微生物的培養(yǎng)基

1、第三節(jié)第三節(jié) 微生物的培養(yǎng)基微生物的培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的概念一、培養(yǎng)基的概念二、培養(yǎng)基的配制原則二、培養(yǎng)基的配制原則三、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用三、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用四、培養(yǎng)基的配制過程四、培養(yǎng)基的配制過程重點(diǎn)重點(diǎn):掌握培養(yǎng)基的概念、配制原則和類型。掌握培養(yǎng)基的概念、配制原則和類型。難點(diǎn)難點(diǎn)：學(xué)習(xí)選擇和配制培養(yǎng)基：學(xué)習(xí)選擇和配制培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的概念一、培養(yǎng)基的概念 培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：按照微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的，按照微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的，用人工方法配制而成的適合于微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生用人工方法配制而成的適合于微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。用途用途：1.1.促進(jìn)特定微生物的

2、生長(zhǎng)繁殖。促進(jìn)特定微生物的生長(zhǎng)繁殖。2.2.用于微生物純種的分離、鑒定。用于微生物純種的分離、鑒定。3.3.制造微生物制品。制造微生物制品。實(shí)現(xiàn)有效控制微生物生長(zhǎng)繁殖前提條件是：實(shí)現(xiàn)有效控制微生物生長(zhǎng)繁殖前提條件是： 合理配制培養(yǎng)基合理配制培養(yǎng)基培養(yǎng)基應(yīng)具有的條件：培養(yǎng)基應(yīng)具有的條件：1.1.含有滿足微生物生長(zhǎng)發(fā)育的水分、碳源、氮源、含有滿足微生物生長(zhǎng)發(fā)育的水分、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子及基本的離子（磷、硫、鈉、鈣、鎂、鉀、生長(zhǎng)因子及基本的離子（磷、硫、鈉、鈣、鎂、鉀、鐵）及各種微量元素。鐵）及各種微量元素。2.2.具有適宜的酸堿度具有適宜的酸堿度(PH)(PH)。3.3.具有一定的緩沖能力及一定

3、的氧化還原電位和合具有一定的緩沖能力及一定的氧化還原電位和合適的滲透壓。適的滲透壓。 一、配制培養(yǎng)基的原則一、配制培養(yǎng)基的原則1.選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同不同的培養(yǎng)基。的培養(yǎng)基。 如：自養(yǎng)、異養(yǎng)如：自養(yǎng)、異養(yǎng) 細(xì)菌細(xì)菌 - - 牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨( (普通肉湯普通肉湯) )培養(yǎng)基；培養(yǎng)基； 放線菌放線菌 - - 高氏高氏1 1號(hào)合成號(hào)合成培養(yǎng)基；培養(yǎng)基； 酵母菌酵母菌 - - 麥芽汁麥芽汁培養(yǎng)基，培養(yǎng)基，馬鈴薯蔗糖馬鈴薯蔗糖 霉菌霉菌- - 查氏查氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)基，馬鈴薯蔗糖馬鈴薯蔗糖2.2.控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比

4、控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適合適（1 1）營(yíng)養(yǎng)物的濃度）營(yíng)養(yǎng)物的濃度 濃度大濃度大-抑制抑制作用，作用，如高糖，鹽；如高糖，鹽； 濃度小濃度小-不能滿足不能滿足微生物生長(zhǎng)的需要。微生物生長(zhǎng)的需要。（2 2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配比）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配比-影響微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物積累。影響微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物積累。 碳氮比碳氮比（C/N=C/N=碳元素碳元素與與氮氮元素元素） 碳源過多碳源過多-抑制作用；抑制作用； 碳源過少碳源過少-菌種衰老和自溶菌種衰老和自溶 氮源過多氮源過多菌體生長(zhǎng)旺盛，積累代謝產(chǎn)物少。菌體生長(zhǎng)旺盛，積累代謝產(chǎn)物少。 氮源過少氮源過少-菌體生長(zhǎng)繁殖緩慢。菌體生長(zhǎng)繁殖緩慢。 谷氨酸發(fā)酵谷氨

