動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)畜牧、獸醫(yī)專業(yè)用崔 燕 主編甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)獸醫(yī)系動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)主 編崔 燕 編 者崔燕 何俊峰 王正波 課程網(wǎng)址：前言動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)是動(dòng)物醫(yī)學(xué)、動(dòng)物科學(xué)等專業(yè)的一門必修的專業(yè)基礎(chǔ)課程。動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)課程也是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的形態(tài)學(xué)課程。實(shí)驗(yàn)課是一個(gè)重要的教學(xué)環(huán)節(jié)，它可幫助學(xué)生鞏固和加深課堂所學(xué)的理論知識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用基本知識(shí)和技能，觀察動(dòng)物體微觀世界的能力，自己動(dòng)手分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力。為了使這些專業(yè)的學(xué)生在實(shí)習(xí)和自學(xué)中能更好的學(xué)習(xí)、掌握組織學(xué)與胚胎學(xué)的基本理論知識(shí)和鑒別組織結(jié)構(gòu)的方法，得到必要的技能訓(xùn)練，我們基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)解剖組織學(xué)教研

2、室在總結(jié)以往的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，編寫了這本適合于本科生和研究生所使用的實(shí)驗(yàn)課本。本書圖文并茂，所有插圖均為照片，形象逼真，其中部分是作者在教學(xué)、科研中積累的組織學(xué)切片通過(guò)數(shù)碼攝像技術(shù)制作而成的原創(chuàng)作品，部分來(lái)源與參考資料，掃描收集了了大量的根據(jù)新修訂的實(shí)驗(yàn)大綱，本書共設(shè)計(jì)了17個(gè)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)都附有作業(yè)，以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)效果。每個(gè)實(shí)驗(yàn)所附的思考題可以活躍學(xué)生思維。在實(shí)驗(yàn)的編排上，實(shí)驗(yàn)一主要介紹了光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和使用方法；實(shí)驗(yàn)二到實(shí)驗(yàn)十三為組織學(xué)切片實(shí)習(xí)部分；實(shí)驗(yàn)十五為胚胎學(xué)實(shí)習(xí)部分；。除了要求學(xué)生系統(tǒng)的觀察組織切片外，根據(jù)新修訂的實(shí)驗(yàn)大綱，在實(shí)驗(yàn)課的設(shè)計(jì)上，新開(kāi)設(shè)了綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)驗(yàn)四 血

3、液、實(shí)驗(yàn)十五石蠟切片制作）和部分高水平的設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)（顯微攝影、免疫組織化學(xué)方法），以加強(qiáng)學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手能力。本書中的圖片除了實(shí)驗(yàn)中要求學(xué)生觀察的圖片外，還有相當(dāng)多的為示教切片，以擴(kuò)展學(xué)生的知識(shí)層面。本書附錄部分的彩圖與正文中的插圖一一對(duì)應(yīng)，不但便于學(xué)生查找和使用，而且便于學(xué)生使用顯微鏡觀察組織學(xué)切片時(shí)對(duì)照插圖進(jìn)行自學(xué)；附錄部分的作業(yè)以表格形式出現(xiàn)，學(xué)生即可以作為實(shí)驗(yàn)前的預(yù)習(xí)、又作為實(shí)驗(yàn)后的復(fù)習(xí)總結(jié)。 本書雖然經(jīng)過(guò)了大量時(shí)間進(jìn)行編寫和修改，但仍然可能有不當(dāng)和錯(cuò)誤之處，望各位老師和同學(xué)在教學(xué)實(shí)踐過(guò)程中給予批評(píng)指正，以備今后修編時(shí)參考。 崔 燕 2004年6月目 錄緒論.1實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的使用及細(xì)胞

4、的結(jié)構(gòu).2實(shí)驗(yàn)二 上皮組織.8實(shí)驗(yàn)三 結(jié)締組織.11實(shí)驗(yàn)四 血液. .15實(shí)驗(yàn)五 肌組織.18實(shí)驗(yàn)六 神經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng).21實(shí)驗(yàn)七 循環(huán)系統(tǒng).25實(shí)驗(yàn)八 免疫系統(tǒng).28實(shí)驗(yàn)九 消化系統(tǒng).32實(shí)驗(yàn)十 呼吸系統(tǒng).39實(shí)驗(yàn)十一 泌尿系統(tǒng).41實(shí)驗(yàn)十二 生殖系統(tǒng).44實(shí)驗(yàn)十三 被皮系統(tǒng).48*實(shí)驗(yàn)十四 石蠟切片的制作.52實(shí)驗(yàn)十五 哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育及胎膜、胎盤的結(jié)構(gòu).55*實(shí)驗(yàn)十六 顯微攝影方法與步驟 .58*為開(kāi)放性選做實(shí)驗(yàn)- 79 -緒 論 （一） 實(shí)驗(yàn)課的目的 動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)是畜牧獸醫(yī)專業(yè)的一門必修專業(yè)基礎(chǔ)課。組織學(xué)是在學(xué)習(xí)生物學(xué)和解剖學(xué)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步借助顯微鏡（包括光學(xué)顯微鏡和電子

5、顯微鏡）研究動(dòng)物細(xì)胞、組織和器宮等微細(xì)結(jié)構(gòu)及功能的科學(xué)；胚胎學(xué)則是研究個(gè)體發(fā)生，發(fā)育的科學(xué)。本課程教學(xué)過(guò)程包括理論課和實(shí)驗(yàn)課兩部分，實(shí)驗(yàn)課是理論課的繼續(xù)和深化，其目的不僅在于驗(yàn)證理論知識(shí)，使學(xué)生加深對(duì)基本理論的理解和記憶，正確掌握使用光學(xué)顯微鏡和制作切片等基本方法，更重要的是引導(dǎo)學(xué)生應(yīng)用這些基本知識(shí)和技能、觀察和復(fù)習(xí)切片標(biāo)本，從而達(dá)到正確認(rèn)識(shí)不同動(dòng)物各種器官、組織的結(jié)構(gòu)和不同染色方法所制成的切片，從而培養(yǎng)和提高學(xué)生學(xué)習(xí)的自覺(jué)性和深人鉆研客觀事物的能力。研究和辨認(rèn)標(biāo)本時(shí)，要配合必要的繪圖和記錄，借以培養(yǎng)學(xué)生掌握科學(xué)的記錄方法和分析、綜合問(wèn)題的能力。 （二） 實(shí)驗(yàn)課的要求 為了達(dá)到上述目的，實(shí)驗(yàn)課

6、要求做到下列項(xiàng)目： l.實(shí)驗(yàn)前要求學(xué)生認(rèn)真復(fù)習(xí)有關(guān)理論課內(nèi)容和預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書，明確本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?nèi)容和方法，以培養(yǎng)獨(dú)立操作的能力。 2.顯微鏡是組織學(xué)實(shí)驗(yàn)課的主要儀器，是培養(yǎng)基本技能的重要手段，因此要求每個(gè)學(xué)生必須熟練掌握顯微鏡的使用方法。顯微鏡是貴重的光學(xué)儀器，使用時(shí)務(wù)必嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，切勿隨意拆卸或暴力轉(zhuǎn)動(dòng)，做到輕取輕放，用畢放回原處。 3.對(duì)切片要嚴(yán)加愛(ài)護(hù)，觀察切片前一定要區(qū)別其正反面，蓋玻片朝上為正面，切忌蓋玻片朝下。必須按肉眼低倍鏡高倍鏡的順序進(jìn)行觀察，在低倍鏡下先觀察整體結(jié)構(gòu)，然后轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察局部微細(xì)結(jié)構(gòu)，切忌集中于切片某一部位，未加詳細(xì)觀察與思考就轉(zhuǎn)入高倍鏡。一定要做到

