現(xiàn)代生物制藥技術(shù)1

1、重點名詞1、生物工程：應(yīng)用生物科學(xué)的理論、方法，按照人們設(shè)計的藍(lán)圖，改良加工生物或用生物及其制備物作為加工原料，以提供所需生物制品為人類社會服務(wù)的綜合性科學(xué)技術(shù)。2、第二代生物工程：以純種微生物發(fā)酵工藝為標(biāo)志的生物技術(shù)。3第三代生物工程：以基因工程誕生為標(biāo)志的生物技術(shù)。4、基因工程：指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)?；蚱渌d體分子，構(gòu)成遺傳物質(zhì)的新組合，并使之摻入到原先沒有這類分子寄生的細(xì)胞內(nèi)，而能持續(xù)穩(wěn)定地繁殖，并通過工程化為人類提供有用產(chǎn)品及服務(wù)的技術(shù)。5、分子克?。涸诜肿铀缴习凑杖藗冊O(shè)計的藍(lán)圖對基因進行人工操作的技術(shù)。6、載體：攜帶外源基因進入受體細(xì)胞的工具即載體。7、質(zhì)粒：在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)

2、作為與宿主染色體有別的復(fù)制子而進行復(fù)制，并且在細(xì)胞分裂時能恒定地傳遞給子代細(xì)胞的獨立遺傳因子。8、基因文庫：利用基因工程方法將某生物的全部基因幾乎都制備成克隆細(xì)胞系，這一組克隆的總?cè)o性繁殖系）叫該生物的基因文庫。9、感受態(tài)：就是細(xì)菌吸收轉(zhuǎn)化因子（周圍環(huán)境中的DNA分子）生理狀態(tài)。10、轉(zhuǎn)化：就是將攜帶某種遺傳信息的DNA分子引入宿主細(xì)胞；通過DNA之間同源重組作用，獲得具有新遺傳信息并傳遞到另一個細(xì)胞的過程。11、轉(zhuǎn)導(dǎo)：通過噬菌體或病毒的感染作用將一個細(xì)胞的遺傳信息傳遞到另一個細(xì)胞的過程。12、基因表達(dá)：指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程。13、微細(xì)胞：是某些細(xì)菌的突變株在生

3、長期間產(chǎn)生的一類微小的圓形的無核細(xì)胞，它具細(xì)胞壁及細(xì)胞膜、核糖體及能量產(chǎn)生系統(tǒng)，但不含有染色體DNA。14、HBsAg：即乙肝表面抗原，是乙型肝炎病毒表面包被的抗原。15、微生物：指一切形體微小，結(jié)構(gòu)簡單的低等生物的總稱。16、病毒：一類比細(xì)菌還小，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能營獨立生活的微生物。17、培養(yǎng)基：人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成各種代謝產(chǎn)物所需營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。18、氮源：是指構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中的氮素營養(yǎng)物質(zhì)。19、生長因素：指某些微生物在生命活動過程中必須從外界環(huán)境中攝取的某些微量有機化合物。20、防腐：一種抑菌作用，使物體內(nèi)外的微生物暫時處于不生長，不繁殖但又未死亡的

4、狀態(tài)。21、消毒：殺死或消除所有病原微生物的措施。22、滅菌：用物理或化學(xué)因子，使存在于物體內(nèi)外的所有生活微生物，永久性地喪失其生活力，包括最耐熱的芽孢。23、死亡：對微生物而言，不可逆地喪失了生長繁殖的能力，即使再放到合適的環(huán)境中也不再繁殖。24、干熱滅菌：指的高溫條件下，微生物細(xì)胞內(nèi)的各種與溫度有關(guān)的化學(xué)反應(yīng)速度增加，使微生物的致死率迅速增高的過程。25、自然選育：根據(jù)菌種自發(fā)突變而進行的菌種篩選的過程。26、原生質(zhì)體融合育種：指用人工方法強制兩個親本細(xì)胞發(fā)生融合，從而可能導(dǎo)致遺傳重組，產(chǎn)生新型的遺傳后代的技術(shù)。27、基因工程育種：指用人工方法在離體條件下得到所需的外源基因，然后把這個外源

5、基因連在載體DNA上，并引入受體細(xì)胞，從而可使受體細(xì)胞獲得外源基因的遺傳信息，并進行正常的復(fù)制，表達(dá)和遺傳。28、分批補料培養(yǎng)法：在分批式操作基礎(chǔ)上，不全部取出反應(yīng)系，剩余部分重新補充新的營養(yǎng)成分，再按分批式操作的方式進行的培養(yǎng)方法。29、種子制備：指將固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)的孢子或菌體轉(zhuǎn)到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使其大量繁殖成菌絲或菌體的過程。30、平板培養(yǎng)法：分散的植物細(xì)胞接種于含薄層固體培養(yǎng)基器皿內(nèi)培養(yǎng)的方法。31、細(xì)胞突變：指遺傳物質(zhì)在一級結(jié)構(gòu)上發(fā)生永久而能遺傳的變化。32、復(fù)蘇：深凍冷藏細(xì)胞經(jīng)化凍再培養(yǎng)的過程。33、植物原生質(zhì)體：除去纖維素外壁且具有生活力的裸體植物細(xì)胞。34、遺傳互補篩選法：利

6、用每一親本貢獻(xiàn)一個功能正常等位基因，糾正另一親本的缺陷，令雜種細(xì)胞表現(xiàn)正常功能的原理選擇雜種細(xì)胞的方法。35、抗性互補篩選法：利用親本原生質(zhì)體對抗生素、除草劑及其它有毒物質(zhì)抗性差異選擇雜種細(xì)胞的方法。36、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)：在人工控制下高密度大量培養(yǎng)有益植物細(xì)胞即植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)。37、動物細(xì)胞工程：根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)及工程學(xué)原理定向改造動物細(xì)胞遺傳性、創(chuàng)造新物種，通過工程化為人類提供名貴藥品服務(wù)的技術(shù)，稱為動物細(xì)胞工程。38、細(xì)胞塊培養(yǎng)法：將動物組織切成直徑12mm小塊，進行培養(yǎng)的方法，稱為組織塊培養(yǎng)法。39、細(xì)胞單層培養(yǎng)法：動物組織塊經(jīng)消化分散成單個細(xì)胞或細(xì)胞團塊后，粘附于培養(yǎng)容器表面培養(yǎng)

7、成新生細(xì)胞單層的培養(yǎng)法，稱為細(xì)胞單層培養(yǎng)法。40、動物體細(xì)胞雜交技術(shù)：在外力作用下，令兩個或兩個以上異源細(xì)胞合并為一個多核細(xì)胞的過程，稱為動物體細(xì)胞雜交技術(shù)。41、核體：細(xì)胞核連同其外表薄層細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成的顆粒稱為核體。42、胞質(zhì)體：不具有細(xì)胞核的細(xì)胞稱為胞質(zhì)體。43、微核雜種細(xì)胞：按完整細(xì)胞之間的融合方式，將微核與另一完整細(xì)胞融合，使后者獲得另一種細(xì)胞中的若干個染色體，所獲融合子稱為微核雜種細(xì)胞。44、抗藥性篩選系統(tǒng)：利用生物細(xì)胞對藥物敏感性差異篩選雜種細(xì)胞的方法。45、營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞：在一些營養(yǎng)物質(zhì)的合成能力上出現(xiàn)缺陷，因此必須在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的有機成分才能正常生長的變異細(xì)胞。46、營養(yǎng)

