HIV實(shí)驗(yàn)室SOP文件

1、成高子鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)SOP文件責(zé)任部門 檢 驗(yàn) 科文件編號(hào)SOP-MY-HIV-5版次/頁碼第1版第1次修改 第92頁 共70頁HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮艾滋病檢測(cè)在艾滋病防治工作中的作用，根據(jù)全國艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范對(duì)于艾滋病的檢測(cè)要求，我院檢驗(yàn)科設(shè)置了獨(dú)立的HIV篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)。為了使檢測(cè)工作能夠正常進(jìn)行，保證HIV檢測(cè)結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性，我們不僅對(duì)工作環(huán)境條件和檢測(cè)設(shè)施加以整改，而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，以確保HIV檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確有效。HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)配備了專用的電腦、冰箱、恒溫培養(yǎng)箱、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和安全防護(hù)用品等。根據(jù)HIV檢測(cè)

2、實(shí)驗(yàn)室工作的需要，我科配備從事HIV檢測(cè)工作人員2名，中級(jí)衛(wèi)生技術(shù)職稱人員1名，初級(jí)級(jí)衛(wèi)生技術(shù)職稱人員1名所有人員從業(yè)年限均在5年以上。并積極參加省級(jí)、市級(jí)舉辦的HIV檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)，不斷提高質(zhì)量意識(shí)、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)能力，保證HIV檢測(cè)工作的質(zhì)量。HIV篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)負(fù)責(zé)人： 郭 猛人 員：郭 猛 梁少鋒 HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序一、目的對(duì)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作全過程進(jìn)行控制，保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求，提供可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報(bào)告。二、范圍適用于本實(shí)驗(yàn)室開展的各類醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個(gè)環(huán)節(jié)。三、職責(zé)1、工作人員負(fù)責(zé)門診檢驗(yàn)樣品的采集。2、工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收。3、負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成

3、檢驗(yàn)任務(wù)，并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督。4、工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。5、報(bào)告授權(quán)審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)、發(fā)放。6、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計(jì)算機(jī))工作。四、工作程序（一）、檢驗(yàn)工作分類本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作，根據(jù)標(biāo)本的來源不同分為采樣檢驗(yàn)和送樣檢驗(yàn)，根據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)和檢驗(yàn)質(zhì)量抽檢委托復(fù)檢。（二）、委托復(fù)檢工作需按下列程序執(zhí)行：1、當(dāng)面核對(duì)標(biāo)本姓名、性別、年齡及標(biāo)本質(zhì)量等資料；2、按要求進(jìn)行檢驗(yàn)；3、必要時(shí)委托方可全程參與檢驗(yàn)過程；4、其余程序與常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本相同。（三）、采樣及樣品管理采樣執(zhí)行本科程序文件標(biāo)本采樣管理程序。樣品接收、分發(fā)和保管處理

4、，執(zhí)行本科程序文件標(biāo)本管理程序和標(biāo)本采樣管理程序。樣品一旦受理即給予受理編號(hào)。（四）、標(biāo)本檢驗(yàn)檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件標(biāo)本檢驗(yàn)管理程序和檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。（五）、檢驗(yàn)依據(jù)1、國家標(biāo)準(zhǔn)方法；2、部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)規(guī)范；3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；5、自編規(guī)程的使用執(zhí)行檢驗(yàn)方法確認(rèn)程序。（六）、檢驗(yàn)實(shí)施 檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書的要求按時(shí)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并按程序文件記錄檔案管理程序做好原始記錄。（七）、檢驗(yàn)報(bào)告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件檢驗(yàn)報(bào)告管理程序執(zhí)行。（八）、檢驗(yàn)方法控制檢驗(yàn)必須按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行，也可用經(jīng)本科技

5、術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行。其他檢驗(yàn)方法不得采用。HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖樣 品篩查試劑陽性反應(yīng)均陰性反應(yīng)初篩檢測(cè)陰性反應(yīng)原有試劑加另外一種篩查試劑重復(fù)檢測(cè)一陰一陽均陽性反應(yīng)送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)報(bào)告陰性HIV篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度一、實(shí)驗(yàn)室工作制度1、熱愛黨，熱愛社會(huì)主義，堅(jiān)持四項(xiàng)基本原則，全心全意為人民服務(wù)。2、努力學(xué)習(xí)政治，刻苦鉆研業(yè)務(wù)，發(fā)揚(yáng)救死扶傷，實(shí)行革命人道主義，對(duì)病人如親人，態(tài)度和藹，有問必答。3、熱愛本職工作，服從分配，遵守勞動(dòng)紀(jì)律，做到不遲到、不早退，不擅自離開工作崗位，不私自干私活。4、嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)章制度，盡職盡責(zé)，及時(shí)做好各項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果記錄，自覺抵制不良之風(fēng)。5、識(shí)大體，顧大局

6、，關(guān)心集體，團(tuán)結(jié)友愛，不背后議論，搬弄是非。6、講究文明禮貌、積極參加愛國衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)，美化環(huán)境，保持醫(yī)院科室整潔，安靜、大方。7、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，工作人員必須充分了解各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵照?qǐng)?zhí)行。二、崗位責(zé)任制1、崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療安全，提高工作效率的重要環(huán)節(jié)。建立崗位責(zé)任制，做到人人分工職責(zé)明確，事事有人負(fù)責(zé)，立足本職，團(tuán)結(jié)互助，相互協(xié)調(diào)，保證各項(xiàng)任務(wù)的勝利完成。2、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室由有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)。3、牢固樹立把質(zhì)量放在第一位的思想，在工作中必須加強(qiáng)檢查和復(fù)查制度，以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療安全。4、交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé)，須核對(duì)實(shí)物和記錄，對(duì)工

