study-生技遺傳學(xué)細(xì)菌和病毒的遺傳分析

1、第六章細(xì)菌和病毒的遺傳分析一細(xì)菌的特點(diǎn)1.是單細(xì)胞生物，結(jié)構(gòu)簡單，細(xì)胞一般較小，由一層或多層膜和壁所包圍。2.平均每個(gè)細(xì)胞中有1-2條染色體，每條染色體附著在細(xì)胞膜上的一定區(qū)域，細(xì)菌的染色體大都是雙鏈DNA分子所組成的一個(gè)封閉的環(huán)，染色體長度從250微米到35000微米不等，其染色體沒有組Pr和其他Pr結(jié)合，不形成核小體結(jié)構(gòu)。3.細(xì)菌染色體比較易于接受帶有相同或不同物種的基因或DNA片段的插入。4.細(xì)菌繁殖能力強(qiáng)，世代間隔短，一般每20分鐘分裂1次，在較短的時(shí)間內(nèi)每個(gè)細(xì)胞的子細(xì)胞集合成群，可達(dá)到107 個(gè)細(xì)胞，成肉眼可以看到的菌落（稱克隆）。5.易培養(yǎng)，易獲動(dòng)物各類突變型，便于遺傳分析。第一節(jié)

2、細(xì)菌的特點(diǎn)二.大腸桿菌的實(shí)變型及其篩選1大腸桿菌的實(shí)變型分為三種類型：1.1 合成代謝功能的實(shí)變型，anabolic functional mutauts1.2 分解代謝功能的突變型catabolic functional mutants1.3 抗性突變型 （resistant mutants）1.1 合成代謝功能的實(shí)變型 anabolic functional mutauts合成代謝功能（anabolic functions）:野生型（即原養(yǎng)型）大腸桿菌在基本培養(yǎng)基上具有合成所有代謝和生長所必需的復(fù)雜有機(jī)物的功能，稱合成代謝。營養(yǎng)缺陷型：某個(gè)或幾個(gè)必需基因發(fā)生了突變使合成某種營養(yǎng)物質(zhì)能力喪失

3、，從而阻礙整個(gè)合成代謝功能的實(shí)現(xiàn)，這種突變稱營養(yǎng)型缺陷。營養(yǎng)缺陷型可通過在基本培養(yǎng)基上添加所需的有機(jī)成分使具有這種突變的細(xì)菌存活。一般營養(yǎng)缺陷型細(xì)菌的表型根據(jù)該菌株不能合成的物質(zhì)來命名，取這一物質(zhì)的前3個(gè)字母，第一個(gè)字母用大寫表示，指出他們生長所需的物質(zhì)，例如：Leu- Thr - Met- Bio- 表明這些突變品系分別需要亮氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸、生物素，而相應(yīng)的原養(yǎng)型表型記作Leu+ 、 Thr+、Met+ 、 Bio+，而基因型3個(gè)字母都小寫、斜體。1.2 分解代謝功能的突變型catabolic functional mutants分解代謝功能（catabolic function）

4、:野生型大腸桿菌能把復(fù)雜的糖類轉(zhuǎn)化成葡萄糖或其他糖類，也能把復(fù)雜分子，如氨基酸或脂肪酸降解為乙酸或三羧酸循環(huán)的中間物，這種降解功能稱分解代謝功能。降解功能相關(guān)基因發(fā)生突變從而影響降解功能的實(shí)現(xiàn)，這種突變型稱分解代謝功能的突變型。例：Lac- 實(shí)變型不能分解乳糖，故不能生長在以乳糖為唯一碳源的基本培養(yǎng)基中，Lac+ 可利用乳糖。1.3 抗性突變型 （resistant mutants）細(xì)菌由于某基因的突變而對(duì)某些噬菌體或抗菌體產(chǎn)生抗性，這種突變稱抗性突變。對(duì)T1噬菌體抗性表型記作Tr ，基因型ton- ,敏感表型記作TS 1 基因型ton+ ；對(duì)鏈霉素抗性表型記作Strr ,基因型str- ,每

