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文檔簡介
1、試卷(一)一、名詞解釋 (每小題3分,共10小題)1) 著絲粒和動粒 (centromere and kinetochore) :著絲粒即染色體的主縊痕,是高度有序的整合結(jié)構(gòu),至少分為3種不同的結(jié)構(gòu)域:動粒結(jié)構(gòu)域、中央結(jié)構(gòu)域和配對結(jié)構(gòu)域。動粒動粒結(jié)構(gòu)域即動粒位于著絲粒外表面,哺乳動物著絲粒分為3個區(qū)域:內(nèi)板,中間間隙和外板,(組成)。紡綞體微觀與動粒的外側(cè)結(jié)合,動粒的內(nèi)側(cè)與著絲粒相互交織。著絲粒-動粒復(fù)合體及在細(xì)胞分裂過程中的重要性。2) 接觸抑制 (contact inhibition) :正常細(xì)胞生長到彼此相互接觸時,其運動和分裂活動就會停止。癌細(xì)胞失去運動和分裂的接觸抑制,“它們” 能堆
2、積。正常細(xì)胞體外培養(yǎng)貼壁性,轉(zhuǎn)化細(xì)胞貼壁性下降。懸浮性培養(yǎng)。3) 微管組織中心 (microtubule organizing center, MTOC):微管在生理狀態(tài)或?qū)嶒炋幚斫饩酆笾匦卵b配的發(fā)生處。MTOC決定了細(xì)胞微管的極性,微管的(-)極指向MTOC,(+)極背向MTOC。動物細(xì)胞的MTOC是中心體。4) 轉(zhuǎn)分化 (transdifferentiation) :一種類型的分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N類型的分化細(xì)胞。轉(zhuǎn)分化往往經(jīng)歷去分化和再分化的過程。去分化是指分化細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能變成具有未分化細(xì)胞特征的過程。5) proto-oncogene and oncogene:proto-
3、oncogene (原癌基因) 是控制細(xì)胞生長和分裂的正?;?,而oncogene (癌基因) 是原癌基因的突變形式;原癌基因的突變能引起正常細(xì)胞癌變。命名原因、癌基因表達產(chǎn)物。6) 非細(xì)胞體系 (cell-free system) :an experimental system to study cellular activities that does not required whole cells. Such systems typically contain a preparation of purified proteins and/or subcellular fractions
4、 and are amenable to experimental manipulation.7) 常染色質(zhì)和異染色質(zhì): 常染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低,處于伸展?fàn)顟B(tài),用堿性染料染色時著色淺。構(gòu)成常染色質(zhì)的DNA主要是單一序列和中度重復(fù)序列DNA,處于常染色質(zhì)狀態(tài)是基因轉(zhuǎn)錄的必要條件。異染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài),用堿性染料染色著色深。異染色質(zhì)又分為結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)和兼性異染色質(zhì)。結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)是指除復(fù)制期以外在整個細(xì)胞周期均處于聚縮狀態(tài),DNA包裝比在整個細(xì)胞周期中基本沒有較大變化的異染色質(zhì)。兼性異染色質(zhì)是指在某些細(xì)胞類型或一定的發(fā)育階段,原來的常染色質(zhì)聚縮,并喪失基因轉(zhuǎn)錄活性,變?yōu)楫惾旧?/p>
5、質(zhì)。8) trans Golgi network:that part of the Golgi apparatus that is furthest from the endoplasmic reticulum and from which proteins and lipids leave for lysosomes, secretory vesicles or the cell surface.9) 管家基因: 所有細(xì)胞均要表達的一類基因,其產(chǎn)物是對維持細(xì)胞基本生命活動所必須的。10) 主動運輸:由載體蛋白介導(dǎo)的物質(zhì)逆濃度梯度或電化學(xué)梯度由濃度低的一側(cè)向濃度高的一側(cè)進行跨膜轉(zhuǎn)運的方式,主動
6、運輸過程需要消耗能量,需要與某種釋放能量的過程相偶聯(lián)。主動運輸需要膜上的特異性載體蛋白,這些載體蛋白不僅具有結(jié)構(gòu)上的特異性,而且具有結(jié)構(gòu)上的可變性。二、問答題 (每題7分,共10題)1.如何理解膜蛋白在細(xì)胞膜上分布的不對稱性及其意義?(1) 膜周邊蛋白和膜內(nèi)在蛋白在質(zhì)膜上都呈不對稱性分布。(2) 膜蛋白分子在細(xì)胞膜上具有明確的方向性:a, 細(xì)胞表面的受體、載體蛋白等都安一定的方向傳遞信號和轉(zhuǎn)運物質(zhì);b, 與細(xì)胞膜相關(guān)的酶促反應(yīng)發(fā)生在膜的某一側(cè)面;c, 膜蛋白的糖殘基均分布在質(zhì)膜的細(xì)胞外表面。(3) 膜蛋白決定了膜特征及其功能。膜蛋白的不對稱性是生物膜完成復(fù)雜的在時間和空間上有序的各種生理功能的
