氨基酸的等電點（PI）

11、nPI：在某一條件下，氨基酸所帶凈電荷為零，此時環(huán)境的PH值成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 191、肽鍵：氨基酸之間脫水后形成的共價鍵稱肽鍵，又稱酰胺鍵。五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 202、肽平面：肽鏈中從一個C到另一個C之間的結構五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 212、特征（二）肽平面（二）肽平面五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 22完全伸展的多肽主鏈構象-碳原子碳原子酰胺平面酰胺平面=1800，=1800=00，=00的多肽主鏈構象的多肽主鏈構象酰胺平面酰胺平面

12、=00，=00側鏈側鏈非鍵合原子非鍵合原子接觸半徑接觸半徑成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 233 3、肽：氨基酸通過肽鍵連接起來形成的化合物。、肽：氨基酸通過肽鍵連接起來形成的化合物。 .五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式構成肽鏈的氨基酸已殘缺不全，稱為構成肽鏈的氨基酸已殘缺不全，稱為氨基酸氨基酸殘基殘基成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 244 4、多肽鏈、多肽鏈五、氨基酸的連接方式五、氨基酸的連接方式多肽鏈可以看成由多肽鏈可以看成由CC串聯(lián)起來的無數(shù)個酰胺平面組成串聯(lián)起來的無數(shù)個酰胺平面組成成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 251 1、谷胱甘肽（、谷胱甘肽（GSHGSH）在保持某些要

13、求巰基的酶活性中起重要作用！在保持某些要求巰基的酶活性中起重要作用！六、生物活性肽六、生物活性肽成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 26短桿菌肽S由短桿菌產(chǎn)生的由短桿菌產(chǎn)生的10肽環(huán)。肽環(huán)。2 2 、 抗生素類多肽抗生素類多肽青霉素青霉素含D- Cys 和 D-Val 的二肽衍生物作用于革蘭氏陽性細菌細胞壁肽聚糖的合成六、生物活性肽六、生物活性肽成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 273 3、腦啡肽、腦啡肽腦啡肽具有強烈的鎮(zhèn)痛作用，不上癮腦啡肽具有強烈的鎮(zhèn)痛作用，不上癮。Met-腦啡肽腦啡肽 Tyr-Gly-Gly-Phe-MetLeu-腦啡肽腦啡肽 Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu4 4、

14、胰高血糖素、胰高血糖素 由胰島由胰島-細胞分泌細胞分泌的的2929肽。促進肽。促進糖糖分解代謝的激分解代謝的激素，同時素，同時促進促進胰島素胰島素的分泌。的分泌。六、生物活性肽六、生物活性肽成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 28第三節(jié) 蛋白質基本結構一、蛋白質的一級結構一、蛋白質的一級結構二、蛋白質的空間結構二、蛋白質的空間結構三、蛋白質一級結構與功能的關系三、蛋白質一級結構與功能的關系四、蛋白質空間結構與功能的關系四、蛋白質空間結構與功能的關系成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 2919521952年丹麥人年丹麥人Linderstrom-LangLinderstrom-Lang最早提出最早提出

15、蛋白質的結構可以分成四個層次蛋白質的結構可以分成四個層次: :v一級結構：一級結構：v二二級結構：級結構：v三三級結構：級結構：v 四四級結構：級結構：成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 30共價鍵共價鍵次級鍵次級鍵化學鍵化學鍵 肽鍵肽鍵一級結構一級結構氫鍵氫鍵二硫鍵二硫鍵二、三、四級結構二、三、四級結構疏水鍵疏水鍵鹽鍵鹽鍵范德華力范德華力三、四級結構三、四級結構蛋白質分子中的共價鍵與次級鍵蛋白質分子中的共價鍵與次級鍵配位鍵配位鍵成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 31一、蛋白質的一級結構一級結構又叫初級結一級結構又叫初級結構、基本化學結構或構、基本化學結構或共價結構。共價結構。19691969年

16、國年國際純粹與應用化學聯(lián)際純粹與應用化學聯(lián)合會合會(IUPAC)(IUPAC)定義為：定義為：一級結構即一級結構即肽鏈中的肽鏈中的氨基酸順序氨基酸順序。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 32研究一級結構需要闡明的內(nèi)容包括：研究一級結構需要闡明的內(nèi)容包括：q（1 1）多肽鏈數(shù)目。）多肽鏈數(shù)目。q（2 2）每條肽鏈的末端殘基種類。）每條肽鏈的末端殘基種類。q（3 3）每條肽鏈的氨基酸順序。）每條肽鏈的氨基酸順序。q（4 4）鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的配置等。）鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的配置等。一、蛋白質的一級結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 33 胰島素的一級結構胰島素的一級結構一、蛋白質的一級結構成都中醫(yī)藥

