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文檔簡介
1、1鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下。eq x(aal(新生營,養(yǎng)芽)eq o(,sup17(誘導(dǎo))eq x(PLBs)eq o(,sup17(增殖培養(yǎng))eq x(PLBs)eq o(,sup17(不同時間,取樣、檢測)eq x(aal(實驗,結(jié)果)在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如下圖所示,請回答下列問題。(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱_。(2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在_,_,_。(3)脫落
2、酸(ABA)能提高生物堿含量,但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng),推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實驗驗證該推測,在設(shè)計實驗方案時探討了以下問題:ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個ABA處理組,1個空白對照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基_后按比例加入。實驗進程和取樣:實驗50 d完成,每10 d取樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為_。依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間:當某3個樣品(重復(fù)樣)的_時,其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對應(yīng)的
3、培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。答案(1)細胞分化程度低,容易誘導(dǎo)形成PLBs細胞的脫分化(2)生長起始較快快速生長時間較長PLBs產(chǎn)量較高(3)滅菌、冷卻75PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大解析(1)新生營養(yǎng)芽分裂能力強,全能性容易表達,根據(jù)題干可知,PLBs類似愈傷組織,外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。(2)由圖可看出與黑暗條件下相比,光照條件下PLBs重量開始增加的時間早,快速生長期經(jīng)歷時間長,且最終含量要高。(3)由于ABA受熱易分解,所以各組液體培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后,冷卻,再加入不同濃度的ABA。根據(jù)題干可知,實驗50 d完成,如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,每10 d取樣,需要取5次樣,每次
4、取樣時,需要記錄15個樣品中的數(shù)據(jù),取樣5次共需要測定的樣品數(shù)為75。適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間應(yīng)既能提高生物堿含量,又要保證PLBs的生長。由于脫落酸能提高生物堿含量,卻抑制PLBs的生長,根據(jù)數(shù)學(xué)原理,最適ABA濃度和培養(yǎng)時間應(yīng)為生物堿含量與PLBs重量乘積的最大值,本實驗每個組分別做了3次重復(fù)實驗,因此還應(yīng)該求平均值。此題不能將生物堿含量與PLBs簡單相加,因為兩者數(shù)據(jù)的數(shù)量級相差較大。2下圖所示為科學(xué)家利用番茄葉細胞和馬鈴薯葉細胞雜交培育“番茄馬鈴薯”植株的過程,請回答下列問題:(1)過程使用了_酶,以使植物原生質(zhì)體相互分離,此處使用的溶液濃度較大,以保證植物細胞會發(fā)生_,以保護原生質(zhì)
5、體不被破壞;在動物細胞培養(yǎng)技術(shù)中,使細胞分離開來的酶是_。(2)過程在化學(xué)藥劑_的作用下會發(fā)生細胞融合;動物細胞融合的方法與植物細胞不相同的是_。(3)過程_屬于脫分化,過程_屬于再分化,細胞發(fā)生分化的根本原因是_。(4)過程的細胞工程技術(shù)是_,其培養(yǎng)時選用的材料通常是分生組織,原因是_。(5)植物體細胞雜交的研究在_方面,取得了巨大突破。答案(1)纖維素酶和果膠質(zhì)壁分離胰蛋白酶(2)聚乙二醇可以使用滅活的病毒(3)基因的選擇性表達(4)植物組織培養(yǎng)全能性高,易培養(yǎng)形成愈傷組織(5)克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙解析植物細胞的細胞壁主要由纖維素和果膠組成,因此可以用纖維素酶和果膠酶將其水解得到原生質(zhì)體,然后用聚乙二醇或物理方法誘導(dǎo)原
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