7、保證。2.何謂信號假說?解釋開始轉(zhuǎn)移序列 (start-transfer sequence) 和停止轉(zhuǎn)移序列 (stop-transfer sequence) ,并說明它們與合成蛋白質(zhì)的membrane orientation之間的關(guān)系 。信號假說是目前公認(rèn)的關(guān)于分泌性蛋白被糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (rER) 選擇并輸出的機制和指導(dǎo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運至細(xì)胞特定部位的機制。分泌性蛋白合成首先在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中開始,在其N端有一段序列稱為信號序列或信號肽,該序列中的氨基酸多數(shù)為疏水性氨基酸。當(dāng)信號序列合成后便與位于rER 膜上的特異受體結(jié)合,從而指導(dǎo)分泌性蛋白到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上合成。隨后信號肽穿入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并引導(dǎo)肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔
8、,多肽鏈合成后信號肽大多被切除。信號序列存在與很多種位于細(xì)胞器中的蛋白,這些細(xì)胞器蛋白在細(xì)胞質(zhì)中合成后在位于N端的信號序列指導(dǎo)下被轉(zhuǎn)運至細(xì)胞的特點部位。引導(dǎo)肽鏈穿過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的信號肽稱為start-transfer sequence。肽鏈中還可能有某些序列與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜有很強的親和力而結(jié)合在脂雙層中,這段序列不再轉(zhuǎn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,稱為stop-transfer sequence。如果一種多肽只有N端信號序列而沒有stop-transfer sequence,這種多肽一般進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中。如果一種多肽的stop-transfer sequence位于分子中部,這種多肽最終會稱為跨膜蛋白;含有多個start
9、-transfer sequence 和stop-transfer sequence的多肽將稱為多次跨膜的膜蛋白。3.試述核小體的結(jié)構(gòu)要點及其實驗證據(jù)。(1) 每個核小體單位包括200bp DNA、一個組蛋白八聚體和一個分子的組蛋白H1.(2) 組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的盤狀核心結(jié)構(gòu)。兩個H3和H4形成的四聚體位于核心顆粒中央,兩個H2A和H2B二聚體分布位于四聚體兩側(cè)。(3) 146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75圈,組蛋白H1在核心顆粒外結(jié)合額外20 bp DNA。(4) 兩個核小體之間以典型長度為60 bp的連接DNA相連。(5) (6)4.The drug taxol ha
10、s the opposite effect of the drug colchicines. Taxol binds tightly to microtubules and stabilizes them; when added to cells, it causes much of the free tubulin to assemble into microtubules. In contrast, colchicines prevent microtubule formation. Taxol is just as pernicious to dividing cells as colc
11、hicines, and both are used as anticancer drugs. Based on your knowledge of microtubule dynamics, suggest why both drugs are toxic to dividing cells despite their opposite actions.(1) 微管系統(tǒng)的解聚和聚合 (polymerization and depolymerization) 對細(xì)胞分裂是必須的。(2) Mitotic spindle的形成首先需要細(xì)胞現(xiàn)有微管系統(tǒng)的解聚提供free tubulin.(3) Th
12、is rearrangement is not possible in Taxol-treated cells.(4) Division is blocked in colchicine-treated cells coz spindle cannot be assembled.(5) Both drugs block the dynamic instability of microtubules 從而影響Mitotic spindle的形成和功能是實施。5.設(shè)計3個不同實驗,檢測細(xì)胞是否發(fā)生編程性細(xì)胞死亡并簡述原理。(1) 形態(tài)學(xué),DAPI染色。(2) DNA電泳,DNA ladder.(3
13、) TUNEL測定。(4) 流式細(xì)胞分析,亞二倍體細(xì)胞。6.用3種實驗確定某組成均一的細(xì)胞群體中細(xì)胞處于S期,并簡述其原理。(1) DNA 含量測定,處于1C和2C之間。(2) S-PCC,呈粉末狀。DNA synthesis.(3) BrdU or 3H-TdR incorporation. DNA synthesis.7.Why do you suppose cells have evolved a special G0 state to exit the cell cycle, rather than just stopping in a G1 state at a G1 checkpo