17、大學峨眉學院 童娟 制 34指蛋白質多肽鏈中主鏈原子指蛋白質多肽鏈中主鏈原子的空間排布的空間排布1、-螺旋螺旋主要特征：主要特征：u多肽主鏈按右手或左手方向盤繞，一般形成右手多肽主鏈按右手或左手方向盤繞，一般形成右手螺旋。螺旋。u每圈螺旋：每圈螺旋：3.6個氨基酸殘基；螺距：個氨基酸殘基；螺距：0.54nm 。u結構穩(wěn)定的主要化學鍵：氫鍵。結構穩(wěn)定的主要化學鍵：氫鍵。u構成螺旋的每個構成螺旋的每個C都取相同的二面角。都取相同的二面角。u影響形成和穩(wěn)定的因素：氨基酸組成和排列順序影響形成和穩(wěn)定的因素：氨基酸組成和排列順序（一）蛋白質的二級結構（一）蛋白質的二級結構二、蛋白質的空間結構成都中醫(yī)藥大

18、學峨眉學院 童娟 制 35-螺旋螺旋二、蛋白質的空間結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 362、-折疊結構折疊結構主要特征：主要特征：u多肽主鏈呈鋸齒狀折疊構象。多肽主鏈呈鋸齒狀折疊構象。u側鏈側鏈R基交替地分布在片層基交替地分布在片層平面的上下。平面的上下。u結構穩(wěn)定的主要化學鍵：氫結構穩(wěn)定的主要化學鍵：氫鍵鍵（一）蛋白質的二級結構（一）蛋白質的二級結構二、蛋白質的空間結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 37主要特征：主要特征：u由多肽鏈上由多肽鏈上4個連續(xù)的氨基酸殘個連續(xù)的氨基酸殘基組成。基組成。u主鏈骨架以主鏈骨架以180返回折疊。返回折疊。u結構穩(wěn)定的主要化學鍵：氫鍵。結構穩(wěn)定的主

19、要化學鍵：氫鍵。u脯氨酸容易出現(xiàn)在這種結構中。脯氨酸容易出現(xiàn)在這種結構中。3、-轉角（一）蛋白質的二級結構（一）蛋白質的二級結構二、蛋白質的空間結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 38主要特征：主要特征：u肽段有更大的任意性。肽段有更大的任意性。u穩(wěn)定、非重復性結構。穩(wěn)定、非重復性結構。u受受R基基團團的影響較大，經(jīng)常是的影響較大，經(jīng)常是構成蛋白質的功能部位。構成蛋白質的功能部位。4 4、無規(guī)則卷曲、無規(guī)則卷曲 （一）蛋白質的二級結構（一）蛋白質的二級結構二、蛋白質的空間結構無規(guī)無規(guī)則卷則卷曲曲細胞色素細胞色素C的的三級結構三級結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 391 1、定義：、定義：

20、蛋白質分子蛋白質分子中中所有原子的空間排布。所有原子的空間排布。（二）蛋白質的三級結構（二）蛋白質的三級結構二、蛋白質的空間結構n結構為球形或近似球形。結構為球形或近似球形。 n含多種二級結構單元。含多種二級結構單元。n結構穩(wěn)定的主要化學鍵：結構穩(wěn)定的主要化學鍵：二硫二硫鍵、次級鍵（鍵、次級鍵（氫鍵、范德華力、氫鍵、范德華力、疏水鍵、離子鍵疏水鍵、離子鍵）n三級結構與生物活性密切相關。三級結構與生物活性密切相關。血紅蛋白血紅蛋白成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 401、定義：由多條具有三級結構的多肽鏈彼此通過定義：由多條具有三級結構的多肽鏈彼此通過相相互連接而成的互連接而成的聚合體結構聚合體結

21、構2 2、亞基：四級結構中，每一個具有獨立的三級結構的多肽鏈。、亞基：四級結構中，每一個具有獨立的三級結構的多肽鏈。（三）蛋白質的四級結構（三）蛋白質的四級結構二、蛋白質的空間結構3 3、維持亞基之間的化學鍵：、維持亞基之間的化學鍵：氫鍵、離子鍵氫鍵、離子鍵4 4、單獨的亞基一般沒有生、單獨的亞基一般沒有生物學功能，只有完整的物學功能，只有完整的四級結構才有生物學功四級結構才有生物學功能。能。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 41蛋白質的一、二、三、四級結構蛋白質的一、二、三、四級結構成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 42三、蛋白質一級結構與功能的關系三、蛋白質一級結構與功能的關系蛋白質一級結

