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文檔簡介

1、實驗二實驗二 植物組織含水量的測定植物組織含水量的測定 - - 水分測定儀法水分測定儀法實驗三實驗三 植物組織水勢的測定植物組織水勢的測定 - - 小液流法小液流法 含水量含水量是表示植物組織水分狀況的常用指標。是表示植物組織水分狀況的常用指標。對于正常生長的組織,含水量的多少直接影響植對于正常生長的組織,含水量的多少直接影響植物的生長狀況;對于水果、蔬菜,含水量的多少物的生長狀況;對于水果、蔬菜,含水量的多少對品質(zhì)有著很大的影響;對于貯藏中的種子,含對品質(zhì)有著很大的影響;對于貯藏中的種子,含水量的多少對于能否安全貯藏起著決定性的作用。水量的多少對于能否安全貯藏起著決定性的作用。 植物組織含水

2、量的測定在植物生理學研究中植物組織含水量的測定在植物生理學研究中具有重要的意義。具有重要的意義。實驗二實驗二 植物組織含水量的測定植物組織含水量的測定 -水分測定儀法水分測定儀法一、實驗目的一、實驗目的n了解含水量的表示方法了解含水量的表示方法n了解了解絕對含水量絕對含水量和和相對含水量相對含水量的區(qū)別的區(qū)別n掌握掌握HG63HG63水分測定儀的使用水分測定儀的使用二、原理二、原理n表示組織含水量的方法有兩種:一是以干重為基數(shù)表示;二是以鮮重為基數(shù)表示。從而分為干重法和鮮重法: 植物組織的含水量常用水分含量占鮮重或干重的百分比來表示。在研究水分生理時,相對含水量與水分飽和虧也是常用的水分生理指

3、標。 測定植物組織的鮮重(FW)、干重(DW)、飽和鮮重(SFW)后,用下式計算以上幾個生理指標:組織含水量組織含水量( (占鮮重占鮮重%) =%) = (FW(FW-DW/FW)DW/FW)100 100 組織含水量組織含水量( (占干重占干重%) = (FW%) = (FW-DW/DWDW/DW)100100組織相對含水量組織相對含水量(RWC%) = (FW(RWC%) = (FW-DW)/(SFWDW)/(SFW-DW)DW)100100組織水分飽和虧組織水分飽和虧(WSD%) = (1-RWC)RWC)100100三、材料、儀器與用具三、材料、儀器與用具1、材料:大葉紫薇(Lager

4、stroemia speciosa L.) (單數(shù)組)和海芋(Alocasia macrorrhizos L.) (雙數(shù)組)。2、儀器與用具:HG63鹵素水分測定儀、剪刀。頂頂面面觀觀HG63HG63鹵素水分測定儀鹵素水分測定儀l 主要由一臺鹵素加熱單元和一臺精密天平兩個儀器組成。l 儀器根據(jù)熱解重量原理:測定開始,水分測定儀測定樣品的重量,然后,樣品由內(nèi)置的鹵素加熱單元和水分蒸發(fā)器快速加熱。在干燥過程中,儀器連續(xù)測定樣品重量并顯示失去的水分。干燥結(jié)束時,顯示水分含量和干燥物質(zhì)含量作為最終結(jié)果。 HG63 HG63鹵素水分測定儀的特點鹵素水分測定儀的特點1、操作簡便、測量準確。2、采用鍍金輻射

5、體,確保樣品加熱的均勻性。3、兼顧樣品稱重和干燥功能,在干燥過程中,水分儀持續(xù)測量并即時顯示樣品丟失的水分含量%,干燥程序完成后,最終測定的水分含量值被鎖定顯示。 HG63 HG63鹵素水分測定儀的特點鹵素水分測定儀的特點4 4、與國標烘箱加熱法相比、與國標烘箱加熱法相比,鹵素加熱可以在高溫鹵素加熱可以在高溫下將樣品均勻地快速干燥,樣品表面不易受損,下將樣品均勻地快速干燥,樣品表面不易受損,其檢測結(jié)果與國標烘箱法具有良好的一致性其檢測結(jié)果與國標烘箱法具有良好的一致性, ,具具有可替代性有可替代性, ,且檢測效率遠遠高于烘箱法。且檢測效率遠遠高于烘箱法。一般一般樣品只需幾分鐘即可完成測定。樣品只