14、int?(1) 細(xì)胞分裂調(diào)控對multicellular organisms至關(guān)重要。Individual cells must not proliferate unless it is to the benefit of the whole organism.(2) G0期的存在避免了異常的細(xì)胞分裂,因為在G0期細(xì)胞中the cell-sycle control system被解體 (dismantled), 從而避免了細(xì)胞對一些異常情況的反應(yīng)。(3) G1期細(xì)胞中存在完整的cell-cycle control system, 可能對一些不利因素做出響應(yīng)而進行分裂。為了整個個體的利益,細(xì)胞要
15、不停地決定是否進行分裂。(4) 從G0期進入G1期,細(xì)胞需要重新合成所有的components of the cell-cycle control system.8.敘述細(xì)胞G2/M期轉(zhuǎn)換過程中M-Cdk活化機制。(1) M-cyclin (Cyclin B) 的積累,threshold, G2/M at peak.(2) Mitotic-CdK (p34cdc2) phosphorylation and dephosphorylation.(3) M-Cdk activity switches on abruptly at the end of interphase, while M-Cyc
16、lin concentration increases gradually throughout interphase.(4) M-Cdk can activate more M-Cdk through activating phosphatases, producing the sudden, explosive increase in M-Cdk activity that drives the cell abruptly into M phase.9.細(xì)胞膜可以看做是二維溶液,很多的膜蛋白可以象膜脂一樣在脂雙分子層中相對自由地運動。然而細(xì)胞可以限制特定膜蛋白的運動以形成特定功能區(qū)域 (f
17、unctionally specialized regions, or membrane domains) 。說出3種可能的細(xì)胞限制膜蛋白運動的方式。(1) 膜蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。(2) 膜蛋白與另一個細(xì)胞膜蛋白結(jié)合。(3) 膜蛋白與細(xì)胞膜內(nèi)的蛋白結(jié)合。(4) 細(xì)胞膜上存在diffusion barrier.10蘇州大學(xué)2004級生物技術(shù)班細(xì)胞生物學(xué)研究組是一個特殊機構(gòu),專門研究一些“棘手”的和保密性“很強”的工作。最近接到了一個任務(wù),需要培養(yǎng)出正常狗大小的小鼠-“狗鼠”,據(jù)說是為了戰(zhàn)爭需要,哎!我們得采用以下哪一種方案才有可能得到“狗鼠” ?A.Block programmed cell
18、death. B. Overproduce growth factors, mitogens or survival factors. C.Block p53 function. D.退出該研究組,慶祝2006年新年的到來!JJJA不會成功。因為個體發(fā)育過程需要PCD,阻斷了PCD,發(fā)育不能實現(xiàn)。B方案可能成功。Growth factor 和mitogens 的存在使細(xì)胞持續(xù)分裂稱為可能,實現(xiàn)了發(fā)育過程中細(xì)胞數(shù)量的增加;survival factors保證了分化細(xì)胞的存活。Actually,即使?jié)M足這些條件,也很難做到“狗鼠” 的誕生,比如必須提供大量的growth factors, mito
19、gens and survival factors才有可能實現(xiàn)誕生“狗鼠” 所需的細(xì)胞數(shù)量,what is more, 我們必須保證細(xì)胞分化按一定的比例進行,以產(chǎn)生特點比例的不同類型的分化細(xì)胞。C不會成功。P53對細(xì)胞分裂分化等過程具有重要的調(diào)控作用,如參與DNA損傷修復(fù),參與細(xì)胞分化調(diào)控;p53蛋白具有抑制細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的功能。癌與p53. D也是一個主意,至少不會為此煩惱。試卷(二)一、名詞解釋 (每小題3分,共10小題)1)細(xì)胞周期:細(xì)胞分裂是一個復(fù)雜過程,包括物質(zhì)積累,遺傳物質(zhì)復(fù)制,平均分配到兩個子細(xì)胞。物質(zhì)積累和細(xì)胞分裂的循環(huán)。分裂間期和有絲分裂期,間期包括G1,S,G2期。分裂期包括
20、mitosis and cytokinesis.2) 細(xì)胞全能性: 細(xì)胞分裂和分化后仍具有產(chǎn)生完整有機體的潛能或特性。受精卵和早期的胚胎細(xì)胞。3) 染色體超前凝集 (PCC) :與M期細(xì)胞融合的間期細(xì)胞中的染色質(zhì)發(fā)生了凝集,形成了形態(tài)各異的染色體。G1-PCC,S-PCC,G2-PCC. M-Cdk的作用??蓹z測細(xì)胞所處周期時相等。4) cis Golgi network:連續(xù)的分支狀管網(wǎng)結(jié)構(gòu),高爾基體靠近細(xì)胞核的一面。接受來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新合成的物質(zhì),分類后大部分轉(zhuǎn)入高爾基體中間膜囊,小部分蛋白質(zhì)和脂質(zhì)再返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。其它生物活性。5) 中間纖維:10 nm纖維,成分具有組織特異性。按組織來源和免疫
