血培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1、會(huì)計(jì)學(xué)1血培養(yǎng)注意事項(xiàng)血培養(yǎng)注意事項(xiàng)感染形勢(shì)嚴(yán)峻感染形勢(shì)嚴(yán)峻 感染性疾病并沒(méi)有像人類(lèi)曾經(jīng)預(yù)料的那樣隨著抗感染化療感染性疾病并沒(méi)有像人類(lèi)曾經(jīng)預(yù)料的那樣隨著抗感染化療時(shí)代的到來(lái)而銷(xiāo)聲匿跡。多種原因造成的時(shí)代的到來(lái)而銷(xiāo)聲匿跡。多種原因造成的易感人群增加；易感人群增加； 多重耐藥菌多重耐藥菌如甲氧西林耐藥的金葡菌如甲氧西林耐藥的金葡菌（MRSAMRSA）、產(chǎn)）、產(chǎn)ESBLESBL的的肺炎克雷伯菌和大腸桿菌、肺炎克雷伯菌和大腸桿菌、泛耐藥泛耐藥的銅綠假單胞菌和鮑曼的銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌等不斷涌現(xiàn)并持續(xù)蔓延，不動(dòng)桿菌等不斷涌現(xiàn)并持續(xù)蔓延，曲霉菌、念珠菌等曲霉菌、念珠菌等深部深部真菌越來(lái)越常見(jiàn)；真菌越

2、來(lái)越常見(jiàn)； 新發(fā)感染病原新發(fā)感染病原如如SARSSARS、禽流感、手足口病、甲型、禽流感、手足口病、甲型H1N1H1N1流感流感等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人類(lèi)關(guān)注的熱點(diǎn)。等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人類(lèi)關(guān)注的熱點(diǎn)。臨床微生物學(xué)的任務(wù)臨床微生物學(xué)的任務(wù)WHOWHO對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提出三項(xiàng)指導(dǎo)性方針提出三項(xiàng)指導(dǎo)性方針 （1 1）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在快速診斷快速診斷方面；方面； （2 2）顯微鏡檢查顯微鏡檢查對(duì)建立快速的初步診斷具有對(duì)建立快速的初步診斷具有很大價(jià)值；很大價(jià)值； （3 3）實(shí)驗(yàn)室人員必須）實(shí)驗(yàn)室人員必須主動(dòng)與臨

3、床結(jié)合，將實(shí)主動(dòng)與臨床結(jié)合，將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。標(biāo)本采集和處理的原則標(biāo)本采集和處理的原則 發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時(shí)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查 最好是病程最好是病程早期、急性期或癥狀典型早期、急性期或癥狀典型時(shí)，而且必須時(shí)，而且必須在在使用抗生素或其他抗菌藥物之前使用抗生素或其他抗菌藥物之前采集采集標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作嚴(yán)格無(wú)菌操作，采集的標(biāo)本應(yīng)無(wú)外源，采集的標(biāo)本應(yīng)無(wú)外源性污染，減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染性污染，減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染 采集的標(biāo)本均應(yīng)盛于采集的標(biāo)本均應(yīng)盛于無(wú)菌容器無(wú)菌容

4、器內(nèi)內(nèi)要收集要收集足夠量足夠量的標(biāo)本的標(biāo)本 標(biāo)本采集后應(yīng)標(biāo)本采集后應(yīng)立即立即送至細(xì)菌室送至細(xì)菌室重視無(wú)菌部位的標(biāo)本：血培養(yǎng)重視無(wú)菌部位的標(biāo)本：血培養(yǎng)分析當(dāng)前血培養(yǎng)存在的問(wèn)題：報(bào)告不及時(shí)陽(yáng)性率低采樣時(shí)污染培養(yǎng)一次（單部位）作為診斷依據(jù)采血量不夠（與培養(yǎng)基比例不正確）采樣時(shí)間不正確血液培養(yǎng)操作規(guī)范血液培養(yǎng)操作規(guī)范 采集血培養(yǎng)的重要指征采集血培養(yǎng)的重要指征 1. 1. 發(fā)熱（發(fā)熱（3838）或低溫（）或低溫（3636）。）。2 2 寒戰(zhàn)。寒戰(zhàn)。3 3 白細(xì)胞增多（白細(xì)胞增多（101010109 9/L/L，特別有，特別有“核左移核左移”未成未成熟的或帶狀的白細(xì)胞增多熟的或帶狀的白細(xì)胞增多) )。4

