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文檔簡介

1、園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué) 植物花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂制片植物花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂制片技術(shù)和染色體觀察技術(shù)和染色體觀察 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握植物花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂制片技術(shù)。掌握植物花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂制片技術(shù)。熟悉減數(shù)分裂的具體過程。熟悉減數(shù)分裂的具體過程。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 減數(shù)分裂是性母細(xì)胞在分裂形成配子過程中減數(shù)分裂是性母細(xì)胞在分裂形成配子過程中一種特殊的細(xì)胞分裂方式。一種特殊的細(xì)胞分裂方式。 高等植物花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生四個(gè)小高等植物花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生四個(gè)小孢子,染色體數(shù)目已減半為孢子,染色體數(shù)目已減半為n。小

2、孢子進(jìn)一步發(fā)。小孢子進(jìn)一步發(fā)育為花粉粒。育為花粉粒。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)減數(shù)分裂過程減數(shù)分裂過程( (一一) )、間期、間期( (前間期前間期) )( (二二) )、減數(shù)第一分裂、減數(shù)第一分裂( (三三) )、中間期、中間期( (四四) )、減數(shù)第二分裂、減數(shù)第二分裂前期前期I I 中期中期I I 后期后期I I 末期末期I I前期前期II II 中期中期II II 后期后期II II 末期末期IIII園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué) 在適宜的時(shí)期采集植物的花蕾,經(jīng)固定液殺死固定,使細(xì)胞保持活體時(shí)形態(tài)。然后進(jìn)行壓片染色等處理,在顯微鏡下進(jìn)行觀察,可以看到小孢子母

3、細(xì)胞的減數(shù)分裂過程,研究染色體在形態(tài)和數(shù)量上的動態(tài)變化特點(diǎn)。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)三、材料用品三、材料用品實(shí)驗(yàn)材料:玉米雄花序 玉米PMC減數(shù)分裂永久制片和照片儀器物品:顯微鏡、水浴鍋、鑷子、解剖針實(shí)驗(yàn)藥品:無水乙醇、95%乙醇濃鹽酸 冰醋酸、卡寶品紅或醋酸洋紅。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟取材取材 固定固定 染色壓片染色壓片 鏡檢鏡檢園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué) 1.取材:選取適當(dāng)大小的花蕾,是觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂選取適當(dāng)大小的花蕾,是觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂的關(guān)鍵性步驟。不同植物取材時(shí)期不同。的關(guān)鍵性步驟。

4、不同植物取材時(shí)期不同。 玉米:抽雄前兩周(大喇叭口期),雄花序所在部玉米:抽雄前兩周(大喇叭口期),雄花序所在部位用刀片縱向劃一切口,用鑷子取出花序分枝。此位用刀片縱向劃一切口,用鑷子取出花序分枝。此時(shí)雄花序先端小穗穎長時(shí)雄花序先端小穗穎長4mm左右,花藥長左右,花藥長23mm。小麥:挑旗以后,旗葉抽出小麥:挑旗以后,旗葉抽出1-2cm,取出穗子。,取出穗子。 時(shí)間一般在上午時(shí)間一般在上午9時(shí)時(shí)10時(shí),不同材料間稍有差異。時(shí),不同材料間稍有差異。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)玉米大喇叭口期玉米小穗玉米雄花序園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)小麥挑旗期小麥的小花園藝植物遺傳育

5、種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué) 實(shí)驗(yàn)中注意觀察:每一分枝是中上部實(shí)驗(yàn)中注意觀察:每一分枝是中上部還是下部小穗發(fā)育最早?還是下部小穗發(fā)育最早?園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué) 2 2固定:固定:取下的材料應(yīng)立即放入固定液中殺死固定。取下的材料應(yīng)立即放入固定液中殺死固定。一般采用卡諾氏固定液,無水酒精:冰醋酸一般采用卡諾氏固定液,無水酒精:冰醋酸3:1,可用,可用95 乙醇代替無水乙醇。乙醇代替無水乙醇。如需長期保存,可先用如需長期保存,可先用70%酒精沖洗酒精沖洗2次然次然后轉(zhuǎn)入后轉(zhuǎn)入70%酒精中保存。酒精中保存。注意:固定液時(shí)應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,固定時(shí)不要在陽光下注意:固定液時(shí)應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,固定

