第十一章 克隆與醫(yī)學(xué)

1、第十一章第十一章 克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)1997年2月23日，英國科學(xué)家Wilmut等宣布通過克隆技術(shù)，獲得了世界上第一只來源于體細胞的克隆羊Dolly，“克隆”問題成為科技界、法律界、宗教界、各媒體及全社會熱烈討論的話題?？寺∨？寺∨?（Kato,1998）克隆猴克隆猴“太特拉太特拉”克隆的熒光小豬克隆的熒光小豬(左左)和正常小豬和正常小豬(右右)克隆兔克隆兔 (保羅保羅雷納德雷納德,2002)克隆馬克隆馬“普羅梅泰亞普羅梅泰亞”在意大利出生。在意大利出生。后面是它的后面是它的“母親兼姐姐母親兼姐姐”?？寺」贰八辜{皮”1.1克隆的一般概念克隆的一般概念克隆克隆(clone)：指通過：指通過無性

2、方式無性方式由單個細胞或個體由單個細胞或個體產(chǎn)生的、和親代非常相似的一群細胞或生物體，產(chǎn)生的、和親代非常相似的一群細胞或生物體，在不發(fā)生突變的情況下，一個克隆內(nèi)的所有成員在不發(fā)生突變的情況下，一個克隆內(nèi)的所有成員具有具有完全相同的遺傳構(gòu)成完全相同的遺傳構(gòu)成。 克隆的概念強調(diào)：克隆的概念強調(diào)：以無性的方式進行增殖或繁殖以無性的方式進行增殖或繁殖一個克隆中的每一成員其遺傳構(gòu)成完全相同一個克隆中的每一成員其遺傳構(gòu)成完全相同克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)克隆在分子水平的層次克隆在分子水平的層次個體克隆個體克隆組織器官克隆組織器官克隆細胞克隆細胞克隆分子克隆分子克隆克隆按照目的來分類克隆按照目的來分類生殖性克隆生

3、殖性克隆治療性克隆治療性克隆(1). 分子克隆分子克?。豪美肈NA重重組技術(shù)將特定基因或組技術(shù)將特定基因或DNA序列插入載體或利用序列插入載體或利用PCR技術(shù)獲得大量相同基因或技術(shù)獲得大量相同基因或DNA序列的過程。序列的過程。O克隆在分子水平的層次克隆在分子水平的層次導(dǎo)入導(dǎo)入擴增擴增(2). 細胞克隆細胞克隆: 指的是一個祖先細胞經(jīng)過分裂，增殖而形指的是一個祖先細胞經(jīng)過分裂，增殖而形成一群細胞，這些細胞具有相同的遺傳組成，該群細胞成一群細胞，這些細胞具有相同的遺傳組成，該群細胞中的每一個細胞都含有相同的遺傳組成和特性，也稱無中的每一個細胞都含有相同的遺傳組成和特性，也稱無性繁殖細胞系。性

4、繁殖細胞系。(3). 組織器官克隆組織器官克隆：將體細胞核移入到去核的卵將體細胞核移入到去核的卵細胞形成重構(gòu)胚，經(jīng)過一定處理，待發(fā)育到囊胚細胞形成重構(gòu)胚，經(jīng)過一定處理，待發(fā)育到囊胚后，分離胚內(nèi)細胞團后，分離胚內(nèi)細胞團 ，純化、培養(yǎng)、篩選胚胎干，純化、培養(yǎng)、篩選胚胎干細胞，定向誘導(dǎo)分化成預(yù)定組織和器官的過程。細胞，定向誘導(dǎo)分化成預(yù)定組織和器官的過程。(4).個體克隆個體克?。荷矬w克隆，是指用無性繁殖的生物體克隆，是指用無性繁殖的方法，從體細胞得到遺傳上與原來生物體完全方法，從體細胞得到遺傳上與原來生物體完全相同的相同的 生物體，即人工復(fù)制生物體。生物體，即人工復(fù)制生物體。19581958年，年