5、4 粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞1110109 9/L/L）。）。5 5 血小板減少。血小板減少。6 6 皮膚粘膜出血。皮膚粘膜出血。7 7 昏迷?；杳?。8 8 多器官衰竭，血壓降低，多器官衰竭，血壓降低，CRP CRP 升高及呼吸快，或同升高及呼吸快，或同時(shí)具備上述幾種體征而臨床可疑菌血癥應(yīng)采血培養(yǎng)。時(shí)具備上述幾種體征而臨床可疑菌血癥應(yīng)采血培養(yǎng)。新生兒菌血癥，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。新生兒菌血癥，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。對(duì)入院危重感染患者未進(jìn)行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，對(duì)入院危重感染患者未進(jìn)行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時(shí)采集血培養(yǎng)。應(yīng)及時(shí)采集血培養(yǎng)。血培養(yǎng)檢測(cè)消毒

6、程序血培養(yǎng)檢測(cè)消毒程序 皮膚消毒程序皮膚消毒程序?yàn)榉乐蛊つw寄生菌污染，可使用消毒劑對(duì)皮膚進(jìn)行嚴(yán)格為防止皮膚寄生菌污染，可使用消毒劑對(duì)皮膚進(jìn)行嚴(yán)格仔細(xì)的消毒處理，最大限度地減低皮膚污染。仔細(xì)的消毒處理，最大限度地減低皮膚污染。 用用70%70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s30s以上。以上。 然后用棉簽（然后用棉簽（1 12%2%碘酊或碘酊或10%10%碘伏）消毒皮膚，從穿刺點(diǎn)碘伏）消毒皮膚，從穿刺點(diǎn)向外以向外以1.51.52cm2cm直徑畫(huà)圈進(jìn)行消毒。直徑畫(huà)圈進(jìn)行消毒。最后用最后用70%70%酒精脫碘。對(duì)碘過(guò)敏的患者，只能用酒精脫碘。對(duì)碘過(guò)敏的患者，只能用70%70%酒精酒

7、精消毒，消毒消毒，消毒60s60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。不允許在消毒后按壓靜脈，除非帶有無(wú)菌手套。不允許在消毒后按壓靜脈，除非帶有無(wú)菌手套。 培養(yǎng)瓶消毒程序培養(yǎng)瓶消毒程序 1 1 用用70%70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s60s。2 2 用無(wú)菌紗布或無(wú)菌棉簽清除橡皮塞表面剩余用無(wú)菌紗布或無(wú)菌棉簽清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。的酒精，然后注入血液。血培養(yǎng)檢測(cè)采集和運(yùn)送血培養(yǎng)檢測(cè)采集和運(yùn)送 采血量采血量 嬰幼兒和兒童，一般靜脈采血嬰幼兒和兒童，一般靜脈采血1 1 5ml5ml，采血量不超過(guò)患者總血，采血

8、量不超過(guò)患者總血量的量的1 1；成人采血量是；成人采血量是8 8 10ml10ml，2020 30ml30ml最合適，血液和肉最合適，血液和肉湯的比一般為湯的比一般為1 15 5至至1 11010。 血培養(yǎng)的份數(shù)和采血時(shí)間血培養(yǎng)的份數(shù)和采血時(shí)間一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單次血培養(yǎng)。一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單次血培養(yǎng)。建議常規(guī)的血培養(yǎng)應(yīng)包括一個(gè)需氧血培養(yǎng)瓶和一個(gè)厭氧血培建議常規(guī)的血培養(yǎng)應(yīng)包括一個(gè)需氧血培養(yǎng)瓶和一個(gè)厭氧血培養(yǎng)瓶。養(yǎng)瓶。對(duì)間歇性菌血癥，用于培養(yǎng)的血液應(yīng)在估計(jì)寒戰(zhàn)或體溫高峰對(duì)間歇性菌血癥，用于培養(yǎng)的血液應(yīng)在估計(jì)寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前到來(lái)之前0.50.5 1h1h采