6、需幾分鐘即可完成測定。 HG63HG63鹵素水分測定儀技術(shù)參數(shù)鹵素水分測定儀技術(shù)參數(shù)n測量值測量值 可讀性水分含量可讀性水分含量 0.01 % 重復性重復性(sd) 2 g樣品樣品 0.05 % 重復性重復性(sd) 10 g樣品樣品 0.01 %n測定結(jié)果評估測定結(jié)果評估 水分和干重含量水分和干重含量% 質(zhì)量質(zhì)量 g ATRO Dry, ATRO Wet n天平天平 最大樣品量最大樣品量 61 g 最小樣品量最小樣品量 0.1 g 可讀性可讀性 1 mgn干燥單元干燥單元 干燥技術(shù)干燥技術(shù) 環(huán)形鹵素燈環(huán)形鹵素燈 溫度范圍溫度范圍 40200C 溫度調(diào)節(jié)增量溫度調(diào)節(jié)增量 1C 升溫程序升溫程序

7、 標準、快速標準、快速n關(guān)機模式關(guān)機模式 時間控制時間控制(分鐘分鐘)+手動手動 0.5-480 自動關(guān)機自動關(guān)機(5 級級) 自由關(guān)機模式自由關(guān)機模式 n用戶支持用戶支持 方法測試功能方法測試功能(Test) 自動進樣腔自動進樣腔 測定方法儲存測定方法儲存 10 測定方法命名測定方法命名(數(shù)字數(shù)字) 每個樣品注釋行每個樣品注釋行 1 自由因子自由因子 LCD背亮液晶顯示屏背亮液晶顯示屏 內(nèi)置打印機內(nèi)置打印機HA-P43 HG63P標配標配n質(zhì)量管理質(zhì)量管理 天平校驗天平校驗 50 g 加熱單元校驗加熱單元校驗 100/160C 稱量指導稱量指導 主動主動/被動被動 參數(shù)修改保護參數(shù)修改保護

8、符合符合GLP / GMP規(guī)范的打印輸出規(guī)范的打印輸出 該關(guān)機模式依據(jù)單位時間失重,只要在指定時間該關(guān)機模式依據(jù)單位時間失重,只要在指定時間內(nèi)平均失重小于預設置,儀器就認為干燥過程完成,并內(nèi)平均失重小于預設置,儀器就認為干燥過程完成,并自動終止測量過程。在干燥過程中所顯示的時間表示測自動終止測量過程。在干燥過程中所顯示的時間表示測量過程經(jīng)歷時間。量過程經(jīng)歷時間。自動關(guān)機自動關(guān)機(5(5級級) ) 測量結(jié)果可靠性的相關(guān)因素測量結(jié)果可靠性的相關(guān)因素1. 1. 樣品的制備樣品的制備 樣品制備決定了測量速度和結(jié)果的準確性。請注意樣品制備的基本規(guī)則:請注意樣品制備的基本規(guī)則:l 所選擇樣品應盡可能小(0

9、.10.5 g).l 樣品量大需要更多干燥時間,因此而延長測量過程。若樣品量少,則測量結(jié)果不具代表性。l 注意樣品的取量和均勻。樣品越不均勻,樣品量要求則越大。l 樣品要均勻分布于樣品盤上,盡量增加樣品表面積,便于熱量吸收。2.2.主要測量參數(shù)的正確選擇主要測量參數(shù)的正確選擇l 干燥溫度-根據(jù)樣品正確選擇干燥程序后( 或 ),設置好溫度。l 關(guān)機模式-可確定樣品結(jié)束干燥的時間。l 干燥時間。注意:注意:儀器上的平衡珠是否處儀器上的平衡珠是否處于水平狀態(tài),稱盤是否放平。于水平狀態(tài),稱盤是否放平。1 1、開機按 ,儀器自檢 選擇與設置“干燥程序”(快速 ,75) 選擇“關(guān)機模式”(出廠設置 ,適用