7、作一般情況、存在問題和注意事項(xiàng)應(yīng)進(jìn)行具體交待，否則，發(fā)生問題由交班人負(fù)責(zé)。5、職工臨時(shí)因故離開工作崗位，必須將工作委托給能勝任該項(xiàng)工作的人員，否則，發(fā)生問題由原擔(dān)任該項(xiàng)工作者負(fù)責(zé)。6、新參加工作的職工，在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位，在確能掌握經(jīng)考核合格后方可。7、建立HIV篩查實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制，其他人不得任意使用。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，不可擅自亂改設(shè)置。8、凡是一物多人使用的，除共同負(fù)責(zé)外，應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱，定期安全檢查，經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)，保持正常運(yùn)轉(zhuǎn)，該負(fù)責(zé)人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備安全的行為。9、人員職責(zé)分工：每日

8、正班人員負(fù)責(zé)樣品的采集，接收，執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，簽發(fā)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng)。副班人員負(fù)責(zé)協(xié)助正班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作，并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督，檢驗(yàn)報(bào)告的復(fù)核、發(fā)放，結(jié)果的解釋，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計(jì)算機(jī))工作。三、標(biāo)本管理制度 （一）、樣品的采集和處理艾滋病檢測(cè)最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下：1、血清樣品采集和處理（1）、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量靜脈血，室溫下自然放置12h，待血液凝固、血塊收

9、縮后再用3000r/min離心15min，吸出血清備用。（2）、如用濾紙片采樣，則手指或耳垂局部嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒，在刺破皮膚后，迅速把濾紙片沾上，切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。2、抗凝血樣品采集和處理（1）、用加有抗凝劑的真空采血管（或一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管），反復(fù)輕搖，分離血漿和血細(xì)胞備用。（2）、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽鏑D4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定可選用K3EDTA或肝素或枸櫞酸鈉，HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉。（3）、用于核酸定性檢測(cè)時(shí)，采集的抗凝全血應(yīng)在48h內(nèi)分離PBMC

10、和血漿，否則應(yīng)在2448h內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞。3、采集樣品注意事項(xiàng)（1）、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。（2）、采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸HIV感染者/艾滋?。ˋIDS）病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套。（3）、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。（4）、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。（5）、采血時(shí)一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。（6）、離心機(jī)要使用

11、密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。（二）樣品的保存1、用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品，應(yīng)存放于-20以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于2-8。2、用于抗原和核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20以下，進(jìn)行病毒RNA檢測(cè)的樣品如需保存3個(gè)月以上應(yīng)置于-80。3、用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品不能長期保存，樣品采集時(shí)間超過48h則不可檢測(cè)。（三）樣品的運(yùn)送1、實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，除特殊情況外一般不運(yùn)送全血。2、應(yīng)采用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)：第一層容器：裝樣品，要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號(hào)或受檢

12、者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與樣品分開放置。第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。3、血清和血漿樣品應(yīng)在28條件下由專人運(yùn)送。用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品應(yīng)在室溫下1823運(yùn)送。每一包裝的體積以不超過50ml為宜。4、運(yùn)送感染性材料必須有記錄。5、如分離血漿仍有困難，可直接將抗凝血-20以下凍存，采用冰壺冷藏運(yùn)輸，避免凍融。6

13、、特殊情況下如需對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè)，可以用特快專遞形式投寄，但必須按三級(jí)包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保證不會(huì)破碎和溢漏。（四）樣品的接收1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。2、核對(duì)樣品與送檢單，認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號(hào)、住院號(hào)是否與申請(qǐng)單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器消毒，同時(shí)報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。3、檢查樣品的狀況，觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況，

14、判斷標(biāo)本是否符合檢驗(yàn)要求。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。4、打開標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡，以防皮膚或粘膜污染。5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測(cè)試。6、接收樣品時(shí)應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。7、不符要求的標(biāo)本，必須及時(shí)填寫退回理由單，及時(shí)通知送樣人，說明情況，重新留取。不符要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗(yàn)后的標(biāo)本一樣進(jìn)行消毒或無害化處理后廢棄。（五）標(biāo)本檢測(cè)1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)

15、形成氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟，在檢測(cè)過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。2、在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒（六）、標(biāo)本處理 檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒劑浸泡半小時(shí)，再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。并做好登記。四、試劑管理制度（一）、采購與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購計(jì)劃，交由院領(lǐng)導(dǎo)審批，批核后由科主任與供應(yīng)商聯(lián)系進(jìn)貨。（二）、驗(yàn)收與登記倉管負(fù)責(zé)人根據(jù)供應(yīng)商提供的試劑及清單

16、對(duì)數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行驗(yàn)收，并將入庫數(shù)據(jù)登記。（三）、貯存冷藏試劑統(tǒng)一存放在HIV實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi)，冷箱保管及溫度控制由倉管負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。HIV試劑一般應(yīng)28避光保存，在有效期內(nèi)使用。（四）、出庫管理各室提出試劑申領(lǐng)，倉管人填寫出庫單據(jù)，認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫。（五）、其它1、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求存放，以保證有效期內(nèi)能有效地使用，杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。2、倉管人應(yīng)對(duì)試劑庫存定期檢查，不使用過期變質(zhì)的試劑。3、易燃，易爆試劑應(yīng)分開存放遠(yuǎn)離火源和電源。 4、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存，放保險(xiǎn)箱內(nèi)，使用時(shí)應(yīng)有兩人在場(chǎng)，并做好登記。五、環(huán)境消毒隔離制度1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔

17、區(qū)和操作區(qū)，清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線燈，排氣扇等操作區(qū)的工作臺(tái)及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染時(shí)隨時(shí)消毒，每周大掃除一次。2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺(tái)一次，采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺(tái)、桌子和地面一次，紫外線每日照射消毒二次，每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次，紫外線強(qiáng)度定期測(cè)定。3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集，送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取，不得外溢污染。4、靜脈及末稍采血，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施，靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒，所用止血帶及紙墊每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜絕交叉污染。5、一次性醫(yī)用器具包括采血針，注射器、尿杯、血

18、紅蛋白微量吸血吸管，應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記，注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對(duì)一調(diào)換，統(tǒng)一處理，其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩，操作臺(tái)和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手，必要時(shí)用消毒液浸泡雙手，酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。7、溢出試管外的血液，應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈，注意防止玻璃碎片刺傷手，并注意試管有無破裂。8、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí),用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部。9、實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本，離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程，防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。10、已檢查標(biāo)本與容器分別浸

19、泡于次氯酸鈉(2000mg/L)中兩小時(shí)后，標(biāo)本傾棄，一次性容器送焚燒，重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用，均要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理，防止污染環(huán)境。11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入。六、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施1、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施必須符合艾滋病實(shí)驗(yàn)室的通用生物安全要求。由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。2、臺(tái)面的清潔消毒，保持清潔、濕式打掃。每天開始工作前用濕布抹擦1次，地面用濕拖把擦1次，禁用干抹干掃。抹布和拖把等清潔用具實(shí)驗(yàn)室專用，不得混用，用后洗凈晾干，下班前用含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000mg/L）、0.20.5%過

20、氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高強(qiáng)度紫外線消毒器近距離照射消毒。3、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣進(jìn)行消毒與滅菌，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量控制和參考物質(zhì)，若被上述物品明顯污染，如具傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)物外溢，濺潑或器皿打破，灑落于臺(tái)面，應(yīng)立即用消毒液消毒，用5000mg/L有效氯消毒劑、過氧乙酸或乙醇灑于污染的臺(tái)面，并使消毒液浸過污染表面，保持3060 min后再擦，拖把用后浸于上述消毒液內(nèi)1h以上。4、各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理，所有廢棄物應(yīng)視為HIV污染物品，按照傳染病防治法處理。七、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒1、廢棄物處置廢棄物處

21、置應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）。從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。2、HIV常用的物理消毒方法壓力蒸汽消毒，121，保持1520min; 干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140，保持23h。3、HIV常用的化學(xué)消毒方法HIV最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯20005000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持1030 min。4、廢棄物缸：5000mg/L 次氯酸鈉。5、生物安全柜工作

22、臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇。6、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。7、污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L 次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。八、消毒液的配制及使用措施1、HIV實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持1030 min。2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行1：201：50稀釋（2000-5000mg/L）或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1：101：25（2000-5000mg/L）稀釋后，用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒。3、乙醇，俗稱“酒精”，能夠殺滅多種細(xì)菌，對(duì)HIV病毒有一定的殺滅作用，

23、7075%的效果最好。因此，使用前新鮮配置足量7075%的乙醇，用于生物安全柜、工作臺(tái)面和儀器表面的消毒，可以達(dá)到最佳的消毒效果。4、過氧乙酸也是目前使用比較廣泛的一種高效消毒劑，新鮮配置13%的過氧乙酸熏蒸，用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒。0.04%的過氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡120分鐘，再用肥皂洗手。5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，醫(yī)療器械等。6、HIV實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置，本著多用多配，少用少配，現(xiàn)用現(xiàn)配的原則，保證消毒劑使用時(shí)的濃度，保證消毒效果。九、消防安全制度1、根據(jù)“誰主管、誰負(fù)責(zé)”的原則，實(shí)行科室負(fù)責(zé)制。 2、主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對(duì)全

24、體職工經(jīng)常進(jìn)行消防安全教育，提高思想認(rèn)識(shí)，掌握消防知識(shí)和消防器材的使用。 3、嚴(yán)格執(zhí)行安全防火管理制度各種火種與易燃易爆物品，必須嚴(yán)格分區(qū)，保持一定的安全距離。實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度，通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物。 4、嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙。 5、電器的安裝與拆除，必須由電工進(jìn)行，嚴(yán)禁亂接電源，亂后電線。 6、各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施，使用時(shí)必須有專人負(fù)責(zé)，隨時(shí)檢查，消除隱患，嚴(yán)防事故發(fā)生。 7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備，應(yīng)定期進(jìn)行檢查，維修和更換，隨時(shí)處于完好狀態(tài)，并不得隨便挪動(dòng)。 8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者，必須及時(shí)向科領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告。科主任及時(shí)向院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告，及時(shí)做

