生奶收購(gòu)檢測(cè)

1、摘要：牛奶和乳制品是大自然賜予人類最理想的、最接近于人奶的完善天然食品。牛奶中至少有 100多種化學(xué)成分，其中水、蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、礦物質(zhì)、維生素都是人類賴以生存的營(yíng)養(yǎng)素。因此，牛奶有“白色血液”、“人類保姆”、“完全食品”等美稱。乳和乳制品已成為人們非常喜愛的日常食品之一。根據(jù)FAO統(tǒng)計(jì)，世界年人均乳品消費(fèi)量達(dá)到46公斤，而在一些發(fā)達(dá)國(guó)家，人均乳品消費(fèi)量更是達(dá)到了130公斤，而乳品工業(yè)的產(chǎn)值更是占食品工業(yè)的產(chǎn)值的10以上。由于乳制品是人們?nèi)粘ｏ嬍辰Y(jié)構(gòu)的重要組成部分，它的安全性直接影響到人們的身體健康，所以世界各國(guó)都對(duì)乳制品的質(zhì)量控制制定了相當(dāng)詳細(xì)的法規(guī)體系。眾所周知要生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的牛奶

2、，就要有好的奶源，也就是說牛奶的質(zhì)量主要取決于原料的好壞。生產(chǎn)牛奶那么多的環(huán)節(jié)能不能確保牛奶的安全衛(wèi)生呢？解決這一問題就要提高從奶源抓起。本文主要介紹了原料奶的常規(guī)檢驗(yàn)方法，包括感觀的檢驗(yàn)，理化指標(biāo)的測(cè)定，微生物的檢測(cè)等以保證我們喝到真正有營(yíng)養(yǎng)健康的牛奶。關(guān)鍵字：原料奶   感觀   理化   微生物 前言：新鮮而優(yōu)質(zhì)的原料乳是制造優(yōu)良乳制品的先決條件。因此，在原奶收購(gòu)時(shí)必須及時(shí)地進(jìn)行原奶的質(zhì)量檢驗(yàn)。根據(jù)感官檢查理化性質(zhì)及微生物的檢查以區(qū)分質(zhì)量好壞，判斷出等級(jí)，以便按質(zhì)論價(jià)和分別加工。    &

3、#160;                                                  

4、                                                 1收奶程序及指標(biāo)控制1

5、.1收奶程序   新鮮牛奶在奶站經(jīng)過初步的檢驗(yàn)合格后被允許進(jìn)入牛奶加工企業(yè)加工，在進(jìn)入乳品加工企業(yè)以后牛奶要經(jīng)過很多過程才能進(jìn)行生產(chǎn)。其具體程序如下：奶車入廠   采樣編號(hào)  取樣 檢驗(yàn)     感官不合格               合格    不合格   拒收        

6、    過磅      復(fù)檢        收奶     合格    由收奶程序可見在原奶收入過程中質(zhì)量檢驗(yàn)有很大的作用。原奶的好壞直接影響乳制品的質(zhì)量，通過對(duì)原奶的檢驗(yàn)可以了解其質(zhì)量是否符合生產(chǎn)要求，使生產(chǎn)者心中有數(shù)，并為工廠制定生產(chǎn)計(jì)劃、進(jìn)行經(jīng)濟(jì)核算提供基本數(shù)據(jù)。1.2 原奶指標(biāo)1.2.1感官指標(biāo)   色澤  收購(gòu)鮮乳色澤應(yīng)是乳白色或稍帶微黃色。

7、0;  滋氣味  具有新鮮牛奶應(yīng)有的香味、無異味。   組織狀態(tài)   呈均勻一致的膠態(tài)液體、無沉淀、無凝塊、無肉眼可見機(jī)械雜質(zhì)。1.2.2原奶理化指標(biāo)      項(xiàng)目   指標(biāo)脂肪3.2全脂乳固體11.8蛋白質(zhì)2.9乳糖4.9酸度°T13-16雜質(zhì)度4溫度8 1.2.3衛(wèi)生指標(biāo)         項(xiàng)目   指標(biāo)細(xì)菌cfu/ml50耐熱芽孢 個(gè)/ml10芽孢 