5、，StewardSteward首次證實哈布蘭特的細胞全能性設(shè)想首次證實哈布蘭特的細胞全能性設(shè)想 (1).(1).生殖性克隆生殖性克隆(reproductive cloning)(reproductive cloning)是指對是指對生物包括人個體的復(fù)制，即從被克隆的個體獲得生物包括人個體的復(fù)制，即從被克隆的個體獲得細胞之后，將其植入被去除了遺傳物質(zhì)的卵細胞細胞之后，將其植入被去除了遺傳物質(zhì)的卵細胞中，通過刺激使重構(gòu)胚分化發(fā)育到囊胚，然后植中，通過刺激使重構(gòu)胚分化發(fā)育到囊胚，然后植入母體的子宮里孕育，發(fā)育為與供體完全相同的入母體的子宮里孕育，發(fā)育為與供體完全相同的遺傳組成的個體。遺傳組成的個體。

6、O克隆按照目的來分類克隆按照目的來分類(2).(2).治療性克隆治療性克隆(therapeutic cloning)(therapeutic cloning)是指出于治療是指出于治療目的而克隆人的胚胎，提取目的而克隆人的胚胎，提取胚胎干細胞胚胎干細胞，并使干細胞定向，并使干細胞定向發(fā)育，培育出健康的可以修復(fù)或替代壞死受損的細胞、組發(fā)育，培育出健康的可以修復(fù)或替代壞死受損的細胞、組織和器官，然后移植，治療疾病?？椇推鞴?，然后移植，治療疾病。目前的外科移植手術(shù)（心、肝、腎）常見問題目前的外科移植手術(shù)（心、肝、腎）常見問題 免疫排斥反應(yīng)免疫排斥反應(yīng) 器官的來源問題器官的來源問題生殖性克隆及治療性克隆

7、的比較生殖性克隆及治療性克隆的比較生殖性克隆生殖性克隆治療性克隆治療性克隆最終產(chǎn)品最終產(chǎn)品動物或人動物或人 可用于治療的細胞、組可用于治療的細胞、組織或器官織或器官 克隆目的克隆目的復(fù)制動物或人復(fù)制動物或人 修復(fù)受損的組織器官修復(fù)受損的組織器官 需要時間需要時間胚胎發(fā)育整個時間胚胎發(fā)育整個時間 短，幾周短，幾周移植子宮移植子宮需要需要不需要不需要法律限制法律限制對人禁止對人禁止美、德等國反對；英、美、德等國反對；英、中等國支持中等國支持 相同點：兩者都是以細胞核移植為基礎(chǔ)相同點：兩者都是以細胞核移植為基礎(chǔ)第二節(jié)第二節(jié) 動物克隆動物克隆及治療性克隆技術(shù)的基本方法及治療性克隆技術(shù)的基本方法2.1動

8、物克隆技術(shù)的基本方法動物克隆技術(shù)的基本方法 動物克隆技術(shù)的理論依據(jù)是動物克隆技術(shù)的理論依據(jù)是細胞具有全能性細胞具有全能性。 從理論上講，動物體內(nèi)幾乎所有的細胞，包括從理論上講，動物體內(nèi)幾乎所有的細胞，包括已分化的體細胞，細胞核中都含有完全相同的遺已分化的體細胞，細胞核中都含有完全相同的遺傳信息，具發(fā)育的全能性。傳信息，具發(fā)育的全能性。 受體卵細胞質(zhì)中含有啟動細胞核受體卵細胞質(zhì)中含有啟動細胞核重新編程重新編程的各的各種因子，供體核在卵細胞質(zhì)內(nèi)因子的作用下，可種因子，供體核在卵細胞質(zhì)內(nèi)因子的作用下，可以重新回到未分化狀態(tài)。以重新回到未分化狀態(tài)。2.1 2.1 動物克隆技術(shù)的基本方法動物克隆技術(shù)的基

9、本方法動物克隆的獲得的動物克隆的獲得的3個途徑個途徑胚胎分割技術(shù)胚胎分割技術(shù)：人工獲得同卵雙生：人工獲得同卵雙生細胞核移植技術(shù)細胞核移植技術(shù)：1 1、供體細胞、供體細胞2 2、受體細胞、受體細胞3 3、核移植、核移植4 4、重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植、重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植體細胞與去核卵細胞融合技術(shù)體細胞與去核卵細胞融合技術(shù)：不移植核，供：不移植核，供體細胞與去核卵細胞直接融合。體細胞與去核卵細胞直接融合?？寺∨c醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)2.1.1胚胎分割技術(shù)胚胎分割技術(shù)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)胚胎分割胚胎分割(embryo splitting)(embryo splitting)技術(shù)是指在技術(shù)是指在2 2細胞期至囊細胞

