色譜柱故障診斷和治療和維護(hù)

1、色譜柱故障診斷和治療和維護(hù)Authoring Division Name File NameSecurity Notice (if required) HLC與GC 色譜柱問題用戶調(diào)查 色譜柱問題Back Pressure, Plugged Frits24%Poor Reproducibility16Sample Recovery14Loss of Resolution13Instability11Voids8.1Leaks, Fittings4.8pH Range2.0Low Plate Count2.0Column Overload2.0Cost1.7Miscellaneous15介紹提綱

2、I. 常見問題， 現(xiàn)象及排除方案- 基線漂移/噪音- 峰型- 壓力變化- 保存漂移II. 日常維護(hù)/ 良好的實(shí)踐- 在線裝置- 樣品制備- 操作的限制III. 再生/維修已損壞的色譜柱 -物理方法 -化學(xué)方法I. 常見問題 基線噪音可能的原因：流動(dòng)池臟檢測(cè)器燈有問題如果是周期性的，那么起源于泵的脈沖溫度對(duì)檢測(cè)器的影響氣泡經(jīng)過檢測(cè)器Time (min.)基線漂移 梯度洗脫 溫度不穩(wěn)定 (示差檢測(cè)器 流動(dòng)相中有污染物 柱中的流動(dòng)相沒有平衡 體系中有污染物流出可能的原因：鬼 峰 鬼峰即使不樣也會(huì)出現(xiàn)的峰20% - 100% MeOH沒有進(jìn)樣601530150371517問題1- 流動(dòng)相臟問題2- 樣

3、品過量(也可能是回收率太差)峰 型雙 峰柱 塌 陷正 常 峰 雙 峰柱中有死體積 過濾片局部堵塞只有一個(gè)雙峰組分的共洗脫可能原因：樣品與溶劑不匹配峰 型所有的峰都展寬柱效降低柱死體積大進(jìn)樣量 / 質(zhì)量高捻度流動(dòng)相局部峰展寬前次進(jìn)樣后流出的組分大分子量樣品蛋白或聚合物峰展寬樣品與流動(dòng)相不匹配峰 型拖尾峰對(duì)稱性 1.2NormalTailingNormalTailing原因：局部峰拖尾二次保存效應(yīng)殘留硅醇基的反響小峰緊跟在大峰的后面流出柱頭有污染金屬所有峰拖尾額外的柱效應(yīng)柱損壞不適當(dāng)?shù)臉悠妨?溶劑峰 型NormalFronting前伸峰不對(duì)稱性 強(qiáng)有機(jī)溶劑) 通常最有效低 pH 流動(dòng)相, 如 0.

4、1% TFA or 0.01M H3PO4, 也是有效的升高溫度60-80色譜柱修復(fù)和再生 - 化學(xué)變化-I6M鹽酸胍、異硫氰酸胍、尿素等溶液可用于去除蛋白質(zhì)的沉積XDB, 有機(jī)聚合物等填料可使用高pH 水溶液 /有機(jī)溶液，如： 0.01M NaOH 50% 異丙醇 /水溶液，硅膠基質(zhì)應(yīng)盡量減少接觸時(shí)間 (15-30 min).色譜柱的修復(fù)和再生 - 化學(xué)變化 -IIExample: 4.6 mm ID x 15 cm Zorbax 300SB-C18Flow rate: 1 mL / min; Temp: 80A: 0.1% TFA in water B: 0.1% TFA in acetonitrile100% A for 30 min.; 0-100% B over 30 min.; H