5、2個(gè)表型記作Strs ,表型記作str+ 2.突變型篩選。不同的突變型采用不同的篩選手段。2.1營養(yǎng)缺陷型的篩選基本培養(yǎng)基：含水、無機(jī)鹽和一般糖類及微量的生物素的培養(yǎng)基，野生型細(xì)菌可在基本培養(yǎng)基上生長完全培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基上添加酵母和麥芽抽提物以及水解酪蛋白等的培養(yǎng)基，一般各種營養(yǎng)缺陷型菌株均可在完全培養(yǎng)基上生長1.將誘變劑如X射線，紫外線，或化學(xué)誘變劑等處理的細(xì)菌涂布在完全培養(yǎng)基上，通過細(xì)胞分裂，使各種突變型充分表現(xiàn)。2.待菌落出現(xiàn)以后，用印跡法（replica-plated method）把他們影印到基本培養(yǎng)基上，鑒定出不能生長的克隆。圖示4-13.將鑒定出的不能在基本培養(yǎng)基上生長的克隆

6、再影印到只含一種氨基酸或維生素的培養(yǎng)基上，從而判定該突變型的營養(yǎng)缺陷類型。2.2分解代謝功能的突變型的篩選糖發(fā)酵性突變株lac- 選擇，可將lac+和lac- 涂布于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（EMB）上培養(yǎng)，lac+可形成有金屬光澤的紫色菌落，而lac- 則形成白色菌落，容易識(shí)別。2.3抗性突變的篩把經(jīng)過誘變處理的細(xì)菌細(xì)胞直接涂布到含有某種噬菌體或抗生素的培養(yǎng)基上，形成的菌落克隆就是抗性突變。對(duì)真核生物而言，遺傳物質(zhì)的交換，分離和獨(dú)立分配機(jī)制形成重組體是通過減數(shù)分裂實(shí)現(xiàn)的，對(duì)于細(xì)菌而言，尚不具備真核生物配子進(jìn)行融合的有性過程，它們重組體的出現(xiàn)單靠突變（10-4 10-10 ）不太理想，更重要的一個(gè)來源是

7、遺傳物質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞傳遞到另一個(gè)細(xì)胞形成重組體。細(xì)菌獲取外源DNA方式有4種：轉(zhuǎn)化，接合，轉(zhuǎn)導(dǎo)，性導(dǎo)下面我們分別來學(xué)習(xí)這4種方式，細(xì)菌遺傳物質(zhì)的交換過程，而且將利用這些方法作出細(xì)菌和噬菌體的染色體圖。第二節(jié) 細(xì)菌轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化：transformation 指某些細(xì)菌能通過其細(xì)胞膜攝取周圍供體的染色體片段，并將外源DNA片段通過同源重組整合到自己的染色體的過程叫轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)染（transfection）:是轉(zhuǎn)化的一種特殊形式。用于原核細(xì)胞時(shí)其外源DNA是特指離體的噬菌體DNA，來感染感受態(tài)的細(xì)菌，并在其中得到表達(dá)。用于真核細(xì)胞時(shí)，對(duì)任何裸露DNA的吸收均稱轉(zhuǎn)染。一、轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象是在1928年首先

8、由格里費(fèi)斯（Griffith）在肺炎雙球菌實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的，該菌的光滑型（S）菌株可引起人的肺炎及小鼠的敗血癥，粗糙型R不致病，實(shí)驗(yàn)過程見圖示4-2說明S型細(xì)菌有一種物質(zhì)或轉(zhuǎn)化因素能夠進(jìn)入R型細(xì)菌，并引起穩(wěn)定的遺傳變異1944年Avery等不但成功重復(fù)了上述實(shí)現(xiàn)，而且在分子水平加以研究，證明轉(zhuǎn)化因子是DNA，他們把DNA,Pr和莢膜（多糖類）物質(zhì)從活S型細(xì)菌中抽提出來，把每一成份跟活的R型細(xì)菌混合，懸浮培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有DNA組分，能夠把R型轉(zhuǎn)化為S型，且DNA純度愈高，轉(zhuǎn)化過程愈有效。二、轉(zhuǎn)化的過程動(dòng)畫4-11.供體DNA與受體細(xì)胞間的最初相互作用 這包括：轉(zhuǎn)化片段的大小、形態(tài)、濃度和受體細(xì)胞的