10、期至囊胚期胚期以前的早期胚胎用酶或者是機械方法分割，然后由以前的早期胚胎用酶或者是機械方法分割，然后由分割的細胞分別發(fā)育產(chǎn)生新個體。分割的細胞分別發(fā)育產(chǎn)生新個體。用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的后代數(shù)量有限，但方法較簡單，用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的后代數(shù)量有限，但方法較簡單，可有效地獲得同卵孿生后代。可有效地獲得同卵孿生后代。2.1.2細胞核移植技術(shù)細胞核移植技術(shù)原理：原理：利用細胞拆合或細胞重組技術(shù)，將卵母利用細胞拆合或細胞重組技術(shù)，將卵母細胞去核作為細胞去核作為核受體核受體，以不同來源細胞核作為，以不同來源細胞核作為核供體核供體，將后者移入前者中，構(gòu)建，將后者移入前者中，構(gòu)建重組胚重組胚，供，供體核在去核卵

11、母細胞的胞質(zhì)中體核在去核卵母細胞的胞質(zhì)中重新編程重新編程，啟動，啟動卵裂，開始胚胎發(fā)育過程。卵裂，開始胚胎發(fā)育過程。動物克隆技術(shù)的核心是核移植。動物克隆技術(shù)的核心是核移植。克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)O細胞核移植技術(shù)的技術(shù)路線細胞核移植技術(shù)的技術(shù)路線v(1)供體細胞的準備供體細胞的準備v(2)受體細胞的準備受體細胞的準備v(3)核移植核移植v(4)重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植 (1)供體細胞的準備供體細胞的準備 用于細胞核移植的供體用于細胞核移植的供體(donor)(donor)細胞有：早期胚胎細胞、細胞有：早期胚胎細胞、胚胎干細胞和體細胞，它們可來自活體或體外培養(yǎng)的細胞。

12、胚胎干細胞和體細胞，它們可來自活體或體外培養(yǎng)的細胞。供體核處在供體核處在G GO O/G/G1 1期期：容易獲得：容易獲得最佳克隆效果。這時的細胞雖然最佳克隆效果。這時的細胞雖然代謝比較活躍，但細胞卻置身于代謝比較活躍，但細胞卻置身于細胞分裂周期之外；細胞分裂周期之外；供體核處在供體核處在/G/G期：受體卵母期：受體卵母細胞質(zhì)指導(dǎo)的潛在的基因組復(fù)制細胞質(zhì)指導(dǎo)的潛在的基因組復(fù)制將導(dǎo)致異常的發(fā)育。將導(dǎo)致異常的發(fā)育。 (2)受體細胞的準備受體細胞的準備 核移植的受體核移植的受體(recipient)細胞有：去核卵細胞、受精卵和細胞有：去核卵細胞、受精卵和2細胞胚胎，其中多以細胞胚胎，其中多以卵細胞卵

13、細胞作為受體。卵細胞一般采用超作為受體。卵細胞一般采用超排卵法或卵巢的卵泡，經(jīng)體外培養(yǎng)成熟而獲得。將收集到排卵法或卵巢的卵泡，經(jīng)體外培養(yǎng)成熟而獲得。將收集到的受體細胞經(jīng)顯微操作或其他方式去除細胞核。的受體細胞經(jīng)顯微操作或其他方式去除細胞核。 供體細胞與受體細胞的細胞周期同步化。供體細胞與受體細胞的細胞周期同步化。(3)(3)核移植核移植利用顯微操作技術(shù)，將供體核移入去核受體細胞質(zhì)形成利用顯微操作技術(shù)，將供體核移入去核受體細胞質(zhì)形成重構(gòu)胚。重構(gòu)胚。卵子的激活：在正常受精過程中卵子的激活：在正常受精過程中，精子穿過透明帶及卵黃膜時，精子穿過透明帶及卵黃膜時，引起卵子內(nèi)鈣離子濃度升高，卵引起卵子內(nèi)鈣