8、個(gè)/ml100有機(jī)氯農(nóng)藥mg/ml0.02鉛mg/ml0.05汞mg/ml0.01錫mg/ml2.3鉻mg/ml2.3無機(jī)砷mg/ml0.05硝酸鹽（以硝酸鈉計(jì)）mg/ml81.2.4其他要求  項(xiàng)目指標(biāo)酒精實(shí)驗(yàn)陰性v/v75%煮沸前后酸度差°T2抗生素不的檢出摻假、雜實(shí)驗(yàn)無任何摻假、雜煮沸實(shí)驗(yàn)呈均勻一致的膠態(tài)液體、無絮片、無凝塊                2  原奶感官檢驗(yàn)2 .1 感官的檢驗(yàn)：2.1.1 色澤

9、：取樣過濾，觀察樣品是否為乳白色或微帶黃色，無明顯其他顏色；2.1.2  滋氣味：取過濾后的樣品100 ml放入三角瓶中置于電爐上加熱煮沸，聞其是否有奶香味，無其他異味（酸味，香精味，澀味，苦味，藥味，咸味 臭味）。待降溫至15時(shí)品嘗，是否稍帶甜味，無其他異味。2.1.3  組織狀態(tài)：將樣品倒入燒杯中，靜置5分鐘，觀察有無沉淀、凝塊、雜質(zhì)等。           3  理化指標(biāo)的檢驗(yàn)3.1脂肪、蛋白質(zhì)、全乳固體的檢測(cè)a.儀器：乳成分分析儀（FT120）b.檢測(cè)方法：

10、取約50 ml混勻的樣品倒入燒杯中，預(yù)熱至3540，將樣品放在牛乳全組分分析儀吸樣管下，選擇相應(yīng)程序，點(diǎn)擊檢測(cè)鍵，儀器開始自動(dòng)檢測(cè)，待顯示屏出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果時(shí)，即可讀數(shù)。記錄脂肪、蛋白質(zhì)、全乳固體的數(shù)值。3.2乳糖的檢驗(yàn)3.3酸度的檢驗(yàn)3.3.1原理：    牛乳的酸度一般是以中和100毫升牛乳所消耗的0.1N氫氧化鈉的毫升數(shù)來表示，稱為°T，此為滴定酸度，簡(jiǎn)稱為酸度，也可以乳酸的百分含量為牛乳的酸度。    RCOOH+NAOH-RCOONA+H2O    此中和反應(yīng)用酚酞作指示劑，它在PH約8.

11、2時(shí)，就確定了游離酸中的終點(diǎn)。無色的酚酞與堿作用時(shí)，生成酚酞鹽，同時(shí)失去一分子水，引起醌型重排而呈現(xiàn)紅色。3.3.2儀器與試劑  （1）250毫升錐形瓶  （2）1毫升刻度吸管  （3）5毫升微量滴定管    (4)50毫升燒杯    (5)60毫升滴瓶    (6)10毫升吸管    (7)0.1NNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液：用小燒杯在粗天平上稱取固體氫氧化鈉4克，加水100毫升，氫氧化鈉全部溶解，將溶液倒入另一清潔試劑瓶中

12、，用蒸餾水稀釋至1000毫升，以橡皮塞塞瓶口，充分搖勻。    將化學(xué)純鄰苯二甲酸氫鉀于120烘約1小時(shí)至恒重，冷卻25分鐘，稱取0.3-0.4克，(精確到0.0001克)于250毫升錐形瓶中，加入100毫升水溶液，加三滴酚酞指示劑，用以上配好的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色，半分鐘不褪色為止。        按下式計(jì)算氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度。    N= W/(V×0.2042)    式中：    N

13、：氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度。    V：滴定時(shí)消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)。    W：鄰苯二甲酸氫鉀的克數(shù)。    0.2042：與1NNaOH溶液l毫升相當(dāng)?shù)泥彵蕉姿釟溻浀目藬?shù)。    (8)0.5酚酞乙醇溶液3.3.3方法：    在250毫升三角瓶中注入lOml牛乳，加20ml蒸餾水，加0.5酚酞指示液0.5m1，小心混勻，用0.1N氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，直至微紅色在1分鐘內(nèi)不消失為止。消耗0.1N氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)乘以l0，即得酸度。