8、互補選擇法：利用兩種親本細(xì)胞營養(yǎng)互補作用原理篩選雜種細(xì)胞的方法稱為營養(yǎng)互補選擇法。47、雜交瘤技術(shù)：骨髓瘤細(xì)胞與免疫淋巴細(xì)胞融合制備的雜種細(xì)胞稱為雜合瘤。48、微載體培養(yǎng)法：將細(xì)胞吸附于微載體表面的培養(yǎng)方法。49、酶工程：應(yīng)用酶的特異性催化功能并通過工程化為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品及提供有益服務(wù)的技術(shù)為酶工程。50、酶：生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質(zhì)稱為酶。51、固定化細(xì)胞：被限制或定位于特定空間位置的細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。52、載體結(jié)合法：將細(xì)胞懸浮液直接與水不溶性載體相結(jié)合的固定化方法。53、包埋法：將細(xì)胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的技術(shù)稱為包埋法。54、偶聯(lián)效率：偶聯(lián)固定化反應(yīng)過程中載體結(jié)合蛋白質(zhì)的能力稱

9、為偶聯(lián)效率。55、酶活力：酶類催化特定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力。56、固定化反應(yīng)的酶活力回收率：固定酶所顯示的活力與加入偶聯(lián)液中酶總活力的比值稱為固定化反應(yīng)的酶活力回收率。57、酶試劑盒：將酶、反應(yīng)試劑、穩(wěn)定劑、激活劑、填充劑、及緩沖劑等配成檢測用的混合制劑稱酶試劑盒。58、細(xì)胞因子：是人類或動物的各類細(xì)胞分泌的具有多樣生物活性的因子，是可溶性物質(zhì)，是一組不均一的蛋白質(zhì)分子，能調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與分化。59、白細(xì)胞介素：由白細(xì)胞或其它體細(xì)胞產(chǎn)生的又在白細(xì)胞間起調(diào)節(jié)作用和介導(dǎo)作用的因子。60、IL-10：由TH2細(xì)胞產(chǎn)生，能抑制TH1細(xì)胞合成細(xì)胞因子的能力，是一種糖蛋白。61、腫瘤壞死因子：是一種由

10、巨噬細(xì)胞分泌能產(chǎn)生細(xì)胞毒，使腫瘤細(xì)胞溶解的因子。62、干擾素：是一類在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì)，其活性的發(fā)揮又受細(xì)胞基因組的調(diào)節(jié)和控制，涉及RNA和蛋白質(zhì)的合成。63、集落刺激因子：CSF為一組糖蛋白物質(zhì)，由淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞自然產(chǎn)生，有刺激紅細(xì)胞系以外造血細(xì)胞增殖和分化的作用。64、超誘導(dǎo)：是指細(xì)胞在某種大分子合成抑制物的適當(dāng)作用下，誘生蛋白合成增加的現(xiàn)象。65、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑：是生物體體內(nèi)的某些細(xì)胞和某些分子，它們既是機體對內(nèi)外環(huán)境刺激應(yīng)答的效應(yīng)機制，也是機體維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定因素。非重點名詞66、第一代生物工程：以非純種微生物自然發(fā)酵工藝為標(biāo)志的生物技術(shù)。67、科斯質(zhì)粒：一種由

11、人工構(gòu)建的含有噬菌體粘性末端及質(zhì)粒復(fù)制子的雜種質(zhì)粒。68、酶促合成法：以某一目的基因的mRNA為模板，用逆轉(zhuǎn)錄酶合成其互補DNA，再進而合成雙鏈DNA的方法。69、體外重組：就是將目的DNA分子與載體DNA在DNA連接酶的作用下連接成重組DNA分子。70、hGH：是人腦下垂體前葉分泌的由191個氨基酸組成的蛋白質(zhì)類激素，分子量為22KD，可促進人及動物的生長。71、微生物工程：在應(yīng)用微生物中，所有通過微生物培養(yǎng)而生產(chǎn)的對人類有益的產(chǎn)品或提供服務(wù)的技術(shù)。72、碳源：凡是用于構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳素的營養(yǎng)物質(zhì)。73、誘變育種：指用物理、化學(xué)因素處理微生物細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)上發(fā)生變化

12、，從而導(dǎo)致微生物遺傳性狀的改變，根據(jù)育種的目的要求，挑選出有價值的變異菌株的技術(shù)。74、植物細(xì)胞工程：根據(jù)生物學(xué)原理及工程學(xué)原理定向改造植物細(xì)胞遺傳性，利用植物細(xì)胞為人類生產(chǎn)名貴藥品提供服務(wù)的技術(shù)。75、植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：在一定條件下，通過人工供給營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子，令離體植物細(xì)胞生長繁殖的方法。76、懸浮培養(yǎng)法：游離植物細(xì)胞懸浮于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的方法。77、直接篩選法：利用選擇條件下細(xì)胞突變體可優(yōu)先生長的新表型或感觀上可測定的差異進行選擇的方法。78、植物細(xì)胞融合：在外界因素作用下，令兩個或兩個以上植物細(xì)胞合并成一個多核細(xì)胞的過程。79、微室培養(yǎng)法：此為懸浮單細(xì)胞接種于凹玻片或玻璃環(huán)與蓋玻

13、片組成的微室內(nèi)固體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)方法。80、利用生長特性篩選法：利用原生質(zhì)體對培養(yǎng)基成分要求與反應(yīng)的差異選擇雜種細(xì)胞的方法稱為利用生長特性篩選法。81、半連續(xù)培養(yǎng)法：在反應(yīng)器中投料和接種，培養(yǎng)一段時間后，將培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液進行交換的培養(yǎng)方法，稱為半連續(xù)培養(yǎng)法。82、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：在一定條件下，通過人工供給營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子，使離體動物細(xì)胞或組織生長繁殖的方法，稱為動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。83、單細(xì)胞分離培養(yǎng)：動物組織分散后，將其單個細(xì)胞培養(yǎng)成純系細(xì)胞集群的技術(shù)，稱之為單細(xì)胞分離培養(yǎng)。84、確立細(xì)胞株：正常細(xì)胞在移植繼代過程中，有些細(xì)胞增殖力突然增強，在特定條件下可無限繁殖，與初代細(xì)胞相比，其形

14、態(tài)、生理生化特性，病毒敏感性，抗原性及染色體結(jié)構(gòu)均發(fā)生變化，具有致癌性，這些細(xì)胞稱為確立細(xì)胞株。85、雜合瘤：骨髓瘤細(xì)胞與免疫淋巴細(xì)胞融合制備的雜種細(xì)胞稱為雜合瘤。86、固定化酶：限制或定位于特定空間位置的酶稱為固定化酶。87、酶比活：指每毫克酶蛋白所表現(xiàn)的活力。88、IL-3：即白細(xì)胞介素3，由激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，能刺激多能造血干細(xì)胞和各系細(xì)胞的分化和增殖，促進和維持肥大細(xì)胞的增殖，增殖中性粒細(xì)胞、酸性粒細(xì)胞的活性，促進NK細(xì)胞殺傷實體瘤的活性。89、IL-12：是由B淋巴細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，分子量為75KD的糖蛋白，其主要作用是促進PHA活化的PBMC增殖以及亞適劑量IL-2協(xié)同促進