7、既認(rèn)真仔細(xì)，又實(shí)事求是地觀察每張切片。觀察標(biāo)本時(shí)要配合必要的繪圖和記錄，增強(qiáng)理解和記憶，但必須在全面觀察并掌握主要結(jié)構(gòu)和弄清主要結(jié)構(gòu)與次要結(jié)構(gòu)關(guān)系的基礎(chǔ)上，選擇器官或組織中比較典型的部分進(jìn)行繪圖，切忌盲目臨摹掛圖或書本的插圖，要按時(shí)完成每次的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 4.繪圖方法：繪制組織學(xué)圖只要求用點(diǎn)和線繪制半模式圖。用線條繪細(xì)胞膜、核膜和纖維等連續(xù)性結(jié)構(gòu)，而細(xì)胞質(zhì)則用點(diǎn)來(lái)表示。線條要粗細(xì)均勻，點(diǎn)要大小一致，圓、細(xì)、密而不重疊。繪圖要求真實(shí)反映顯微鏡下的結(jié)構(gòu)和比例，繪圖要用橫線指明結(jié)構(gòu)，并注字說(shuō)明，一般要求在繪圖紙的左邊繪圖，右邊注字。要求字體正楷，字跡清楚，無(wú)錯(cuò)別字。在圖下方要注明標(biāo)本（圖）名稱，染色方

8、法和放大倍數(shù)等。 5.在學(xué)習(xí)本課程期間，要求學(xué)生充分利用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書上的插圖、實(shí)驗(yàn)室的掛圖，實(shí)物標(biāo)本、模型、幻燈片和圖片等直觀教具，反復(fù)比較和認(rèn)真思考，做到理論和實(shí)際、立體和切面、局部與整體、結(jié)構(gòu)與功能、光鏡結(jié)構(gòu)與電鏡結(jié)構(gòu)等關(guān)系密切結(jié)合，達(dá)到融會(huì)貫通，全面理解的目的。6.為檢查學(xué)生獲得知識(shí)是否鞏固，除實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行提問(wèn)外，還可利用切片標(biāo)本進(jìn)行經(jīng)常性的辨認(rèn)或小測(cè)驗(yàn)，從而了解理論課或?qū)嶒?yàn)課獲得知識(shí)是否鞏固，并驗(yàn)證基本技能掌握的程度以及獨(dú)立工作能力等。實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的使用及細(xì)胞的結(jié)構(gòu)一、目的與要求1.了解生物顯微鏡的構(gòu)造和使用。2.掌握細(xì)胞在光鏡下的基本結(jié)構(gòu)。3.認(rèn)識(shí)動(dòng)物不同組織的細(xì)胞，了解由于功能各異，

9、導(dǎo)致細(xì)胞的多樣性。4.了解細(xì)胞的主要增殖方式有絲分裂過(guò)程中各期的形態(tài)學(xué)特征。二、材料LEICA生物顯微鏡、卵巢切片、脊神經(jīng)結(jié)切片、馬蛔蟲(chóng)卵巢切片。三、內(nèi)容和方法（一）生物顯微鏡的構(gòu)造及使用1. LEICA（徠卡）EME型生物顯微鏡的構(gòu)造包括機(jī)械部分和光學(xué)部分。機(jī)械部分（1）鏡座 一般呈蹄鐵狀或方形，有穩(wěn)固和支持鏡體的作用。（2）鏡臂 是鏡座與鏡筒的連接部分，呈弓狀，便于手握，有的在基部具一關(guān)節(jié)螺旋，可使鏡簡(jiǎn)傾斜，便于觀察。（3）載物臺(tái)（鏡臺(tái)） 方形，上有兩個(gè)金屬片夾，供固定標(biāo)本用，或安裝標(biāo)本推進(jìn)器。載物臺(tái)中央有一通光孔。（4）標(biāo)本推進(jìn)器 安放在載物臺(tái)上，除固定切片外，還通過(guò)轉(zhuǎn)軸連接接兩個(gè)調(diào)節(jié)螺

10、旋，這兩個(gè)調(diào)節(jié)螺旋可前、后、左、右移動(dòng)切片。在推進(jìn)器的縱、橫坐標(biāo)上標(biāo)有刻度，以便確定某一結(jié)構(gòu)的方位。（5）物鏡轉(zhuǎn)換器 呈圓盤狀，上有34個(gè)物鏡螺旋口，供物鏡按放大倍數(shù)高低順序嵌入，以便把物鏡根據(jù)觀察需要推到正確的使用位置上。（6）調(diào)節(jié)螺旋 分粗調(diào)節(jié)和細(xì)調(diào)節(jié)兩個(gè)螺旋。粗調(diào)節(jié)螺旋用于低倍鏡調(diào)焦；細(xì)凋節(jié)螺旋用于高倍鏡調(diào)焦。兩螺旋結(jié)合使用，使視野清晰。（7）眼間距調(diào)整 使兩目鏡與兩眼間距離一致，不同的人兩眼間距離不同，應(yīng)根據(jù)自己的情況加以調(diào)節(jié)。（8）屈光度調(diào)節(jié) 光學(xué)部分（1）物鏡 作第一次放大標(biāo)本用。安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上，通常有34個(gè)接物鏡，分別是4×、l0×、40× （5

11、0×）和l00×，在每個(gè)接物鏡的鏡管上分別標(biāo)有醒目的紅色、黃色、藍(lán)色和白色線圈。4×和l0×稱低倍鏡，40 （50） ×稱高倍鏡，l00×是油浸鏡，每個(gè)接物鏡的鏡管上通常標(biāo)有主要性能參數(shù)，如40/0.65，160/0.17, 40表示放大倍數(shù)，0.65表示鏡口率（數(shù)值孔徑，N·A），160表示機(jī)械管長(zhǎng)（mm），0.17表示允許蓋玻片厚度（mm）。N·A值越大，透鏡分辨率越高。（2）目鏡 亦有5×, 10×, 15×和20×等。目鏡的作用是將物鏡放大的標(biāo)本像（實(shí)像）再放大成虛像

12、。觀察者可根據(jù)工作需要和標(biāo)本的實(shí)際情況，恰當(dāng)選擇不同放大倍數(shù)的目鏡。接目鏡內(nèi)常安放一指針，便于指示視野中的某一結(jié)構(gòu)。目鏡可旋轉(zhuǎn)，目鏡底部有相應(yīng)的刻度，以供兩眼度數(shù)不同的人調(diào)節(jié)。（3）聚光器 位于載物臺(tái)的下方，起著把光線匯聚成光柱（束），增強(qiáng)照明度之用。聚光器的一側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋，可以升降，可按需要調(diào)節(jié)亮度。（4）光闌 在聚光器下方，由許多金屬葉片組成。由一光圈調(diào)節(jié)桿調(diào)節(jié)光圈大小，以控制聚光鏡的N·A值，以便符合物鏡要求。（5）亮度調(diào)節(jié)鈕 用于調(diào)整照明亮度。注意每次用完顯微鏡后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置，然后關(guān)閉電源。（6）濾光片 在光闌下方有一金屬圈，可安放濾光片，借以改變光源的色調(diào)和

13、強(qiáng)弱，便于觀察和攝影。常用濾光片有三種：毛玻片減弱光強(qiáng)度、使光漫射而變的柔和；藍(lán)玻片白熾燈光照明時(shí)用，將黃色燈光校正成白光；綠玻片通常適用于黑白照片，顯微攝影用。（7）光源 有自然光源（陽(yáng)光）和人工光源（燈光）之分，本機(jī)采用人工光源。2.顯微鏡的使用（1）顯微鏡的提取和放置 顯微鏡是精密的光學(xué)儀器，從顯微鏡柜中取出時(shí)，一定要按操作規(guī)程進(jìn)行，即一手握住鏡臂，另一手托住鏡座，嚴(yán)禁單手握住鏡臂走動(dòng)。顯微鏡使用前要平放于使用者前方偏左的位置上。用擦鏡紙輕輕擦拭目鏡和物鏡，若有臟物，則用擦鏡紙蘸少許乙醚與酒精混合液擦拭干凈，并用紗布擦拭顯微鏡的機(jī)械部分。（2）接通電源，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，調(diào)整光強(qiáng)度，旋轉(zhuǎn)物鏡