21、原性分為5類:角蛋白纖維,上皮細(xì)胞;vimentin filament, desmin filament, neurofilament, neuroglial filament.6) 活性染色質(zhì)和非活性染色質(zhì):活性染色質(zhì)具有轉(zhuǎn)錄活性,具有輸送的染色質(zhì)結(jié)構(gòu),DNase超敏感位點,折疊程度低,生化上特殊性,很少組蛋白H1與其結(jié)合等。非活性染色質(zhì)沒有轉(zhuǎn)錄活性,異染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài)。7) 鬼筆環(huán)肽 (philloidin) :可以切斷微絲,并結(jié)合在微絲末端阻止actin聚合,對微絲解聚沒有明顯影響,破壞微絲三維網(wǎng)絡(luò)。利用標(biāo)記的philloidin可以特異顯示F-actin.8) 管
22、家基因和奢侈基因: 所有細(xì)胞中都表達的一類基因,對維持細(xì)胞基本生命活動所必需的基因稱為管家基因。組織特異性基因是指不同的細(xì)胞類型進行特異性表達的基因,其產(chǎn)物賦予個類細(xì)胞特異的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與特異的生理功能。細(xì)胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果。時間和空間上的基因差異表達,轉(zhuǎn)錄水平,轉(zhuǎn)錄后加工水平,染色體和DNA水平,翻譯和翻譯后加工與修飾水平等。9) 原代細(xì)胞:從機體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,一般傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)等變化很小,都稱為原代細(xì)胞。在體外適應(yīng)了培養(yǎng)條件,可以連續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞成為傳代細(xì)胞。10) dynein and kinesin:motor proteins. ATPase. dy
23、nein沿微管向(-)極,kinesin向(+)極運動。物質(zhì)沿微管運輸,dynein與鞭毛、纖毛運動,dynein and kinesin與紡綞體微管滑動,中心體的分離形成紡綞體等過程起作用。二、問答題 (每題7分,任選10題)1. 何謂主動運輸?以Na-K泵為例說明。由載體蛋白介導(dǎo)的物質(zhì)逆濃度梯度或電化學(xué)梯度由濃度低的一側(cè)向濃度高的一側(cè)進行跨膜轉(zhuǎn)運的方式,主動運輸過程需要消耗能量,需要與某種釋放能量的過程相偶聯(lián)。主動運輸需要膜上的特異性載體蛋白,這些載體蛋白不僅具有結(jié)構(gòu)上的特異性,而且具有結(jié)構(gòu)上的可變性。Na-K泵,細(xì)胞內(nèi)低Na+高K+。Na+和K+電壓門逆濃度和電化學(xué)梯度輸入輸出的跨膜運轉(zhuǎn)
24、是一種典型的主動運輸方式,由ATP直接提供能量,通過細(xì)胞膜上的Na-K泵來完成。細(xì)胞內(nèi)側(cè)結(jié)合位點與Na相結(jié)合,ATP水解,磷酸化后構(gòu)想變化,將Na泵出;胞外K與另一結(jié)合位點結(jié)合,去磷酸化,構(gòu)想再變化,泵進K。一次循環(huán)3個Na一個K。2. 比較細(xì)胞凋亡和壞死性細(xì)胞死亡。(1) 細(xì)胞凋亡是一種自然的生理過程,是一個主動的由基因決定的自動結(jié)束生命的過程。(2) 細(xì)胞壞死是極端的物理、化學(xué)因素或嚴(yán)重的病理性刺激引起的細(xì)胞損傷和死亡。(3) 凋亡,細(xì)胞膜反折,凋網(wǎng)小體,膜完整,無炎癥反應(yīng)。壞死,膜滲漏,炎癥反應(yīng)。 (4) 凋亡,DNA ladder,TUNEL檢測。3. 舉例說明磷酸化和去磷酸化在細(xì)胞周
25、期調(diào)控過程中的作用。(1) Mitotic-CdK (p34cdc2) phosphorylation and dephosphorylation.(2) M-Cdk activity switches on abruptly at the end of interphase, while M-Cyclin concentration increases gradually throughout interphase.(3) M-Cdk can activate more M-Cdk through activating phosphatases, producing the sudden,
26、explosive increase in M-Cdk activity that drives the cell abruptly into M phase.4. 敘述細(xì)胞周期中主要檢驗點及其作用。檢驗點的概念:保證細(xì)胞周期有序的完成的一種調(diào)控機制。(1) G1期檢驗點,決定細(xì)胞繼續(xù)進行分裂,檢測營養(yǎng)供給、相關(guān)的激素刺激等。(2) S期檢驗點,DNA合成完成?DNA質(zhì)量?(3) G2期檢驗點:DNA合成完成?DNA質(zhì)量?DNA損傷修復(fù)?(4) 紡綞體裝配檢驗點。5. 高爾基體是細(xì)胞內(nèi)大分子運輸?shù)囊粋€主要交通樞紐,如何用實驗證明某分泌型蛋 白的轉(zhuǎn)運是通過高爾基體來完成的?放射自顯影標(biāo)記,正在合
27、成的蛋白質(zhì)。同位素標(biāo)記分泌性細(xì)胞,如胰腺的腺泡細(xì)胞,放射自顯影:開始銀粒位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),稍長時間銀粒出現(xiàn)在高爾基體,接著在頂端釋放的分泌泡中檢測到銀粒。6. 細(xì)胞膜可以看做是二維溶液,很多的膜蛋白可以象膜脂一樣在脂雙分子層中相對自由地運動。然而細(xì)胞可以限制特定膜蛋白的運動以形成特定功能區(qū)域 (functionally specialized regions, or membrane domains) 。說出3種可能的細(xì)胞限制膜蛋白運動的方式。(1) 膜蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。(2) 膜蛋白與另一個細(xì)胞膜蛋白結(jié)合。(3) 膜蛋白與細(xì)胞膜內(nèi)的蛋白結(jié)合。(4) 細(xì)胞膜上存在diffusion barrie