14、離子濃度升高，卵子細胞周期恢復(fù)，啟動胚胎發(fā)育子細胞周期恢復(fù)，啟動胚胎發(fā)育，這一現(xiàn)象稱為激活。胚胎克隆，這一現(xiàn)象稱為激活。胚胎克隆時，通常用一定強度的電脈沖作時，通常用一定強度的電脈沖作用卵母細胞。用卵母細胞。(4)(4)重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植重構(gòu)胚的培養(yǎng)及移植完成核移植后形成的單個細胞在體外培養(yǎng)一段時間，或完成核移植后形成的單個細胞在體外培養(yǎng)一段時間，或者是移入離體輸卵管（同種或異種）進行體外培養(yǎng)，待者是移入離體輸卵管（同種或異種）進行體外培養(yǎng)，待獲得發(fā)育的重構(gòu)胚（囊胚或桑椹胚）后再移入雌性子宮獲得發(fā)育的重構(gòu)胚（囊胚或桑椹胚）后再移入雌性子宮或輸卵管進行發(fā)育，直到出生?；蜉斅压苓M行發(fā)育，直到出生。

15、通過核移植得到的胚胎可作供體，再進行細胞核移植，通過核移植得到的胚胎可作供體，再進行細胞核移植，稱再克隆。稱再克隆。 2.1.3體細胞與去核卵細胞融合技術(shù)體細胞與去核卵細胞融合技術(shù)O供體細胞不一定是核，可以是含部分細胞質(zhì)供體細胞不一定是核，可以是含部分細胞質(zhì)甚至是整個細胞甚至是整個細胞O不進行核移植，而是用細胞融合技術(shù)，使供不進行核移植，而是用細胞融合技術(shù)，使供核細胞與去核卵細胞融合獲得重構(gòu)胚核細胞與去核卵細胞融合獲得重構(gòu)胚融合方法有：電融合、化學(xué)融合、融合方法有：電融合、化學(xué)融合、病毒融合等。病毒融合等。2.2治療性克隆技術(shù)治療性克隆技術(shù)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)治療性克隆技術(shù)是治療性克隆技術(shù)是克

16、隆技術(shù)、胚胎干細胞技術(shù)克隆技術(shù)、胚胎干細胞技術(shù)、移植技術(shù)、移植技術(shù)結(jié)合的一種綜合技術(shù)。結(jié)合的一種綜合技術(shù)。Somatic cell nuclear transfer directdifferentiationReplacetherapyEstablish ofES cells2.2治療性克隆技術(shù)治療性克隆技術(shù)取患者體細胞，體外培養(yǎng)，使細胞同步化取患者體細胞，體外培養(yǎng)，使細胞同步化顯微注射移入去核卵母細胞構(gòu)建重構(gòu)胚顯微注射移入去核卵母細胞構(gòu)建重構(gòu)胚體外培養(yǎng)至囊胚分離細胞團，獲得胚胎干細胞體外培養(yǎng)至囊胚分離細胞團，獲得胚胎干細胞對胚胎干細胞進行基因修飾，定向誘導(dǎo)分化對胚胎干細胞進行基因修飾，定向誘

17、導(dǎo)分化移植入患者病變部位，替代病損細胞、組織移植入患者病變部位，替代病損細胞、組織 器官，達到治療的效果器官，達到治療的效果第三節(jié)第三節(jié)動物克隆技術(shù)的應(yīng)用前景動物克隆技術(shù)的應(yīng)用前景 3.1動物克隆技術(shù)與醫(yī)學(xué)動物克隆技術(shù)與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)v(1)克隆技術(shù)與醫(yī)藥生產(chǎn)克隆技術(shù)與醫(yī)藥生產(chǎn) 結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)制備動物生物反應(yīng)器結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)制備動物生物反應(yīng)器v(2)克隆技術(shù)結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)構(gòu)建疾病動物模型克隆技術(shù)結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)構(gòu)建疾病動物模型v(3)克隆技術(shù)與組織工程克隆技術(shù)與組織工程v(4)動物克隆技術(shù)與與基因療法結(jié)合治療遺傳疾病動物克隆技術(shù)與與基因療法結(jié)合治療遺傳疾病(1)克隆技術(shù)與醫(yī)藥生產(chǎn)克隆技