14、轉(zhuǎn)換器，先把低倍接物鏡對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)中央的通光孔（對(duì)正光軸），根據(jù)標(biāo)本染色情況選用不同放大倍率的接物鏡，靈活應(yīng)用亮度調(diào)節(jié)鈕、聚光器和光闌，調(diào)節(jié)至視野完全照明、亮度均勻，光強(qiáng)適宜。（3）觀察切片 觀察切片前，先用肉眼分辨切片的正反面，蓋玻片朝上為正面，并大致觀察標(biāo)本的外形、大小和著色。將切片放置于載物臺(tái)上，置于持片夾內(nèi)固定，運(yùn)用推進(jìn)器將組織塊對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)中央的通光孔。在鏡臂的兩側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋，可調(diào)節(jié)鏡筒和物鏡或載物臺(tái)的升降。 按照低倍鏡、高倍鏡順序觀察切片，低倍鏡觀察的范圍大，便于觀察器官或組織的全貌或整體結(jié)構(gòu)。高倍鏡觀察的范圍小，放大的倍數(shù)高，適用于分辨器官或組織某一局部的微細(xì)結(jié)構(gòu)。兩者互相配合，可達(dá)

15、到全面了解器官結(jié)構(gòu)的目的。觀察標(biāo)本時(shí)，首先在低倍鏡下對(duì)焦至觀察物象最清晰時(shí)為止，觀察完切片一般結(jié)構(gòu)后，需要進(jìn)一步觀察某一部分結(jié)構(gòu)時(shí)，應(yīng)將此部位移至視野中央，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察，如圖像不清晰時(shí)，只需稍調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋，即可看到清晰的物象。必須指出，接物鏡放大倍數(shù)愈低，其工作距離（即接物鏡前鏡片與蓋玻片上平面之間的距離）愈長(zhǎng)，接物鏡放大倍數(shù)愈高，其工作距離愈短。所以使用高倍物鏡時(shí)，應(yīng)避免用粗調(diào)節(jié)器。若必須便用時(shí)，則應(yīng)用眼睛從側(cè)方觀看載物臺(tái)上升，當(dāng)蓋玻片至物鏡之間的距離約為1毫米時(shí)，然后用眼觀察視野，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，直至看見(jiàn)物象清晰為止。運(yùn)用粗調(diào)節(jié)器時(shí)應(yīng)小心，否則會(huì)壓碎切片。觀察切片時(shí)姿勢(shì)要端正，要做好

16、繪圖或記錄。（4）收藏 觀察完畢后，移開(kāi)物鏡，取下切片，放入切片盒，降下鏡筒。注意每次用完顯微鏡后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置，然后關(guān)閉電源，套上塑料套。（二）細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1.學(xué)生觀察切片（1）光鏡下圓形細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu) 以初級(jí)卵母細(xì)胞為例。A卵巢切片 H.E染色肉眼觀察：卵巢縱切面呈橢圓形，著紫紅色。低倍鏡觀察：參考例圖，找到卵巢的邊緣部分，可見(jiàn)其中有許多小而圓、單個(gè)或成群存在的原始卵泡。選擇一個(gè)典型而清晰的原始卵泡，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：高倍鏡下可見(jiàn)原始卵泡由位于中央的卵母細(xì)胞和其外圍呈扁平狀的一層卵泡細(xì)胞組成。卵母細(xì)胞較大，圓形，中央有一個(gè)大而圓、嗜堿性的細(xì)胞核，核仁大而明顯、染色質(zhì)呈

17、小塊狀。細(xì)胞質(zhì)包繞在核的周圍，弱嗜酸性，呈細(xì)顆粒狀或均質(zhì)淡紅色。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)未見(jiàn)任何細(xì)胞器和包含物，這是由于所有的細(xì)胞器和包含物都需要經(jīng)過(guò)特殊的染色才能顯示。胞膜和核膜在光鏡下不能分辨。切面如不經(jīng)過(guò)細(xì)胞核或核仁，則細(xì)胞內(nèi)無(wú)細(xì)胞核或缺核仁。核內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)可能不在同一焦距平面上，觀察時(shí)必須上下轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋方可獲得清晰的圖像（圖1）。 圖1 卵巢切片 圖2脊神經(jīng)節(jié)縱切片B高爾基復(fù)合體 脊神經(jīng)節(jié)縱切片 鍍銀法肉眼觀察：脊神經(jīng)節(jié)縱切面略呈橢圓形，染成棕黃色。低倍鏡觀察：可見(jiàn)脊神經(jīng)節(jié)主要由深色的神經(jīng)纖維束和纖維束之間呈淡黃色的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞構(gòu)成。脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞成群分布，切面呈圓形或橢圓形，胞體大小不等。選擇一個(gè)

18、細(xì)胞質(zhì)中有黑色網(wǎng)狀物的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡下觀察：脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈淡黃色，中央或偏心處有一個(gè)不著色圓形的細(xì)胞核。核周圍的胞質(zhì)中散布棕黑色的網(wǎng)狀物即高爾基復(fù)合體。注意胞質(zhì)中的高爾基復(fù)合體數(shù)量不等，形狀各異，有的呈網(wǎng)狀，有的則被切斷而呈粗顆粒狀。切面如不經(jīng)胞核的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，高爾基復(fù)合體則散布于細(xì)胞質(zhì)中（圖2）。（2）動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂 馬蛔蟲(chóng)子宮切片 鐵蘇木精染色肉眼觀察：切片中有46個(gè)圓形馬蛔蟲(chóng)子宮橫切面。低倍鏡觀察：一個(gè)馬蛔蟲(chóng)子宮橫切面，可見(jiàn)子宮壁由高柱狀細(xì)胞構(gòu)成，子宮腔內(nèi)有許多圓形或橢圓形的馬蛔蟲(chóng)卵切面。每個(gè)蟲(chóng)卵的外表面都包著一層較厚的膠質(zhì)膜，其內(nèi)是處于不同分裂階段的卵細(xì)胞。卵

19、細(xì)胞的胞質(zhì)著淡藍(lán)色，參考例圖，找出各分裂期的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，找出前期、中期、后期和末期的卵細(xì)胞，并依次置于高倍鏡下觀察。高倍鏡下觀察：前期：蟲(chóng)卵的膠質(zhì)膜內(nèi)只有一個(gè)圓形的卵細(xì)胞，胞核中的染色質(zhì)已形成發(fā)夾樣的染色體，并在核仁、核膜消失后群集于細(xì)胞質(zhì)中。紡錘體明顯，其兩極有深染的中心體。中期：紡錘體移至細(xì)胞中部，染色體排列于紡錘體中部的赤道面上。后期：染色體分為均等的兩半，并分別向兩極的中心體集中，中部的胞膜向內(nèi)縮窄而呈啞鈴狀。末期：膠質(zhì)膜內(nèi)的兩個(gè)子細(xì)胞已完全分開(kāi)，染色體解聚變成小塊狀的染色質(zhì)，核仁、核膜相繼出現(xiàn)，注意若在一個(gè)馬蛔蟲(chóng)的子宮切片中，未能察見(jiàn)各期分裂相時(shí)，可從別的子宮切面中尋找，直至全部察見(jiàn)

20、為止（圖3）。圖3馬蛔蟲(chóng)子宮內(nèi)卵細(xì)胞切片2.教師示教切片A立方形細(xì)胞 甲狀腺切片 H.E染色高倍鏡下觀察甲狀腺濾泡，指針?biāo)傅氖菫V泡壁的濾泡上皮細(xì)胞，呈立方形，細(xì)胞的長(zhǎng)、寬和高幾乎相等，細(xì)胞核圓形，位于細(xì)胞中央，細(xì)胞質(zhì)弱嗜酸性，圍繞在核的周圍（圖4）。B柱狀細(xì)胞 小腸切片 H.E染色 高倍鏡下觀察小腸絨毛，可見(jiàn)絨毛表面整齊地排著一層柱狀上皮。指針?biāo)傅氖且粋€(gè)柱狀細(xì)胞，細(xì)胞的高度大于寬度，呈柱狀，細(xì)胞質(zhì)弱嗜酸性.細(xì)胞核橢圓形，位于細(xì)胞近基部。由于細(xì)胞排列緊密，且細(xì)胞膜極薄，細(xì)胞界限不清，可從兩核之間劃一分界線，即可顯示細(xì)胞的柱狀形態(tài)（圖5）。C星狀有突起細(xì)胞（神經(jīng)元） 脊髓切片 硫堇染色 高倍鏡