6、時(shí)不要在陽光下暴曬。暴曬。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)3染色和壓片:吸去小穗過多保存液吸去小穗過多保存液 置于載玻片中央置于載玻片中央挑出花藥,滴染液挑出花藥,滴染液 將花藥橫向切斷將花藥橫向切斷擠壓花藥,使花粉母細(xì)胞從切口處逸出擠壓花藥,使花粉母細(xì)胞從切口處逸出取出花藥壁取出花藥壁 低倍鏡檢,加上蓋玻片低倍鏡檢,加上蓋玻片酒精燈烤片酒精燈烤片 壓片壓片注意不要使蓋片移動注意不要使蓋片移動園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)4.4.鏡檢觀察鏡檢觀察先低倍后高倍。先低倍后高倍。具體使用參見后面顯微鏡的使用方法。具體使用參見后面顯微鏡的

7、使用方法。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)5. 利用玉米花粉母細(xì)胞的減數(shù)分裂永久制片利用玉米花粉母細(xì)胞的減數(shù)分裂永久制片和照片,在顯微鏡下觀察,并與自己的制片和照片,在顯微鏡下觀察,并與自己的制片比較,掌握各個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)。比較,掌握各個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)。 注意:注意: 怎樣區(qū)分各個(gè)時(shí)期?怎樣區(qū)分各個(gè)時(shí)期? 如中如中I 、中、中I I,后,后I I、后、后I ?園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)減數(shù)分裂前期減數(shù)分裂前期 I I細(xì)線期偶線期偶線期園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)粗線期雙線期終變期中期后期后期園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)前期II中期II后期II末期

8、II四分體小孢子園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)附:顯微鏡操作和使用 開關(guān)顯微鏡,移動顯微鏡。開關(guān)顯微鏡,移動顯微鏡。調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)目鏡間距和目鏡微調(diào)目鏡間距和目鏡微調(diào),使兩個(gè)眼睛視野相同和,使兩個(gè)眼睛視野相同和清晰,防止眼睛疲勞。清晰,防止眼睛疲勞。 先低倍鏡,后高倍鏡觀察,高倍鏡下不準(zhǔn)用粗調(diào)。先低倍鏡,后高倍鏡觀察,高倍鏡下不準(zhǔn)用粗調(diào)。 高倍鏡下不得取放載玻片。高倍鏡下不得取放載玻片。 使用結(jié)束:電壓或光亮度調(diào)至最小,關(guān)閉并拔下電使用結(jié)束:電壓或光亮度調(diào)至最小,關(guān)閉并拔下電源,降低載物臺,最低倍物鏡或無目鏡的鏡筒居中,源,降低載物臺,最低倍物鏡

9、或無目鏡的鏡筒居中,防塵罩,填寫使用記錄,請老師驗(yàn)收方可離開。防塵罩,填寫使用記錄,請老師驗(yàn)收方可離開。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)調(diào)節(jié)目鏡間距和目鏡微調(diào)園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 愛護(hù)顯微鏡。愛護(hù)顯微鏡。 一次取材不要太多。一次取材不要太多。取完載玻片,蓋上染色缸蓋子,以免酒精揮發(fā)。取完載玻片,蓋上染色缸蓋子,以免酒精揮發(fā)。 酒精燈使用注意安全。酒精燈使用注意安全。用過的載玻片必須刷洗干凈再放回染色缸,用過用過的載玻片必須刷洗干凈再放回染色缸,用過的蓋玻片丟棄。的蓋玻片丟棄。使用過的紗布、濾紙、蓋玻片放到廢品杯或垃圾使用過的紗布、濾紙、蓋玻片放到廢品杯或垃圾桶,不得直接沖入水池。桶,不得直接沖入水池。 值日生打掃衛(wèi)生、檢查儀器及門窗值日生打掃衛(wèi)生、檢查儀器及門窗。園藝植物遺傳育種實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心園藝植物遺傳學(xué)五、作業(yè)五、作業(yè)1寫出制片步驟流程圖

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