25、好善事處理工作。十、生物安全防護(hù)制度1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過崗前安全與技術(shù)培訓(xùn)，取得合格證，具有獨(dú)立工作能力的人員。2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)（如對(duì)篩查陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測(cè)或檢測(cè)高危標(biāo)本）要戴防護(hù)眼鏡，防止污染暴露的皮膚和衣物。3、嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。操作過程中，不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。4、操作時(shí)可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、傳染性標(biāo)本的污染，有應(yīng)急處理的方法，有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉。5、操作中手套破損，應(yīng)立即丟棄，洗手后戴上新手套繼續(xù)操作，不慎發(fā)生瀉漏，應(yīng)立即按照發(fā)生職業(yè)暴露后的處理措施，進(jìn)行處理。6、防止腐蝕、灼傷、中

26、毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。7、實(shí)驗(yàn)操作完畢后，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序，進(jìn)行善后處理。同時(shí)記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔。8、工作結(jié)束后，應(yīng)先洗戴手套的手，然后脫去手套丟棄，再脫去工作衣，用肥皂和流動(dòng)水洗手后離開實(shí)驗(yàn)室。9、注意安全，隨手關(guān)門，做好水，電，門的安全保衛(wèi)工作，防火防盜防水。十一、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施    HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測(cè)工作過程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被艾滋病病毒感染的情況。（一）、防護(hù)措施：

27、0;  1.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立即洗手，必要時(shí)進(jìn)行手消毒。   2.在診療、護(hù)理操作過程中，有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時(shí)，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時(shí)，還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙。  3.醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴雙層手套。  4.醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療，護(hù)理操作過程中，要保證充足的光線，并特別注意防止被針頭、縫

28、合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷。  5.使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，也可使用具有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。  6.禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。（二）、處理措施：  1.用肥皂液和流動(dòng)水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。  2.如有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用肥皂液和流動(dòng)水進(jìn)行沖洗，禁止進(jìn)行傷口的局部擠壓。  3.受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如75%的酒精或者0.5%的碘伏等進(jìn)行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應(yīng)當(dāng)反復(fù)

29、用生理鹽水沖洗干凈。  4.在暴露后的0周、第四周、第八周、第十二周及六個(gè)月時(shí)抽血進(jìn)行檢測(cè)艾滋病病毒抗體。  5.預(yù)防性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始，最好在四小時(shí)內(nèi)實(shí)施，最遲不得超過二十四小時(shí)；即使超過24小時(shí)，也應(yīng)當(dāng)實(shí)施預(yù)防性用藥，連續(xù)使用28天。  6.發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評(píng)估。十二、篩查檢驗(yàn)程序1、篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑。推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評(píng)估敏感性和特異性高的試劑。2、篩查方法（1）、常用的篩查方法是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（ELISA）目前國內(nèi)外主要使用第三代（雙抗原夾心法）

30、試劑，少數(shù)使用第二代試劑。血源篩查仍以第三代ELISA為主，國際上有些國家和地區(qū)已將線性免疫酶測(cè)定（第四代ELISA試劑）用于血源篩查。第四代ELISA試劑是最近發(fā)展起來的HIV抗原抗體聯(lián)合測(cè)定試劑，可同時(shí)檢測(cè)P24抗原和抗HIV-1/2抗體。與第三代抗HIV-1/2試劑相比，檢出時(shí)間提前了49d。其優(yōu)點(diǎn)在于能同時(shí)檢測(cè)抗原抗體，降低血源篩查的殘余危險(xiǎn)度。（2）、快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè) 隨著對(duì)HIV感染者和AIDS病人抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的進(jìn)展，及對(duì)無癥狀HIV感染者提供自愿咨詢檢測(cè)（VCT）的迫切需求，簡便、快速的HIV檢測(cè)方法被廣泛應(yīng)用。常用的主要有以下幾種：、明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）：PA

31、是HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡便方法，是將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用，混勻后保溫（一般為室溫）。當(dāng)待檢樣品含有HIV抗體時(shí)，經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種，HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA試劑（AFD HIV-1/2 PA），已經(jīng)我國食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）注冊(cè)批準(zhǔn)；HIV-1、HIV-2抗原分別致敏的PA試劑（SERODIA-HIV-1/2）可初步區(qū)分HIV-1型和HIV-2型，目前我國尚未引進(jìn)。、斑點(diǎn)EIA或稱斑點(diǎn)ELISA（dot-EIA）：以硝酸纖維膜為載體，將HIV抗原滴在膜上成點(diǎn)狀，

32、即為固相抗原。加血清樣品作用，以后步驟同ELISA。陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。反應(yīng)時(shí)間在10 min以內(nèi)，使用抗原量少。、斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)：與斑點(diǎn)EIA相似，也是以硝酸纖維膜為載體。區(qū)別在于不用酶標(biāo)記抗體，而代之以紅色的膠體金（或膠體硒）A蛋白，用滲濾法作為洗滌方法。試劑穩(wěn)定，可室溫長期保存。試驗(yàn)時(shí)不需任何設(shè)備，迅速、簡便、特異性較好，敏感性約相當(dāng)于中度敏感的ELISA，適用于應(yīng)急檢測(cè)、門診急診個(gè)體檢測(cè)。目前已有在國內(nèi)被SFDA批準(zhǔn)注冊(cè)的國外進(jìn)口試劑和國內(nèi)產(chǎn)品。一般可在1030min內(nèi)判讀結(jié)果。、艾滋病唾液檢測(cè)卡：在硝酸纖維膜上包被人工合成的HIVgp41/gp3