21、下觀察脊髓灰質(zhì)的腹角，指針?biāo)傅氖羌顾柽\(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞，細(xì)胞呈星狀，從胞體向外周伸出數(shù)個(gè)突起，胞體中央有一大而圓的細(xì)胞核，核內(nèi)有較大的核仁（圖6）。D梭形的平滑肌細(xì)胞 平滑肌分離裝片高倍鏡下觀察單個(gè)平滑肌細(xì)胞，可見(jiàn)平滑肌細(xì)胞（肌纖維）呈長(zhǎng)梭形，兩端尖細(xì)，中部略寬，胞質(zhì)紅染，內(nèi)有一深藍(lán)色桿狀或長(zhǎng)橢圓形的細(xì)胞核（圖7）。 圖4甲狀腺切片 圖5小腸腸絨毛切片 圖6 神經(jīng)元 圖7 平滑肌縱切片3.觀察電鏡幻燈片和圖片結(jié)合功能，了解細(xì)胞膜、各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的亞微結(jié)構(gòu)。四、作業(yè)1.繪制一個(gè)原始卵泡中的卵母細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)高倍鏡圖。2.繪制一個(gè)脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，示高爾基復(fù)合體高倍鏡圖。五、思考題1.粗、細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕使

22、物鏡上下移動(dòng)還是使載物臺(tái)上下移動(dòng)？2.若用低倍鏡能看到切片內(nèi)容，但用高倍鏡看不到，應(yīng)考慮那些原因？3.一般而言，細(xì)胞哪些部分嗜堿性，哪些部分嗜酸性？為什么？實(shí)驗(yàn)二 上皮組織一、目的與要求1.掌握各種類型被覆上皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)。2.了解外分泌腺中幾種腺上皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。3.了解上皮細(xì)胞各個(gè)面的特化結(jié)構(gòu)。二、材料LEICA生物顯微鏡、小腸橫切片、氣管橫切片、食管橫切片。三、內(nèi)容和方法1.學(xué)生觀察切片（1）單層柱狀上皮 小腸橫切片 H.E染色肉眼觀察：小腸橫切面一般呈圓形或橢圓形，中央的空腔為腸腔，周圍紫紅色的部分為腸壁。低倍鏡觀察：可見(jiàn)腸壁腔面有許多突起的小腸絨毛，選擇一個(gè)結(jié)構(gòu)清晰的小腸絨毛進(jìn)一

23、步詳細(xì)觀察。高倍鏡觀察：小腸絨毛表面由單層柱狀上皮構(gòu)成。上皮細(xì)胞的胞質(zhì)嗜酸性，細(xì)胞核橢圓形，嗜堿性且著色較深，位于細(xì)胞近基部。轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋可見(jiàn)上皮的游離面有一條亮紅色粗線樣的結(jié)構(gòu)即紋狀緣，它是由微絨毛密集而成的。上皮的基底面與結(jié)締組織交界處有著色較深的基膜，在局部的上皮細(xì)胞之間，夾有單個(gè)呈空泡樣的杯狀細(xì)胞，屬于單細(xì)胞腺，分泌粘液。杯狀細(xì)胞的頂部因含大量粘原顆粒而膨大成杯狀，由于粘原顆粒不著色（或著淡藍(lán)色）而呈空泡狀。細(xì)胞的基部較小，內(nèi)含不規(guī)則或新月?tīng)畹募?xì)胞核（圖8）。（2）假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮 氣管橫切片 H.E染色肉眼觀察：氣管橫切面呈圓形，管腔較大，腔面平整，管壁中有染成藍(lán)紫色形如“C”字

24、的透明軟骨。低倍鏡觀察：氣管的粘膜層較薄，被覆的是假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮，選擇其中較清晰的部分換高倍鏡觀察，高倍鏡觀察：由于構(gòu)成上皮的三種細(xì)胞高低不一，故上皮中細(xì)胞核的位置亦高低不平。大致可排成三層。表層的細(xì)胞核呈橢圓形，較大，著色較淡的是高柱狀細(xì)胞的核，中間層細(xì)胞的核呈較小的橢圓形，著色較深，是梭形細(xì)胞的核；最深層的核呈圓形，著色最深，是錐形細(xì)胞的核。三種細(xì)胞同位于基膜上，實(shí)屬單層上皮。注意高柱狀細(xì)胞的游離面有纖毛。在有的部位上皮細(xì)胞間也見(jiàn)到空泡樣的杯狀細(xì)胞。上皮的基底面與結(jié)締組織之間有較明顯的基膜（圖9）。 圖8小腸腸絨毛切片 圖9氣管橫切片（3）復(fù)層扁平上皮 食管橫切片 H.E染色肉眼觀察：

25、食管橫切面呈橢圓形，粘膜向管腔突出形成數(shù)個(gè)皺襞，故管壁面凹凸不平。 低倍鏡觀察：找到緊靠腔面的復(fù)層扁平上皮，可見(jiàn)到上皮厚，層數(shù)多，選擇一清晰部位換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：從腔面向外觀察，上皮細(xì)胞可分三個(gè)層次：表層由數(shù)層扁平狀的細(xì)胞構(gòu)成，胞質(zhì)弱嗜酸性，由于不同程度的角化，細(xì)胞核可固縮而濃染變小以至消失，最后呈鱗片狀脫落。中間層細(xì)胞大，層數(shù)多，由多邊形或梭形的細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞核圓或橢圓，著色較淺，細(xì)胞質(zhì)亦弱嗜酸性?；讓蛹?xì)胞呈立方形或矮柱狀，位于基膜上，排列緊密，胞核橢圓著色深，胞質(zhì)弱嗜堿性。因此，易與基膜下淡紅色的結(jié)締組織相區(qū)別（圖10）。 圖10食管橫切片 圖11甲狀腺切片2.教師示教切片（1）

26、立方上皮甲狀腺切片 H.E染色 高倍鏡下甲狀腺濾泡壁的單層立方上皮?？梢?jiàn)細(xì)胞的高度和寬度大致相等，細(xì)胞核圓，位于中央（圖11）。（2）變移上皮（高倍） 膀胱 H.E染色 當(dāng)膀胱收縮時(shí)，膀胱壁的變移上皮增厚，由不同形態(tài)的46層細(xì)胞組成，表層細(xì)胞體積大，核圓呈雙核，該細(xì)胞頂端的胞質(zhì)濃縮而呈深紅色，稱殼層，中間層細(xì)胞稍小，多為梭形或倒梨形，有一個(gè)位于中央的圓形核，胞質(zhì)染色淡而清亮，基底層細(xì)胞小，呈不規(guī)則立方形，排列較密，核圓色深。當(dāng)膀胱充盈擴(kuò)張時(shí)，上皮變薄，數(shù)減少至13層，細(xì)胞變成扁平形（圖12）。（4）腺上皮 頜下腺切片 H.E染色 在頜下腺中，可以見(jiàn)到由漿液性細(xì)胞和粘液性細(xì)胞組成的不同形態(tài)的腺泡