14、    T°V ×l03.4雜質(zhì)度與溫度的檢驗(yàn)3.4.1雜質(zhì)度的檢驗(yàn)：a.儀器：旋片式真空泵、抽濾瓶、真空瓶、24mm布氏漏斗、雜質(zhì)度棉板。b.方法將雜質(zhì)度棉板放入布氏漏斗中，插上真空泵電源，將加熱至60的500ml奶樣，全部通過棉板抽入抽濾瓶中，并用已過濾的水沖洗盛放奶樣的三角瓶，再次通過棉板抽入抽濾瓶中，取下棉板烘干與標(biāo)準(zhǔn)板對(duì)照，即可讀出過濾板上的雜質(zhì)量。當(dāng)過濾板上的雜質(zhì)含量介于兩個(gè)級(jí)別之間時(shí)，判定為雜質(zhì)含量較多的級(jí)別。3.4.2收奶溫度的檢驗(yàn)：取樣時(shí)，將校準(zhǔn)過的溫度計(jì)插入奶罐中經(jīng)攪拌均勻的牛奶中，待溫度計(jì)溫度恒定時(shí)，讀取讀數(shù)。  

15、;                     4 衛(wèi)生指標(biāo)的檢驗(yàn)4.1 菌落總數(shù)的檢驗(yàn)   落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、PH、需氧性質(zhì)等），所得1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用此方法觀察

16、細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。4.1.1設(shè)備和材料(1)恒溫培養(yǎng)箱：36±1(2)高壓蒸汽滅菌鍋(3)恒溫水浴鍋：46±1(4)天平：0500g(5)電爐(6)吸管：1ml、10ml和25ml，標(biāo)有0.1ml單位的刻度。(7)三角瓶：容量為250ml、500ml(8)平皿：皿底直徑為9cm (9)試管：15×150mm(10)酒精燈(11)試管架、試管筐(12)滅菌刀或剪刀、滅菌鑷子(13)酒精棉球：75%酒精(14)記號(hào)筆4.1.2培養(yǎng)基和試劑(1)   營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：購(gòu)買制好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂，按說明分裝于500

17、ml三角瓶中，在121下高壓滅菌 15分鐘。(2)   生理鹽水：稱取8.5g氯化鈉溶于1000ml蒸餾水中，高壓滅菌121、15分鐘。4.1.3檢樣程序做成幾個(gè)適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)液檢  樣        選擇2-3個(gè)適宜稀釋度各以1ml之量加入滅菌平皿中    每皿加入適量瓊脂            36±1   

18、60;  48±2h菌落計(jì)數(shù)數(shù)     報(bào)  告 4.1.4操作步驟（1）檢樣稀釋及培養(yǎng)a.將檢樣搖勻，以無菌操作將檢樣25g(或25ml)放于含有225ml滅菌生理鹽水三角瓶中，充分搖勻，作為1:10的稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1:10的稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水的試管中（注意吸管尖不要觸及管內(nèi)稀釋液），振搖試管混勻，作為1:100的稀釋液；按上述操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。b.檢樣根據(jù)實(shí)際情況選擇適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)，用1ml滅菌吸管分別移取l

19、ml適當(dāng)稀釋度的樣液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。c.稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46的營(yíng)養(yǎng)瓊脂注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使樣液與瓊脂混勻；同時(shí)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂注入加有1ml滅菌生理鹽水的平皿內(nèi)做空白對(duì)照。d.待營(yíng)養(yǎng)瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板。置于36±1的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h，取出計(jì)數(shù)。4.1.5計(jì)數(shù)規(guī)則（1）平板菌落數(shù)的選擇選取菌落數(shù)在30-300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)，若其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又

20、很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘2以代表全皿菌落數(shù)。平板內(nèi)如有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)（菌落之間無明顯界限），如僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如有幾個(gè)不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。（2）稀釋度的選擇a.應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30-300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)，報(bào)告之 。b.若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30-300之間，則視二者之比來決定，若其比值小于2，報(bào)告其平均數(shù)，若大于2，則報(bào)告其中較小的數(shù)字 。c.若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告 。d.若所有稀釋度的菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告 。e若所有稀釋度均

21、無菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告 。f.若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30-300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告 。4.1.6菌落數(shù)的報(bào)告及報(bào)告方式（1）報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告；大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值以四舍五入的方法計(jì)算，用10的指數(shù)來表示。（2）報(bào)告方式稀釋倍數(shù)平均菌落數(shù)例次 10-1 10-2 10-3兩稀釋倍  數(shù)之  比菌落總數(shù) 個(gè)/g或個(gè)/ml報(bào)告方式 個(gè)/g或個(gè)/ml1多不可計(jì)16420164001.6×