28、r.7. 舉例說明GFP (綠色熒光蛋白) 在細(xì)胞生物學(xué)研究中的應(yīng)用。(1) GFP作為報告分子,reporter gene, reporter protein.(2) 特定蛋白定位。(3) 動態(tài)變化,如the dynamic instability of microtubules.8. A transmembrane protein has the following properties: it has two binding sites, one for solute A and one for solute B. The protein can undergo a conformati
29、onal change to switch between two states: either both binding sites are exposed exclusively on one side of the membrane or both binding sites are exposed exclusively on the other side of the membrane. The protein can switch between the two conformational states only if both binding sites are occupie
30、d or if both binding sites are empty, but cannot switch if only one binding site is occupied.A.What kind of protein do these properties define? B.Do you need to specify any additional properties to turn this protein into a symport that couples the movement of solute A up its concentration gradient t
31、o the movement of solute B down its electrochemical gradient? C.Write a set of rules that defines an antiport.A.The properties define a symport. B.No additional properties need to be specified. Symport概念,特性。兩個結(jié)構(gòu)位點同時結(jié)合或同時empty. B drives the transport of A. C.Antiport概念,特性9. 何謂蛋白質(zhì)的分選?蛋白質(zhì)的分選可分為哪4種基本類型?
32、絕大多數(shù)蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成,然后轉(zhuǎn)運至細(xì)胞特定部位;也只有轉(zhuǎn)運至正確的部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,才能參與細(xì)胞的生命活動,這個過程稱為蛋白質(zhì)的分選。(1) 蛋白質(zhì)的跨膜運轉(zhuǎn):細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)至細(xì)胞器內(nèi)。(2) 膜泡運輸:rER, Golgi complex, fusion, exocytosis.(3) 選擇性的門控轉(zhuǎn)運:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)。(4) 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)的運轉(zhuǎn)。10. 蘇州大學(xué)2004級生物技術(shù)班細(xì)胞生物學(xué)研究組是一個特殊機構(gòu),專門研究一些棘手的和保密性很強的工作。最近接到了一個任務(wù),需要培養(yǎng)出正常狗大小的小鼠-“狗鼠”,據(jù)說是為了戰(zhàn)爭需要,哎!我們得
33、采用以下哪一種方案才有可能得到“狗鼠”?A. Block programmed cell death.B. Block p53 function.C. Overproduce growth factors, mitogens or survival factors.D. 退出該研究組,慶祝2006年新年的到來!JJJA不會成功。因為個體發(fā)育過程需要PCD,阻斷了PCD,發(fā)育不能實現(xiàn)。B方案可能成功。Growth factor 和mitogens 的存在使細(xì)胞持續(xù)分裂稱為可能,實現(xiàn)了發(fā)育過程中細(xì)胞數(shù)量的增加;survival factors保證了分化細(xì)胞的存活。Actually,即使?jié)M足這些條件
34、,也很難做到“狗鼠” 的誕生,比如必須提供大量的growth factors, mitogens and survival factors才有可能實現(xiàn)誕生“狗鼠” 所需的細(xì)胞數(shù)量,what is more, 我們必須保證細(xì)胞分化按一定的比例進行,以產(chǎn)生特點比例的不同類型的分化細(xì)胞。C不會成功。P53對細(xì)胞分裂分化等過程具有重要的調(diào)控作用,如參與DNA損傷修復(fù),參與細(xì)胞分化調(diào)控;p53蛋白具有抑制細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的功能。癌與p53. D也是一個主意,至少不會為此煩惱,哈哈。試卷三一、名詞解釋(每小題2分,共30分)1) primary culture: 直接從機體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。
