實驗植物的組織培養(yǎng)學習教案

1、會計學1實驗植物的組織培養(yǎng)實驗植物的組織培養(yǎng)第一頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。大多綠色開花植物靠種子繁殖（有性繁殖），不用種子繁殖（無性繁殖）的方法有： 組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條 無性繁殖第1頁/共21頁第二頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織（外植體），如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進而生根發(fā)芽。一、組織培養(yǎng)概述1.概念第2頁/共21頁第三頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。2、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？ 植物細胞具有全能性，即生物體的細胞，具有使后代細胞形成完整個體的

2、能力。3.植物組織培養(yǎng)的基本過程:離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體生長發(fā)育第3頁/共21頁第四頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。植物組織培養(yǎng)過程示意圖 煙草植株根細胞培養(yǎng)形成愈傷組織發(fā)育成幼胚長成幼苗成熟植株第4頁/共21頁第五頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。4.植物組織培養(yǎng)條件: 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等。細胞分裂素多，生長素少誘導芽的生成細胞分裂素少，生長素多誘導根的生成細胞分裂素適中，生長素少愈傷組織只生長不分化細胞分裂素生長素比例合適誘導根芽的分化第5頁/共21頁第六頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。二

3、、實驗培養(yǎng)基配制外植體的選取消毒接種培養(yǎng)移栽和栽培等。第6頁/共21頁第七頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。1、實驗材料（1）MS培養(yǎng)基：大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、I、Co有機成分：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等（3）發(fā)芽培養(yǎng)基： MS培養(yǎng)基+BA+NAA+瓊脂+蒸餾水（2）萘乙酸NAA、芐基腺嘌呤BA（4）生根培養(yǎng)基： MS培養(yǎng)基+NAA+瓊脂+蒸餾水第7頁/共21頁第八頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。2、步驟1.取外植體超凈臺上將無菌幼苗(無菌水沖洗)切段，每段至少1張葉片2.生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)基中，放入1-3

4、段切段（莖一部分插入培養(yǎng)基），蓋上封口膜。日光燈下保持1825的溫度培養(yǎng)，每天光照不少于。3.生根培養(yǎng)23周后，將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)。第8頁/共21頁第九頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。5.定植將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)。4.適應鍛煉將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中繼續(xù)生長，用玻璃罩或塑料布保持80以上的濕度，23天后打開減低濕度進行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止。第9頁/共21頁第十頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。幼苗外植體叢芽生根鍛苗消毒 接種愈傷組織胚狀體定植 植株生根培養(yǎng)生芽培養(yǎng)第10頁/共21頁第十一頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。1.不同

5、植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實驗相同的生長素和細胞分裂素濃度？2.本實驗用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為什么？不相同天然激素都有相應的使之分解的酶，所以使用時間短，而人工合成的，沒有分解酶，作用時間長，效果顯著。課后題第11頁/共21頁第十二頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)，無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。4. 同LB培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？3.如果在自然界取植物樣本進行組織培養(yǎng)，你認為應采取什么措施保證樣本不被污染?（1）操作環(huán)境清潔（

6、2）植物樣本的潔凈（3）操作敏捷迅速第12頁/共21頁第十三頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。 脫分化：脫分化：將來自已分化組織的已停止分裂的細胞從植物將來自已分化組織的已停止分裂的細胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復細胞的分裂活體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復細胞的分裂活性。性。 再分化再分化:經(jīng)脫分化的組織或細胞在一定的培養(yǎng)條件下可經(jīng)脫分化的組織或細胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細胞類型的能力。有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細胞類型的能力。愈傷組織第13頁/共21頁第十四頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔污

7、染途徑第14頁/共21頁第十五頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。污染的預防措施（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（三）操作人員嚴格遵守無菌操作規(guī)程（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔第15頁/共21頁第十六頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。第16頁/共21頁第十七頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應了什么問題？第17頁/共21頁第十八頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？第18頁/共21頁第十九頁，編輯于星期一：十九點 五十八分。植物全能性的表達離體的植