33、6蛋白抗原，可同時(shí)檢測(cè)含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗體，原理為酶免疫間接法。主要檢測(cè)唾液中的HIV IgA與IgG抗體，敏感性特異性與ELISA相近，可避免靜脈穿刺。但樣品預(yù)處理時(shí)間長且售價(jià)較高。以唾液為樣品測(cè)定HIV抗體的ELISA、免疫印跡法（WB）試劑已經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)。、其它快速篩查試驗(yàn)方法：家庭HIV檢測(cè)（Home Access System）等。3、尿液HIV抗體檢測(cè)1996年美國FDA首次批準(zhǔn)HIV-1尿液ELISA試劑，我國也正在研制尿液HIV抗體檢測(cè)試劑。主要適用于靜脈注射毒品（IDUs）人群和其它高危人群的大面積流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)。篩查陽性者仍需采血做確認(rèn)試驗(yàn)才能確定

34、。4、篩查試驗(yàn)根據(jù)檢測(cè)目的選用符合要求的篩查試劑對(duì)樣品進(jìn)行初篩和重復(fù)檢測(cè)（復(fù)檢）。5、初篩試驗(yàn)：以第三代ELISA（雙抗原夾心法）為例。（1）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：試驗(yàn)開始前將試劑和樣品放置在室溫(1823), 按實(shí)驗(yàn)室SOP做好試劑準(zhǔn)備。磷酸鹽緩沖液：若液體內(nèi)有結(jié)晶,應(yīng)放置在37直至溶解，用蒸餾水1：25稀釋濃縮液，4保存2周。TMB底物液：使用前配制，TMB液和過氧化脲液等量混勻。1M硫酸終止液：85 ml蒸餾水中加入5 ml濃硫酸。備好試劑盒、待檢樣品和外部對(duì)照質(zhì)控血清后，按試劑盒說明書以及質(zhì)控和安全防護(hù)要求進(jìn)行篩查檢測(cè)。（2）實(shí)驗(yàn)操作、裝好所需使用數(shù)目的孔條,每孔均加入100l樣品稀釋液。設(shè)3個(gè)陰

35、性對(duì)照孔，1個(gè)HIV-1陽性對(duì)照孔，若需要可再設(shè)1個(gè)HIV-2陽性對(duì)照孔。、每孔加入50l待檢樣品及對(duì)照（對(duì)照要后加），未用孔用樣品稀釋液加滿以溶解結(jié)合物球，以免堵塞洗板機(jī)孔。可震搖15S，37±2孵育60±5min。、置洗板機(jī)上洗滌6遍（用洗液將反應(yīng)孔完全加滿,靜置3060S,共洗滌6遍，洗完后孔上方及底部不應(yīng)殘存液體,禁止在濾紙上拍干）。、每孔加入100l底物液，勿攪動(dòng)，室溫避光孵育30±2min。、每孔加入100l 1M硫酸終止反應(yīng)，充分混勻。、在2h內(nèi)置于酶標(biāo)儀讀數(shù)，單波長450nm，或雙波長450/630nm測(cè)OD值。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果、陰性對(duì)照（NC），H

36、IV-1陽性對(duì)照（PC1），HIV-2陽性對(duì)照（PC2）。NC 必須0.25方可用，排除NC0.25的值，計(jì)算NC平均值。NC界限范圍：0.6倍NC均值NC1.4倍NC均值。、符合以下條件的實(shí)驗(yàn)成立：兩個(gè)以上的NC可用。PC1-NC均值 0.4，PC2-NC均值 0.4。、Cut off值 = 陰性對(duì)照均值 + 0.100。小于Cut off為陰性，大于或等于Cut off為陽性。（4）報(bào)告：對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可由實(shí)施檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室出具HIV抗體陰性報(bào)告；對(duì)呈陽性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽性報(bào)告。6、復(fù)檢試驗(yàn)：對(duì)初篩呈陽性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)

37、。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，需送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)（見圖1）。樣 品篩查試劑陽性反應(yīng)均陰性反應(yīng)初篩檢測(cè)陰性反應(yīng)原有試劑加另外一種篩查試劑重復(fù)檢測(cè)一陰一陽均陽性反應(yīng)送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)報(bào)告陰性圖1 HIV抗體篩查檢測(cè)流程7、初篩試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告對(duì)HIV抗體篩查試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)者可出具“HIV抗體陰性”報(bào)告（可用附表1）；對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)者不能出陽性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告（附表1）。8、初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)，需要填寫“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表2），經(jīng)1名檢驗(yàn)人員和1名具有中級(jí)以上技術(shù)職稱

38、的人員審核簽字。送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室，再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。9、對(duì)篩查陰性和陽性者，均需做好檢測(cè)后咨詢。十三、檢測(cè)結(jié)果的判定方法1、HIV測(cè)定（膠體金法）結(jié)果的判定方法（1）、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反應(yīng)。（2）、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。（3）、無效：如無紅線（或只有反應(yīng)線）出現(xiàn)，表明實(shí)驗(yàn)無效，須重新檢測(cè)。2、HIV測(cè)定（ELISA法）結(jié)果的判定方法（1）、計(jì)算臨界值CO（cut-off）值。（2）、臨界值陰性對(duì)照A均值0.12（3）、正常情況下，陰性對(duì)照孔的OD值0.10（若1孔陰性對(duì)照的OD值0.1應(yīng)舍棄，若有2孔或2