22、;1042多不可計(jì)295461.6377503.8×1043多不可計(jì)271602.2271002.7×1044多不可計(jì)46505135130005.1×1055271152702.7×10260001×10107多不可計(jì)30512305003.1×1044.2有毒有害物質(zhì)的檢測(cè)4.2.1有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 a 氣相色普法 1.儀器與試劑（1）電子捕獲堅(jiān)定器、氚放射源（2）色譜柱：長(zhǎng)1.2M，內(nèi)徑3mm（3）固定液：3%OV-17+3%QF-1（4）擔(dān)體：ChromosorbW800-100目（5）汽化室溫度：2

23、30；色譜柱溫度：186；鑒定器溫度：190（6）載氣：N2，柱前壓2.2kg,流速92ml/min(7) 極化電壓36V；記錄器流速：5mm/min2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備六六六標(biāo)準(zhǔn)曲線：取a-六六六，r-六六六每ml0.2ug,b-六六六每ml1ug，q-六六六每ml0.5ug混合標(biāo)準(zhǔn)液1、3、5、7、10ul，分別進(jìn)樣，制造標(biāo)準(zhǔn)曲線。DDT及其異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：取O，P-DDT、PP-DDD、P，P-DDE、P，P-DDT每ml含有1ug的混合標(biāo)準(zhǔn)液分別進(jìn)樣；1、3、5、7、10ul，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）測(cè)定：     將凈化濃縮至一定體

24、積的樣液進(jìn)樣5ul，測(cè)得的峰高不應(yīng)超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，否則需要減少進(jìn)樣量或?qū)悠废♂尯笾販y(cè)。（3）計(jì)算：     從色譜圖中量出被測(cè)樣峰高值，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，找出相當(dāng)農(nóng)藥的量，計(jì)算                 有機(jī)農(nóng)藥（mg/kg）=V/W×C/V1        式中：V樣品提取液濃縮體積ml  &

25、#160;           V1進(jìn)色譜儀濃縮體積ml              C相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)濃度ug              W相當(dāng)于原來樣品重量g4.2.2硝酸鹽、亞硝酸鹽的測(cè)定1.固體試劑法：（1）試劑：亞硝酸鹽，硝酸鹽檢測(cè)專用藥

26、粉（哈爾濱專利）（2）方法：取亞硝酸鹽，硝酸鹽檢測(cè)專用試劑（哈爾濱試劑）二耳勺（0.04-0.05g）倒入試管中，加入被檢奶樣1ml，振蕩溶解1-2min；（3）觀察判定：正常奶無色；含亞硝酸鹽，硝酸鹽奶，因含量不同顏色呈微粉一水粉一粉色（4）注意事項(xiàng)：試管用前要用不含亞硝酸鹽水刷凈，以防止影響判定結(jié)果；低溫季節(jié)時(shí)，加奶樣后應(yīng)加溫觀察；注意本試劑出廠日期，本品保質(zhì)期一年；試劑應(yīng)干燥避光貯存，用后馬上把蓋關(guān)嚴(yán)，防透空氣。4.2.3黃曲霉毒素的測(cè)定1原理標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品試液加入各自板孔，游離的黃曲霉毒素M1與微孔中包被的黃曲霉毒素M1抗體結(jié)合，沒有結(jié)合的物質(zhì)在洗滌中被清除。再加入黃曲霉毒素M1酶標(biāo)記

27、物，將沒有結(jié)合的抗體位點(diǎn)全部覆蓋，結(jié)合的酶標(biāo)記物通過顯色液顯示出來。最后加入終止液，用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定吸光度值，吸光度值與樣品中的黃曲霉毒素M1含量成反比。2試劑和溶液（1）本實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純，水為去離子水；（2）黃曲霉毒素M1試劑盒1：最低檢出限不大于0.02g/kg；（3）微孔板；（4）黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度范圍00.10g/kg；（5）酶標(biāo)記物濃縮液；（6）酶標(biāo)記物稀釋用緩沖液；（7）顯色劑；（8）檸檬酸緩沖液；（9）終止液；（10）樣品稀釋緩沖液；（11）洗板濃縮酶標(biāo)記物工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算用量，用酶標(biāo)記物稀釋用緩沖液（4.1.4）將其濃縮液（4.1.3）以1：100稀