22、構決定其高級結構蛋白質一級結構決定其高級結構蛋白質一級結構與分子病蛋白質一級結構與分子病n代表病例：鐮刀型貧血癥 -鏈鏈N端氨基酸排列順序端氨基酸排列順序 1 2 3 4 5 6 7 8 Hb-A（正常人）（正常人） Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys Hb-S（患（患 者）者） Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys正常紅細胞與鐮刀形紅細胞的掃描電鏡圖鐮刀形紅鐮刀形紅細胞細胞正常紅正常紅細胞細胞Val四、蛋白質的空間結構與功能的關系四、蛋白質的空間結構與功能的關系蛋白質的三維結構決定其生物學功能蛋白質的三維結構決定其生物學功能 Val 取代

23、取代Glu含氧含氧-HbAO2O2粘性疏水斑點粘性疏水斑點含氧含氧HbS脫氧脫氧HbS疏水位點疏水位點血紅蛋白分子凝集血紅蛋白分子凝集成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 44 蛋白質的一級結構決定它的空間結構 特定的空間結構是蛋白質具有生物活性的保證成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 45第四節(jié) 蛋白質的基本性質成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 46一、蛋白質的兩性解離及等電點一、蛋白質的兩性解離及等電點pH = pI 凈電荷凈電荷=0 pH pI凈電荷為負凈電荷為負PrCOOHNH3+ + H+ OH- + H+ OH-PrCOO-NH2PrCOO-NH3+ 對某一蛋白質而言，在某一對某一蛋白質

24、而言，在某一PH下，當它所帶正負電荷相下，當它所帶正負電荷相等的時候，該溶液的等的時候，該溶液的pH值即為該蛋白質的值即為該蛋白質的等電點等電點 （pI）成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 47二、蛋白質的膠體性質二、蛋白質的膠體性質n高分子化合物高分子化合物n粘度大、擴散慢粘度大、擴散慢n易沉降易沉降n不能透過半透膜不能透過半透膜n親水性：親水性：水化層、雙電層水化層、雙電層 成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 48三、蛋白質的變性與復性三、蛋白質的變性與復性1 1、蛋白質的變性作用：、蛋白質的變性作用：蛋白質因受某些蛋白質因受某些理理化因素的影響，分子的化因素的影響，分子的空間構象被破壞，從而

25、導致其理化性質及生物學活性改變的現(xiàn)象空間構象被破壞，從而導致其理化性質及生物學活性改變的現(xiàn)象2 2、變性因素：、變性因素：物理：高溫、高壓、射線等物理：高溫、高壓、射線等化學：強酸、強堿、重金屬鹽等?；瘜W：強酸、強堿、重金屬鹽等。3 3、變性的本質：、變性的本質：空間結構破壞，一級結構和分子量不變空間結構破壞，一級結構和分子量不變4 4、蛋白質變性后的表現(xiàn)：、蛋白質變性后的表現(xiàn)：生物學活性喪失、理化性質改變生物學活性喪失、理化性質改變5、蛋白質變性作用的應用意義、蛋白質變性作用的應用意義n消毒滅菌消毒滅菌n去除雜蛋白、純化藥物去除雜蛋白、純化藥物n保存蛋白質生物制劑保存蛋白質生物制劑成都中醫(yī)藥

26、大學峨眉學院 童娟 制 49 6 6、蛋白質的復性、蛋白質的復性 影響蛋白質變性的理化因素消除后，某些影響蛋白質變性的理化因素消除后，某些變性蛋白質又恢復原來的空間構象，生物學變性蛋白質又恢復原來的空間構象，生物學活性也隨之恢復。活性也隨之恢復。變性變性復性復性注意注意：并不是所有變性蛋白都可以復：并不是所有變性蛋白都可以復性的！性的！三、蛋白質的變性與復性三、蛋白質的變性與復性注意注意：蛋白質變性后一級結構沒有發(fā)：蛋白質變性后一級結構沒有發(fā)生變化。只是空間構象發(fā)生變化。生變化。只是空間構象發(fā)生變化。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 50（一）可逆的沉淀作用（一）可逆的沉淀作用四、蛋白質的沉淀

27、作用四、蛋白質的沉淀作用1 1、鹽溶與鹽析：、鹽溶與鹽析：在蛋白質溶液中加入中性鹽時，可產(chǎn)生以下兩種現(xiàn)象：在鹽濃在蛋白質溶液中加入中性鹽時，可產(chǎn)生以下兩種現(xiàn)象：在鹽濃度很稀的范圍內(nèi)，隨著鹽濃度增加，蛋白質的溶解度亦隨之增度很稀的范圍內(nèi)，隨著鹽濃度增加，蛋白質的溶解度亦隨之增加，這種現(xiàn)象稱加，這種現(xiàn)象稱鹽溶鹽溶。與鹽溶作用相反，當溶液中鹽濃度提高到一定的飽和度時，與鹽溶作用相反，當溶液中鹽濃度提高到一定的飽和度時，蛋白質溶解度逐漸降低，蛋白質分子發(fā)生絮結，成沉淀析出，蛋白質溶解度逐漸降低，蛋白質分子發(fā)生絮結，成沉淀析出，這種現(xiàn)象稱為這種現(xiàn)象稱為鹽析鹽析。鹽析沉淀法鹽析沉淀法。成都中醫(yī)藥大學峨眉學