39、孔以上陰性對(duì)照的OD值0.1，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。）。樣品OD值臨界值者為HIV抗體陰性。（4）、正常情況下，陽性對(duì)照孔的OD值0.80（若1孔陽性對(duì)照的OD值0.8應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陽性對(duì)照的OD值0.8，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。樣品OD值臨界值者為HIV抗體陽性。3、HIV測(cè)定（蛋白印跡法）結(jié)果的判定方法根據(jù)衛(wèi)生部1990(2)號(hào)文件的規(guī)定，蛋白印跡法的判斷標(biāo)準(zhǔn)為： （1）、陽性：至少有一條env(gp160，gp120，gp41)帶和一條pol(p65，p51，p32)帶或至少有一條env帶和一條gag(p55，p24，p18)帶或至少有一條env帶和一條gag帶，一條pol帶或至少2條env帶。（

40、2）、陰性：無病毒特異帶。（3）、可疑：一條gag帶和一條pol帶或只有g(shù)ag帶或只有pol帶。十四、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告規(guī)程1、從事HIV檢測(cè)工作的技術(shù)人員必須接受過上崗前的培訓(xùn)和定期復(fù)訓(xùn)。2、HIV檢測(cè)工作必須在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。3、初篩檢測(cè)試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、中國藥品生物制品檢定所批批檢合格且在有效期內(nèi)的試劑。4、按照全國艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范的要求建立健全質(zhì)量管理制度、實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、安全防護(hù)工作等。5、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告前應(yīng)填寫好原始實(shí)驗(yàn)記錄資料，包括試驗(yàn)日期，試驗(yàn)操作記錄，檢測(cè)樣品及空白、陰、陽對(duì)照結(jié)果，S/CO值、臨界值、試劑廠家、批號(hào)、效期，檢測(cè)人、復(fù)核人簽名等

41、。6、將試驗(yàn)結(jié)果存檔保存，處理試驗(yàn)廢物，擦凈實(shí)驗(yàn)臺(tái)，做好實(shí)驗(yàn)室消毒衛(wèi)生。7、結(jié)果報(bào)告：對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具“HIV抗體篩查報(bào)告”（見附表1）陰性報(bào)告；對(duì)呈陽性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽性報(bào)告。8、復(fù)檢試驗(yàn)：對(duì)初篩呈陽性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告“HIV抗體篩查報(bào)告”（見附表1）陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，則應(yīng)按照全國HIV檢測(cè)管理規(guī)范的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。十五、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋HIV抗體檢測(cè)的結(jié)果有三種，分別是陽性、陰性和不確定，絕大多數(shù)情況下都是陽性或陰性，出現(xiàn)不確定結(jié)果的情況很少。

42、（一）、陽性結(jié)果的解釋1、表明一個(gè)人感染了HIV，具有傳播性當(dāng)一個(gè)人HIV抗體檢測(cè)結(jié)果為陽性，表明這個(gè)人已經(jīng)感染了HIV，具有把HIV傳播給別人的可能。2、不能判斷發(fā)病與否，不能判斷疾病的進(jìn)展。HIV抗體檢測(cè)結(jié)果只能說明一個(gè)人是否感染了HIV，陽性結(jié)果并非就意味著一 個(gè)人已經(jīng)得了艾滋病，也不能說明患者處于疾病發(fā)展的哪個(gè)階段。若要判斷疾病的進(jìn)展，則要做另外的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CD4細(xì)胞記數(shù)和HIV病毒載量檢查。3、對(duì)于剛出生的嬰兒，情況則不一樣剛出生的嬰兒，不能根據(jù)其HIV抗體檢測(cè)呈陽性反應(yīng)而判斷該嬰兒感染了HIV。因?yàn)槌錾肽暌詢?nèi)的嬰兒，其抗體主要是由該嬰兒從其母體獲得，不管他(她)感染HIV與否，只要

43、其母親感染了HIV，母體內(nèi)存在HIV抗體，嬰兒出生后HIV抗體檢測(cè)-般都是陽性。如果要判斷一個(gè)嬰兒是否感染HIV，則應(yīng)該等到一歲半(1 8個(gè)月)以后再做檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果陽性時(shí)才能說明該嬰兒感染了HIV。（二）、陰性結(jié)果的解釋1、檢測(cè)者處于窗口期HIV從感染到能夠檢測(cè)出來有一段時(shí)期，這段時(shí)期稱為窗口期，窗口期一般是2周到2個(gè)月。拿到一個(gè)陰性結(jié)果，首先要確定窗口期是否已過，如果確定最后-次危險(xiǎn) 行為距抽血作檢測(cè)時(shí)已過窗口期，這時(shí)基本可以確定檢測(cè)者未感染HIV。如果窗口期末 過或者抽血化驗(yàn)之后又發(fā)生了危險(xiǎn)行為(如又共用針具或未采取保護(hù)措施的性行為)，同樣也不能確定抽血者沒有感染HIV。2、檢測(cè)者未感染

44、HIV如果檢測(cè)結(jié)果陰性，最后-次危險(xiǎn)行為又過了窗口期，那可以判定檢測(cè)未感染 HIV。（三）、不確定結(jié)果 結(jié)果不能確定是指住進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)的確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不是陰性，又夠陽性標(biāo)準(zhǔn)，界乎于陽性與陰性之間的一種結(jié)果。出現(xiàn)不確定結(jié)果一般建議過三個(gè)月后再復(fù)查，出現(xiàn)不確定結(jié)果一般有以下幾種原因：1、感染處于窗口期，從HIV進(jìn)人體內(nèi)到檢測(cè)這段時(shí)間還不夠長，因此血清還沒有形成典型的抗體反應(yīng)。2、艾滋病進(jìn)展到終末期，抗體水平下降。3、有其它原因：如某些惡性疾病，懷孕，輸血或器官移植等情況，身體會(huì)產(chǎn)生一些抗體，其反應(yīng)與HIV的某些蛋白抗體所引起的反應(yīng)相似。十六、檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存 1、實(shí)驗(yàn)原始記錄表應(yīng)按