28、釋，切勿渦旋混合，配制后放回試劑盒放置4h以上，備用。（12）顯色反應(yīng)液：顯色劑（4.1.5）用檸檬酸緩沖液（4.1.6）以1：10稀釋，在使用前配制，避光保存。（13）洗板工作液：洗板濃縮液（4.1.9）用水以1：20稀釋，備用。（14）0.36mol/L亞鐵氰化鉀溶液：稱取15.2g K4Fe(CN)6·3H2O，用水溶解、定容至100mL。（15）1.04mol/L硫酸鋅溶液：稱取29.9g ZnSO4·7H2O,用水溶解、定容至100mL。液；3儀器和設(shè)備（1）微孔板酶標(biāo)儀（帶450nm濾光片）。（2）天平：最小感量0.01g。（3）冷凍離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速不小于300

29、0rpm。（4）旋渦混合器。（5）連續(xù)可調(diào)移液器及配套吸頭：5L50L、20L200L、200L1000L。（6）脫脂棉簽。（7）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)玻璃器皿。4分析步驟（1）樣品前處理生鮮乳：將待測(cè)樣品搖勻，平行稱取兩份5.0g試樣（精確到0.1g）到10mL離心管中，2 oC8 oC 以3000rpm的轉(zhuǎn)速離心10min，用脫脂棉簽除去上層脂肪。加入150L亞鐵氰化鉀溶液（4.5），短暫渦旋混合后加入150L硫酸鋅溶液（4.6），渦旋振蕩3min。10oC15 oC 以3000rpm的轉(zhuǎn)速離心10min，上清液供測(cè)試用。（2）測(cè)試程序a以下操作均須在20 oC25 oC溫度下進(jìn)行。b取出試劑盒，放置

30、1h以上，使其溫度恢復(fù)到20 oC25 oC。將足夠標(biāo)準(zhǔn)和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架，并記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品對(duì)應(yīng)的位置。c加100L標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.1.2）和已處理好的樣品試液到各自微孔中，孵育60min。d倒除微孔中的液體，注入洗板工作液（4.4）約300L，重復(fù)洗滌5次，最后在吸水紙上輕輕拍干。e在所有微孔中加入100L酶標(biāo)記物工作液（4.2），孵育20min。f重復(fù)6.2.3步驟。g在所有微孔中加入100L顯色反應(yīng)液（4.3），孵育30min。h在所有微孔中加入50L終止液（4.1.7），混勻后60min內(nèi)在450nm處測(cè)定吸光度值。5分析結(jié)果計(jì)算和表述（1）標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值

31、（C）為橫坐標(biāo)，相對(duì)吸光度值（B/B0）為縱坐標(biāo)，在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。相對(duì)吸光度值（%）= B/B0  × 100  - (1)式中： B 標(biāo)準(zhǔn)（或樣品）的吸光度值；B0 空白（濃度為0的標(biāo)準(zhǔn)溶液）的吸光度值。（2）結(jié)果計(jì)算a液態(tài)乳中黃曲霉毒素M1的含量按式（2）計(jì)算：X1 = k1·Cx - (2)式中：X1 液態(tài)乳中黃曲霉毒素M1的含量，g/kg；       k1 液態(tài)乳在前處理過程中的稀釋倍數(shù)。      Cx 由測(cè)試用上清

32、液的相對(duì)吸光度值查標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的黃曲霉毒素M1的濃度，ng/mL；4.3微量元素的測(cè)定4.3.1重金屬含量的測(cè)定 a 鉛含量的測(cè)定：雙硫腙比色法（1）原理   樣品經(jīng)消化后，在pH值在8-9時(shí)，鉛離子與雙硫腙生成紅色螯合物，可被三氯甲烷、四氯化碳等有機(jī)溶劑萃取，顏色的深淺與鉛離子濃度成正比。（2）試劑酚紅指示劑：溶解0.1酚紅于100ml95%的乙醇中；20%檸檬酸銨溶液：取50g檸檬酸銨，溶于100ml水中，加2滴酚紅指示劑，用1：1氨水調(diào)至微紅色，置于分液漏斗中，用雙硫腙三氯甲烷溶液分次抽提，每次10-20ml，至溶劑層綠色不變?yōu)橹?。棄去雙硫腙三氯甲烷層，