5、酸發(fā)酵： C/N=4:lC/N=4:l時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少。時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少。 C/N=3:1C/N=3:1時(shí)，菌體繁殖受抑制，谷氨酸大量增加。時(shí)，菌體繁殖受抑制，谷氨酸大量增加。 正常正常 : :細(xì)菌細(xì)菌：C:N=6:1 C:N=6:1 真菌真菌：C:N=10:1C:N=10:1 3.3.控制控制PHPH值值 各類微生物生長(zhǎng)的最適各類微生物生長(zhǎng)的最適pHpH各不相同。各不相同。 細(xì)細(xì) 菌：菌：7 77.57.5 放線菌：放線菌：7.87.88.08.0 酵母菌、霉菌：酵母菌、霉菌：4.54.5 6.06.0 生長(zhǎng)和代謝生長(zhǎng)和代謝-改變培養(yǎng)基改變培養(yǎng)基pHpH。 維持維

6、持pHpH值的恒定方式值的恒定方式： 在培養(yǎng)基里加在培養(yǎng)基里加PHPH緩沖劑緩沖劑(6.4(6.47.27.2)或或不溶性的不溶性的碳酸鹽。碳酸鹽。磷酸二氫鉀磷酸二氫鉀( (堿性堿性) )或磷酸氫二鉀或磷酸氫二鉀( (酸性酸性) )PH=6.8PH=6.8（CaCO3）4.4.原料來源的選擇原料來源的選擇 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-便于觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象便于觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 原料原料：選擇易加工，使用方便的原料。選擇易加工，使用方便的原料。 碳源碳源-試劑純葡萄糖、蔗糖、淀粉等。試劑純葡萄糖、蔗糖、淀粉等。 氮源氮源-蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。 發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵生產(chǎn) 原料原料-廉價(jià)且易

7、于獲得的原料廉價(jià)且易于獲得的原料 生產(chǎn)醬油生產(chǎn)醬油：碳源碳源: :麩皮麩皮 氮源氮源: :豆粕豆粕。 甲烷發(fā)酵甲烷發(fā)酵廢水、廢渣廢水、廢渣; ; 人畜糞便及禾草人畜糞便及禾草 常用的發(fā)酵工業(yè)原料常用的發(fā)酵工業(yè)原料：麩皮：麩皮 、米糠、玉米漿、酵、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅等。母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅等。 . .選擇適宜的滅菌處理方法選擇適宜的滅菌處理方法 獲得純種微生物，必須避免雜菌污染，獲得純種微生物，必須避免雜菌污染，需對(duì)所用器材和工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。需對(duì)所用器材和工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。 培養(yǎng)基培養(yǎng)基: :高壓蒸汽高壓蒸汽1.05kg/cm1.05kg/cm2 2(

8、121.3(121.3，151530min30min） 不耐熱含糖培養(yǎng)基不耐熱含糖培養(yǎng)基:0.56kg/cm:0.56kg/cm2 2(112.6,15(112.6,1530min)30min)對(duì)糖要求較高的可用對(duì)糖要求較高的可用過慮除菌過慮除菌或或間歇滅菌間歇滅菌。 高溫滅菌（磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵離子）易產(chǎn)高溫滅菌（磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵離子）易產(chǎn)生沉淀的需加入螯合劑生沉淀的需加入螯合劑EDTA(EDTA(乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸) ) 對(duì)于不同種類的培養(yǎng)基、內(nèi)含不同雜菌的器具和對(duì)于不同種類的培養(yǎng)基、內(nèi)含不同雜菌的器具和場(chǎng)所等應(yīng)當(dāng)采用不同的滅菌方法。場(chǎng)所等應(yīng)當(dāng)采用不同的滅菌方法。配制培

9、養(yǎng)基的原則配制培養(yǎng)基的原則1.1.選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2.2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及配比合適營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及配比合適3.3.控制培養(yǎng)基的控制培養(yǎng)基的PHPH值值4.4.原料來源的選擇原料來源的選擇5.5.選擇適宜的滅菌處理方法選擇適宜的滅菌處理方法二、培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用二、培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用1.分類原因分類原因 (1)(1)微生物種類不同，需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同。微生物種類不同，需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同。 (2)(2)同一種微生物，培養(yǎng)或研究目的不同，配制的同一種微生物，培養(yǎng)或研究目的不同，配制的培養(yǎng)基也不同。培養(yǎng)基也不同。2.分類角度分類角度按按組成成分組成成分分：合成、天然、半合成培養(yǎng)基分