45、實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對(duì)照、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照、外部對(duì)照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒廠家、測(cè)定方法、批號(hào)、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。2、標(biāo)本的登記收到標(biāo)本后，及時(shí)登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗(yàn)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、備注 ( 必要時(shí)記錄通信地址 )等。3、HIV陽性標(biāo)本的保存記錄包括HIV陽性標(biāo)本的類型、貯存量、貯存溫度、貯存起始時(shí)間以及標(biāo)本保管人姓名。4、文件存檔實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存15年以

46、上。并同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。十七、呈陽性反應(yīng)標(biāo)本的處理程序、對(duì)HIV抗體初篩試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)的樣品可出具“HIV抗體陰性”報(bào)告（可用附表1）；對(duì)初篩呈陽性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告“HIV抗體篩查報(bào)告”（見附表1）陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，則應(yīng)按照全國HIV檢測(cè)管理規(guī)范的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)者不能出陽性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告（附表1）。2、初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)樣品，需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)，需要填寫“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表2），經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人

47、和1名專業(yè)檢驗(yàn)人員審核簽字。送縣疾病控制中心艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送安陽市艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。3、初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)樣品，進(jìn)一步送檢、本室冰凍保存后不在需要的樣品的處置應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）。4、從HIV實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。5、所有廢棄物應(yīng)按照HIV污染物品處理。由專人按本實(shí)驗(yàn)室制定的程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。6、嚴(yán)格HIV實(shí)驗(yàn)室的廢棄物的消毒處理制度，做好登記。7、檢驗(yàn)

48、科主任定期負(fù)責(zé)檢查，操作處理不當(dāng)?shù)陌凑湛剖矣嘘P(guān)規(guī)定處罰。十八、檢測(cè)數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序1、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)應(yīng)于每季度首月5日前填寫“HIV抗體檢測(cè)數(shù)季報(bào)表”（附表6），向艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告上季度檢測(cè)情況。沒有艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室的地區(qū)可直接向艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)未設(shè)置艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室的地區(qū)每季首月5日前報(bào)告上季檢測(cè)情況艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室每季首月5日前報(bào)告上季檢測(cè)情況每季首月10日前報(bào)告上季檢測(cè)情況艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室每季首月10日前報(bào)告上季檢測(cè)情況每季首月15日前報(bào)告上季檢測(cè)情況同級(jí)衛(wèi)生行政部門省衛(wèi)生行政部門中國CDC

49、性艾中心艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室圖2 HIV抗體檢測(cè)情況季報(bào)流程2、艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將本實(shí)驗(yàn)室和本轄區(qū)內(nèi)各篩查實(shí)驗(yàn)室上季度報(bào)告的檢測(cè)情況（附表6）匯總，報(bào)告艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室。3、艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將上季度檢測(cè)情況匯總后（附表6），報(bào)告當(dāng)?shù)匕滩〈_認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和同級(jí)衛(wèi)生行政部門。4、艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)收集、整理和分析轄區(qū)內(nèi)HIV抗體檢測(cè)情況，于每季首月15日前向省級(jí)衛(wèi)生行政部門和中國疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心（簡稱中國疾控中心性艾中心）參比實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。同時(shí)，按艾滋病疫情報(bào)告的有關(guān)規(guī)定上報(bào)疫情。5、在非送檢樣品中（如專項(xiàng)調(diào)查與研究等）發(fā)

50、現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽性者，應(yīng)向所在地的省疾病預(yù)防控制中心報(bào)告, 并填寫“HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)報(bào)告單”（附表3），報(bào)中國疾控中心性艾中心參比實(shí)驗(yàn)室。6、實(shí)驗(yàn)室上報(bào)檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)，應(yīng)隨時(shí)報(bào)同級(jí)監(jiān)測(cè)人員，以便及時(shí)隨訪調(diào)查。十九、感染追蹤處理方案（一）、追蹤人群1、有明確受血或血液制品史，并排除性傳播、母嬰傳播、經(jīng)國家確證實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的艾滋病病毒抗體陽性者；2、無償獻(xiàn)血工作中發(fā)現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽性獻(xiàn)血人員。（二）、工作步驟1、對(duì)供血或受血的追訪，須以健康跟蹤服務(wù)或科研的名義進(jìn)行，系統(tǒng)體檢并采血預(yù)備有關(guān)的檢驗(yàn)。2、對(duì)發(fā)現(xiàn)的受血艾滋病病毒感染者制定詳細(xì)的個(gè)人追蹤方案，確定追蹤人員，應(yīng)有一名近期參與治療的醫(yī)生

51、參加。3、對(duì)供血者追蹤，由衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)會(huì)同采供血機(jī)構(gòu)的專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行。（三）、善后處理：對(duì)受血的艾滋病病毒感染者由縣衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)制定專人建立健康檔案，實(shí)施預(yù)防監(jiān)護(hù)、醫(yī)療照顧和管理。并定期進(jìn)行隨訪和醫(yī)療保健咨詢服務(wù)。特別必要時(shí)應(yīng)告知受血感染者有關(guān)真實(shí)情況。（四）、對(duì)HIV抗體陰性者，如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史、獻(xiàn)血漿史，或有急性流感癥狀等情況，為排除窗口期的可能，建議每3個(gè)月復(fù)查一次，連續(xù)2次。二十、保密程序制度1 、HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的所有工作人員要具有高度的保密意識(shí)。不得對(duì)無關(guān)人員透漏任何實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的信息。2、HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存與HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的