35、成功傳代之前的培養(yǎng),細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)。通常情況下將第一代至第十代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。最常用的是組織塊培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)。2) endocytosis:Uptake materials into the cell by an invagination of the plasma membrane and its internalization in a membrane-bounded vesicle. Receptor mediated endocytosis.3) membrane asymmetry: 細(xì)胞膜的不對稱性。膜蛋白、膜脂等成分分布不對稱。信號傳遞的方向性。膜內(nèi)外表
36、面機構(gòu)不對稱,功能不對稱。對細(xì)胞功能的實施具有重要意義。4) ubiquitin:蛋白如cyclin的降解與細(xì)胞生命活動的調(diào)節(jié)。Polyubiquitinizaiton, E1, E2, E3, destruction box. 5) survival factor: extracellular signal molecules that must be present in order to prevent programmed cell death. Significance.6) cell recognition: cell-cell interaction. Regulation of
37、 function. 同種或異種,同源或異源??乖贵w,細(xì)胞間,酶與底物。選擇性,特異性。7) transport vesicle: membrane vesicles that carry proteins, lipids, et al. from one intracellular compartment to another, for example from the ER to the Golgi apparatus. Endocytosis, exocytosis, vesicular transport, secretion.8) ER retention signal:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)
38、構(gòu)和功能蛋白質(zhì)羧基端的KDEL信號序列。去除該序列,蛋白就會分泌出來,而不能滯留在ER中。9) importin: 具有核定位信號的蛋白質(zhì)必須與核定位信號受體importin結(jié)合才能穿過核孔復(fù)合體。 10) proto-oncogene: 正?;?,突變后致使細(xì)胞發(fā)生癌變。11) antiport: 偶聯(lián)運輸,同時運轉(zhuǎn)的兩種物質(zhì)是相反的方向。12) anaphase-promoting complex(APC): a protein complex that promotes the destruction of specific proteins, by catalyzing their u
39、biquitination. Crucial component of the cell-cycle control system.13) heterochromatin: region of a chromosome that remains unusually condensed and transcriptionally inactive during interphase.14) nuclear lamina: fibrous layer on the inner surface of the inner membrane made up of a network of interme
40、diate filaments made from lamins.15) voltage-gated channel: membrane protein that selectively allows ions to cross a membrane and is opened by changes in membrane potential. Found mainly in electrically excitable cells such as nerve and muscle.二、問答題(每題10分,共70分)1. 如何理解微管的dynamic instability特性對細(xì)胞分裂的重要
41、性?微管系統(tǒng)的解聚和聚合 (polymerization and depolymerization) 對細(xì)胞分裂是必須的。Mitotic spindle的形成首先需要細(xì)胞現(xiàn)有微管系統(tǒng)的解聚提供free tubulin.染色體運動。2. 設(shè)計兩個實驗證明成纖維細(xì)胞生長因子bFGF具有促進NIH3T3細(xì)胞分裂的作用。細(xì)胞計數(shù):數(shù)量增加。DNA合成方面:BrdU或同位素標(biāo)記TdR摻入等。3. 如何理解cyclin-Cdk復(fù)合物在細(xì)胞周期調(diào)控過程中的中心地位?各個時期控制。CdK活性。Cyclin調(diào)節(jié)。Checkpoint與參與cyclin-CdK. DNA損傷修復(fù)。核膜破裂,核纖層崩解,染色體凝集等
42、。4. 簡述motor proteins的結(jié)構(gòu)特點及在沿著微管進行的物質(zhì)運輸過程中的作用。Dynein,Kinesin。ATP酶活性。頭部。沿著微管運輸物質(zhì)。Dynein往-極運輸,Kenesin極。5. Why do you suppose cells have evolved a special G0 state to exit the cell cycle, rather than just stopping at a G1 checkpoint?(1) 細(xì)胞分裂調(diào)控對multicellular organisms至關(guān)重要。Individual cells must not prolif