27、。A漿液性腺泡呈圓形或橢圓形，由數(shù)個(gè)錐形的漿液性細(xì)胞圍成，腺細(xì)胞基部胞質(zhì)嗜堿性，細(xì)胞頂部含大量嗜酸性分泌顆粒而呈紅色，核圓，位于細(xì)胞基部。B粘液性腺泡由錐形的粘液性細(xì)胞組成，胞質(zhì)內(nèi)含大量的粘原顆粒，著色很淡，呈淡藍(lán)色，核被擠向基底部，呈扁平月牙形。C混合性腺泡是在粘液性腺泡的一側(cè)有幾個(gè)漿液性的細(xì)胞附著，呈半月?tīng)钆帕校t，又稱漿半月（圖13）。 圖12膀胱 圖13頜下腺切片（5）細(xì)胞的特化結(jié)構(gòu) 通過(guò)觀察電鏡圖片和幻燈片，了解上皮細(xì)胞游離面的微絨毛，纖毛，側(cè)面的連接復(fù)合體、縫管連接、鑲嵌連接，基底面的基膜、質(zhì)膜內(nèi)褶、半橋粒等的亞微結(jié)構(gòu)。四、作業(yè)1.繪制部分單層柱狀上皮細(xì)胞（含杯狀細(xì)胞）的高倍鏡圖

28、。2.繪制高倍鏡下的部分復(fù)層扁平上皮。五、思考題1.總結(jié)各種被覆上皮的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及分布。2.在組織切片上，可以根據(jù)那些形態(tài)結(jié)構(gòu)特征確認(rèn)上皮組織？3.復(fù)層扁平上皮和變移上皮在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能上有什么不同？實(shí)驗(yàn)三 結(jié)締組織一、目的與要求l.掌握固有結(jié)締組織中特別是疏松結(jié)締組織和網(wǎng)狀組織的形態(tài)特點(diǎn)。2.掌握軟骨的一般結(jié)構(gòu)和三種軟骨的特點(diǎn)，并了解骨組織的結(jié)構(gòu)特征。二、材料Leica生物顯微鏡、結(jié)締組織鋪片、淋巴結(jié)切片（鍍銀法）、淋巴結(jié)切片（H.E）、氣管橫切片、骨干橫磨片。三、內(nèi)容和方法1. 學(xué)生觀察切片（1）疏松結(jié)締組織鋪片 結(jié)締組織鋪片（活體注射臺(tái)盼藍(lán)） H.E及特殊的彈性纖維染色法復(fù)染肉眼觀察：鋪片

29、染成藍(lán)紫色，形態(tài)不規(guī)則且厚薄不均勻。低倍鏡觀察：可見(jiàn)縱橫交錯(cuò)呈淡紅色的膠原纖維和深紫色單根的彈性纖維，纖維間有許多散在的細(xì)胞。選擇一薄而清晰的部位換高倍鏡觀察，高倍鏡觀察：可以辨認(rèn)以下幾種纖維和兩種細(xì)胞成分： A膠原纖維 染成淡紅色，數(shù)量多，為長(zhǎng)短粗細(xì)均不等的纖維束，呈現(xiàn)波浪狀且有分支，相互交織成網(wǎng)。 B彈性纖維 數(shù)量少，呈深紫色的發(fā)絲狀，長(zhǎng)而比較直，斷端有卷曲。 C成纖維細(xì)胞 數(shù)量最多，胞體大，具有多個(gè)突起的星形或多角形的細(xì)胞。由于胞質(zhì)染色極淺而細(xì)胞輪廓不清，只能根據(jù)細(xì)胞核較大，橢圓形，有12個(gè)明顯的核仁等特點(diǎn)來(lái)判斷。這些細(xì)胞多沿膠原纖維分布。另外還可見(jiàn)到一些橢圓形、較小且深染，核仁不明顯的

30、細(xì)胞核，此系功能不活躍的纖維細(xì)胞的細(xì)胞核。 D巨噬細(xì)胞 又稱組織細(xì)胞，一般呈梭形或星形，最大的特征是胞質(zhì)內(nèi)有許多被吞噬的臺(tái)盼藍(lán)顆粒。細(xì)胞核較小，橢圓形且染色較深，見(jiàn)不到核仁，可借助于胞質(zhì)中吞噬顆粒的存在來(lái)判斷它的形狀和大?。▓D14）。（2）網(wǎng)狀細(xì)胞 淋巴結(jié)切片 H.E染色肉眼觀察：淋巴結(jié)切面，周圍色深的部分是淋巴結(jié)的皮質(zhì)，中央色較淺的部分是淋巴結(jié)的髓質(zhì)。低倍鏡觀察：找到淋巴結(jié)髓質(zhì)，把細(xì)胞分布比較稀疏的部分（髓竇）置高倍鏡下觀察。高倍鏡觀察：可見(jiàn)網(wǎng)狀細(xì)胞較大，有數(shù)目不等的胞質(zhì)突起，相鄰網(wǎng)狀細(xì)胞的突起可互相連接成網(wǎng)，胞質(zhì)和突起呈弱嗜堿性，胞核圓形或橢圓形，著色淺（圖15）。 圖14疏松結(jié)締組織 圖

31、15淋巴結(jié)髓質(zhì) （3）網(wǎng)狀纖維 淋巴結(jié)切片 鍍銀法肉眼觀察：淋巴結(jié)的切面被染成棕黑色。低倍鏡觀察：找到粗細(xì)不等交織成網(wǎng)的黑色纖維，換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：可見(jiàn)纖維著色深淺不同，其中較細(xì)呈黑色的是網(wǎng)狀纖維，較粗呈棕色或灰黑色的是膠原纖維。因鍍銀時(shí)兩種纖維都著色，只是著色深淺程度不同而已（圖16）。（4）透明軟骨 氣管橫切片 H.E染色肉眼觀察：在氣管壁中有一條染成深藍(lán)紫色的“C”形軟骨環(huán)，即透明軟骨。低倍鏡觀察：找到透明軟骨后，即可見(jiàn)到表面有嗜酸性的軟骨膜，中央的基質(zhì)著淺藍(lán)紫色，其中散布著許多軟骨細(xì)胞。高倍鏡觀察：軟骨膜由致密結(jié)締組織構(gòu)成，可見(jiàn)嗜酸性平行排列的膠原纖維束，束間夾有扁平的成纖維細(xì)

32、胞。軟骨細(xì)胞位于軟骨陷窩內(nèi)，邊緣的軟骨細(xì)胞小，呈扁平形或橢圓形，越靠近中央，細(xì)胞體積漸大變成卵圓形或圓形。生活狀態(tài)下軟骨細(xì)胞充滿軟骨陷窩，制片后因胞質(zhì)收縮，軟骨細(xì)胞與陷窩壁之間出現(xiàn)空隙。由于軟骨細(xì)胞分裂增值，一個(gè)陷窩內(nèi)?？梢?jiàn)到24個(gè)軟骨細(xì)胞，稱同源細(xì)胞群。軟骨基質(zhì)呈均質(zhì)凝膠狀，埋于其中的膠原纖維不能分辨。在軟骨陷窩周圍的基質(zhì)中含有較多的硫酸軟骨素而顯強(qiáng)嗜堿性，稱軟骨囊（圖17）。 圖16網(wǎng)狀纖維 圖17透明軟骨（5）密質(zhì)骨 骨干橫磨片 原色肉眼觀察：骨磨片形狀呈方形，著淡黃色。 低倍鏡觀察：由于是磨片，骨中的骨膜、骨細(xì)胞、血管及神經(jīng)等已不存在，只留下骨板、骨陷窩及骨小管等結(jié)構(gòu)。從外向內(nèi)可見(jiàn)骨板

33、、分為外、中，內(nèi)三層。外層骨板較厚，內(nèi)層骨板較薄，它們分別圍繞骨表面和骨髓腔作環(huán)行排列，稱外環(huán)骨板和內(nèi)環(huán)骨板。中間層骨板最厚，有許多同心圓排列的骨板系統(tǒng)即哈佛氏系統(tǒng)（骨單位）。哈佛氏系統(tǒng)中央的深色管腔稱哈佛氏管，周圍環(huán)形的骨板是哈氏骨板。位于哈佛氏系統(tǒng)之間的一些呈不規(guī)則形狀的骨板稱骨間板。在上述各種骨板周圍可見(jiàn)到淺色的分界線即粘合線。在骨板面成骨板內(nèi)有許多深染的小窩為骨陷窩，其周圍伸出的細(xì)管為骨小管。骨陷窩和骨小管是骨細(xì)胞及其突起存在的腔隙。另外還有少數(shù)呈橫行或斜行的管進(jìn)穿，與內(nèi)、外環(huán)骨板相通，并與哈佛氏管相通，稱伏克曼氏管（圖18）。圖18骨干橫磨片 2. 教師示教切片（1）脂肪細(xì)胞與脂肪組