52、所有資料（包括送檢單、各種實(shí)驗(yàn)記錄、感染者檔案、報(bào)告單的發(fā)放），不得擅自修改和銷毀。未經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門許可，不得向無關(guān)人員或單位提供任何情況。嚴(yán)格遵守保密制度，杜絕泄密事件的發(fā)生。2、我院HIV實(shí)驗(yàn)室屬于篩查實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)的結(jié)果也不是最終結(jié)果，檢測(cè)到陽性結(jié)果應(yīng)及時(shí)啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，根據(jù)WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)送到上級(jí)實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步確認(rèn)。此時(shí)，不能出具HIV抗體陽性的結(jié)果報(bào)告，更不能告知受檢者本人。3、確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽性結(jié)果，以機(jī)密級(jí)向送檢單位出具陽性報(bào)告；送檢單位接到報(bào)告后，由專人負(fù)責(zé)接收，并應(yīng)及時(shí)會(huì)同醫(yī)院感染科上報(bào)縣衛(wèi)生防疫站和衛(wèi)生局。在對(duì)陽性者告知檢測(cè)結(jié)果時(shí)要先做好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢

53、。4、經(jīng)確認(rèn)的陽性標(biāo)本，包括在實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級(jí)HIV抗體確認(rèn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時(shí)間至少5年。5、當(dāng)發(fā)生職業(yè)暴露事故后，無論職業(yè)暴露事故級(jí)別的大小，對(duì)涉及的職業(yè)暴露者，均應(yīng)注意做好保密工作。任何一個(gè)得到信息的人都要做好保密工作。保密守則：1、不該說的機(jī)密絕對(duì)不說；2、不該問的機(jī)密絕對(duì)不問；3、不該看的機(jī)密絕對(duì)不看；4、不該記錄的機(jī)密絕對(duì)不記錄；5、不在非保密本上記錄機(jī)密；6、不在私人通信中涉及機(jī)密；7、不在公共場(chǎng)所和家屬、子女、親友面前談?wù)摍C(jī)密；8、不在不利于保密的地方存放機(jī)密文件資料；9、不在普通電話、明碼電話、普通郵件傳達(dá)機(jī)密事項(xiàng)；10、不

54、攜帶機(jī)密材料游覽、參觀、探親、訪友和出入公共場(chǎng)所。二十一、質(zhì)量管理制度1、根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定，開展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)的質(zhì)量控制，繪制HIV實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制圖，包括20次OD值、S、靶值、CV%值。對(duì)室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄，有每月的S、靶值、CV%值。對(duì)失控情況有糾正方法，有預(yù)防性措施。2、積極參加省臨檢中心組織的室間質(zhì)控活動(dòng)，對(duì)每次質(zhì)控評(píng)價(jià)應(yīng)有記錄。3、計(jì)量儀器應(yīng)定期校正，每年一次。4、精密分析儀器由專人負(fù)責(zé)，有使用記錄和維修記錄。5、商品化的試劑盒的申購由專業(yè)組長負(fù)責(zé)申報(bào)，每月一次報(bào)科主任審批，不得使用過期，無批準(zhǔn)文號(hào)的劣質(zhì)試劑，進(jìn)貨統(tǒng)一由科室管理，自配試劑須嚴(yán)格校正后方可使用。6、建立完整的

55、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，并應(yīng)嚴(yán)格按程序執(zhí)行。7、當(dāng)日發(fā)出的全部檢驗(yàn)報(bào)告單須經(jīng)當(dāng)日科室總值班人員嚴(yán)格審核后方可發(fā)出。8、科室在完成嚴(yán)格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時(shí)，應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量控制體系，對(duì)標(biāo)本的采集，運(yùn)送，保存等納入嚴(yán)格的管理之中。二十二、室內(nèi)質(zhì)控失控分析管理制度室內(nèi)質(zhì)控出現(xiàn)失控時(shí)，應(yīng)填寫失控報(bào)告單，并上交專業(yè)主管，由專業(yè)主管做出是否發(fā)出與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告并分析及登記失控原因。失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種因素的影響，這些因素包括操作上的失誤、試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、質(zhì)控限范圍、一次測(cè)定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等等。失控信號(hào)一旦出現(xiàn)就意味著與測(cè)定

56、質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本報(bào)告可能作廢。此時(shí)，首先要盡量查明導(dǎo)致的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例(例如5-10)的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測(cè)定結(jié)果是否可接受，對(duì)失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛?。?duì)判斷為真失控的情況，應(yīng)該在重做質(zhì)控結(jié)果在控以后，對(duì)相應(yīng)的所有失控患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定。如失控信號(hào)被判斷為假失控時(shí)，常規(guī)測(cè)定報(bào)告可以按原先測(cè)定結(jié)果發(fā)出，不必重做。當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘?hào)時(shí)，可以采用如下步驟去尋找原因：一、立即重測(cè)定同一質(zhì)控品。此步是主要是用以查明人為誤差，每一步都認(rèn)真仔細(xì)操作，以查明質(zhì)控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然誤差，則重測(cè)的結(jié)果應(yīng)控。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則可以進(jìn)行下一步操作。二、新開一瓶質(zhì)控品，重測(cè)