15、作用。重點知識2、在現(xiàn)代生物工程中，基因工程是定向改造生物遺傳性的主導(dǎo)性技術(shù)。3、現(xiàn)代生物工程根據(jù)操作對象及目的，可分為基因工程、微生物工程、細(xì)胞工程、酶工程等。4、細(xì)胞融合是改造生物遺傳性的重要途徑。5、原始生物工程以非純種微生物自然發(fā)酵工藝為標(biāo)志。6、近代生物工程是采用純種微生物的發(fā)酵工藝。1、基因工程是在發(fā)現(xiàn)細(xì)菌限制性核酸內(nèi)切酶、DNA重組及DNA順序分析獲得成功基礎(chǔ)發(fā)展和成熟的。6、重組DNA技術(shù)通常包括：載體的選擇和制備，目的基因的分離純化。目的基因與載體的重組，重組體的轉(zhuǎn)化、重組克隆的篩選、基因表達(dá)與產(chǎn)物純化。7、質(zhì)粒是指能在細(xì)胞內(nèi)寄生和復(fù)制的復(fù)制子。8、質(zhì)粒的復(fù)制不受宿主染色體控

16、制。9、質(zhì)粒為雙鏈閉合環(huán)狀DNA分子。12、根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)胞中拷貝數(shù)的不同，可把質(zhì)粒分為松馳型質(zhì)粒和嚴(yán)緊型質(zhì)粒。13、嚴(yán)緊質(zhì)粒大多為具有自身傳遞能力的大質(zhì)粒。14、分子量較大，自身傳遞是嚴(yán)緊型質(zhì)粒的特點。16、基因工程中使用的質(zhì)粒都是松馳型質(zhì)粒。17、松馳型質(zhì)粒可被氯霉素擴增。18、細(xì)菌收獲可通過離心進行。19、細(xì)菌裂解可采用：非離子型或離子型去污劑，有機溶劑，堿處理及加熱處理。 20、噬菌體長約48.5kb。21、野生型噬菌體為雙鏈線形分子，具有12個堿基的粘性末端，進入大腸桿菌之后可以互補成環(huán)。22、噬菌體既可溶菌生長，又可溶源生長。23、噬菌體適于克隆大片段DNA及組建原核基因文庫。24、

17、科斯質(zhì)粒是一種人工質(zhì)粒。26、M13噬菌體是一種單鏈DNA噬菌體。27、M13噬菌體只能感染雄性大腸肝菌。28、M13噬菌體形成渾濁斑。29、汞離子可以特異地與dA、dT結(jié)合。30、目前分離目的基因的方法主要有直接分離法，構(gòu)建基因文庫法，酶促合成法及化學(xué)合成法。31、構(gòu)建基因文庫法主要應(yīng)用于原核生物。32、酶促合成法主要應(yīng)用于真核生物。33、酶促合成法的前提是必須首先得到該目的基因的mRNA。34、化學(xué)合成法必須已知該基因的核苷酸順序或蛋白質(zhì)的氨基酸序列。36、大腸桿菌DNA連接酶以NAD為輔因子。37、T4DNA連接酶以ATP為輔因子。38、T4DNA可以催化DNA-DNA，DNA-RNA，

18、RNA-RNA，雙鏈DNA的粘末端或鈍端連接。39、大腸桿菌DNA連接酶只能催化DNA雙鏈的單鏈缺口和帶粘性末端的雙鏈DNA。40、TDT即末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶。41、DNA連接酶的最適溫度37。42、連接反應(yīng)溫度應(yīng)介于催化反應(yīng)與末端粘合之間。46、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)只能轉(zhuǎn)導(dǎo)宿主染色體上少數(shù)基因。47、普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)宿主染色體上任何基因。48、-半乳糖基因插入失活法的重組質(zhì)粒產(chǎn)生白色菌落。50、動植物病毒也可作為外源基因的載體。51、目的基因重組克隆的篩選方法包括：根據(jù)重華麗體表型篩選，重組體結(jié)構(gòu)分析法，檢測目的基因法及檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)的法。52、原核生物中基因表達(dá)以操縱子形式進行。53、原核生物細(xì)胞沒

19、有核膜，因此表達(dá)過程中的轉(zhuǎn)錄與翻譯往往同時進行。54、原核生物的mRNA.在翻譯完畢之后，隨即被水解掉。55、真核生物轉(zhuǎn)錄成不均一RNA之后，還需加工，如去掉內(nèi)含子，修飾5末端和3末端。56、基因工程中基因表達(dá)的研究，是指外源基因在某一種細(xì)胞中的表達(dá)活動。57、大腸桿菌，酵母與哺乳動物細(xì)胞三大基因表達(dá)體系已成為當(dāng)前基因工程工業(yè)性生產(chǎn)的核心。58、基因表達(dá)全盛功能蛋白的基本條件是依賴于基因的有效轉(zhuǎn)錄，mRNA正確的轉(zhuǎn)譯和轉(zhuǎn)譯后的加工。59、閱讀框架是由起始密碼子決定的。60、用于保證目的基因處于正確的閱讀框架中的方法有；用人工接頭調(diào)節(jié)閱讀框架；構(gòu)建一組適合不同閱讀框的載體。62、基因的高效表達(dá)必

20、須領(lǐng)帶一個強的啟動子。64、對已知功能的基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測，可以彩蛋白質(zhì)電泳，免疫擴散和凝集，酶聯(lián)免疫和放射免疫等方法。67、微細(xì)胞不含有染色體DNA。68、HBsAg是指乙肝表面抗原。69、hGH是指人生長激素。70、hGH可以治療侏儒癥，促進燒傷及骨折等創(chuàng)傷性組織的恢復(fù)。2、細(xì)菌為單細(xì)胞原核生物。3、常用工業(yè)微生物主要有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、大型真菌和病毒。4、工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用最多的細(xì)菌為桿菌。6、細(xì)菌大小一般為110m之間。9、酵母菌的主要繁殖方式為芽殖。10、霉菌為多細(xì)胞真核生物。11、病毒的復(fù)制包括吸咐、侵入、脫殼、生物合成、裝配與釋放五個階段。12、培養(yǎng)基的組成對菌體生長繁殖、

21、產(chǎn)物生物合成、產(chǎn)品的分離精制以及產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量都有重要影響。13、培養(yǎng)基的原材料包括碳源、氮源、無機鹽、水和生長因子等五大類。14、碳源在微生物細(xì)胞內(nèi)的主要功能是構(gòu)成細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)，供給能源及為次生代謝提供原料。15、氮源的生理功能主要是作為合成細(xì)胞原生質(zhì)、生理活性物質(zhì)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)和某些代謝產(chǎn)物的原料。16、無機鹽和微量無素的主要生理功能是某些生理活性物質(zhì)和組成成分，參與細(xì)胞滲透壓，氫離子濃度，氧化還原電位的調(diào)節(jié)等。17、水常以游離狀態(tài)和結(jié)合狀態(tài)存在于生物體內(nèi)。18、水的主要生理功能是參與代謝反應(yīng)，作為反應(yīng)的介質(zhì)，提供氫、氧元素；參與物質(zhì)運輸；傳遞熱量，調(diào)節(jié)體溫。19、培養(yǎng)基中的生長因素的主