33、用三氯甲烷洗2次，每次5ml，棄去三氯甲烷層，加水稀釋至250ml；20%鹽酸羥胺溶液：取20g鹽酸羥胺。溶于50ml水中，加2滴酚紅指示劑，用1：1氨水調(diào)至PH值為8.5-9.0，用試劑處理除鉛和除去殘余雙硫腙，鹽酸化，加水至100ml；10%氰化鉀溶液：取10g氰化鉀，溶于100ml水中；0.05%雙硫腙儲(chǔ)備液：取精制過的雙硫腙0.05g，加100ml三氯甲烷溶解，儲(chǔ)備與冰箱中；鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.1598g硝酸鉛，加10ml1%硝酸，溶解后，移入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度；雙硫腙使用液：吸取1.0ml雙硫腙儲(chǔ)備液，加三氯甲烷至10ml，混勻，用1cm比色杯，以三氯甲烷調(diào)節(jié)儀器

34、零點(diǎn)，于波長(zhǎng)510nm處測(cè)吸光度，用下式算出配制100ml雙硫腙使用液所需的雙硫腙儲(chǔ)備液的毫升數(shù)：V=10（2-70）/A=1.55/A；標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0ml鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液于100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度。（3）操作方法     取適量樣品，用硝酸-硫酸法消化或干法灰化后定容至50或100ml，吸取10.0ml消化液和相同的試劑空白液，分別置于125ml分液漏斗中，各加水至20ml。吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于125ml分液漏斗中，各加1%硝酸溶液至20ml。    

35、; 于樣品消化液、試劑空白液和鉛標(biāo)準(zhǔn)液各加2.0ml20%檸檬酸銨溶液，1.0ml20%鹽酸羥胺溶液和2滴酚紅指示劑，用1：1氨水調(diào)至紅色，加10.0ml雙硫腙溶液，劇烈振搖1min，靜置分層后，三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾入1cm比色杯中，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)510nm處測(cè)的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在曲線上查出樣品消化液和試劑空白液中鉛的含量。（4）計(jì)算       鉛的含量（mg/l）=V1(A1-A2)/W*V2式中：A1測(cè)定用樣品消化液中鉛的含量ug      A2試劑空白液中鉛的含量

36、ug      W樣品體積ml      V1樣品消化液總體積ml      V2測(cè)定用樣品消化液體積mlb 汞含量的測(cè)定：雙硫腙比色法（1）原理     汞離子在酸性溶液中與雙硫腙生成橙色絡(luò)合物，用氯仿萃取比色。（2）試劑     20%鹽酸羥胺溶液     雙硫腙使用液    汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：準(zhǔn)確

37、稱取0.135g于干燥器中干燥過的二氯化汞，加0.5mol/l硫酸使其溶解后，移入100ml容量瓶中，定容至刻度。（3）操作方法：     稱取適量樣品，消化后加水至總體積為150ml，去全量消化液用錐形瓶在電爐上煮沸10min，除去二氧化氮，冷卻，于樣品消化液及空白液中各加5%高錳酸鉀液至溶液呈紫紅色，然后再加20%鹽酸羥胺溶液至紅色褪去，加2滴酚酞指示劑，用氨水調(diào)痔PH值為1-2，定量轉(zhuǎn)移至125ml分液漏斗中。     吸取0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml汞標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，分別

38、置于125ml分液漏斗中，各加10ml5%硫酸，各加水至40ml，混勻。再各加1ml20%鹽酸羥胺溶液，放置20分鐘，并時(shí)時(shí)振搖。     于上述個(gè)分液漏斗中各加5.0ml雙硫腙使用液，劇烈振搖2分鐘，靜置分層后，經(jīng)脫脂棉將溶劑層入1cm比色杯中，以氯仿調(diào)節(jié)零點(diǎn)，在波長(zhǎng)490nm處測(cè)吸光度，標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去零管吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算如下：        Hg(mg/kg)=(A1-A2)×100/W×1000=A1-A2/10W   式中：A

39、1樣品消化液中汞的含量ug         A2試劑空白液中汞的含量ug         W 樣品重量g同樣用比色法可測(cè)出鉻、錫等金屬的含量。4.3.2非金屬元素的檢測(cè)（1）無機(jī)砷的檢驗(yàn)                     5其他要求5