9、生理狀態(tài)，這些因素中最重要的是受體細(xì)胞生理上必須處于感受態(tài)（competence）即細(xì)胞處于能攝入核糖分子時(shí)的生理狀態(tài)，一般用化學(xué)方法處理細(xì)胞，使其改變膜對(duì)DNA的通透性，因?yàn)橐吧虴.colio產(chǎn)生一種酶可迅速降解進(jìn)入的外源DNA。2.轉(zhuǎn)化DNA的攝取和整合包括供體DNA的結(jié)合和穿入，聯(lián)會(huì)和整合，最后供體DNA的一條單鏈片段可通過重組而整合到受體DNA中2.1 供體DNA的結(jié)合與穿入（binding and penetration）當(dāng)細(xì)菌處于感受態(tài)時(shí)，幾個(gè)雙鏈DNA分子可結(jié)合在受體細(xì)胞表面的幾個(gè)接受座位上，接受座位飽和后，這些DNA隨后縱長的被細(xì)菌所攝取，攝取時(shí)，由外切酶或DNA移位酶降解其

10、中一條鏈，并利用降解這條鏈產(chǎn)生的能量，將另一條鏈拉進(jìn)細(xì)胞中。2.2聯(lián)會(huì)（synasis）:供體的單鏈DNA片段進(jìn)入細(xì)胞后和受體環(huán)狀染色體的同源部分聯(lián)會(huì)，形成三鏈結(jié)構(gòu)。2.3 整合（integration）供體的單鏈DNA和受體雙鏈DNA通過雙交換進(jìn)行重組，從而使供體DNA穩(wěn)定地插入到受體DNA中，被取代的受體單鏈DNA不被降解。四通過轉(zhuǎn)化作染色體連鎖圖原理如下：圖4-3第三節(jié) 細(xì)菌的接合接合（conjugation）：通過細(xì)菌細(xì)胞間的直接接觸，而發(fā)生的遺傳信息從供體單向轉(zhuǎn)移到受體的過程。一、Ecoli接合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)Ecoli接合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)是許多科學(xué)家不懈努力的結(jié)果。接合雜交實(shí)驗(yàn)1946年，黎德

11、伯格（Lederberg）和塔特姆（Tatum）發(fā)現(xiàn)大腸桿菌之間可通過接觸交換遺傳物質(zhì) 見圖示4-4A： 品系： met- bio- thi+ leu+ thr+B： 品系： met+ bio+ thi- leu- thr-A、B菌株在基本培養(yǎng)基上都不能生長A、B菌株混合培養(yǎng)在液體的完全培養(yǎng)基上，幾小時(shí)后，把培養(yǎng)物離心，將沉淀細(xì)胞涂布在基本培養(yǎng)基上，結(jié)果長出一些原養(yǎng)型菌落：met+ bio+ thi+ leu+ thr+該實(shí)驗(yàn)巧妙之處在于：1）多重突變型（multiple auxotroph）品系排除了回復(fù)突變 2）用基本培養(yǎng)基來篩選原養(yǎng)型菌落這種原養(yǎng)型菌落的出現(xiàn)有2種可能性：（1）發(fā)生轉(zhuǎn)化：

12、即其中一親本的細(xì)胞在處理過程中發(fā)生破裂，釋放出轉(zhuǎn)化因子，和另一親本重組產(chǎn)生部分的原養(yǎng)型。（2）這2種品系的細(xì)胞直接接觸而發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交換與重組，得到了原養(yǎng)型菌。到底是哪一種情況呢？年avis的型管實(shí)驗(yàn)巧妙的解決了這一問題。.型管實(shí)驗(yàn)圖示4-5型管底部有一微孔濾板，可通過.微米以下的顆粒，細(xì)胞無法通過，即培養(yǎng)液和大分子可通過，將，品系分別放入型管的兩側(cè)，一側(cè)塞上棉花，另一端接上注射器，當(dāng)種細(xì)菌培養(yǎng)物都增生到飽和狀態(tài)時(shí)，用注射器輕輕把培養(yǎng)液從一臂經(jīng)過濾器吸到另一臂，再輕輕壓過去，讓培養(yǎng)物充分混合，但種品系的細(xì)胞無法接觸，然后將兩側(cè)，菌株離心洗滌后再涂布到基本培養(yǎng)基上，都不出現(xiàn)菌落。這個(gè)實(shí)驗(yàn)非常

