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文檔簡介

1、2021/6/161常見凝血項目的檢測及臨床意常見凝血項目的檢測及臨床意義解讀義解讀 2021/6/162凝血瀑布學說激活激活內源性途徑內源性途徑外源性途徑外源性途徑共同途徑共同途徑VIIIV 2021/6/163D-DimerE纖維蛋白凝塊纖維蛋白原DED纖維蛋白單體 + 纖維蛋白肽可溶性纖維蛋白 聚合體 XIIIa 凝血酶纖溶酶凝血和纖溶纖維蛋白降解產(chǎn)物 纖維蛋白原 降解產(chǎn)物2021/6/164凝血 我們實驗室凝血檢測包括PT、APTT、TT、纖維蛋白原含量、 D-Dimer 、AT-和FDP的測定。現(xiàn)主要用于手術前患者、產(chǎn)前孕婦凝血功能篩查,某些凝血因子異常疾病的檢測以及口服抗凝藥物的監(jiān)

2、測等。2021/6/165凝血檢測的方法學 目前可開展的血栓/止血成分檢測主要包括三種方法:凝固法、底物顯色法、免疫比濁法。 Stago公司: PT、APTT、FIB、TT:凝固法。 D-二聚體/ FDP:免疫比濁法。 AT-:發(fā)色底物速率法。2021/6/166擺動磁珠法2021/6/167擺動磁珠法2021/6/168檢測原理 D-二聚體/ FDP檢測原理:免疫比濁法。 用光度計檢測含有乳膠顆粒的懸濁液吸光度的變化。含有共價包被特異抗體的乳膠顆粒懸濁液與待檢樣本進行混合。抗原抗體發(fā)生反應,導致乳膠顆粒發(fā)生凝集,誘導反應介質濁度增加。濁度的增加反映在吸光度的增加上,用來測試樣本中D-二聚體/

3、 FDP的水平。 AT-檢測原理:發(fā)色底物速率法。 AT在肝素存在時是快速有力的凝血酶抑制物。待測血漿與肝素和過量凝血酶(試劑1)共同孵育;剩余凝血酶通過對合成產(chǎn)色底物(試劑2)的酶促反應來定量。由于凝血酶的數(shù)量在第一步中被血漿AT成比例地消耗,因此剩余的凝血酶在第二步反應中與血漿AT水平呈反比。此測定不受治療劑量肝素影響。2021/6/169PT PT是檢查涉及外源性和共同凝血途徑的過篩實驗,如因子VII,X,V,II和 I。 PT同時用于監(jiān)測口服抗凝劑的用量,是監(jiān)測口服抗凝劑的首選指標。 PT試劑含肝素拮抗劑。 PT TTAPTTXIIXIIXVIIIVII X VIII2021/6/16

4、10PT一、PT延長:1、先天性因子、缺乏癥和低(無)纖 維蛋白原血癥;2、獲得性凝血因子缺乏:DIC、原發(fā)性纖溶亢進、 肝病阻塞性黃疸和維生素K缺乏癥;3、血循環(huán)中有抗凝物質:口服抗凝劑如肝素和抗凝血因子抗體、抗體。二、PT縮短:先天性因子增多癥、口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病。三、口服抗凝劑的檢測:據(jù)報道,在口服抗凝劑過程中,維持PT在正常對照的1-2倍最為適宜。 PT TTAPTTXIIXIIXVIIIVII X VIII2021/6/1611APTT APTT是在體外模擬內源性凝血的全部條件,測定血漿凝固需要的時間,用以反應內源性和共同凝血途徑凝血因子(因子XII,XI,IX,VII

5、I,X,V,II 和I)是否異常。 PT TTAPTTXIIXIIXVIIIVII X VIII2021/6/1612APTT一、APTT延長: 見于血友病、凝血因子、和纖維蛋白原缺乏;口服抗凝劑、血循環(huán)中有凝血因子抑制物、狼瘡抗凝物等。二、縮短: 見于DIC早期,血栓前狀態(tài)及血栓性疾病。三、監(jiān)測肝素治療: 肝素治療期間,APTT維持在正常對照的1.5-3.0倍為宜。 肝素通過AT-發(fā)揮抗凝作用, AT-是抑制XII、XI、 IX、 X 等發(fā)揮作用,主要是和內源性凝血途徑相關。2021/6/1613TT TT是一評估纖維蛋白形成過程的檢測項目,TT同樣也是一用于補充PT和APTT的篩選實驗。