34、織 皮膚切片 H.E染色高倍鏡下的脂肪組織呈蜂窩狀，由大量脂肪細(xì)胞及少量結(jié)締組織和毛細(xì)血管構(gòu)成。脂肪細(xì)胞較大，胞質(zhì)內(nèi)充滿脂滴，胞核被擠到邊緣，染色深呈扁平狀，由于脂滴被溶去，故脂肪細(xì)胞呈空泡狀（圖19）。（2）致密結(jié)締組織 腱切片 H.E染色腱是規(guī)則的致密結(jié)締組織。高倍鏡下可見(jiàn)它由平行排列著的粗大淡紅色的膠原纖維束和夾于纖維束之間的腱細(xì)胞構(gòu)成。腱細(xì)胞核呈細(xì)長(zhǎng)狀，著色深，胞質(zhì)少而不易看見(jiàn)（圖20）。 圖19脂肪細(xì)胞 圖20 腱切片 （3）彈性軟骨 耳廓切片 Weigert染色高倍鏡下彈性軟骨的主要特征是基質(zhì)中含有大盤染成深藍(lán)色的彈性纖維交織成網(wǎng)。在軟骨邊緣的彈性纖維稀疏，深部的粗大而致密。軟骨膜

35、及軟骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，基本同透明軟骨（圖21）。（4）纖維軟骨 椎間盤切片 H.E染色高倍鏡下可見(jiàn)基質(zhì)中有大量呈淡紅色平行排列的膠原纖維束，纖維束之間有較小的單個(gè)、兩個(gè)或成行排列的軟骨細(xì)胞（圖22）。 圖21彈性軟骨 圖22纖維軟骨 四、作業(yè)1.繪圖：高倍鏡下疏松結(jié)締組織結(jié)構(gòu)圖。2.繪圖：高倍鏡下網(wǎng)狀組織的結(jié)構(gòu)圖。五、思考題1.比較上皮組織和結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2.疏松結(jié)締組織中有哪幾種細(xì)胞和纖維。3.三種軟骨的組織結(jié)構(gòu)有什么不同？實(shí)驗(yàn)四 血液一、目的與要求掌握血液涂片的制作方法，并觀察血液涂片。二、材料LEICA生物顯微鏡、牛血液、駱駝血液、雞血液、瑞特氏染液、香柏油、吸水紙、擦鏡紙、載玻片、蒸

36、餾水、二甲苯、染色缸。三、內(nèi)容和方法1. 血涂片的制作（1）血涂片的染色取一滴新鮮的血液，置于玻片的一端，以左手拿該片的兩端，迅速用右手拿住另一載玻片的一端，在左手載玻片上由前向后接觸血滴，使兩載玻片約成45o角度，輕輕移動(dòng)，使血滴成一直線，然后由前向后推為一均勻的薄片。涂片在空氣中干燥后置于染色架上，滴加染色液，使涂片被染色液覆蓋，染1min后，再加等量的緩沖液于染色液上，浸染約58min。此時(shí)涂片表面呈現(xiàn)一層古銅色，用蒸餾水迅速?zèng)_洗，見(jiàn)涂片呈粉紅色后，以吸水紙吸干。（2）將干燥好的血涂片加香柏油一滴，置顯微鏡下觀察。肉眼觀察制作良好的血涂片厚薄適宜,血膜分布均勻,呈粉紅色。有些血片涂抹厚薄

37、不均勻,主要是推片不齊,用力不勻及玻片不潔所致。選一厚薄適宜部位置顯微鏡下觀察。2. 學(xué)生觀察切片（1）家畜血液涂片（圖23）低倍鏡觀察可見(jiàn)到大量圓形而細(xì)小的紅細(xì)胞。白細(xì)胞很少，稀疏地散布于紅細(xì)胞之間,具有藍(lán)紫色的細(xì)胞核。選白細(xì)胞較多的部位（一般在血膜邊緣和血膜尾部,因體積大的細(xì)胞常在此出現(xiàn)），換油鏡觀察。油鏡下區(qū)別血液中各種有形成分時(shí)，可參考第三版教材的彩色圖版1或3，結(jié)合圖5-1各種血細(xì)胞模式圖的特點(diǎn)進(jìn)行觀察。應(yīng)該指出的是,圖版中的細(xì)胞形態(tài)都是經(jīng)過(guò)典型化了的，實(shí)際上,血細(xì)胞的形態(tài)不僅因動(dòng)物而異，而且常因制片技術(shù)和染色偏酸、偏堿均可使細(xì)胞形態(tài)或染色反應(yīng)異常。如血膜過(guò)厚，細(xì)胞重疊而細(xì)胞直徑縮小

38、，血膜太薄，白細(xì)胞多集中于邊緣。染色結(jié)果偏酸，則紅細(xì)胞和嗜酸性顆粒偏紅，白細(xì)胞的細(xì)胞核呈極淺藍(lán)色或不著色。染色結(jié)果偏堿,所有的紅、白細(xì)胞呈灰藍(lán)色，顆粒深暗等。故觀察時(shí)不能生搬硬套，一定要根據(jù)具體情況，靈活掌握，對(duì)比分析，才能做出正確的判斷。A紅細(xì)胞 數(shù)量最多，體積小而均勻分布，呈粉紅色的圓盤狀，邊緣厚，著色較深，中央薄，著色較淺，無(wú)核無(wú)細(xì)胞器，胞質(zhì)內(nèi)充滿血紅蛋白。B中性粒細(xì)胞 是白細(xì)胞中較多的一種,體積比紅細(xì)胞大,主要的特征是胞質(zhì)中的特殊顆粒細(xì)小，分布均勻，著淡紅色或淺紫色。胞核著深紫紅色,形態(tài)多樣,有豆形、桿狀（為幼稚型,胞核細(xì)長(zhǎng)，彎曲盤繞成馬蹄形、S形、W形或U形等多種形態(tài)）或分葉狀，一般

39、分35葉或更多，葉間以染色質(zhì)絲相連，各葉的大小、形狀和排列各不相同。核分葉的多少與該細(xì)胞年齡有關(guān)。C嗜酸粒細(xì)胞 比中性粒細(xì)胞略大，數(shù)量少，胞核常分兩葉，著紫藍(lán)色。主要特點(diǎn)是胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大的嗜酸性特殊顆粒，色鮮紅或桔紅。馬的嗜酸性顆粒粗大，晶瑩透亮，呈圓形或橢圓形，其他家畜的嗜酸性顆粒較小。D嗜堿粒細(xì)胞 數(shù)量很少，體積與嗜酸粒細(xì)胞相近或略小。主要特征是胞質(zhì)中含有大小不等，形狀不一的嗜堿性特殊顆粒，顆粒著藍(lán)紫色，常蓋于胞核上。胞核呈"S"形或雙葉狀，著淺紫紅色。此種白細(xì)胞由于數(shù)量極少，,必須多觀察一些視野方能察見(jiàn)。E淋巴細(xì)胞 有大、中、小三種類型，其中小淋巴細(xì)胞最多，血膜上很易