13、好的排除了轉(zhuǎn)化的可能性，而清楚的表明兩個(gè)親本的細(xì)胞不互相接觸是不可能進(jìn)行雜交的，這為研究接合的本質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。二、單向轉(zhuǎn)移與F因子1.單向轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)1952年Hayes在重復(fù)Lederberg和Fatum的雜交實(shí)驗(yàn)前，分別用高劑量的鏈霉素處理A品質(zhì)和B品質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：這個(gè)實(shí)驗(yàn)說明，A，B兩個(gè)品系在雜交過程中，作用是不相同的，A的基因轉(zhuǎn)移到B，但B的基因不能轉(zhuǎn)移A，因?yàn)殒溍顾乜勺柚辜?xì)菌分裂，繼而殺死細(xì)胞，但它允許交配持續(xù)一個(gè)短時(shí)間，A品系在雜交后被殺死，并不影響雜交結(jié)果，表明它是一種供體，象雄性動(dòng)物一樣，交配后被殺死，不會(huì)影響后代，而B品系像是一種受體，和雌性動(dòng)物一樣，受孕后被殺死，就無法產(chǎn)生后代

14、。Hayes的結(jié)論認(rèn)為細(xì)菌有供體，受體之分，相當(dāng)于雄性和雌性。F因子又稱性因子（sex factor）或致育因子（fertilingFactor )，F(xiàn)因子結(jié)構(gòu)包含了3個(gè)區(qū)域：（1）原點(diǎn)（origin）：轉(zhuǎn)移的起點(diǎn)（2）致育基因（fertility factor）編碼生成性傘毛即下纖毛的基因群，性傘毛即供體菌菌表面的管狀結(jié)構(gòu)，稱為接合管（onjugutiontube ）（3）配對(duì)區(qū)（pairing region）:不止一個(gè)。2.F因子的結(jié)構(gòu) 圖 4-8三、高頻重組品系和F因子F因子在菌體內(nèi)存在方式有兩種：1.自主狀態(tài)存在 含有F因子的菌株記作F+ 菌株，無F因子的菌株記作F 菌株。當(dāng)F因子以自

15、主狀態(tài)存在時(shí)，F(xiàn)因子不依賴宿主染色體而獨(dú)立地進(jìn)行分裂，因此F因子的新拷貝能在接合過程中（F+ F ）轉(zhuǎn)移到F 細(xì)胞中，把F 細(xì)胞轉(zhuǎn)變成F+ 細(xì)胞，見動(dòng)畫4-22.整合至細(xì)菌的染色體組即Hfr，當(dāng)F因子整合到細(xì)菌染色體時(shí)，F(xiàn)因子的繁殖與細(xì)菌染色體同步進(jìn)行，當(dāng)HfrF- 時(shí)，細(xì)菌基因的重組頻率增加千倍之多，故這個(gè)品系稱高頻重組品系（High frequence bination ,Hfr）動(dòng)畫4-3。HfrF-中細(xì)菌染色體隨著進(jìn)入F- 細(xì)胞，一般在接合期間，Hfr細(xì)胞和F 細(xì)胞之間的接合管常會(huì)自發(fā)斷裂，進(jìn)入的Hfr染色體也隨之?dāng)嗔?，這樣HfrF- 雜交中選出的大多數(shù)重組子仍為F-.動(dòng)畫4-4。3.

16、部分二倍體Partial diploid F受體細(xì)胞只接受部分的供體染色體，這樣的細(xì)胞稱為部分二倍體。在這種部分二倍體細(xì)胞中，供體提供的部分基因組稱外基因子（exogenote）,而受體提供完整的基因組，稱內(nèi)基因子（endogenote）,所以供體與受體的重組就是內(nèi)基因子與外基因子之間的重組，這種重組不同于真核生物的完整二倍體重組。動(dòng)畫4-4四中斷雜交與重組作圖1中斷雜交實(shí)驗(yàn)（interrupted mating experiment）是一種用來研究細(xì)菌接合過程中基因轉(zhuǎn)移方式的實(shí)驗(yàn)方法?；静襟E是把接合中的細(xì)菌在不同時(shí)間取樣，并把樣品攪拌以中斷接合中的細(xì)菌，然后分析受體細(xì)菌的基因型。將Hfr菌