28、院 童娟 制 512 2、有機溶劑沉淀、有機溶劑沉淀 在蛋白質溶液中，加入能與水互溶的有機溶劑使蛋白質產(chǎn)生沉淀的方法。在蛋白質溶液中，加入能與水互溶的有機溶劑使蛋白質產(chǎn)生沉淀的方法。機理機理：破壞蛋白質的水化膜：破壞蛋白質的水化膜注意注意：（：（1 1）低溫操作。）低溫操作。 （2 2）在沉淀完全的前提下，時間越短越好。）在沉淀完全的前提下，時間越短越好。應用應用：等電點有機溶劑沉淀法、消毒滅菌、分離制備有活性的蛋白質：等電點有機溶劑沉淀法、消毒滅菌、分離制備有活性的蛋白質（一）可逆的沉淀作用（一）可逆的沉淀作用四、蛋白質的沉淀作用四、蛋白質的沉淀作用成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 521

29、1、重金屬鹽沉淀：、重金屬鹽沉淀：條件：溶液條件：溶液pHpH大于等電點大于等電點機理：機理：堿性條件下，蛋白質帶負電，可與帶正電的堿性條件下，蛋白質帶負電，可與帶正電的重金屬重金屬離子結合離子結合應用：解毒應用：解毒2 2、熱凝固沉淀：、熱凝固沉淀：條件：蛋白質受熱變性后，溶液條件：蛋白質受熱變性后，溶液pHpH等于等電點等于等電點機理：水化膜、電荷層破壞機理：水化膜、電荷層破壞應用：豆腐工藝應用：豆腐工藝3 3、生物堿試劑沉淀：、生物堿試劑沉淀：條件：溶液的條件：溶液的pHpH低于等電點低于等電點機理：酸性條件下，蛋白質帶正電，可與機理：酸性條件下，蛋白質帶正電，可與帶負電的帶負電的生物堿

30、試劑結合生物堿試劑結合應用：啤酒澄清、尿蛋白檢驗劑、應用：啤酒澄清、尿蛋白檢驗劑、“柿石癥柿石癥”的原理的原理（二）不可逆的沉淀作用（二）不可逆的沉淀作用四、蛋白質的沉淀作用四、蛋白質的沉淀作用成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 53五五、蛋白質的紫外吸收特征、蛋白質的紫外吸收特征n蛋白質溶液能吸收一定波長的紫外線，主要是由蛋白質溶液能吸收一定波長的紫外線，主要是由帶芳香環(huán)的氨基酸決定的帶芳香環(huán)的氨基酸決定的n最大吸收峰：最大吸收峰：280nmn吸收能力：色吸收能力：色酪酪苯丙苯丙n測定濃度：測定濃度： 0.1一一0.5mgml成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 54第五節(jié) 氨基酸代謝 成都中醫(yī)藥

31、大學峨眉學院 童娟 制 55 食物蛋白經(jīng)消化吸收的氨基酸（外源性氨基酸）與體內(nèi)組織蛋白食物蛋白經(jīng)消化吸收的氨基酸（外源性氨基酸）與體內(nèi)組織蛋白降解產(chǎn)生的氨基酸（內(nèi)源性氨基酸）混在一起，分布于體內(nèi)各處，參降解產(chǎn)生的氨基酸（內(nèi)源性氨基酸）混在一起，分布于體內(nèi)各處，參與代謝，稱為與代謝，稱為氨基酸代謝庫。氨基酸代謝庫。成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 56成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 57成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 58成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 59成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 60成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 61成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 62成都中醫(yī)藥大學峨眉學

32、院 童娟 制 63成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 64成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 65成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 66成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 67成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 68成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 69 作為合成嘌呤和嘧啶的原料作為合成嘌呤和嘧啶的原料 滿足多種重要物質生物合成對甲基的需要滿足多種重要物質生物合成對甲基的需要成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 70補充作業(yè)：補充作業(yè)：名詞解釋：名詞解釋：n兩性離子兩性離子 、必需氨基酸、等電點、必需氨基酸、等電點 n蛋白質的一級結構蛋白質的一級結構 、蛋白質的二級結構、蛋白質、蛋白質的二級結構、蛋白質的三級結構、蛋白質的四級結構的三級結構、蛋白質的四級結構n鹽析、鹽溶、蛋白質的變性鹽析、鹽溶、蛋白質的變性 、蛋白質的復性、蛋白質的復性成都中醫(yī)藥大學峨眉學院 童娟 制 71應用題：應用題：根據(jù)蛋白質一級氨基酸序列可以預測蛋白質的空間結構。假設有下列氨基酸