40、見(jiàn)到，體積與紅細(xì)胞相近或略大。核大而圓，幾乎占據(jù)整個(gè)細(xì)胞，核一側(cè)常見(jiàn)凹陷，染色質(zhì)呈致密塊狀，著深紫藍(lán)色。胞質(zhì)極少，僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線狀天藍(lán)色或淡藍(lán)色的胞質(zhì),有時(shí)甚至完全不見(jiàn)。中淋巴細(xì)胞體積與中性粒細(xì)胞相近,形態(tài)與小淋巴細(xì)胞相似，但胞質(zhì)較多呈薄層圍繞在核的周圍。在核的凹陷處胞質(zhì)較多且透亮，偶見(jiàn)少量紫紅色的嗜天青顆粒。大淋巴細(xì)胞在正常血液中不常見(jiàn)到，體積與單核細(xì)胞相近或略小，胞核圓形著深紫藍(lán)色，胞質(zhì)更多，呈天藍(lán)色。圍繞核周圍的胞質(zhì)呈一淡染區(qū)。F單核細(xì)胞 是白細(xì)胞中體積最大的一種，胞核呈腎形、馬蹄形或不規(guī)則形，著色淺，染色質(zhì)呈細(xì)網(wǎng)狀。細(xì)胞質(zhì)豐富，弱嗜堿性，呈灰藍(lán)色,偶見(jiàn)細(xì)小紫紅色的嗜天青顆粒。G血

41、小板 體積很小，常三五成群散布于紅細(xì)胞之間，形態(tài)有圓形、橢圓形、星形或多角形的藍(lán)紫色小體，,中央著色深的是血小板的顆粒區(qū)，周邊著色淺的是透明區(qū)。（2）家禽血液涂片（圖24）雞血的有形成分與家畜比較有以下不同：A紅細(xì)胞呈橢圓形,中央有一深染的橢圓形細(xì)胞核，不見(jiàn)核仁，胞質(zhì)呈均質(zhì)的淡紅色。B中性粒細(xì)胞，又稱異嗜性粒細(xì)胞,圓形,具有25個(gè)分葉核,胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性的特殊顆粒呈桿狀或紡錘形。C凝血細(xì)胞，又稱血栓細(xì)胞，相當(dāng)于家畜的血小板。凝血細(xì)胞具有典型細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，比紅細(xì)胞略小，兩端鈍圓，核呈橢圓形、染色質(zhì)致密。胞質(zhì)微嗜堿性，內(nèi)有12個(gè)紫紅色的嗜天青顆粒。其它血細(xì)胞基本上與其它家畜的血細(xì)胞相似。 圖23牛

42、血涂片 圖24雞血涂片 3. 教師示范切片駱駝血涂片高倍鏡下觀察駱駝血液中的有形成分,見(jiàn)紅細(xì)胞呈橢圓形,無(wú)細(xì)胞核。其余血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與一般家畜血液的有形成分相似（圖25）。圖25駱駝血涂片四、作業(yè)1.寫出血涂片制作的操作步驟。2.繪制自制血涂片中的各種血細(xì)胞。五、思考題1.比較哺乳動(dòng)物和禽類紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2.比較哺乳動(dòng)物和禽類各種白細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)五 肌組織一、目的與要求 以骨骼肌為重點(diǎn)，掌握三種肌纖維的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，要求在顯微鏡下準(zhǔn)確識(shí)別它們縱橫切面的不同。二、材料LEICA生物顯微鏡、骨骼肌切片、心肌切片、平滑肌切片。三、內(nèi)容和方法1. 學(xué)生觀察切片（1） 骨骼肌縱、橫切

43、鐵蘇木素（或H.E）染色 低倍鏡觀察：骨骼肌的縱切面上有許多平行排列著的圓柱狀肌纖維，具有明暗相間的橫紋，邊緣有很多細(xì)胞核。橫切面上可見(jiàn)肌纖維集聚成束，被切成許多圓形或多邊形斷面。無(wú)論縱切面或橫切面的肌纖維周圍都有疏松結(jié)締組織包裹（肌內(nèi)膜和肌束膜），結(jié)締組織內(nèi)含豐富的血管。高倍鏡觀察：在縱切面找出一條橫紋清晰的肌纖維，在肌纖維膜下分布著一些橢圓形的細(xì)胞核，可以見(jiàn)到核仁。肌纖維內(nèi)含有順長(zhǎng)軸平行排列的肌原纖維，很多肌原纖維上的明帶（I帶）和暗帶（A帶）相間排列，就形成了橫紋。仔細(xì)觀察在暗帶中有一淡染的窄帶稱H帶，H帶中央還有一細(xì)的M線。在一般光鏡下，M線不能見(jiàn)到。在明帶中央有一條隱約可見(jiàn)的Z線（間

44、線），相鄰兩條Z線之間的一段肌原纖維，即為一個(gè)肌節(jié)。 肌纖維的橫切面上可見(jiàn)肌原纖維被切成點(diǎn)狀或短桿狀（斜切），有的均勻分布，有的則被肌漿分別成一個(gè)個(gè)小區(qū)。在橫切面上還可以見(jiàn)到少量位于周邊的圓形細(xì)胞核（圖26，27）。 圖26骨骼肌縱切 圖27骨骼肌橫切 （2）心肌 心肌切片 H.E染色 低倍鏡觀察：由于心肌纖維呈螺旋狀排列，故在切面中可同時(shí)觀察到心肌纖維的縱切、斜切或橫切面，各心肌纖維之間由結(jié)締組織相連系并含有豐富的血管。 高倍鏡觀察：先觀察縱切的心肌纖維，細(xì)胞呈短柱狀，平行排列，并以較細(xì)而短的分支與鄰近的肌纖維相吻合，互連成網(wǎng)。胞核橢圓形，位于細(xì)胞中央，注意核周圍由于肌漿較多而呈淡染區(qū)。心肌

45、纖維亦可見(jiàn)明暗相間的橫紋，但不如骨骼肌明顯。心肌橫切面呈大小不等的圓形或橢圓形切面，心肌無(wú)骨骼肌那樣結(jié)構(gòu)典型的肌原纖維，中間有一圓形胞核，核周圍清亮，但很多切面未能切到核（圖28、29）。（3）平滑肌 小腸橫切片 H.E染色肉眼觀察：切片呈紅色，本實(shí)驗(yàn)觀察的是小腸的肌層，呈更深的紅色，而且比較厚。低倍鏡觀察：從小腸的腔面向外觀察，依次是粘膜層，粘膜下層（淡紅色）、肌層（深紅色）和漿膜。肌層發(fā)達(dá)，由平滑肌纖維呈內(nèi)環(huán)行、外縱行排列，在此切而上內(nèi)環(huán)肌呈縱切，外縱肌呈橫切。高倍鏡觀察：縱切的平滑肌纖維呈細(xì)長(zhǎng)紡錘形，彼此嵌合緊密排列，胞核為長(zhǎng)橢圓形，位于肌纖維中央，若見(jiàn)到扭曲的細(xì)胞核，是由于平滑肌收縮所

46、引起。胞質(zhì)嗜酸性，呈均質(zhì)狀，不具橫紋。橫切的肌纖維呈大小不等的圓形切面，較大的切面上可見(jiàn)到圓形的細(xì)胞核，偏離肌纖維中部的切面均較小而無(wú)核（圖30）。 圖28心肌縱切片 圖29心肌橫切片 2. 教師示教切片（1）心肌閏盤 鐵蘇木素或鉀礬蘇木紅染色 高倍鏡下可清楚見(jiàn)到肌纖維的分支和橫紋，在兩個(gè)心肌纖維的連接處，藍(lán)色呈階梯狀的閏盤（圖31）。 圖30平滑肌 圖31心肌閏盤 （2）觀察肌節(jié)的超微結(jié)構(gòu) 從圖片或幻燈片中了解I帶、A帶、H帶、M線、Z線形成及構(gòu)造。四、作業(yè)1.繪制骨骼肌、心肌、平滑肌纖維的縱、橫切面高倍鏡圖。五、思考題1.試述肌組織的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2.如何在光鏡下分辨三種肌組織。實(shí)驗(yàn)六 神