10、：合成、天然、半合成培養(yǎng)基按按物理狀態(tài)物理狀態(tài)分：固體、半固體、液體培養(yǎng)基。分：固體、半固體、液體培養(yǎng)基。按按功能功能分：基礎(chǔ)、選擇、加富、鑒別培養(yǎng)基。分：基礎(chǔ)、選擇、加富、鑒別培養(yǎng)基。按照培養(yǎng)按照培養(yǎng)微生物微生物的種類分：細(xì)菌、霉菌、酵母菌、的種類分：細(xì)菌、霉菌、酵母菌、放線菌培養(yǎng)基。放線菌培養(yǎng)基。（一）根據(jù)培養(yǎng)基成分（一）根據(jù)培養(yǎng)基成分1.1.合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基 又稱限定性培養(yǎng)基，指由化學(xué)成分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)又稱限定性培養(yǎng)基，指由化學(xué)成分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（已知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的已知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的成分的化學(xué)性質(zhì)和數(shù)量成分的化學(xué)性質(zhì)和數(shù)量）配制而成）配制而成的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): :化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng)化學(xué)

11、成分精確、重復(fù)性強(qiáng)。缺點(diǎn)缺點(diǎn): :配制過程復(fù)雜，微生物生長(zhǎng)較慢，價(jià)格昂貴。配制過程復(fù)雜，微生物生長(zhǎng)較慢，價(jià)格昂貴。應(yīng)用應(yīng)用：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，研究微生物營(yíng)養(yǎng)、代謝、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，研究微生物營(yíng)養(yǎng)、代謝、菌種選菌種選育育、菌種鑒定、生物測(cè)定等定量要求較高的研究。、菌種鑒定、生物測(cè)定等定量要求較高的研究。 2. 2.天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基 又稱復(fù)雜培養(yǎng)基，采用動(dòng)植物組織或微生物細(xì)胞又稱復(fù)雜培養(yǎng)基，采用動(dòng)植物組織或微生物細(xì)胞或其提取物和粗消化產(chǎn)物制成的?；蚱涮崛∥锖痛窒a(chǎn)物制成的。 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來源于天然物質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來源于天然物質(zhì)。天然物質(zhì)：天然物質(zhì)：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麥芽汁、玉米粉、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、

12、麥芽汁、玉米粉、馬鈴薯、牛奶和血清等。馬鈴薯、牛奶和血清等。 蒸熟的馬鈴薯、豆芽汁、麥芽汁蒸熟的馬鈴薯、豆芽汁、麥芽汁-霉菌、酵母菌霉菌、酵母菌 普通牛肉湯、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨等普通牛肉湯、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨等-細(xì)菌細(xì)菌。 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，：配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，價(jià)格低廉。價(jià)格低廉。 缺點(diǎn)缺點(diǎn)：成分不穩(wěn)定，營(yíng)養(yǎng)成分難以控制，結(jié)果復(fù)重性差。：成分不穩(wěn)定，營(yíng)養(yǎng)成分難以控制，結(jié)果復(fù)重性差。 應(yīng)用應(yīng)用：生產(chǎn)上大規(guī)模培養(yǎng)菌種。：生產(chǎn)上大規(guī)模培養(yǎng)菌種。 3.3.半合成培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基 即有天然有機(jī)物，又有已知成分化學(xué)藥品的培養(yǎng)基即有天然有機(jī)物，又有已知成分化學(xué)藥品的培養(yǎng)基。在天然培養(yǎng)

13、基的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入無機(jī)鹽類或在合在天然培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入無機(jī)鹽類或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些有機(jī)物。成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些有機(jī)物。 如如馬鈴薯蔗糖馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基培養(yǎng)基。馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基成分馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基成分: : 去皮馬鈴薯去皮馬鈴薯200200克，葡萄糖克，葡萄糖2020克，水克，水1000mL.1000mL. 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求，適：有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求，適合大多數(shù)微生物。合大多數(shù)微生物。 應(yīng)用應(yīng)用：生產(chǎn)上、實(shí)驗(yàn)室：生產(chǎn)上、實(shí)驗(yàn)室（二）（二）根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分 1.1.固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基中加入在液體培