17、株和F菌株混合在一起進(jìn)行雜交培養(yǎng)。每隔一定時(shí)度取樣，把菌液放在食物攪拌器內(nèi)攪拌，以中斷雜交，經(jīng)過稀釋，接種到含有鏈霉素的完全培養(yǎng)基上，這樣將殺死所有Hfr細(xì)胞。然后對(duì)形成菌落的F- 細(xì)胞用影印培養(yǎng)法測試其基因型，以確定Hfr基因進(jìn)入F 細(xì)胞的時(shí)間。見圖4-9和表4-1從上圖和表可看出，Hfr 菌株的基因是按一定的線性順序依次進(jìn)入F 菌株的，即染色體從原點(diǎn)開始以直線方式進(jìn)入F 細(xì)胞，基因離原點(diǎn)愈近，進(jìn)入F 細(xì)胞愈早，反之則晚。根據(jù)中斷雜交實(shí)驗(yàn)，用Hfr基因在F 細(xì)胞中出現(xiàn)的時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)，做細(xì)菌的遺傳連鎖圖。圖4-10同一個(gè)Hfr菌株的轉(zhuǎn)移起始點(diǎn)及轉(zhuǎn)移順序在不同的實(shí)驗(yàn)中是相同的，但是一個(gè)F+ 品系可

18、產(chǎn)生許多Hfr品系，因?yàn)镕因子在細(xì)菌染色體上有許多插入位點(diǎn)，且插入取向不同而形成的，圖4-11，用這些不同Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn)，則他們轉(zhuǎn)移起點(diǎn)，基因轉(zhuǎn)移順序及轉(zhuǎn)移方向都不同見表4-2。從表中可見每一基因兩側(cè)基因均是相同的，證實(shí)了大腸桿菌遺傳圖呈環(huán)狀圖4-12所示，Jacob和Wallman根據(jù)中斷雜交實(shí)驗(yàn)所作大腸桿菌染色體圖。2. 重組作圖 bination mapping根據(jù)基因間重組率進(jìn)行基因定位。在細(xì)菌的染色體作圖中，基因距離較遠(yuǎn)用中斷雜交作圖有效，但基因距離較近時(shí)，基因間轉(zhuǎn)移時(shí)間在兩分鐘之內(nèi) ，僅用中斷雜交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行基因定位不夠精確可靠，用重組作圖來提高基因定位的精確性。第四節(jié) F

19、因子與性導(dǎo)通過前面我們知道F因子可插入到細(xì)菌染色體中，形成Hfr菌株，科學(xué)家Adelberg 在1959年研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)因子也可通過規(guī)則的交換和剪切，從染色體上游離下來形成F+菌株，但是也會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則的環(huán)出，形成F因子攜帶一段相鄰的細(xì)菌染色體，我們稱這種帶有細(xì)菌染色體的F因子為F因子（Ffactor）。由于細(xì)菌染色體上插入位置不同而構(gòu)成不同的Hfr品系，由此形成不同的F因子，它們各自攜帶細(xì)菌的不同基因。一F因子的形成見動(dòng)畫4-5二性導(dǎo)FF- F，F(xiàn)即F菌株即可轉(zhuǎn)移F因子的拷貝至F 菌株，也可轉(zhuǎn)移細(xì)菌染色體與F菌株染色體發(fā)生重組，將這種利用F因子將供體基因?qū)胧荏w形成部分二倍體的過程稱性導(dǎo)（se

20、xcluction ）?？赏ㄟ^分離大量不同的F因子進(jìn)行了遺傳圖的識(shí)別。三三種不同致育因子的相互關(guān)系放在自我檢測中第五節(jié) 噬菌體的遺傳分析前面我們學(xué)習(xí)了細(xì)菌獲取外源DNA的方式，即轉(zhuǎn)化，接合，性導(dǎo)，細(xì)菌獲取外源DNA的方式還有一種：轉(zhuǎn)導(dǎo)。由于轉(zhuǎn)導(dǎo)與噬菌體有關(guān)，所以我們放在噬菌體的遺傳分析這部分講。一噬菌體的基本知識(shí)噬菌體結(jié)構(gòu)簡單，沒有一般的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由核酸由Pr外殼構(gòu)成，圖示4131.噬菌體的類型：根據(jù)噬菌體感染細(xì)菌后能否將噬菌體裂解,可將噬菌體分為兩類：烈性噬菌體（virulent phage）：可使宿主菌發(fā)生裂解的噬菌體，裂解過程見圖示414：溫和性噬菌體（temperate phage）：