18、術(shù)與醫(yī)藥生產(chǎn)克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)將轉(zhuǎn)基因技術(shù)與克隆技術(shù)有機結(jié)合，以動物體細胞將轉(zhuǎn)基因技術(shù)與克隆技術(shù)有機結(jié)合，以動物體細胞為受體，將藥用蛋白基因以為受體，將藥用蛋白基因以DNADNA轉(zhuǎn)染的方式導(dǎo)入能進轉(zhuǎn)染的方式導(dǎo)入能進行傳代培養(yǎng)的動物體細胞內(nèi)，再以這些攜帶目的基因行傳代培養(yǎng)的動物體細胞內(nèi)，再以這些攜帶目的基因的體細胞為核供體，進行動物克隆。的體細胞為核供體，進行動物克隆。應(yīng)用克隆技術(shù)還可構(gòu)建疾病動物模型，以研究疾病應(yīng)用克隆技術(shù)還可構(gòu)建疾病動物模型，以研究疾病的的發(fā)病機制發(fā)病機制、治療方案治療方案和和防治措施防治措施。也可應(yīng)用體細胞。也可應(yīng)用體細胞克隆技術(shù)和干細胞技術(shù)研究疾病基因組、功能基因組克隆

19、技術(shù)和干細胞技術(shù)研究疾病基因組、功能基因組、以及基因的功能。、以及基因的功能。(2)(2)克隆技術(shù)與組織工程克隆技術(shù)與組織工程克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)組織工程組織工程(tissue engineering)(tissue engineering)是近年來發(fā)展起來的是近年來發(fā)展起來的一門新興交叉學(xué)科，它是應(yīng)用工程學(xué)和生命科學(xué)的原理一門新興交叉學(xué)科，它是應(yīng)用工程學(xué)和生命科學(xué)的原理和方法，創(chuàng)建組織和器官或替代物，植入體內(nèi)，修復(fù)組和方法，創(chuàng)建組織和器官或替代物，植入體內(nèi)，修復(fù)組織缺損，替代損傷的組織、器官，達到提高生活、生存織缺損，替代損傷的組織、器官，達到提高生活、生存質(zhì)量，延長生命的目的。質(zhì)量，延長生

20、命的目的。利用治療性克隆技術(shù)獲得組織工程所需的胚胎干細胞利用治療性克隆技術(shù)獲得組織工程所需的胚胎干細胞可用于培育各種組織、器官進行移植；也可接種于由生可用于培育各種組織、器官進行移植；也可接種于由生物可吸收材料構(gòu)成的三維結(jié)構(gòu)中，經(jīng)過適當培養(yǎng)，形成物可吸收材料構(gòu)成的三維結(jié)構(gòu)中，經(jīng)過適當培養(yǎng)，形成具有一定組織結(jié)構(gòu)的移植物，移植于受損傷部位，細胞具有一定組織結(jié)構(gòu)的移植物，移植于受損傷部位，細胞繼續(xù)分裂、分化、重組成新組織，避免排斥反應(yīng)。繼續(xù)分裂、分化、重組成新組織，避免排斥反應(yīng)。人耳鼠人耳鼠”是先使用可降解材是先使用可降解材料經(jīng)過耳形壓模，聚乳酸（料經(jīng)過耳形壓模，聚乳酸（PLAPLA）溶液浸泡使其強

21、度增強）溶液浸泡使其強度增強，制成耳廓支架材料，然后，制成耳廓支架材料，然后讓細胞在支架上繁殖生長。讓細胞在支架上繁殖生長。經(jīng)過經(jīng)過1-21-2周體外培養(yǎng)，在裸鼠周體外培養(yǎng)，在裸鼠背上割開一個口子，植入背上割開一個口子，植入“人耳人耳”。隨后，。隨后，“人耳人耳”的的支架會自己降解消失，支架會自己降解消失，“長長”在老鼠的背上。在老鼠的背上。(3)(3)與基因療法結(jié)合治療遺傳疾病與基因療法結(jié)合治療遺傳疾病克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)3.2 動物克隆技術(shù)與遺傳育種動物克隆技術(shù)與遺傳育種克隆技術(shù)是一種無性繁殖技術(shù)，也稱為生物復(fù)制技術(shù)克隆技術(shù)是一種無性繁殖技術(shù)，也稱為生物復(fù)制技術(shù)，體細胞克隆技術(shù)的發(fā)明和發(fā)展