22、要功能是作為酶的重要組成成分。22、紫外線殺菌最有效波長為2537Å。23、干熱滅菌主要用于器械、容器的滅菌。27、誘變育種的誘變因素主要分物理、化學(xué)和生物學(xué)三類。28、誘變育種整個過程就是誘變和篩選的重復(fù)。29、通過基因工程改造后的菌株稱為工程菌。30、斜面低溫保藏微生物菌種是利用低溫短期保存菌種方法。31、液體石蠟封存法保存菌種不適用于能利用石蠟的微生物。32、砂土管保存菌種的方法僅適用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌以及產(chǎn)芽孢的細(xì)菌。33、冷凍干燥保存法適用于各種菌種的保存。37、液體表面培養(yǎng)法的優(yōu)點就是簡單易行，投資少及適用于小型生產(chǎn)。38、液體深層培養(yǎng)法又可分為需氧深層培養(yǎng)和厭氧深層

23、培養(yǎng)。39、深層勇氣培養(yǎng)是在純種條件下，強制通入無菌空氣到密閉發(fā)酵罐中進行培養(yǎng)的方式。40、在分批培養(yǎng)過程中，細(xì)胞生長大致有四個階段：遲滯期；對數(shù)生長期；平衡期；死亡期。42、碳源豐富造成的生理酸性營養(yǎng)環(huán)境不利于放線菌孢子形成。43、一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)放線菌孢子形成。44、霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麥皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。45、細(xì)菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。46、微生物培養(yǎng)與培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度、pH值，溶解氧、培養(yǎng)時間、泡沫、CO2、菌濃及產(chǎn)物濃度等有關(guān)。47、微生物培養(yǎng)的溫度應(yīng)略低于微生物生長的最適溫度。48、大多數(shù)細(xì)菌適于中性或

24、微堿性環(huán)境，放線菌喜微堿性，而酵母菌和霉菌則喜酸性。49、發(fā)酵液的需氧量，受菌體濃度，基質(zhì)的種類和濃度以及培養(yǎng)條件等因素的影響。51、細(xì)菌和放線菌主要采用溶菌酶制備原生質(zhì)體。52、對于酵母菌和霉菌原生質(zhì)體的制備，則一般采用蝸牛酶和纖維素酶。53、高滲培養(yǎng)基稱為原生質(zhì)體穩(wěn)定液。54、一般原生質(zhì)體融合選用40006000分子量的聚乙二醇較好。55、影響原生質(zhì)體再生的因素主要有菌種的特性，原生質(zhì)體制備條件，再生培養(yǎng)基成份，再生培養(yǎng)條件等。57、放線菌原生質(zhì)體融合中相關(guān)培養(yǎng)基為SI培養(yǎng)基，GPYG培養(yǎng)基，P3培養(yǎng)基，PWP液，P培養(yǎng)基，R2培養(yǎng)基及R3培養(yǎng)基。58、R2、R3培養(yǎng)基屬于放線菌原生質(zhì)體再

25、生培養(yǎng)基。60、氫化可的松屬于糖皮質(zhì)激素，臨床上主要用于抗炎、抗過敏等。3、植物細(xì)胞生長的最適pH通常為5.86.0。7、植物細(xì)胞單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有平板培養(yǎng)法，微室培養(yǎng)法、看護培養(yǎng)法等。12、人工誘發(fā)植物細(xì)胞突變的化學(xué)因素主要有堿基類似物、烷化劑、抗生素等。18、超低溫深凍保存法系將植物種質(zhì)于-196的液氮中保存。19、常用的冰凍保護劑有DMSO，甘油，PEG，葡萄糖、山梨糖及蔗糖。20、為提高存活力，凍存材料應(yīng)選用抗寒力強的幼齡培養(yǎng)細(xì)胞。23、對于木本植物冬芽凍存物需于0慢速化凍。25、再培養(yǎng)法是檢查細(xì)胞活力的根本方法。26、植物原生質(zhì)體制備的材料應(yīng)用較多的是葉片，愈傷組織及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。27

26、、高等植物細(xì)胞壁主要成分為纖維素，其次為半纖維素、果膠質(zhì)及蛋白質(zhì)。28、植物原生質(zhì)體制備時的脫壁酶有纖維素酶，果膠酶，半纖維素酶，蝸牛酶及崩潰酶。29、纖維素酶使用時的pH值為5.4。31、纖維素酶及果膠酶混合使用的pH值為5.45.6之間。32、脫壁酶液采用0.45m微孔濾膜過濾除菌。33、純化植物原生質(zhì)體的方法有離心法、飄浮法、界面法及滴洗法。38、植物細(xì)胞融合實質(zhì)是其原生質(zhì)體融合。39、PEG誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合時，關(guān)鍵是PEG作用時間。40、PEG誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合時，PEG規(guī)格和純度影響結(jié)果。41、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的目的在于通過規(guī)模培養(yǎng)，獲得細(xì)胞，初級及次級代謝產(chǎn)物，為藥品、食品及化工行

27、業(yè)提供服務(wù)。43、動物細(xì)胞工程的內(nèi)容十分廣泛，包括人工受精、胚胎移植、體外受精、性別選擇、細(xì)胞融合等。44、原代動物培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡。45、動物細(xì)胞所需營養(yǎng)要求高，其碳源不可為無機物。48、動物細(xì)胞培養(yǎng)基的維持液含低濃度或不含小牛血清，生長液含5%20%的小牛血清。51、細(xì)胞培養(yǎng)又分初代培養(yǎng)，二倍體細(xì)胞培養(yǎng)及確立細(xì)胞株培養(yǎng)。52、動物細(xì)胞培養(yǎng)材料來源有胚胎及成體的組織和器官。53、人皮膚細(xì)胞分散較難，適宜于用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)。54、組織塊培養(yǎng)法又分為血漿凝固培養(yǎng)法，膠原固著培養(yǎng)法及無基質(zhì)固著培養(yǎng)法。55、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件一般為37，5%CO2。56、小牛血清可以保護動物細(xì)胞免受

28、胰酶的消化。57、動物細(xì)胞培養(yǎng)時通入CO2以維持培養(yǎng)基的pH值。58、正常組織原代單層細(xì)胞不能無限期繁殖。62、影響二倍體細(xì)胞培養(yǎng)的因素主要是分種率，繼代壽命及pH值等。67、超低溫法是保存種質(zhì)細(xì)胞最有效和最重要的方法。68、甘油使用濃度一般為5%20%。69、DMSO使用濃度一般為5%12.5%。72、完整細(xì)胞間融合是擴大生物變異的有效手段。74、完整細(xì)胞間的融合是擴大生物變異的有效手段。75、在細(xì)胞融合時，完整細(xì)胞一方相當(dāng)于一個微型反應(yīng)器。78、篩選的目的是獲得性能優(yōu)良的雜種細(xì)胞。79、雜種動物細(xì)胞篩選系統(tǒng)及方法有HAT選擇系統(tǒng)，抗藥性篩選系統(tǒng)，互補選擇法，原位雜交法及基因探針選擇法。81