9、集，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后采集，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h1h進(jìn)行。進(jìn)行。 血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告程序血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告程序 培養(yǎng)培養(yǎng)48h48h后，對(duì)陰性血培養(yǎng)結(jié)果在最短的時(shí)間內(nèi)發(fā)后，對(duì)陰性血培養(yǎng)結(jié)果在最短的時(shí)間內(nèi)發(fā)出初步出初步（中間）（中間）報(bào)告。報(bào)告。 血培養(yǎng)陽(yáng)性，立即進(jìn)行革蘭染色。染色結(jié)果口頭報(bào)血培養(yǎng)陽(yáng)性，立即進(jìn)行革蘭染色。染色結(jié)果口頭報(bào)告告（電話通知）（電話通知）給患者的主治醫(yī)生。給患者的主治醫(yī)生。 CLISCLIS推薦的抗生素敏感試驗(yàn)沒(méi)有血培養(yǎng)直接敏感試推薦的抗生素敏感試驗(yàn)沒(méi)有血培養(yǎng)直接敏感試驗(yàn)法，但根據(jù)革蘭染色可以靈活地選擇抗生素進(jìn)行驗(yàn)法，但根據(jù)革蘭染色可以靈活地選擇抗生素進(jìn)行直接抗生素藥敏

10、試驗(yàn)，供臨床參考使用。直接抗生素藥敏試驗(yàn)，供臨床參考使用。 CLSI要求每次采集2-3套標(biāo)本,每套應(yīng)包括一個(gè)需氧培養(yǎng)瓶,一個(gè)厭氧培養(yǎng)瓶。 成年病人不能只采1瓶血培養(yǎng)標(biāo)本，采血量不足和只做1套血培養(yǎng)所得的結(jié)果是很難正確解釋的。Cockrill2004年報(bào)告:163位病人,血培養(yǎng)儀采血套數(shù)及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)檢出率65%80%96% 血培養(yǎng)的套數(shù)2001年Khanna數(shù)據(jù)7072份血培養(yǎng)，640份陽(yáng)性，陽(yáng)性率為9組別陽(yáng)性率需氧瓶厭氧瓶均報(bào)陽(yáng)55僅需氧瓶報(bào)陽(yáng)26僅厭氧瓶報(bào)陽(yáng)19Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217

11、-219儲(chǔ)從家數(shù)據(jù)（2000年）組別陽(yáng)性率需氧瓶厭氧瓶均報(bào)陽(yáng)50份僅需氧瓶報(bào)陽(yáng)7份僅厭氧瓶報(bào)陽(yáng)23份591份血培養(yǎng)，81份陽(yáng)性，陽(yáng)性率為13.17中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23：285陰性培養(yǎng)結(jié)果分析陰性培養(yǎng)結(jié)果分析 抗生素影響抗生素影響 苛養(yǎng)菌苛養(yǎng)菌 特殊病原體特殊病原體 檢驗(yàn)技術(shù)受限檢驗(yàn)技術(shù)受限 采樣運(yùn)送不當(dāng)采樣運(yùn)送不當(dāng) 非感染性疾病非感染性疾病特別注意特別注意 血培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止皮膚寄生菌或環(huán)境引起的污染。血培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止皮膚寄生菌或環(huán)境引起的污染。 感染性心內(nèi)膜炎，可能由皮膚寄生的微生物引起（例感染性心內(nèi)膜炎，可能由皮膚寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒桿菌

12、屬）。如：表皮葡萄球菌或棒桿菌屬）。 不同部位采集血樣可選擇左、右手臂或頸部，避免通不同部位采集血樣可選擇左、右手臂或頸部，避免通過(guò)靜脈置管直接采集血樣。過(guò)靜脈置管直接采集血樣。 切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。 標(biāo)本采集量少，兒童少于標(biāo)本采集量少，兒童少于1ml1ml，成人少于，成人少于3ml3ml，血，血培養(yǎng)份數(shù)不夠，可明顯降低血培養(yǎng)的陽(yáng)性率。培養(yǎng)份數(shù)不夠，可明顯降低血培養(yǎng)的陽(yáng)性率。 采血時(shí)機(jī)不合適，未抓住菌血癥時(shí)期，或在剛使采血時(shí)機(jī)不合適，未抓住菌血癥時(shí)期，或在剛使用抗生素不久，均降低了血培養(yǎng)的陽(yáng)性率。用抗生素不久，均降低了血培養(yǎng)的陽(yáng)性率。 采