21、噬菌體感染細(xì)菌后，細(xì)菌并不裂解，而以兩種不同形式存在1）噬菌體的染色體通過交換整合到細(xì)菌染色體上，如入溫和性噬菌體2）phage染色體能存在于細(xì)菌中，未發(fā)生整合。圖示4-15溶源性lysogeny：某些細(xì)菌受到噬菌體的感染，并不立即導(dǎo)致溶菌，這種現(xiàn)象稱溶源性，這樣的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌或溶源菌。形成溶源性的原因：溫和性噬菌體一般只有一個(gè)或少數(shù)基因表達(dá)，由此產(chǎn)生阻遏物可關(guān)閉其他基因的表達(dá)，使A噬菌體的核酸既不大量復(fù)制也不大量轉(zhuǎn)錄和翻譯。溶源性可遺傳：入噬菌體染色體隨細(xì)菌染色體復(fù)制而復(fù)制，每個(gè)子細(xì)胞中有一個(gè)拷貝。P1噬菌體染色體的復(fù)制與細(xì)菌不同步，每個(gè)子細(xì)胞中至少有一個(gè)拷貝。溶源性噬菌體可通過誘變轉(zhuǎn)

22、變?yōu)榱倚允删w，這類誘導(dǎo)可造成阻遏物失活或稀釋，促使噬菌體的其他基因表達(dá)，噬菌體大量繁殖使細(xì)胞裂解。二噬菌體的基因重組噬菌體非常小，只有在電鏡下才能看到，如何研究它們的遺傳重組？必須通過可見或檢測的性狀特征來研究。1.噬菌體可用于遺傳研究的性狀1.1 噬菌斑的形態(tài)噬菌體裂解細(xì)菌后，所釋放的子代噬菌體感染鄰近的細(xì)菌，使其裂解，釋放的噬菌體再侵染其他細(xì)菌，這樣在不長的時(shí)間內(nèi)可形成大量的噬菌體的堆積，即噬菌斑（107 108 個(gè)），一個(gè)噬菌斑是由一個(gè)噬菌體起源的，在遺傳上是均一的，相當(dāng)于一個(gè)cloning。由于噬菌體基因不同，噬菌斑形態(tài)各異，或大或小，邊緣清晰或模糊，如研究的廣泛的T2噬菌體，野生型

23、r+噬菌體形成小而邊緣模糊的噬菌斑，而突變型r噬菌體形成大而邊緣清晰的噬菌斑，突變型r噬菌體裂解速度快稱速溶菌突發(fā)型，不同速溶菌突變型在表型上不同，記作ra rb rc 等。1.2宿主范圍：不同基因型的噬菌體能感染和裂解的菌株不同，T2噬菌體野生型h+可侵染裂解大腸桿菌B菌株，但不能侵染B/2菌株，而突變型h噬菌體可同時(shí)感染B、B/2菌株，如果把h+和h分別接種B和B/2的混合培養(yǎng)物上，形成的噬菌斑是不同的，對(duì)h+來說，形成半透明的噬菌斑，對(duì)h來說，形成透明的噬菌斑。2.噬菌體的遺傳重組hr+與h+r型噬菌體同時(shí)侵染B菌株，為了測定在這個(gè)雜交中所得子代噬菌體的基因型，把釋放出的子代噬菌體接種在

24、含有B及B/2菌株的培養(yǎng)基上，觀察噬菌斑的形態(tài)，見圖4-16。以重組值為圖距繪制連鎖圖如果要繪制ra rb rc 及h的連鎖圖，用rx h+r+ h獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4-3三、轉(zhuǎn)導(dǎo)transduction以噬菌體為媒介所進(jìn)行的細(xì)菌遺傳物質(zhì)重組的過程，即細(xì)菌的一段染色體被錯(cuò)誤包裝在噬菌體的蛋白質(zhì)外殼內(nèi)，并通過感染而轉(zhuǎn)移到另一個(gè)受體細(xì)菌內(nèi)。轉(zhuǎn)導(dǎo)有2種：1）普通性轉(zhuǎn)導(dǎo)（generalized transduction）即供體染色體上的任何部分均可被噬菌體攜帶轉(zhuǎn)移至受體菌中。2）特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)（specialized transduction）即噬菌體只能攜帶供體菌的特異部分轉(zhuǎn)移至受體菌中，又稱局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)（restricted transduction）。1.轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)1951年Lederberg和Zinder首先在鼠傷寒沙門氏菌中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。利用沙門氏菌的2個(gè)營養(yǎng)缺陷型雜