14、養(yǎng)基中加入凝固劑（凝固劑（1.51.52.0%2.0%的瓊脂的瓊脂），），使液體培養(yǎng)基凝固呈固體狀態(tài)，或直接由天然的固體使液體培養(yǎng)基凝固呈固體狀態(tài)，或直接由天然的固體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，如白酒、固體食醋生產(chǎn)。如白酒、固體食醋生產(chǎn)。用途用途：分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、菌種保藏等分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、菌種保藏等 。凝固劑凝固劑：瓊脂、明膠和硅膠三種。：瓊脂、明膠和硅膠三種。凝固劑凝固劑要求要求: :不被微生物利用分解，生長(zhǎng)溫度范圍為固體。不被微生物利用分解，生長(zhǎng)溫度范圍為固體。凝固點(diǎn)溫度不能太低。瓊脂凝固點(diǎn)溫度不能太低。瓊脂:96:96，45 無毒，滅菌不會(huì)破壞。無毒，滅菌不會(huì)

15、破壞。透明及粘著力強(qiáng)。透明及粘著力強(qiáng)。配制方便；便宜。配制方便；便宜。 2. 2.半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑, ,使之呈柔軟的糨使之呈柔軟的糨糊狀或直接將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制成半流體狀態(tài)的培養(yǎng)基。糊狀或直接將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制成半流體狀態(tài)的培養(yǎng)基。 凝固劑加量凝固劑加量：0.2 % 0.2 % 0.7%0.7%的瓊脂。的瓊脂。 應(yīng)用應(yīng)用: :觀察細(xì)菌的觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)特征運(yùn)動(dòng)特征( (有無鞭毛有無鞭毛) )、培養(yǎng)微好培養(yǎng)微好氧細(xì)菌，檢驗(yàn)噬菌體。氧細(xì)菌，檢驗(yàn)噬菌體。小曲白酒小曲白酒- -邊糖化邊發(fā)酵、醬油邊糖化邊發(fā)酵、醬油- -高鹽稀醪發(fā)酵高鹽稀醪發(fā)酵 3

16、.3.液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 把各種把各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)都溶解于都溶解于水水中，中，混合混合制成的制成的液液體體狀態(tài)的培養(yǎng)基。狀態(tài)的培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。通過振蕩和攪拌增加通不加任何凝固劑。通過振蕩和攪拌增加通氣量。氣量。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：成分均勻，便于滅菌處理、運(yùn)輸和監(jiān)測(cè)。成分均勻，便于滅菌處理、運(yùn)輸和監(jiān)測(cè)。 應(yīng)用：應(yīng)用：微生物生理生化特性研究、大規(guī)模的工業(yè)微生物生理生化特性研究、大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)（生產(chǎn)（啤酒、葡萄酒、乳制品生產(chǎn)啤酒、葡萄酒、乳制品生產(chǎn)）。 （三）按照培養(yǎng)基的功能分（三）按照培養(yǎng)基的功能分 (1)(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基: :含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的含有

17、一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基?；緺I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。 用途用途: :作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。 細(xì)菌細(xì)菌: :牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 霉菌霉菌: :馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 酵母菌酵母菌: :麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 (2) (2)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某些在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)藥品化學(xué)藥品以以抑制抑制不需要的微不需要的微生物生長(zhǎng)，而生物生長(zhǎng)，而促進(jìn)促進(jìn)需要的微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。需要的微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 化學(xué)藥品化學(xué)藥品-抑菌劑和殺菌劑抑菌劑和殺菌劑 常用染色劑常用染色劑（結(jié)晶紫、亮綠、

18、孟加拉紅）結(jié)晶紫、亮綠、孟加拉紅）或或抗抗生素生素（青霉素、鏈霉素）（青霉素、鏈霉素）. 分離分離革蘭氏陰性革蘭氏陰性菌菌-加青霉素或結(jié)晶紫加青霉素或結(jié)晶紫(抑制抑制G+). 分離分離酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌-加抗生素加抗生素(青霉素、鏈霉素，青霉素、鏈霉素，抑制細(xì)菌和放線菌抑制細(xì)菌和放線菌)。 用途用途: :將所需要的微生物從混雜的微生物中分離將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。出來。 培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)藥品抑制培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)藥品抑制不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)需要的不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)需要的微生物生長(zhǎng)。微生物生長(zhǎng)。 (3) (3)加富培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基里專門加入在

