[基礎科學]1_1細胞培養(yǎng)概述ppt課件

1、細胞培育細胞培育的優(yōu)點細胞培育的優(yōu)點1.活細胞：活細胞：能長時間、直接察看、研討能長時間、直接察看、研討 活細胞的形狀、構(gòu)造、生命活動活細胞的形狀、構(gòu)造、生命活動優(yōu)點優(yōu)點 2.可控制：可控制：可控制可控制-選擇對象：均一性、反復性選擇對象：均一性、反復性 哪一種：類型：上皮？間質(zhì)？哪一種：類型：上皮？間質(zhì)？- 性質(zhì)：正常？腫瘤？性質(zhì)：正常？腫瘤？- 階段：階段：可控制可控制-調(diào)理條件：各種要素調(diào)理條件：各種要素 物理、化學、生物等要素物理、化學、生物等要素優(yōu)點優(yōu)點2.可控制：可控制：可控制可控制-利用方法：利用方法： 采用各種研討技術(shù)、記錄方法：采用各種研討技術(shù)、記錄方法： 研討：倒置生物顯微

2、鏡、熒光顯微鏡、研討：倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、 電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦 顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、 同位素標志同位素標志- 記錄：攝影照片、縮時電影、電視記錄：攝影照片、縮時電影、電視-優(yōu)點優(yōu)點3.運用廣：運用廣： 學科多：學科多： 對象廣：對象廣： 各種動物：低等動物各種動物：低等動物-高等動物高等動物-人類人類 一種動物：不同年齡一種動物：不同年齡- 不同組織不同組織- 正?；虍惓Ｄ[瘤正常或異常腫瘤-優(yōu)點優(yōu)點4.較經(jīng)濟：較經(jīng)濟：可提供大量、同時、反復性好的、可提供大量、同時、反復性好的、 生物學性狀類似的實

3、驗對象生物學性狀類似的實驗對象細胞培育的缺陷細胞培育的缺陷 現(xiàn)人工模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)曾經(jīng)很高現(xiàn)人工模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)曾經(jīng)很高, 但但, 人工所模擬的條件與體內(nèi)實踐情況人工所模擬的條件與體內(nèi)實踐情況 仍不完全一樣仍不完全一樣. 當細胞被置于體外培育后當細胞被置于體外培育后, 生活在缺乏動態(tài)平衡的環(huán)境中生活在缺乏動態(tài)平衡的環(huán)境中, 久了，必然發(fā)生變化久了，必然發(fā)生變化.1.與體內(nèi)主要不同與體內(nèi)主要不同 相對孤立、相對單一相對孤立、相對單一 缺乏體內(nèi)的系統(tǒng)作用、缺乏體內(nèi)的系統(tǒng)作用、 失去神經(jīng)體液的調(diào)理失去神經(jīng)體液的調(diào)理 和細胞相互間的影響和細胞相互間的影響 缺陷缺陷2.主要表現(xiàn)主要表現(xiàn) 失去原有組織

4、構(gòu)造和細胞形狀失去原有組織構(gòu)造和細胞形狀 分化減弱或不顯分化減弱或不顯 細胞趨向單一化；細胞趨向單一化； 3.提示提示 要正確認識體外培育細胞要正確認識體外培育細胞 是一種特定條件下生長的細胞群體。是一種特定條件下生長的細胞群體。 運用運用生長類型生長類型體外細胞培育物的生長類型體外細胞培育物的生長類型 按生長方式按生長方式:2型型 粘附型細胞粘附型細胞:附著在某一固相支持物外表附著在某一固相支持物外表才才 能生長的細胞。能生長的細胞。 懸浮型細胞懸浮型細胞:不用附著于固相支持物外表，不用附著于固相支持物外表，而而 在懸浮形狀下即可生長的細胞。在懸浮形狀下即可生長的細胞。 絕大多數(shù)有機體細胞屬

5、粘附型細胞，絕大多數(shù)有機體細胞屬粘附型細胞， 只需少數(shù)細胞類型，如某些腫瘤細胞只需少數(shù)細胞類型，如某些腫瘤細胞和白細胞和白細胞 可在懸浮形狀下生長可在懸浮形狀下生長 貼附貼附(粘附粘附)型細胞型細胞 粘附粘附: :是大多數(shù)有機體細胞在體內(nèi)是大多數(shù)有機體細胞在體內(nèi) 生存和生長發(fā)育的根本存在方式生存和生長發(fā)育的根本存在方式含義含義 兩方面兩方面結(jié)果結(jié)果 基于粘附特性，使細胞與細胞之基于粘附特性，使細胞與細胞之間相互結(jié)合構(gòu)成組織，間相互結(jié)合構(gòu)成組織， 有機體的絕大多數(shù)細胞必需有機體的絕大多數(shù)細胞必需 粘附于一固相外表粘附于一固相外表 才干生存和生長。才干生存和生長。培育時：細胞被放到體外環(huán)境中以后培