43、erate unless it is to the benefit of the whole organism.(2) G0期的存在避免了異常的細(xì)胞分裂,因為在G0期細(xì)胞中the cell-sycle control system被解體 (dismantled), 從而避免了細(xì)胞對一些異常情況的反應(yīng)。(3) G1期細(xì)胞中存在完整的cell-cycle control system, 可能對一些不利因素做出響應(yīng)而進行分裂。為了整個個體的利益,細(xì)胞要不停地決定是否進行分裂。(4) 從G0期進入G1期,細(xì)胞需要重新合成所有的components of the cell-cycle control s
44、ystem.6. 一些抗腫瘤藥物, 如阿糖胞苷(Ara-C)通過促進細(xì)胞凋亡而達到其治療作用。如何證明Ara-C具有促進HL-60細(xì)胞凋亡的作用?(1) 形態(tài)學(xué),DAPI染色。(2) DNA電泳,DNA ladder.(3) TUNEL測定。(4) 流式細(xì)胞分析,亞二倍體細(xì)胞。 7. 如何理解細(xì)胞的全能性?受精卵具有全能性。干細(xì)胞,分化細(xì)胞,體細(xì)胞。細(xì)胞具有發(fā)育成整個個體的潛能。核移植,體細(xì)胞克隆。試卷四一、名詞解釋(每小題2分,共30分)1) -tubulin ring: protein complex in centrosomes that nucleates microtubule as
45、sembly.2) signal sequence: amino acid sequence that directs a protein to a specific location in the cell, such as the nucleus or mitochondria.3) extracellular matrix: complex network of polysaccharides (such as glycosaminoglycans or cellulose) and proteins (such as collagen) secreted by cells. A str
46、uctural component of tissues that also influences their development and physiology. 4) S-PCC: prematured chromosome condensation. S phase cell. 5) mitogen: an extracellular signal molecule that stimulates cell proliferation. 6) totipotency: potential of a cell that can give rise to an organism or al
47、l types of cells that constitute an organism; 7) house-keeping gene: genes expressing in all cells. 維持細(xì)胞最低限度功能所不可少的基因。8) Hayflick limitation: 體外培養(yǎng)的細(xì)胞具有增殖極限。體外培養(yǎng)的細(xì)胞增殖傳代能力反映了細(xì)胞在體內(nèi)的衰老狀況。細(xì)胞的衰老控制著細(xì)胞的分裂次數(shù),進而控制著細(xì)胞的數(shù)量。9) caspase: 天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶。外來信號作用被切割激活,通過對靶蛋白的水解導(dǎo)致PCD or apoptosis.10) p53: 基因、蛋白。與腫瘤相關(guān)性很高
48、,磷酸話蛋白質(zhì)。與DNA特異性結(jié)合,活性受磷酸化控制。與程序性細(xì)胞死亡關(guān)系。11) nucleosome: structural, beadlike unit of a eukaryotic chromosome composed of a short length of DNA wrapped around a core of histone proteins; the fundamental subunit of chromatin.12) G0 cell: cycling cell/differentiated cell/G0 cell. 暫時脫離細(xì)胞周期,不進行DNA復(fù)制核細(xì)胞分裂。某
49、些誘導(dǎo)條件下重新開始DNA合成,進行細(xì)胞分裂。細(xì)胞周期調(diào)控蛋白在G0期細(xì)胞內(nèi)很多被降解。13)trans Golgi network: that part of Golgi apparatus that is furthest from the endoplasmic reticulum and from which proteins and lipids leave for lysosomes, secretory vesicles or the cell surface.14) dedifferentiation:分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞的特性。15) nuclear