22、極大地擴大了核供體，體細胞克隆技術(shù)的發(fā)明和發(fā)展極大地擴大了核供體的來源，利用其優(yōu)勢，復(fù)制實驗動物成為一個主要用的來源，利用其優(yōu)勢，復(fù)制實驗動物成為一個主要用途。途。 擴大優(yōu)良種群：提高育種效率；加快育種進展擴大優(yōu)良種群：提高育種效率；加快育種進展 保存基因資源保存基因資源 拯救瀕危動物拯救瀕危動物 滿足生物醫(yī)學(xué)實驗對實驗動物的特殊要求滿足生物醫(yī)學(xué)實驗對實驗動物的特殊要求 3.3克隆技術(shù)存在的問題克隆技術(shù)存在的問題克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)體細胞克隆技術(shù)的研究應(yīng)用是多方面的，但體細胞克隆技術(shù)的研究應(yīng)用是多方面的，但克隆技術(shù)就如同原子能技術(shù)一樣，是一把既克隆技術(shù)就如同原子能技術(shù)一樣，是一把既能造福人類，

23、也可禍害無窮的能造福人類，也可禍害無窮的“雙刃劍雙刃劍”。 克隆技術(shù)存在的問題克隆技術(shù)存在的問題1 1理論和克隆技術(shù)不完善問題理論和克隆技術(shù)不完善問題 (1)(1)目前克隆技術(shù)無法保證安全性目前克隆技術(shù)無法保證安全性 (2)(2)體細胞克隆動物的成功率很低體細胞克隆動物的成功率很低 (3)(3)克隆需要大量卵細胞克隆需要大量卵細胞 (4)(4)影響生物遺傳多樣性影響生物遺傳多樣性 (5)(5)克隆人改變了人類自然生殖方式克隆人改變了人類自然生殖方式2 2克隆與倫理道德和法律克隆與倫理道德和法律 1 1理論和克隆技術(shù)不完善問題理論和克隆技術(shù)不完善問題 (1)目前克隆技術(shù)無法保證安全性目前克隆技術(shù)

24、無法保證安全性由于克隆、特別是體細胞克隆是利用體細胞作由于克隆、特別是體細胞克隆是利用體細胞作為核供體，易發(fā)生突變，體細胞為核供體，易發(fā)生突變，體細胞“重新編程重新編程”也易發(fā)生程序差錯和缺失，從而出現(xiàn)克隆生物也易發(fā)生程序差錯和缺失，從而出現(xiàn)克隆生物個體的流產(chǎn)和死胎、早產(chǎn)、各種各樣的先天性個體的流產(chǎn)和死胎、早產(chǎn)、各種各樣的先天性疾病，如畸形、免疫性疾病、早衰等。疾病，如畸形、免疫性疾病、早衰等?？寺游锩寺游锩∫淮蠖眩翰∫淮蠖眩嚎寺∈罂寺∈蟆鞍l(fā)發(fā)福福”我國成功繁我國成功繁殖克隆兔體殖克隆兔體形要比普通形要比普通兔大許多。兔大許多。2003年年2月月14日，研究人員對多莉?qū)嵤┤?，研究人員對

25、多莉?qū)嵤┝肆恕鞍矘匪腊矘匪馈?。早衰？早衰?2003.2.14日蘇格蘭向外界宣布：多莉因早衰并患有日蘇格蘭向外界宣布：多莉因早衰并患有肺炎，被迫實施了安樂死。由于早衰問題，人們懷肺炎，被迫實施了安樂死。由于早衰問題，人們懷疑疑“多莉是穿著羔羊服裝的老羊多莉是穿著羔羊服裝的老羊” 。 (2) (2)體細胞克隆動物的成功率很低體細胞克隆動物的成功率很低體細胞克隆動物的成功率僅體細胞克隆動物的成功率僅1/2771/277。主要表現(xiàn)在流產(chǎn)。主要表現(xiàn)在流產(chǎn)率高，發(fā)育異常，出生后對環(huán)境適應(yīng)性差等。率高，發(fā)育異常，出生后對環(huán)境適應(yīng)性差等。O目前對克隆動物各個環(huán)節(jié)缺乏清楚的理論認識，對目前對克隆動物各個環(huán)節(jié)缺