10、于大多數(shù)樣品) 選擇“結(jié)果顯示類型”(樣品水分含量以占鮮重%顯示 ) 去皮重按 。2、植物葉片剪碎,注意大小盡量一致(2 mm 5 mm),取樣均勻,快速。四、操作步驟四、操作步驟3 3、按“打開/關(guān)閉自動加樣室,按鍵 ,加樣品0.10.5 g取出樣品盤,將樣品擺勻 再按一次 鍵關(guān)閉。4、按start鍵,儀器開始工作。待儀器自動停止工作后,讀取測量結(jié)果。準備稱準備稱量狀態(tài)量狀態(tài)準備去準備去皮狀態(tài)皮狀態(tài)準備啟準備啟動狀態(tài)動狀態(tài)干燥與測干燥與測量狀態(tài)量狀態(tài)l 本次實驗要有平行!本次實驗要有平行!l 結(jié)果要算出結(jié)果要算出標準差標準差。 含水量(%)= 78.9 0.568注意:注意:一一. .實驗目

11、的:實驗目的:掌握植物細胞水勢概念及計算公式,掌握植物細胞水勢概念及計算公式,了解小液流法測定植物組織水勢的方法。了解小液流法測定植物組織水勢的方法。實驗三植物組織水勢的測定實驗三植物組織水勢的測定(小液流法)(小液流法)德天瀑布黃果樹瀑布二二. .實驗原理:實驗原理: 植物細胞、組織之間以及植物體和環(huán)境間的水植物細胞、組織之間以及植物體和環(huán)境間的水分間移動方向都由水勢差決定。分間移動方向都由水勢差決定。 當植物細胞或組織放在某一溶液中時,如蔗糖當植物細胞或組織放在某一溶液中時,如蔗糖溶液。溶液。 w = w = + + + + 水勢水勢 = = 滲透勢滲透勢 + + 壓力勢壓力勢 + + 重

12、力勢重力勢 水分子的移動方向?水分子的移動方向?w w1. 1. w w ,則植物組織失水,溶液濃度下降,則植物組織失水,溶液濃度下降 ,液滴上升,液滴上升 。2. 2. w w ,則植物組織吸水,溶液濃度增加,則植物組織吸水,溶液濃度增加 ,液滴下降,液滴下降 。3. 3. w =w =,則二者水分保持動態(tài)平衡,液滴不動。,則二者水分保持動態(tài)平衡,液滴不動。 利用溶液的濃度不同其比重也不同的原理來測定試驗前后溶利用溶液的濃度不同其比重也不同的原理來測定試驗前后溶液濃度的變化,然后根據(jù)公式計算滲透勢。液濃度的變化,然后根據(jù)公式計算滲透勢。w ww wH2OH2O0 0.05 0.10 0.15

13、 0.20 0.25 蔗糖溶液蔗糖溶液 (mol/Lmol/L,試管中),試管中) 浸提液滴浸提液滴 (含甲烯藍)三、材料與方法1、實驗材料:實驗材料: 大葉紫薇(Lagerstroemia speciosa L.)(單數(shù)組), 海芋(Alocasia macrorrhizos L.)(雙數(shù)組)。2 2、實驗步驟:、實驗步驟: 1)取系列不同濃度的蔗糖溶液:0、0.05、0.1、0.15、0.20 mol/L 各4 ml,放入刻度試管中,分別加入15片葉圓片至試管中。 取葉圓片時避開葉脈取葉圓片時避開葉脈3)另取6支試管編號,按順序(從低濃度到高濃度)放入系列濃度蔗糖溶液5 ml。4)用1 mL注射器分別吸取各試管中著色的液體少許,伸入對應試管蔗糖溶液的中部,緩慢放出一滴藍色試驗溶液,抽出針頭;然后觀察和拍照觀察和拍照小液滴移動的方向。2)放止30 min以上(偶爾搖晃試管),加入1小滴(半滴)亞甲基藍染料染色。 記錄小液滴不移動的試管蔗糖溶液的濃度,并將結(jié)果入公式計算: -w =RTiC 4 ml5 ml葉圓片放置30 min以上偶爾搖動試管滴加1滴染料(亞甲基藍)取1滴著色液滴加到溶液中部蔗糖溶液(mol/L)0.7 cm打孔器15片 避開葉脈避開葉脈1.準確配制蔗糖梯度溶液,正確使用移液管。2.葉片大小和厚薄均一,每管葉數(shù)相同。3.實驗中多次搖動試管,

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