19、基礎(chǔ)培養(yǎng)基里專門加入待分離微生物特別需要待分離微生物特別需要的的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而使待分離微生物達(dá)到選擇的目的。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而使待分離微生物達(dá)到選擇的目的。 如：血清、血液、動(dòng)植物組織液、酵母浸膏等。如：血清、血液、動(dòng)植物組織液、酵母浸膏等。用途用途：培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻苛刻的異養(yǎng)微生物。的異養(yǎng)微生物。富集或富集或分離分離某種微生物。某種微生物。 纖維素纖維素- -富集纖維素降解微生物富集纖維素降解微生物 石蠟油石蠟油-富集分解石油的微生物富集分解石油的微生物 與選擇培養(yǎng)基區(qū)別與選擇培養(yǎng)基區(qū)別： 加富培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基：增加增加所要分離的微生物數(shù)量，成為所要分離的微生物數(shù)量，成為優(yōu)勢(shì)菌，

20、逐步淘汰其他微生物。優(yōu)勢(shì)菌，逐步淘汰其他微生物。 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：抑制抑制不需要微生物的生長(zhǎng)，使所需不需要微生物的生長(zhǎng)，使所需要菌成為優(yōu)勢(shì)菌。要菌成為優(yōu)勢(shì)菌。 (4) (4)鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中加有指示劑，從而用肉眼就能使目的培養(yǎng)基中加有指示劑，從而用肉眼就能使目的微生物或待分離微生物的菌落與其他微生物菌落區(qū)別開來。微生物或待分離微生物的菌落與其他微生物菌落區(qū)別開來。 用途用途：微生物的分類、鑒定或篩選菌種。：微生物的分類、鑒定或篩選菌種。常用的鑒別培養(yǎng)基常用的鑒別培養(yǎng)基：伊紅伊紅- -美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMPEMP）成分：蛋白胨成分：蛋白胨1010克克 乳糖乳糖

21、5 5克克 蔗糖蔗糖5 5克克 K K2 2HPOHPO4 42 2克克 * *伊紅伊紅Y0.4Y0.4克克 美藍(lán)美藍(lán)0.060.06克克 蒸餾水蒸餾水1000ml1000ml伊紅和美藍(lán)作用伊紅和美藍(lán)作用: :抑菌某些細(xì)菌生長(zhǎng)和鑒別染色，產(chǎn)酸指示劑。抑菌某些細(xì)菌生長(zhǎng)和鑒別染色，產(chǎn)酸指示劑。區(qū)分區(qū)分大腸桿菌和大腸桿菌和沙門氏菌和志賀氏菌沙門氏菌和志賀氏菌大腸桿菌大腸桿菌：發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使伊紅與美藍(lán)結(jié)合生成沉淀，呈現(xiàn)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使伊紅與美藍(lán)結(jié)合生成沉淀，呈現(xiàn)紫黑色菌落，經(jīng)反射可看到綠色金屬光澤。紫黑色菌落，經(jīng)反射可看到綠色金屬光澤。沙門氏菌和志賀氏菌沙門氏菌和志賀氏菌: :不能發(fā)酵乳糖不能發(fā)酵乳

22、糖, ,形成無色菌落形成無色菌落. . 區(qū)分大腸桿菌和區(qū)分大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌大腸桿菌大腸桿菌: :在在EMBEMB上上, ,菌落較小菌落較小, ,有綠色金屬光澤。有綠色金屬光澤。產(chǎn)氣桿菌：產(chǎn)氣桿菌：菌落較大，濕潤(rùn)，呈灰棕色菌落較大，濕潤(rùn)，呈灰棕色 培養(yǎng)基中加有能與某一菌的無色代謝培養(yǎng)基中加有能與某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它菌相區(qū)分菌相區(qū)分一些鑒別培養(yǎng)基一些鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基名稱加入化學(xué)物質(zhì)加入化學(xué)物質(zhì)微生物代謝微生物代謝產(chǎn)物產(chǎn)物培養(yǎng)基特性變培養(yǎng)基特性變化化主要