6、育時：細胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需求粘附于同樣需求粘附于某一固相外表才干生存和生長，因此某一固相外表才干生存和生長，因此屬于粘附型細胞。屬于粘附型細胞。粘附粘附(錨定或錨著錨定或錨著)依賴型依賴型(性性)細胞：細胞：唯有粘附于固相外表才干生存的細胞唯有粘附于固相外表才干生存的細胞 類型類型 細胞在體內(nèi)、外的粘附方式：存在差別細胞在體內(nèi)、外的粘附方式：存在差別 體內(nèi)：粘附是全方位體內(nèi)：粘附是全方位 外形具有復雜的立體特征外形具有復雜的立體特征 體外：多數(shù)情況，細胞只需一個附著平面體外：多數(shù)情況，細胞只需一個附著平面 外形普通與體內(nèi)時明顯不同外形普通與體內(nèi)時明顯不同 按照培育細胞的主要形狀，可

7、分為幾大類型按照培育細胞的主要形狀，可分為幾大類型 分類分類 根據(jù)形狀大致的不同，主要根據(jù)形狀大致的不同，主要2類：類： 上皮樣上皮樣 成纖維細胞樣成纖維細胞樣 其它，不定型其它，不定型上皮樣細胞型上皮樣細胞型 稱號：僅形狀上似體內(nèi)，實踐上不完全等于稱號：僅形狀上似體內(nèi)，實踐上不完全等于-來源：來源于外胚層，內(nèi)胚層細胞來源：來源于外胚層，內(nèi)胚層細胞 如：皮膚及其衍生物如：皮膚及其衍生物 消化道，乳腺，肺泡消化道，乳腺，肺泡 上皮性腫瘤上皮性腫瘤形狀：類似體內(nèi)的上皮細胞形狀：類似體內(nèi)的上皮細胞 扁平，不規(guī)那么多角形，中有圓形核扁平，不規(guī)那么多角形，中有圓形核 生長特點生長特點 易相連成片易相連成

8、片 相靠相靠嚴密相連嚴密相連成薄成薄層層 鋪石狀鋪石狀 生長時呈膜狀挪動生長時呈膜狀挪動 很少脫離細胞群而單個活很少脫離細胞群而單個活動動 成纖維細胞樣細胞成纖維細胞樣細胞 稱號：凡在培育中形狀與成纖維細胞類似稱號：凡在培育中形狀與成纖維細胞類似的的來源：由中胚層間充質(zhì)組織來源的組織來源：由中胚層間充質(zhì)組織來源的組織 如：真正的成纖維細胞如：真正的成纖維細胞 心肌，平滑肌，成骨細胞，血管心肌，平滑肌，成骨細胞，血管內(nèi)皮內(nèi)皮形狀：似體內(nèi)成纖維細胞的形狀形狀：似體內(nèi)成纖維細胞的形狀 胞體梭形或不規(guī)那么三角形胞體梭形或不規(guī)那么三角形 胞質(zhì)向外伸出胞質(zhì)向外伸出23個長短不等的突起個長短不等的突起 中有

9、卵圓形核中有卵圓形核生長特點生長特點 陳列成放射狀，漩渦狀陳列成放射狀，漩渦狀 并不緊靠連成片，并不緊靠連成片， 細胞細胞細胞接觸易斷開細胞接觸易斷開而而 單獨行動單獨行動 游離的單獨的成纖維樣游離的單獨的成纖維樣細胞，細胞， 常有幾個伸長的細胞常有幾個伸長的細胞突起突起 貼附生長型-類型1. 1. 與體內(nèi)同名的細胞不完全一樣與體內(nèi)同名的細胞不完全一樣 如：形狀類似的成纖維細胞，可不同如：形狀類似的成纖維細胞，可不同來源來源 自同一動物不同組織的成纖維樣自同一動物不同組織的成纖維樣細胞類似但細胞類似但 開展趨向不同開展趨向不同2. 2. 培育細胞的形狀不穩(wěn)定培育細胞的形狀不穩(wěn)定 條件改動，細胞

10、形狀可有變化條件改動，細胞形狀可有變化 培育細胞形狀不穩(wěn)定培育細胞形狀不穩(wěn)定血清血清 Hela 高血清高血清 低血清低血清 成纖維細胞樣成纖維細胞樣 上皮樣細胞上皮樣細胞 pH Hela 太酸或太堿太酸或太堿 規(guī)規(guī)范范pH 成纖維細胞樣成纖維細胞樣 上皮樣細胞上皮樣細胞 細胞密度細胞密度 3T3 低密度低密度 高密度高密度 成纖維細胞樣成纖維細胞樣 上皮樣細胞上皮樣細胞 生長形狀改動生長形狀改動 懸浮或貼附懸浮或貼附 懸浮懸浮 貼附貼附 圓形圓形 成纖維或上皮樣成纖維或上皮樣 轉(zhuǎn)化與否轉(zhuǎn)化與否 未轉(zhuǎn)化未轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)化后 成纖維樣成纖維樣 可成上皮樣可成上皮樣 懸浮生長型懸浮生長型概念概念 培育時不貼附于底物而呈懸浮形狀生長培育時不貼附于底物而呈懸浮形狀生長 或以機械方法使堅持懸浮形狀下生長或以機械方法使堅持懸浮形狀下生長來源來源 自血，脾或骨髓，尤以血中白細胞自血，脾或骨髓，尤以血中白細胞 癌腫細胞也能夠癌腫細胞也能夠特點特點 在懸