50、 localization signal:48個氨基酸的信號肽,幫助核蛋白進入細(xì)胞核,有含水的核孔通道來鑒別,蛋白進入細(xì)胞核后不被切除。二、 問答題(每題10分,共70分)1. 比較活性染色質(zhì)和非活性染色質(zhì)。有無轉(zhuǎn)錄活性;染色質(zhì)包裝程度;核酸酶超敏感位點;組蛋白修飾;常異染色質(zhì)關(guān)系。2. Microtubules help to arrange the organelles in a eukaryotic cell. 設(shè)計實驗證明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的分布與微管系統(tǒng)有關(guān)。不同色彩染色,看分布。秋水仙素處理破壞微管系統(tǒng),ER分布改變。3. 敘述細(xì)胞周期調(diào)控過程中MPF活化和去活化機制。(1) M-cyclin
51、 (Cyclin B) 的積累,threshold, G2/M at peak.(2) Mitotic-CdK (p34cdc2) phosphorylation and dephosphorylation.(3) M-Cdk activity switches on abruptly at the end of interphase, while M-Cyclin concentration increases gradually throughout interphase.(4) M-Cdk can activate more M-Cdk through activating phosph
52、atases, producing the sudden, explosive increase in M-Cdk activity that drives the cell abruptly into M phase.4. 一些抗腫瘤藥物, 如阿糖胞苷(Ara-C)通過促進細(xì)胞凋亡(apoptosis)而達到其治療作用。如何用體外實驗證明Ara-C具有促進HL-60細(xì)胞凋亡的作用而不是通過其毒性引起的細(xì)胞壞死(necrosis)導(dǎo)致HL-60細(xì)胞死亡?(1) 形態(tài)學(xué),DAPI染色。(2) DNA電泳,DNA ladder.(3) TUNEL測定。(4) 流式細(xì)胞分析,亞二倍體細(xì)胞。5. 何謂
53、細(xì)胞同步化?舉例說明細(xì)胞同步化在細(xì)胞生物學(xué)研究中的作用?將細(xì)胞同步在特定周期時相。細(xì)胞融合,PCC,MPF發(fā)現(xiàn)。特定時相細(xì)胞行為,對信號的應(yīng)答。6. 解釋癌基因和原癌基因概念,并說明與細(xì)胞癌變之間的關(guān)系。proto-oncogene (原癌基因) 是控制細(xì)胞生長和分裂的正?;?,而oncogene (癌基因) 是原癌基因的突變形式;原癌基因的突變能引起正常細(xì)胞癌變。命名原因、癌基因表達產(chǎn)物。7. 說明細(xì)胞質(zhì)膜上的鈉鉀泵與葡萄糖的吸收之間的關(guān)系。耦聯(lián)運輸。Symport。載體蛋白借助鈉鉀泵建立的電位梯度,將鈉離子與葡萄糖同時運輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)。在細(xì)胞內(nèi)釋放的鈉離子又被鈉鉀泵泵出細(xì)胞外維持鈉離子的電位特
54、度。初級主動運輸,次級主動運輸。試卷五一 中英互譯:(本大題共 30分,每小條1分) 1. Oncoprotein答案:癌蛋白 2. Luxury genes答案:奢侈基因 3. actin filaments答案:肌動蛋白絲 4. Dictyosome答案:分散高爾基體 5. Electron transporter答案:電子傳遞體 6. Prion答案:蛋白質(zhì)感染因子 7. Active transport 答案:主動運輸 8. Porin答案:孔蛋白 9. Resolution答案:分辨力 10. Peroxisome答案:過氧化物酶體11. Antioncogenes答案:抑癌基因 1
55、2. Germ plasm答案:生殖質(zhì)13. intracellular mediators答案:細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)物: 14. Proto-oncogenes答案:原癌基因15. Gap junction 答案:間隙連接 16. Telomerase 答案:端粒酶17. Semi-autonomous organelle答案:半自主性細(xì)胞器 18. Apoptosis答案:細(xì)胞凋亡19. Target cells答案:靶細(xì)胞 20. F0-F1 coupling factor答案:F0-F1偶聯(lián)因子21. Ligand-gated channel答案:配體門通道 22. Primary lysoso
56、me答案:初級溶酶體23. Microtubule答案:微管 24. Integrin答案:整聯(lián)蛋白25. Discontinuous secretion答案:不連續(xù)分泌 26. Molecular chaperone 答案:分子伴侶27. N-linked oligosaccharides答案:N-連接寡糖 28. Dedifferentiation答案:脫(去)分化29. Determinants答案:決定子 30. Reticulo-plasmin答案:網(wǎng)質(zhì)蛋白二 名詞解釋:(本大題共 30分,每小條2分)1. secondary plasmodesma 次生胞間連絲 答案:在長成細(xì)胞的壁上因細(xì)胞發(fā)育或功能變化重新形成的胞間連絲。 2. neural stem cell (NSC) 神經(jīng)干細(xì)胞答案:存在于成體腦組織中的一種干細(xì)胞,它可生成神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞。亦可轉(zhuǎn)分化成血細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞。3. X inactivation X 失活 答案:雌性成體細(xì)胞中兩條X 染色體中的一條處于正常失活狀態(tài)。4. tenuin 張力聯(lián)合蛋白 答案:黏附連接質(zhì)膜下的一種蛋白質(zhì),與微絲束和質(zhì)膜的結(jié)
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