29、、HPRT即次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶。85、免疫反應(yīng)分體液免疫與細(xì)胞免疫。86、B淋巴細(xì)胞與體液免疫有關(guān)。87、T淋巴細(xì)胞主要與細(xì)胞免疫有關(guān)。88、免疫淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生抗體。90、單克隆抗體生產(chǎn)方法分體外法及體內(nèi)法兩種。93、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)法適用于培養(yǎng)確立細(xì)胞株、雜交瘤細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、血液細(xì)胞及淋巴細(xì)胞。94、細(xì)胞固定化方法有吸附和包埋法95、微載體培養(yǎng)優(yōu)點在于兼有固定化培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng)的雙重特點。96、組織纖維溶酶原激活劑是一種絲氨酸蛋白酶。97、抗乙型肝炎表面抗原單克隆抗體是專一性識別HBsAg的單一抗體。1、酶工程主要是研究酶在工業(yè)、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域中的應(yīng)用。2、酶是生物體產(chǎn)生的具有催化活性

30、的蛋白質(zhì)。3、酶工程的主要內(nèi)容包括：酶的發(fā)酵生產(chǎn)，酶的分離純化，酶的分子修飾，酶和細(xì)胞固定化，酶反應(yīng)器。4、酶在一定條件下僅能影響化學(xué)反應(yīng)速度，而不改變化學(xué)反應(yīng)平衡點。5、酶工程的核心內(nèi)容是酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)。7、固定化酶偶聯(lián)效率的測定方法有殘留法和水解法。10、管狀固定化酶稱為酶管。11、固定化酶操作穩(wěn)定性的表示方法為半衰期。15、利用固定化黃色短桿菌可以生產(chǎn)L-蘋果酸。16、包埋法固定酶可利用的載體是硅膠等。17、交聯(lián)法可用于制備固定化酶，戊醛不能作為交聯(lián)劑。24、酶珠、酶塊、酶片都屬于顆粒狀固定化酶。27、當(dāng)酶固定化后，對于高分子底物的活性變小。28、酶固定化后其反應(yīng)最適pH值可能變大

31、，也可能變小。30、SOD屬于消炎酶類。31、可治療腫瘤的酶有L-天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶、羧基肽酶、L-精氨酸酶等。32、現(xiàn)在固定化酶的物理形狀有酶膜、酶管、酶纖維、微囊、顆粒狀等。35、用共價結(jié)合法固定酶時，常用載體有纖維素、淀粉、尼龍等。38、交聯(lián)法制備固定化酶包括交聯(lián)酶法、酶與輔助蛋白交聯(lián)法、吸附交聯(lián)法及載體交聯(lián)法。43、固定化酶稱為第二代酶。44、固定化生長態(tài)細(xì)胞、多酶體系及固定化輔酶稱為第三代酶。45、酶作為一種催化劑，只能改變化學(xué)反應(yīng)速度而不能改變化學(xué)平衡。46、吸附法制備固定酶時，酶與載體間結(jié)合力不強，酶易于脫落。50、固定化酶相對活力與單位載體上偶聯(lián)酶量有關(guān)，偶聯(lián)量少，相對活力

32、高53、大多數(shù)天然酶經(jīng)固定化后對蛋白酶的耐受力增高。55、細(xì)胞固定化后其最適溫度通常與游離細(xì)胞相同。56、大多數(shù)天然酶固定化后其Vm與天然酶相同或接近。57、天然酶固定化后其Km值均發(fā)生變化，有的變化很小，有的增加很多，但均不會變小。58、固定化的pH-酶活性曲線與游離酶相比，或保持相同的鐘罩形，或變得更陡，或變得更平坦。59、固定化酶半衰期達(dá)到一個月以上時，即具有工業(yè)應(yīng)用價值。60、固定化酶的底物專一性有所改變。61、界面聚合法包埋酶屬化學(xué)制備法，而界面沉降法則屬于簡單的物理方法。62、固定化生長態(tài)細(xì)胞通常用包埋法。63、迄今從生物界發(fā)現(xiàn)的酶的種類有3,000多種。64、細(xì)胞的固定化方法有吸

33、附法，包埋法，交聯(lián)法及共價結(jié)合法。2、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的中心成份是IL-1。3、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵成份是IL-6。4、IL-1的生物學(xué)活性表現(xiàn)于激活T或B淋巴細(xì)胞。5、IL-3由激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。6、淋巴細(xì)胞生成素I是指IL-7。7、細(xì)胞歷子合成抑制因子是指IL-10。8、IL-12是由B淋巴細(xì)胞分泌的。9、TNF是指腫瘤壞死因子。12、EPO的主要代謝器官是肝臟。16、干擾素的受體主要存在于細(xì)胞膜。18、粒細(xì)胞集落刺激因子是一種糖蛋白。22、LT即淋巴細(xì)胞毒素。23、TNFR是指腫瘤壞死因子受體。25、根據(jù)等電點的不同將IL-1分為，型。26、聯(lián)合化療中，TNF與IFN-可發(fā)揮顯著協(xié)同作用。

34、27、IFN主要在外周血單核細(xì)胞中誘生。28、IFN可抑抑制細(xì)胞生長，通常使細(xì)胞停止于細(xì)胞周期中的G1期。29、集落刺激因子的縮寫是CSF。30、紅細(xì)胞生成素來源于腎臟。32、刺激紅細(xì)胞生成素生成的關(guān)鍵因素是機體的缺氧。34、干擾素屬于蛋白類。36、干擾素中，純化后最穩(wěn)定的是IFN。37、干擾素的受體主要存在于細(xì)胞膜中。38、白介素-2的生物學(xué)作用主要是刺激細(xì)胞增生。39、酵母屬于真核生物，大腸肝菌，放線菌及蘭細(xì)菌等屬于原核生物，但它們均為單細(xì)胞生物。40、NK細(xì)胞能耐受射線照射，而CTL細(xì)胞，K細(xì)胞，LAK細(xì)胞等均不同耐受射線的照射。41、CTL細(xì)胞對射線照射最為敏感。42、B細(xì)胞具有表面球

35、蛋白，而T細(xì)胞、NK細(xì)胞、K細(xì)胞表面則不具有表面球蛋白。43、T細(xì)胞具有形成玫瑰花結(jié)的能力。44、TNF對蛋白酶最為敏感。46、細(xì)胞因子使用的最終效應(yīng)部位在細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)。49、IL-8可來源于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、T細(xì)胞等。50、IFN的蛋白產(chǎn)物包括IFN-，IFN-及IFN-。51、IFN-在成纖維細(xì)胞中誘生。52、IFN-由有絲分裂原誘生。55、EPO的主要來源為腎小管，腎間質(zhì)細(xì)胞。56、可導(dǎo)致EPO生成增加的因素包括高原氣候、冠心病、肺心病、溶血性貧血等。57、細(xì)胞因子研究發(fā)展前景包括細(xì)胞因子的加工改造，細(xì)胞因子的受體及其免疫調(diào)節(jié)的信息傳遞，細(xì)胞因子基因表達(dá)的

36、調(diào)控，分子水平上了解在疾病治療中的作用以及作為有效的免疫佐劑。58、天然干擾素是一種糖蛋白。59、干擾素對蛋白酶敏感。60、干擾素可導(dǎo)致病毒繁殖中斷。61、干擾素具有廣泛的抗病毒活性。64、人白細(xì)胞干擾素制劑的半成品檢定包括比活性測定、無菌試驗、余毒試驗、安全試驗及硫氰酸鉀殘余量檢測。65、干擾素制劑大劑量使用的最佳途徑是批注、皮下注射。66、干擾素制劑的局部用藥多采用噴霧、貼敷、滴鼻。73、糖基成份對細(xì)胞因子活性影響不大。74、IL-1與IL-1可識別相同的受體。75、LPS可誘導(dǎo)單核細(xì)胞但不能誘導(dǎo)皮膚纖維母細(xì)胞產(chǎn)生IL-8。76、去除糖鏈后IL-10的抗原性不受影響。83、高原居民的EPO