13、血最好在：體溫升高前半小時(shí)，使用抗生素前采血最好在：體溫升高前半小時(shí)，使用抗生素前，或停用抗生素，或停用抗生素24h24h。特別提醒 血培養(yǎng)瓶存放于冰箱，取出后立即采血進(jìn)行培養(yǎng)或血培養(yǎng)瓶存放于冰箱，取出后立即采血進(jìn)行培養(yǎng)或血液標(biāo)本采集后放置于冰箱，過(guò)低的溫度均抑制細(xì)血液標(biāo)本采集后放置于冰箱，過(guò)低的溫度均抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。菌生長(zhǎng)。 血液標(biāo)本采集后，放于機(jī)外時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)血液標(biāo)本采集后，放于機(jī)外時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)度已達(dá)衰老期，會(huì)降低陽(yáng)性率。度已達(dá)衰老期，會(huì)降低陽(yáng)性率。 標(biāo)本消毒時(shí)消毒酒精未完全揮發(fā)，會(huì)降低陽(yáng)性率。標(biāo)本消毒時(shí)消毒酒精未完全揮發(fā)，會(huì)降低陽(yáng)性率。 所用培養(yǎng)瓶必須仔細(xì)檢查有無(wú)變色或混濁

14、。所用培養(yǎng)瓶必須仔細(xì)檢查有無(wú)變色或混濁。 對(duì)兩次不同部位血培養(yǎng)生長(zhǎng)同一種微生物，不同對(duì)兩次不同部位血培養(yǎng)生長(zhǎng)同一種微生物，不同（類(lèi)）無(wú)菌部位標(biāo)本培養(yǎng)中生長(zhǎng)同一種微生物或（類(lèi)）無(wú)菌部位標(biāo)本培養(yǎng)中生長(zhǎng)同一種微生物或微生物快速生長(zhǎng)（微生物快速生長(zhǎng)（48h48h內(nèi)）的情況下，應(yīng)考慮是真內(nèi)）的情況下，應(yīng)考慮是真正的感染。正的感染。 培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送至細(xì)菌室，如有特殊情況不能送培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送至細(xì)菌室，如有特殊情況不能送檢的，應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于室溫，切勿放入冰箱。檢的，應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于室溫，切勿放入冰箱。臺(tái)灣長(zhǎng)庚醫(yī)院臺(tái)灣長(zhǎng)庚醫(yī)院BACTEC 9240 13臺(tái)臺(tái)WHOWHO對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提出三項(xiàng)

15、指導(dǎo)性方針提出三項(xiàng)指導(dǎo)性方針 （1 1）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在快速診斷快速診斷方面；方面； （2 2）顯微鏡檢查顯微鏡檢查對(duì)建立快速的初步診斷具有對(duì)建立快速的初步診斷具有很大價(jià)值；很大價(jià)值； （3 3）實(shí)驗(yàn)室人員必須）實(shí)驗(yàn)室人員必須主動(dòng)與臨床結(jié)合，將實(shí)主動(dòng)與臨床結(jié)合，將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。標(biāo)本采集和處理的原則標(biāo)本采集和處理的原則 發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時(shí)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查 最好是病程最好是病程早期、急性期或癥狀典型早期、急性期或癥狀典型時(shí)，而且必須時(shí)，而且必須在在使用

16、抗生素或其他抗菌藥物之前使用抗生素或其他抗菌藥物之前采集采集標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作嚴(yán)格無(wú)菌操作，采集的標(biāo)本應(yīng)無(wú)外源，采集的標(biāo)本應(yīng)無(wú)外源性污染，減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染性污染，減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染 采集的標(biāo)本均應(yīng)盛于采集的標(biāo)本均應(yīng)盛于無(wú)菌容器無(wú)菌容器內(nèi)內(nèi)要收集要收集足夠量足夠量的標(biāo)本的標(biāo)本 標(biāo)本采集后應(yīng)標(biāo)本采集后應(yīng)立即立即送至細(xì)菌室送至細(xì)菌室血培養(yǎng)檢測(cè)消毒程序血培養(yǎng)檢測(cè)消毒程序 皮膚消毒程序皮膚消毒程序?yàn)榉乐蛊つw寄生菌污染，可使用消毒劑對(duì)皮膚進(jìn)行嚴(yán)格為防止皮膚寄生菌污染，可使用消毒劑對(duì)皮膚進(jìn)行嚴(yán)格仔細(xì)的消毒處理，最大限度地減低皮膚污染。仔細(xì)的消毒處理，最大限度地減低皮膚污染。 用用70%70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待酒精擦拭靜脈穿刺部