47、經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng)一、目的與要求 掌握神經(jīng)元、脊髓、小腦和脊神經(jīng)節(jié)的構(gòu)造。二、材料LEICA生物顯微鏡、脊髓橫切片、小腦切片。三、內(nèi)容和方法1. 學(xué)生觀察切片（1）多極神經(jīng)元 脊髓橫切片 硫堇（或H.E）染色 肉眼觀察：標(biāo)本略呈橢圓形，中間著色較深呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì)，灰質(zhì)周圍呈淡藍(lán)色的是白質(zhì)。 低倍鏡觀察：先觀察脊髓全貌，找到脊髓中央管，把灰質(zhì)置視野中心，可見(jiàn)在灰質(zhì)中有成群或單個(gè)呈藍(lán)色、大小不等、形態(tài)各異的多極神經(jīng)元，位于腹角的神經(jīng)元多而大。選擇一個(gè)大而突起多，胞核清晰的神經(jīng)元換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：神經(jīng)元呈星狀，由胞體（核周體）和胞突構(gòu)成。 A胞體 中央有一個(gè)大而圓，著色很淡的細(xì)胞核，核與

48、核仁均很清晰，染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀。胞質(zhì)中分布著許多深藍(lán)色、大小不等的塊狀物即尼氏體。在H.E的切片上尼氏體不甚清楚，呈淡紫紅色。胞體內(nèi)還有許多細(xì)絲狀的神經(jīng)原纖維，用鍍銀法方可顯示，見(jiàn)示教片。B.胞突 有樹(shù)突和軸突兩種，突起的數(shù)目與切面有關(guān)。胞突的起始部較粗，含有尼氏體的是樹(shù)突，數(shù)目較多。不含尼氏體的是軸突，起始部稱軸丘。軸突只有一個(gè)，因切面關(guān)系不易呈現(xiàn)，需多觀察幾個(gè)神經(jīng)元，方能見(jiàn)到。胞突內(nèi)均有神經(jīng)原纖維伸入。在神經(jīng)元的周圍還可見(jiàn)到許多被切斷的神經(jīng)纖維和一些神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞核。主要是星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的核（圖32）。（2）腰部脊髓橫切面 H.E染色肉眼觀察：脊髓橫切面呈橢圓形，中間著色較深

49、呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì)，周圍著色淺的是白質(zhì)。低倍鏡觀察：移動(dòng)標(biāo)本觀察脊髓全貌，外表面包有薄層結(jié)締組織即脊軟膜。脊髓背側(cè)有背正中隔，腹側(cè)有一深溝為腹正中溝。脊髓中央是灰質(zhì)，其尖細(xì)的角為背角（背灰柱）。鈍而寬大的角為腹角（腹灰柱），在胸腰部脊髓，背角與腹角之間還有外側(cè)角。脊髓中央的小孔是脊髓中央管，由室管膜上皮圍成。高倍鏡觀察：在脊髓灰質(zhì)可見(jiàn)到背角有胞體較小的多極神經(jīng)元，即中間神經(jīng)元。腹角有許多胞體較大的多極運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。外側(cè)角有植物性神經(jīng)的節(jié)前神經(jīng)元的胞體。在神經(jīng)元之間還有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和無(wú)髓神經(jīng)纖維。白質(zhì)位于灰質(zhì)周圍，主要由粗細(xì)不等的有髓神經(jīng)纖維橫切面和散布于其間的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成。由于H.E染色不

50、能顯示神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)，僅見(jiàn)到形態(tài)和大小各異的細(xì)胞核，如核較大，圓形或橢圓形的星狀細(xì)胞核。核較小呈圓形的少突膠質(zhì)細(xì)胞核。核小而濃染，卵圓形或三角形的小膠質(zhì)細(xì)胞核等（圖33）。 圖32多極神經(jīng)元 圖33腰部脊髓橫切面 （3）小腦 小腦切片 H.E染色 肉眼觀察：小腦表面許多平行的淺溝把小腦分隔成許多小腦葉，每一個(gè)小腦葉表層紫紅色部分是皮質(zhì)，深部淡紅色為髓質(zhì)（白質(zhì)）。 低倍鏡觀察：分清面的腦軟膜、皮質(zhì)和髓質(zhì)。轉(zhuǎn)高倍鏡觀察皮質(zhì)和髓質(zhì)。A小腦皮質(zhì) 依次觀察下列各層： a分子層 位于腦軟膜的深面，很厚、著淡紅色，內(nèi)有大量淡紅色的無(wú)髓神經(jīng)纖維縱切面（主要是浦金野氏細(xì)胞的樹(shù)突）、少量神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞

51、的核。 b浦金野氏細(xì)胞（節(jié)細(xì)胞）層 由一層胞體呈梨狀，大而不連續(xù)的浦金野氏細(xì)胞構(gòu)成，其胞體頂端的主樹(shù)突伸入分子層，軸突穿過(guò)顆粒層進(jìn)入髓質(zhì)。 c顆粒層 緊靠浦金野氏細(xì)胞層，較厚，由大量胞體較小的顆粒細(xì)胞和少量胞體較大的高爾基II型細(xì)胞構(gòu)成。由于細(xì)胞小且排列緊密，細(xì)胞輪廓不易分辨，僅見(jiàn)大量圓形或橢圓形嗜堿性的細(xì)胞核，似密集的顆粒而得名。細(xì)胞核之間深紅色的塊狀物，即小腦小球。B小腦髓質(zhì)（白質(zhì)） 在顆粒層深面，由許多縱行排列的有髓神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成。有髓神纖維的髓鞘已在制片過(guò)程中被脂溶劑溶去，僅見(jiàn)到神經(jīng)纖維中央著紅色的軸索和其兩側(cè)的神經(jīng)角蛋白網(wǎng)及神經(jīng)膜（圖34）。（4）脊神經(jīng)節(jié) 脊神經(jīng)節(jié)切片

52、H.E染色肉眼觀察和低倍鏡觀察：脊神經(jīng)節(jié)縱切面呈橢圓形，著紫紅色，外表面有致密結(jié)締組織被膜，并伸入節(jié)內(nèi)分布于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和神經(jīng)纖維之間。節(jié)內(nèi)的假單極神經(jīng)元成群分布于神經(jīng)纖維束之間。選擇結(jié)構(gòu)清晰的神經(jīng)細(xì)胞群，轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。高倍鏡觀察：脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞體切面多呈圓形，大小不等，胞質(zhì)嗜酸性，尼氏體呈細(xì)顆粒狀，胞核大而圓。偶見(jiàn)胞體一側(cè)有一個(gè)淡紅色的胞突起始部。圍繞胞體外周的一層扁平或立方形細(xì)胞即衛(wèi)星細(xì)胞。在細(xì)胞群之間可見(jiàn)到大量神經(jīng)纖維的縱切面，其中主要是有髓神經(jīng)纖維，無(wú)髓神經(jīng)纖維很少（圖35）。 圖34小腦皮質(zhì)切片 圖35脊神經(jīng)節(jié)橫切片 2. 教師示教切片（1）環(huán)層小體 腸系膜環(huán)層小體裝片 環(huán)層小體是一種大型感受器，在低倍鏡下就可見(jiàn)到一體積大呈圓形或橢圓形的小體。小體中央有一根直的、呈深藍(lán)色的無(wú)髓神經(jīng)纖維終末部分，外包著十多層由扁平的結(jié)締組織細(xì)胞（注意其扁小而深染的細(xì)胞核）排列成同心圓的被囊（圖36）。（2）運(yùn)動(dòng)終板 肋間肌壓片 氯化金法高倍鏡下觀察肋間肌壓片，可見(jiàn)一條較粗、呈深黑色的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)纖維，分布在許多條淡紅色的骨骼肌纖維上。神經(jīng)纖維到達(dá)骨骼肌纖維前，分出一些爪狀的分支，每一分支的終末形成扣狀膨大，貼附在骨骼肌表面的凹槽內(nèi)，即為運(yùn)動(dòng)終板。骨骼肌纖維染成淡紅色，有不甚明顯的橫紋（圖37） 圖36環(huán)層小