37、生成增加。非重點知識點1、發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過程是微生物作用的結(jié)果的人是巴斯德。2、DNA順序分析技術(shù)，為基因結(jié)構(gòu)分析，基因圖譜制備及基因合成提供了重要分析手段。3、基因工程最大特點是打破生物種屬界限，進行種屬內(nèi)外基因重組，遺傳信息交換和轉(zhuǎn)移。4、基因工程為現(xiàn)代生物工程主體，也為當(dāng)代生物科學(xué)的生長點。5、基因重組技術(shù)也稱重組DNA或分子克隆。10、質(zhì)?？煞譃樽陨韨鬟f性質(zhì)粒和非自身傳遞性質(zhì)粒。11、雄性大腸桿菌表面的性纖毛是一種接合質(zhì)粒形成的表面物質(zhì)。15、分子量較小，不具自身傳遞性是松馳型質(zhì)粒的特點。25、科斯質(zhì)粒是克隆大片段DNA及組建真核基因文庫的有效手段。35、DNA連接酶可催化DNA鏈的5-磷酸

38、基與另一條DNA鏈的3-羥基生成磷酸二酯鍵。43、根據(jù)受體系統(tǒng)不同，基因工程可分為微生物基因工程、動物基因工程和植物基因工程。44、關(guān)于感受態(tài)本質(zhì)的假說包括局部原生質(zhì)體化假說及酶受體假說。45、大腸桿菌感受態(tài)的制備方法包括Hanahan法，氯化鈣法及電轉(zhuǎn)化法。49、不帶-半乳糖苷酶活性蛋白的菌落中央也可出現(xiàn)淡藍(lán)色斑點。61、基因的表達(dá)受到啟動子等調(diào)控元件的控制。63、適當(dāng)?shù)膯幼?，只能保證目的基因的正確轉(zhuǎn)錄，而并不能保證基因的完全正確表達(dá)。65、對未知目的基因功能表達(dá)產(chǎn)物的檢測方法是在攜帶有重組體分子的細(xì)胞中尋找新合成的蛋白質(zhì)。66、應(yīng)用大細(xì)胞系統(tǒng)檢測基因表達(dá)時，主要是利用質(zhì)?；蜉d體擴增的途徑

39、。1、發(fā)酵工程包括天然微生物培養(yǎng)過程和人工控制培養(yǎng)過程兩種方法。5、螺旋菌根據(jù)其彎曲情況不同可分為弧菌和螺旋菌。7、放線菌菌絲分為基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲。8、放線菌最大的經(jīng)濟價值是產(chǎn)生抗生素。20、化學(xué)物質(zhì)滅菌只適用于局部空間或某些器械消毒。21、用于輻射滅菌的射線有X射線，y射線和紫外線。24、濕熱滅菌是直接采用蒸汽滅菌。25、工業(yè)微生物選育的目的是改良菌種的特性，使其符合工業(yè)生產(chǎn)的要求。26、工業(yè)微生物選育的方法主要有自然選育、誘變育種、雜交育種、原生質(zhì)體融合育種、基因工程育種技術(shù)。34、超低溫保藏菌種的方法適用于各種菌種，其操作要點在于慢凍速融。35、工業(yè)微生物細(xì)菌的培養(yǎng)方法有表面培

40、養(yǎng)法、深層培養(yǎng)法、透析法和萃取培養(yǎng)法。36、微生物細(xì)胞的液體表面培養(yǎng)方法都是氣體在基質(zhì)表面上進行交換。41、連續(xù)培養(yǎng)法的優(yōu)點是設(shè)備利用率高，缺點是易于染菌。50、供融合用的親株要求性能穩(wěn)定并帶有遺傳標(biāo)記，采用的遺傳標(biāo)記一般為營養(yǎng)缺陷型和抗生素抗性等遺傳性狀。56、酵母原生質(zhì)體融合主要分為原生質(zhì)體制備，原生質(zhì)體融合及融合子的選擇。59、1，8-二甲基-10-（D-1-核糖基）異咯嗪即維生素B2。1、植物細(xì)胞工程包括植物細(xì)胞及其原生質(zhì)體的培養(yǎng)，植物原生質(zhì)體融合，細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)及次生代謝物的生產(chǎn)。2、植物培養(yǎng)細(xì)胞無錨地領(lǐng)帶性及接觸抑制性。4、植物細(xì)胞實驗室培養(yǎng)法是懸、微室、平板、看護、懸滴及單花粉等

41、多種培養(yǎng)方式。5、懸浮培養(yǎng)特點是培養(yǎng)過程中，細(xì)胞總數(shù)不斷增加，一定時間后產(chǎn)量達(dá)最高點，生長趨于停止。6、植物細(xì)胞接種濃度通常為2.5×1045.0×104細(xì)胞/毫升。8、微室培養(yǎng)法的優(yōu)點是可直接觀察分裂繁殖及分化全過程，胞質(zhì)環(huán)流規(guī)律及線粒體生長與分裂活動，亦可進行連續(xù)觀察原生質(zhì)體融合，細(xì)胞壁再生及融合后細(xì)胞分裂活動，同時可進行顯微攝像。9、看護培養(yǎng)法培養(yǎng)時間較微室培養(yǎng)長。10、細(xì)胞突變的主要原因是染色體缺失、重復(fù)、倒位、異位、堿基順序轉(zhuǎn)換、顛換及移碼所引起。11、植物細(xì)胞培養(yǎng)物易發(fā)生自發(fā)突變，其突變頻率在10-710-6之間。13、篩選植物突變細(xì)胞的目的在于獲得某些藥物高產(chǎn)

42、細(xì)胞株或某些物質(zhì)轉(zhuǎn)化的高產(chǎn)酶細(xì)胞株。14、篩選細(xì)胞突變體主要依據(jù)細(xì)胞表型變化。15、自離體植物細(xì)胞培養(yǎng)物中篩選細(xì)胞突變體的方法有直接選擇法，間接選擇法及綠島法。16、植物細(xì)胞培養(yǎng)物處于無組織及無器官分化的分散狀態(tài)時許多重要基因并不表達(dá)。17、目前已建立植物細(xì)胞種質(zhì)保存法有：干燥保存法，液體石蠟覆蓋法，低溫保存法，低壓低氧保存法及超低溫深凍保存法。21、對于種子、花粉、球莖、塊莖等高度脫水材料可以采用快速降溫凍存。22、對于不耐寒植物細(xì)胞需采用慢速冰凍法。24、深凍細(xì)胞活力及存活率測定的方法有再培養(yǎng)法、二醋酸熒光素染色法及氯化三苯四氮唑還原法。30、果膠酶最適pH值為5.8。34、植物原生質(zhì)體活