40、.1酒精實(shí)驗(yàn)酒精有脫水作用，當(dāng)給牛奶中加入酒精后，牛奶酪蛋白膠粒周圍水化層被脫掉，膠粒變成只帶負(fù)電荷的不穩(wěn)定狀態(tài)。當(dāng)奶的酸度增高時(shí)，H與負(fù)電荷作用，膠粒變?yōu)殡娭行远l(fā)生沉淀。奶的酸度與引起酪蛋白沉淀的酒精濃度之間存在著一定的關(guān)系，故可利用不同濃度的酒精檢測(cè)奶樣，以是否結(jié)絮來判定奶的酸度。（1）儀器: 平皿，直徑80-90 mm    量筒，250 ml   吸管，2 ml 酒精計(jì)   溫度計(jì) （2）試劑:所有試劑均應(yīng)為分析純；實(shí)驗(yàn)用水至少應(yīng)是蒸餾水。    酒精：根據(jù)需要用分析純中性乙醇配制75º

41、; 的酒精。（注：如酒精呈酸性，可用0.1mol/l或1 mol/l NaOH進(jìn)行中和，中和時(shí)推薦使用5g/l酚酞指示劑）（3）實(shí)驗(yàn)步驟:準(zhǔn)確吸取2 ml牛奶于平皿中（注： 該步驟開始后，應(yīng)將試驗(yàn)連續(xù)進(jìn)行下去直至完成，中間不得間斷；酒精加入混合后，應(yīng)在30秒內(nèi)觀察結(jié)果）根據(jù)需要在加有奶樣的平皿中加入2 ml 75º的酒精，要邊加邊搖，使酒精與牛奶均勻混合，觀察是否有絮片生成（注：日常試驗(yàn)應(yīng)盡量在20ºC左右的室溫下進(jìn)行，仲裁試驗(yàn)必須在20ºC條件下進(jìn)行； 絮片不明顯，無法給出準(zhǔn)確判定時(shí)，要以生鮮奶的滴定酸度決定奶是否符合加工要求）（4）結(jié)果判定：出現(xiàn)絮片的牛乳為酒

42、精試驗(yàn)陽性乳，不出現(xiàn)絮片的牛乳為酒精試驗(yàn)陰性乳。5.2 煮沸實(shí)驗(yàn)：（1）儀器：250ml三角瓶   電爐    （2）操作步驟：取約50ml樣品于250ml三角瓶中，置于電爐上加熱，在加熱過程中不停搖動(dòng)，當(dāng)三角瓶中的牛奶沸騰后，將三角瓶取下，冷卻后品嘗，并觀察瓶底白色顆粒的多少。（3）結(jié)果判定：品嘗其有奶香味，無其他異味，則判定為合格（白色顆粒暫不作為判定依據(jù)）。5.3抗生素的檢驗(yàn)5.4摻假實(shí)驗(yàn).5.4.1鹽的檢驗(yàn)：（1）原理：鮮奶中氯化物與硝酸銀反應(yīng)生成氯化銀沉淀，用鉻酸鉀作指示劑，當(dāng)奶中氯化物與AgNO3作用后，過量的AgNO3與鉻酸鉀生成

43、赫紅色鉻酸銀。（2）試劑：AgNO3溶液：稱于105烘干至恒重的AgNO39.6g，用蒸餾水溶于1000ml棕色容量瓶中，定容至刻度。10%鉻酸鉀溶液：稱取鉻酸鉀10g溶于100ml蒸餾水。注：兩種試劑應(yīng)儲(chǔ)存與棕色瓶中。（3）方法：取乳樣2ml于小試管中，加鉻酸鉀溶液5滴，混合均勻后加AgNO3試劑1.5ml，立即搖勻后觀察結(jié)果。（6）結(jié)果判定：正常：顯磚紅色；摻鹽乳：呈黃色，且隨著摻入量的增多，顏色由土黃色向鮮黃色變化。注意事項(xiàng)：試劑加入順序不同會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，應(yīng)按“牛奶+指示劑+硝酸銀”或“指示劑+牛奶+硝酸銀”的順序進(jìn)行。5.4.2堿性物質(zhì)的檢出（玫瑰紅酸法）：（1）原理：鮮奶中如摻堿可使指示劑變色，根據(jù)顏色的不同，粗判斷加堿量的多少。（2）試劑配制：玫瑰紅酸（0.05%乙醇溶液）：稱取0.05克玫瑰紅酸溶于100ml95%的乙醇溶液中。（3）方法：于盛有2牛奶的試管中加入2玫瑰紅酸溶液，搖勻，觀察顏色變化。（4）判定：正常乳：呈黃色；摻堿乳：呈玫紅色，且摻入量與顏色的深淺成正比。 5.4.3甲醛的測(cè)定（1）原理：甲醛常被作為防腐劑而摻入牛乳中，鮮奶中的甲醛在酸性溶液