6、原理:在預定量凝血酶作用下,正常血漿會在有限的和穩(wěn)定的時間內發(fā)生凝固。2021/6/1614TT TT延長表示 FIB異常 質量(異常纖維蛋白原血癥) 數(shù)量: 先天性低或無纖維蛋白原血癥;獲得性低纖維蛋白原血癥(肝病,DIC); 存在肝素、水蛭素; 存在FDP。2021/6/1615FIB 纖維蛋白原在肝臟和巨核細胞內合成,半衰期為3-5d,含量,成人:2-4g/L;新生兒:1.25-3g/L。 在過量凝血酶的作用下,稀釋血漿的凝固時間與血漿中的纖維蛋白原水平有直接關系。2021/6/1616FIB臨床應用 手術前的篩選試驗 診斷 質量缺陷(異常纖維蛋白原血癥) 數(shù)量缺陷(先天性或獲得性) F

7、IB水平升高 炎性綜合征,糖尿病,肥胖,血栓性相關性疾病。2021/6/1617D-Dimer 交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物(FnDPs) 繼發(fā)性纖溶特有代謝產(chǎn)物,反映凝血與纖溶激活的標志物。 生理性:抗血栓; 降解纖維蛋白/原; 降解凝血因子( FV、FVIII、FX、FVII、FXI、 FXIII); 病理性:纖溶亢進出血。 2021/6/1618FDPFDP FgDPs和FnDPs( D-Dimer)統(tǒng)稱纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs),具有抗血小板聚集和抗凝作用。 FgDPs:Fg降解產(chǎn)物。2021/6/1619AT-檢測的臨床應用檢測的臨床應用 AT-是一種由肝臟合成的分子量約為5

8、8000道爾頓的糖蛋白,是一種凝血酶的抑制劑。 一、診斷遺傳或獲得性AT-缺乏癥; 二、疑難DIC診斷標準; 三、監(jiān)測肝素是否有效:肝素抗凝作用依賴AT; 四、肝病(AT合成不足):與肝功能受損程度或病情嚴重程度相關。2021/6/1620影響凝血指標的相關因素1.放置時間對檢測結果的影響與性別和年齡無統(tǒng)計學意義。2.樣本量過少2ml, 樣本存放時間過長, 采血部位為輸液同側, 標本含有凝塊。2021/6/1621 樣本量樣本量結論:血量減少使凝固時間延長,血量增加使凝固時間縮短。2021/6/1622放置時間長短(4)結論:PT在0-8h呈現(xiàn)下降趨勢,可能與因子活化有關,PT在24h略有升高

9、;APTT (4h)隨時間有逐漸上升的趨勢,各時間點的均值均高于基線水平,可能與因子活性逐漸降低有關;TT隨時間呈逐漸上升的趨勢。FIB 值隨時間的增加呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢,但差異并無統(tǒng)計學意義,PT、APTT與TT在多次測量的時間點上差異均由統(tǒng)計學意義。2021/6/1623輸液同側采血2021/6/1624凝塊2021/6/1625凝固反應曲線 整個反應過程包括基線期、加速器、減速期和平臺期(終點)?;€期代表凝血因子被激活,生成凝血酶的過程,也就是凝血的啟動階段,時間相對較長;加速和減速期代表凝血酶發(fā)揮作用,纖維蛋白凝塊形成的過程;平臺期凝固反應完成。 研究表明:在正常情況下,20%-50%的凝原物質就能滿足凝血要求。所以體外實驗時,一部分凝血因子消耗在一定范圍對凝血影響相對較小。 血液有凝塊,反應基線期幾乎是沒有的,反應開始前,凝血因子大部分已經(jīng)處于活化狀態(tài),縮短的基線期時間可能遠遠大于因為凝血因子減少而延長的時間。2021/6/1626樣本采集 另外,樣本采集時

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