26、乏清楚的理論認識，對供體基因組的去分化和重新編程的機制不清楚供體基因組的去分化和重新編程的機制不清楚O克隆的每一個操作環(huán)節(jié)上的失誤克隆的每一個操作環(huán)節(jié)上的失誤O供體細胞核的分化程度供體細胞核的分化程度 4342771329總成功率：總成功率：0.23%0.23%克隆效率克隆效率低低 造成克隆效率低造成克隆效率低, 克隆動物異常等問題的可能原因如下：克隆動物異常等問題的可能原因如下： A. 核移植前胚胎損傷核移植前胚胎損傷 B. 體外培養(yǎng)的時間過長以及培養(yǎng)液成份體外培養(yǎng)的時間過長以及培養(yǎng)液成份 C. 體細胞核在卵質(zhì)中去分化和再程序化不足體細胞核在卵質(zhì)中去分化和再程序化不足 D.一些重要基因的異常

27、表達一些重要基因的異常表達 （研究發(fā)現(xiàn)一些重要的發(fā)育相關(guān)基因如（研究發(fā)現(xiàn)一些重要的發(fā)育相關(guān)基因如IL6，F(xiàn)GF4，F(xiàn)GFr2和和Oct4在克隆桑葚胚和囊胚中表達異常。在牛的在克隆桑葚胚和囊胚中表達異常。在牛的克隆桑葚胚中發(fā)現(xiàn)克隆桑葚胚中發(fā)現(xiàn)Mash2表達過量，表達過量，DNMT表達不足，表達不足，Hsp70表達消失）表達消失） (3) (3)克隆需要大量卵細胞克隆需要大量卵細胞克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)按一般克隆哺乳動物的經(jīng)驗，要獲得一個克隆按一般克隆哺乳動物的經(jīng)驗，要獲得一個克隆胚胎至少需要胚胎至少需要280280個卵子，而且還不能保證正個卵子，而且還不能保證正常發(fā)育。常發(fā)育。用動物卵代替，可能誘

28、發(fā)新的疾病的廣泛傳播用動物卵代替，可能誘發(fā)新的疾病的廣泛傳播，而且涉及到一系列倫理問題。，而且涉及到一系列倫理問題。(4)(4)影響生物遺傳多樣性影響生物遺傳多樣性克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)人類基因的多態(tài)性是人類生存和發(fā)展的基礎(chǔ)，是人人類基因的多態(tài)性是人類生存和發(fā)展的基礎(chǔ)，是人類在地球上經(jīng)過類在地球上經(jīng)過3535億年進化的產(chǎn)物。每個個體的基億年進化的產(chǎn)物。每個個體的基因組具有高度的整體性、對自然環(huán)境的適應(yīng)性和協(xié)因組具有高度的整體性、對自然環(huán)境的適應(yīng)性和協(xié)調(diào)性?？寺∪讼喈斢趶?fù)制某一個體，必然破壞人類調(diào)性。克隆人相當于復(fù)制某一個體，必然破壞人類基因組的多樣性?；蚪M的多樣性。 (5) (5)克隆人改變了

29、人類自然生殖方式克隆人改變了人類自然生殖方式克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)體細胞克隆是一種無性繁殖方式，是一種低級的生殖體細胞克隆是一種無性繁殖方式，是一種低級的生殖方式。這是人類自然生殖方式的倒退。方式。這是人類自然生殖方式的倒退。體細胞克隆不像輔助生育技術(shù)那樣，通過人工促進精體細胞克隆不像輔助生育技術(shù)那樣，通過人工促進精子或卵細胞的成熟或精、卵有效結(jié)合來幫助人類的有子或卵細胞的成熟或精、卵有效結(jié)合來幫助人類的有性生殖過程，而是通過體細胞核移植這種無性方式復(fù)性生殖過程，而是通過體細胞核移植這種無性方式復(fù)制一個基因組結(jié)構(gòu)與現(xiàn)存的或已去世的個體完全一樣制一個基因組結(jié)構(gòu)與現(xiàn)存的或已去世的個體完全一樣的人。的