23、用途主要用途酪素酪素培養(yǎng)基培養(yǎng)基酪素酪素胞外蛋白酶胞外蛋白酶蛋白水解圈蛋白水解圈鑒別產(chǎn)蛋白酶鑒別產(chǎn)蛋白酶的菌種的菌種明膠培養(yǎng)基明膠培養(yǎng)基明膠明膠胞外蛋白酶胞外蛋白酶明膠液化明膠液化鑒別產(chǎn)蛋白酶鑒別產(chǎn)蛋白酶的菌種的菌種油脂培養(yǎng)基油脂培養(yǎng)基食用油、吐溫食用油、吐溫中性紅批示劑中性紅批示劑胞外脂肪酶胞外脂肪酶由淡紅色變成由淡紅色變成深紅色深紅色鑒別產(chǎn)脂肪酶鑒別產(chǎn)脂肪酶菌株菌株淀粉培養(yǎng)基淀粉培養(yǎng)基可溶性淀粉可溶性淀粉胞外淀粉酶胞外淀粉酶淀粉水解圈淀粉水解圈鑒別產(chǎn)淀粉酶鑒別產(chǎn)淀粉酶的菌種的菌種H2S試驗(yàn)培養(yǎng)基試驗(yàn)培養(yǎng)基醋酸鉛醋酸鉛H2S產(chǎn)生黑色沉淀產(chǎn)生黑色沉淀 鑒別產(chǎn)鑒別產(chǎn)H2S菌菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基糖發(fā)酵培

24、養(yǎng)基溴甲酚紫溴甲酚紫乳酸、醋酸乳酸、醋酸由紫色變黃色由紫色變黃色 鑒別腸道細(xì)菌鑒別腸道細(xì)菌伊紅美藍(lán)培養(yǎng)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基基伊紅、美藍(lán)伊紅、美藍(lán)酸酸帶金屬光澤深帶金屬光澤深紫色菌落紫色菌落鑒別水中大腸鑒別水中大腸菌群菌群( (四四) )按照培養(yǎng)微生物的種類分按照培養(yǎng)微生物的種類分培養(yǎng)基按微生物的種類可培養(yǎng)基按微生物的種類可分為分為四類：四類：細(xì)菌培養(yǎng)基細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基酵母菌培養(yǎng)基和和霉菌霉菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基。常用的細(xì)菌培養(yǎng)基常用的細(xì)菌培養(yǎng)基-營(yíng)養(yǎng)肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；營(yíng)養(yǎng)肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；常用的放線菌培養(yǎng)基常用的放線菌培養(yǎng)基-高氏高氏1 1號(hào)培養(yǎng)基；號(hào)培養(yǎng)基；常用的

25、酵母菌培養(yǎng)基常用的酵母菌培養(yǎng)基-馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基和麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基；培養(yǎng)基；常用的霉菌培養(yǎng)基常用的霉菌培養(yǎng)基-馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基等。萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基等。 培養(yǎng)基是微生物菌種生長(zhǎng)繁殖和發(fā)酵的培養(yǎng)基是微生物菌種生長(zhǎng)繁殖和發(fā)酵的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，也是微生物賴以生存的外界重要物質(zhì)基礎(chǔ)，也是微生物賴以生存的外界環(huán)境。在科學(xué)實(shí)驗(yàn)和實(shí)際生產(chǎn)中，會(huì)遇到許環(huán)境。在科學(xué)實(shí)驗(yàn)和實(shí)際生產(chǎn)中，會(huì)遇到許多問題，有些培養(yǎng)基即是液體培養(yǎng)基，又是多問題，有些培養(yǎng)基即是液體培養(yǎng)基，又是選擇培養(yǎng)基也可能是天然培養(yǎng)基，掌握不同選

26、擇培養(yǎng)基也可能是天然培養(yǎng)基，掌握不同類型的培養(yǎng)基特點(diǎn)，并將之靈活地應(yīng)用于具類型的培養(yǎng)基特點(diǎn)，并將之靈活地應(yīng)用于具體的實(shí)際工作之中。體的實(shí)際工作之中。本節(jié)要點(diǎn)：本節(jié)要點(diǎn)：一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基按照微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的，用人工方法配制而按照微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的，用人工方法配制而成的適合于微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)成的適合于微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。二、配制培養(yǎng)基的原則二、配制培養(yǎng)基的原則: :1.1.選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2.2.控制營(yíng)養(yǎng)物控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配合合適質(zhì)濃度及配合合適3.3.控制控制PHPH值值4.4.原料來源的選擇原料來源的選擇. .選擇適宜選擇適宜的滅菌處理方法。的滅菌處理方法。三、三、培養(yǎng)基的分類：按培養(yǎng)基的分類：按組成成分組成成分:合成、天然、半合成；合成、天然、半合成