43、力測定方法有：根據(jù)形態(tài)特征判斷其活力，活體染色法及熒光染料活體染色法。35、大多數(shù)植物原生質(zhì)培養(yǎng)13day即再生新細(xì)胞壁。36、大多數(shù)植物原生質(zhì)體通常在12周內(nèi)發(fā)生第一次分裂。37、誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基含有低濃度生長素，而不含有分裂素。42、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)設(shè)備有漿式攪拌罐，多孔板式攪拌罐、卡普蘭式螺旋漿攪拌罐及空氣提升式培養(yǎng)罐。46、開發(fā)動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)基，將促進動物細(xì)胞工程的發(fā)展。47、動物細(xì)胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)動物器官，組織及細(xì)胞的營養(yǎng)液體，只有維持液及生長液之分。49、以組織塊為材料的培養(yǎng)方法叫組織塊培養(yǎng)法。50、細(xì)胞培養(yǎng)包括細(xì)胞及細(xì)胞團塊單層培養(yǎng)及單細(xì)胞克隆培養(yǎng)。59、微量板細(xì)胞克隆法是分

44、離混雜細(xì)胞的優(yōu)良方法。60、微量板細(xì)胞克隆法是可以用于建立純細(xì)胞系，檢查細(xì)胞遺傳性的一致性，分離細(xì)胞變種，評價藥物及毒物對細(xì)胞生長的影響，篩選淋巴細(xì)胞雜交瘤及基因工程細(xì)胞，制備單克隆抗體并用于病毒學(xué)研究。61、二倍體細(xì)胞培養(yǎng)壽命是用群體倍數(shù)（PD）表示，如二倍體細(xì)胞培養(yǎng)后，其總數(shù)增加一倍時，即稱為1個PD。63、二倍體細(xì)胞保留著原位組織正常的細(xì)胞性狀，并已用于生產(chǎn)疫苗，尿激酶及干擾素等藥物，也用于細(xì)胞遺傳學(xué)，細(xì)胞分化及衰老研究，以及藥物毒性和環(huán)境污染物的檢測。64、傳代細(xì)胞不具有錨地依賴性，接觸抑制性及群體效應(yīng)，喪失了組織分化能力及臟器特異性，僅具有種屬特異性。65、動物細(xì)胞種質(zhì)保存的形式有組

45、織塊，細(xì)胞懸浮物及細(xì)胞單層培養(yǎng)物等。66、動物細(xì)胞種質(zhì)保存方法有常溫，低溫及超低溫冰凍法3種。70、目前改變膜蛋白分布狀態(tài)及膜脂質(zhì)分子重新排布的因素有病毒，PEG，電場力及離心力。71、在一定條件下，通過電脈沖作用使細(xì)胞融合的過程謂之電場誘導(dǎo)融合作用。73、兩種完整細(xì)胞融合時，所轉(zhuǎn)移的遺傳物質(zhì)有整套染色體組，核外DNA及胞質(zhì)因子等。76、影響動物細(xì)胞融合的因素有促融劑、細(xì)胞性質(zhì)、溫度、pH值，離子強度及離子種類。77、兩種親本細(xì)胞融合混合物中至少含有雙核或多核異型融合子，雙核或多核同型親本融合子及親本五種類型細(xì)胞。80、HAT是含有次黃嘌呤、氨基喋呤及胸腺嘧啶核苷的一種選擇性培養(yǎng)基。82、控制

46、雜種細(xì)胞遺傳表現(xiàn)型的作用機制從表現(xiàn)上可分為互補作用，激活作用，消失作用及激活與消失作用。83、雜種細(xì)胞生物學(xué)特性實質(zhì)上是通過基因重組與表達(dá)調(diào)控實現(xiàn)的。84、免疫反應(yīng)是機體對自己和異已物質(zhì)的種種識別反應(yīng)。89、骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)選擇不分泌瘤蛋白，體外能無限繁殖和連續(xù)移植繼代培養(yǎng)者，且為HPRT或TK的親本。91、大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)系指人工條件下高密度大量培養(yǎng)有用動物細(xì)胞生產(chǎn)珍貴藥品的技術(shù)。92、無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點是：可用于培養(yǎng)不同種類的細(xì)胞及含血清培養(yǎng)基中不能生長細(xì)胞，可用于雜種細(xì)胞，基因工程細(xì)胞及突變體細(xì)胞培養(yǎng)，生產(chǎn)有用物質(zhì)。98、體外法生產(chǎn)單克隆抗體是使雜交瘤細(xì)胞在人工反應(yīng)器內(nèi)大規(guī)模培養(yǎng)并表達(dá)相應(yīng)抗體

47、。99、體內(nèi)法生產(chǎn)克隆抗體是利用生物體為細(xì)胞反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體的方法。100、檢出分泌特異抗體細(xì)胞后，應(yīng)即時進行克隆化篩選與鑒定，以免非必需細(xì)胞過分生長。6、判斷酶固定化方法優(yōu)劣的指標(biāo)是酶偶聯(lián)效率及固定化酶活力。8、1972年，國際酶學(xué)委員會提出新的酶活單位，稱為Katal單位。9、固定化酶活力的測定方法有分批測定法和連續(xù)測定法。12、當(dāng)酶固定化后，對于高分子底物的活性明顯下降。13、固定化酶體外應(yīng)用主要是床式反應(yīng)器。14、編號為EC3.2.3.1的酶是水解酶。18、制備固定化酶的交聯(lián)法中，常用的交聯(lián)劑有已二酰亞胺二甲酯、1，5-二氟-2，4-二硝基笨，雙重氮聯(lián)笨胺-2，2-二

48、磺酸。19、在制備固定化酶的過程中，加入比活1500U/ml的酶液50ml，反應(yīng)一段時間后，用緩沖液洗脫，得到活力為50U/ml的酶緩沖液400ml，則偶聯(lián)效率為73.3%。20、1961年，國際酶學(xué)會議規(guī)定，1個酶活單位指特定條件下，1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化1mol底物的酶量。21、國際單位U與Katal之間的換算關(guān)系為1kata=6×107U。22、在固定化酶的過程中，測固定化酶總活力為10000U，在固定化前加入酶的總活力為20000U，現(xiàn)在上清液余酶活力為2000U，則固定化酶的相對活力為55.6%。23、用分批法測定固定化酶活力，若攪拌過快會導(dǎo)致酶活力變大。25、天冬氨酸酶包埋時，在

49、延胡索酸銨存在下可獲得高活力固定化天冬氨酸酶。26、大多數(shù)天然酶經(jīng)固定化后對蛋白酶耐受力有所提高原因是空間位阻。29、用聚丙烯酰胺包埋的轉(zhuǎn)化酶，其Vmax較天然酶小10%。33、用分批測定法測固定化酶活力時，影響測量結(jié)果的因素有攪拌速度、振蕩速度、反應(yīng)器形狀、反應(yīng)液數(shù)量等。34、測定固定化酶活力時應(yīng)注明反應(yīng)溫度、固定化酶的干燥條件、用于固定化的原始酶比活等。36、用載體結(jié)合法固定酶的特點是操作簡單，不影響酶活性等。37、利用酶分子上的氨基、羧基、酚基、咪唑基基團可以進行共價結(jié)合。39、固定化細(xì)胞的特點有（1）無需進行酶的分離純化；（2）固定化過程酶回收率高；（3）細(xì)胞內(nèi)輔因子可以自生、再生；（