30、人。2克隆與倫理道德和法律克隆與倫理道德和法律克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)O 克隆人影響構(gòu)成社會的單元克隆人影響構(gòu)成社會的單元家庭家庭O 克隆人是對人的尊嚴的踐踏，克隆嬰兒像克隆人是對人的尊嚴的踐踏，克隆嬰兒像產(chǎn)品一樣在實驗室里被制造和處理、生命產(chǎn)品一樣在實驗室里被制造和處理、生命的權(quán)利和尊嚴被人為操縱的權(quán)利和尊嚴被人為操縱O 如何平衡要求克隆的當事人的生育權(quán)和他如何平衡要求克隆的當事人的生育權(quán)和他對后裔、對社會倫理責任的問題對后裔、對社會倫理責任的問題克隆與醫(yī)學(xué)克隆與醫(yī)學(xué)O 治療性克隆的三條原則治療性克隆的三條原則v 取得的材料，必須是自愿的，不能是騙取得的材料，必須是自愿的，不能是騙來的或是買來的

31、，提供者有知情權(quán)來的或是買來的，提供者有知情權(quán)v 胚胎細胞保留時間不能超過胚胎細胞保留時間不能超過14天，超過天，超過則有克隆人之嫌則有克隆人之嫌v 不能將克隆的胚胎細胞植入人體子宮不能將克隆的胚胎細胞植入人體子宮禁止任何形式克隆人禁止任何形式克隆人 2005年2月18日，第五十九屆聯(lián)合國大會法律委員會以71票贊成、35票反對、43票棄權(quán)的表決結(jié)果、以決議形式通過了一項政治宣言，要求各國禁止有違人類尊嚴的任何形式的克隆人。當時，中國同比利時、英國、瑞典、日本和新加坡等國投了反對票。中國投反對票并不意味著支持克隆人，而是反對禁止治療性克隆研究。換言之，即反對用胚胎克隆一個完整的人，而支持胚胎研究

32、并從胚胎中提取干細胞用以治療多種疾病，同時，中國還承諾要加強對治療性克隆研究的管理和控制，確保人尊嚴和國際公認的生命倫理原則不受損害。三、性染色質(zhì)性染色質(zhì)（性染色質(zhì)（sex chromatin ） 概念：指間期核中性染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來的一概念：指間期核中性染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來的一種特殊結(jié)構(gòu)。分為種特殊結(jié)構(gòu)。分為X染色質(zhì)和染色質(zhì)和Y染色質(zhì)。染色質(zhì)。1、 X染色質(zhì)：染色質(zhì)：雌性哺乳動物間期細胞核內(nèi)存在的與性別及雌性哺乳動物間期細胞核內(nèi)存在的與性別及性染色體數(shù)目有關(guān)的染色質(zhì)小體。又稱之為性染色質(zhì)體性染色體數(shù)目有關(guān)的染色質(zhì)小體。又稱之為性染色質(zhì)體（ sex chromatin bod

33、y）或巴氏小體）或巴氏小體(Barr body)。為什么正常女性的間期細胞核中有巴氏小體，而男性沒有？為什么正常女性的間期細胞核中有巴氏小體，而男性沒有？這種差異的原因？這種差異的原因？為什么正常女性兩條為什么正常女性兩條X染色體的基因產(chǎn)物并不比男性多？染色體的基因產(chǎn)物并不比男性多？為什么某一為什么某一X-連鎖的突變基因純合女性的病情并不比男性連鎖的突變基因純合女性的病情并不比男性嚴重？嚴重？ LyonLyon假說：假說：19611961年，年，Marry LyonMarry Lyon提出了提出了X X染色質(zhì)失活的假染色質(zhì)失活的假說，解釋了上述問題。說，解釋了上述問題。LyonLyon假說的要點：假說的要點