50、4）可催化一系列反應(yīng)；（5）抗污染能力強。40、過氧化氫酶可以來源于細(xì)菌、霉菌、紅血球等。41、酶催化反應(yīng)的特點是：專一性強、催化效率高、反應(yīng)條件溫和、酶活性的調(diào)控機制復(fù)雜等。42、從動物體及微生物發(fā)酵物中提取的酶稱為第一代酶。47、天然酶使用后通常不回收，不能連續(xù)使用。48、共價結(jié)合法制備固定化酶的缺點是操作復(fù)雜。49、包埋的固定化酶只適用于小分子底物及小分子產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化反應(yīng)，不適用于催化大分子底物或產(chǎn)物的反應(yīng)。51、在酶活力測定過程中，為確保可比性，必須控制反應(yīng)條件的一致性。52、天然酶經(jīng)固定化后即成固定化酶，其催化體系由均相反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)榉蔷喾磻?yīng)。54、多孔玻璃珠共價結(jié)合的葡萄糖異構(gòu)酶最適溫

51、度與游離酶一樣。65、用吸附法制備固定化酶進，每克無機載體吸附的蛋白質(zhì)量為大于1mg。1、細(xì)胞因子的有效濃度常10-1010-14mol/L之間。10、TNF抗腫瘤的重要機理之一是直接的細(xì)胞毒作用。11、IFN是指干擾素。13、能誘導(dǎo)有關(guān)生物細(xì)胞產(chǎn)生IFN的一類物質(zhì)統(tǒng)稱干擾素誘生劑。14、干擾素效價的國際單位數(shù)與蛋白含量的毫克數(shù)之比即活性。15、低濃度的干擾素基本沒有療效的原因是IFN不易進入組織間液。17、把干擾素直接導(dǎo)入“靶灶”內(nèi)即所謂的聚射。19、CSF中唯一一種沒有種間特異性的是巨噬細(xì)胞集落刺激因子。20、EPO為穩(wěn)定的耐熱蛋白，80不變性。21、rhEPO用于治療CRF期間最常見的副

52、作用是患者的血壓升高。24、細(xì)胞因子所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)的中心成份是IL-1。31、血氧含量低，心肌功能不全，溶血性貧血等原因均能導(dǎo)致紅細(xì)胞生成素的分泌量增加；而垂體功能低下本身并不能導(dǎo)致紅細(xì)胞生成素的分泌增加。33、目前檢測白介素最敏感的方法是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。35、2-5A合成酶、蛋白激酶及磷酸二脂酶等均屬于干擾素誘生的抗病毒蛋白，而糖基化酶則與干擾素?zé)o關(guān)。45、具有生物活性的腫瘤壞死因子為三聚體構(gòu)型。47、細(xì)胞因子多為單鏈分子，其基因多由多個外顯子和內(nèi)含子組成，但其基因均為單拷貝。48、IL-5對細(xì)胞的作用包括增強B細(xì)胞的功能，促進活性B細(xì)胞分泌、并可誘導(dǎo)B細(xì)胞表達(dá)IL-2受體。53、TNF也可誘

53、生IFN。54、IFN可抑制病毒的生活周期的許多階段，包括病毒的吸附和脫殼、早期病毒轉(zhuǎn)錄、病毒轉(zhuǎn)譯、蛋白臺成及從細(xì)胞表面芽生。62、干擾素基因在正常生理狀態(tài)下不表達(dá)。63、IFN對免疫功能的調(diào)節(jié)作用包括增強巨噬細(xì)胞活力，使補體水平下降及延長同種移植物的排斥反應(yīng)。67、干擾素臨床應(yīng)用的適應(yīng)癥包括急性病毒性感染、慢性病毒性感染、惡性腫瘤、器官移植患者、乙型腦炎等。68、T細(xì)胞的激活與增殖包括三個時期，即細(xì)胞產(chǎn)生白介素-2及其受體表達(dá)，細(xì)胞進入白介素-2依賴期，進入不依賴白介素-2的增殖期。69、白介素-2的臨床應(yīng)用包括抗病毒感染、抗細(xì)菌感染、抗腫瘤及艾滋病的治療等。70、關(guān)于集落刺激因子的特性，目

54、前認(rèn)為四種集落刺激因子無序列同源性，均為糖蛋白分子，四種集落刺激因子各有特征的膜受體。71、紅細(xì)胞生成素的臨床應(yīng)用包括慢性腎功能衰竭、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌性貧血、早產(chǎn)嬰兒自體輸血及用于外科手術(shù)的輔助治療等。72、細(xì)胞因子大都是糖蛋白類物質(zhì)。77、TNF發(fā)揮作用有相對的細(xì)胞周期特異性。78、TNF直接注入是很有效的。79、體內(nèi)IFN通常在嚴(yán)格的誘導(dǎo)控制下產(chǎn)生。80、IFN可以抑制正常細(xì)胞的生長。81、對晚期癌癥IFN不優(yōu)于IFN。82、體外實驗表明CSF可引起腫瘤細(xì)胞增殖。84、EPO并不能完全消除貧血。85、細(xì)胞因子很難用常規(guī)方法純化。86、TNF具有抗腫瘤作用。87、誘導(dǎo)TNF合成須經(jīng)過兩個階

55、段：起動期、促發(fā)期。88、TNF經(jīng)鑒定有兩類：TNF，TNF。89、TNF分子量因來源不同，制備方法不同及測定方法不同相關(guān)較大。90、TNF與其它細(xì)胞因子，化療藥物聯(lián)合作用可以降低TNF劑量及副作用，提高療效。重點簡答1、重組DNA技術(shù)通常包括：（1）基因重組載體的選擇和制備；（2）目的基因的分離純化；（3）目的基因與載體的重組；（4）重組克隆的轉(zhuǎn)化與感染；（5）重組克隆的篩選與鑒定；（6）目的基因表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的分離與提純；2、載體的基本條件：（1）本身是一個復(fù)制子，能自我復(fù)制；（2）分子量要??；（3）帶選擇標(biāo)記，以便進入宿主細(xì)胞后有可辨認(rèn)的表型特征；（4）對幾種限制性酶有單一切點；（5）有

56、一定的非必要區(qū)，在這段插入外源基因不影響其復(fù)制。3、可作為載體的有：（1）質(zhì)粒；（2）噬菌體；（3）M13噬菌體；（4）科斯質(zhì)粒；（5）動、植物病毒。4、選擇裂解細(xì)菌的方法取決于；（1）質(zhì)粒的大??；（2）大腸桿菌菌株；（3）裂解后用于純化質(zhì)粒DNA的技術(shù)；5、選擇裂解細(xì)胞的一般準(zhǔn)則：（1）大質(zhì)粒（大于15Kb）易受損，、故應(yīng)彩溫和裂解法（SDS裂解法）從細(xì)胞中釋放出來；（2）對于小質(zhì)粒，可加入EDTA后采用溶菌酶處理，再通過煮沸或堿處理使之裂解。6、科斯質(zhì)粒的特點是：（1）具有噬菌體的特性，能高效地轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，但它不含噬菌體的全部必要基因，不能裂解生成噬菌斑；（2）具有質(zhì)粒載體的特性，帶有質(zhì)粒的抗性基因而易于篩選。7、T4DNA連接的作用機制：（1）T4DNA連接酶與輔因子ATP形成酶- AMP復(fù)合物；（2）酶-AMP復(fù)合物再結(jié)合到具有5一磷酸基與3羥切口的DNA，上使DNA腺苷化。（3）產(chǎn)生一個新的磷酸二酯鍵，把缺口封起來。8、DNA連接反應(yīng)中的注意事項：（1）連接及反應(yīng)溫度，（2）防止粘末端的自身環(huán)化應(yīng)采取以下措施：控制載體與外源DNA分子的濃度