凍干人凝血酶原復(fù)合物制造及檢定規(guī)程

1、凍干人凝血酶原復(fù)合物制造及檢定規(guī)程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿或血清，經(jīng)低溫乙醇法或衛(wèi)生部批準(zhǔn)的其他適宜方法提制而得的凍干制劑，并經(jīng)病毒滅活處理。內(nèi)含凝血因子、，主要治療、因子缺乏癥及對(duì)肝病或各種原因所致的凝血酶原時(shí)間延長(zhǎng)而擬作外科手術(shù)等患者。1制造1.1制造要求1.1.1血漿應(yīng)無凝塊，無纖維蛋白析出，非脂血，無溶血。新鮮分離的液體血漿或冰凍血漿、去除冷沉淀以及凝血固子以后的血漿均可用于生產(chǎn)。血漿蛋白分離的組分沉淀存放時(shí)間最長(zhǎng)不得超過半年。所用之血漿來源應(yīng)符合原料血漿采集（單采血漿術(shù)）規(guī)程。1.1.2對(duì)制造工作室、設(shè)備及原材料的要求。與人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程中1.1.3

2、1.1.4項(xiàng)要求相同。1.2制造工藝1.2.1可采用自血漿中直接凝膠吸附法或低溫乙醇和聚乙二醇（PEG，MW4000或6000）分離蛋白并經(jīng)DEAE葡萄糖凝膠A-50吸附法，亦可用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的其他適宜方法制備，并經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的適宜方法進(jìn)行病毒滅活處理。1.2.2穩(wěn)定劑制品內(nèi)可加穩(wěn)定劑，若加肝素，按總效價(jià)即血漿當(dāng)量單位（PE）數(shù)加入等單位的肝素注射液。1.2.3除菌過濾及分裝本品宜采用薄膜過濾，直接分裝入無菌的成品瓶?jī)?nèi)，每瓶裝量根據(jù)效價(jià)及成品規(guī)格確定。1.2.4凍干除菌過濾分裝的制品經(jīng)外觀檢查后立即旋凍，并按人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程1.2.5項(xiàng)的規(guī)定進(jìn)行凍干，但制品溫度不得超過3

3、5。1.2.5分批同一制造工藝、同一容器混合的制品作為一批，不同濾品和不同機(jī)柜凍干的制品分為亞批。1.3半成品檢定每批半成品應(yīng)進(jìn)行效價(jià)測(cè)定及熱原質(zhì)試驗(yàn)，并按亞批做無菌試驗(yàn)。1.4成品規(guī)格每瓶凝血酶原復(fù)合物的效價(jià)可有100、200、300、400、1000PE分鐘。2成品檢定2.1抽樣每批成品應(yīng)抽樣作全面質(zhì)量檢定。不同機(jī)柜凍干制品應(yīng)分別抽樣作無菌試驗(yàn)及水分測(cè)定。2.2物理檢查2.2.1外觀應(yīng)為白色或灰綠色疏松體，無融化亦象，溶解后應(yīng)為淡黃色或黃綠色澄明溶液，不應(yīng)有異物或沉淀。2.2.2真空度以高頻火花真空測(cè)定器檢測(cè)，瓶?jī)?nèi)應(yīng)出現(xiàn)藍(lán)紫色輝光。2.2.3溶解時(shí)間從冰箱取出制品，溫度應(yīng)先平衡至2025，

4、按瓶簽標(biāo)示量加入適量2025滅菌注射用水，使每ml含10PE。制品應(yīng)于15分鐘內(nèi)溶解。2.3化學(xué)檢定按生物制品化學(xué)檢定規(guī)程進(jìn)行。2.3.1水分水分含量應(yīng)3%（g/g）。2.3.2pH值取2.2.3項(xiàng)下溶液在202測(cè)定，pH值應(yīng)為6.87.6。2.3.3PEG含量測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下溶液測(cè)定，PEG含量應(yīng)0.05%（g/ml）。2.3.4鈉離子含量測(cè)定鈉離子含量160mmol/L。2.4凝血酶活性測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下的溶液按附錄1進(jìn)行測(cè)定。不得有凝塊或纖維蛋白析出。2.5效價(jià)測(cè)定取2.2.3項(xiàng)下的溶液按附錄2進(jìn)行測(cè)定。每瓶效價(jià)應(yīng)不低于標(biāo)示量的80%。2.6HBsAg檢測(cè)用敏感性為1ng/ml以下

5、的試劑盒檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.7抗HCV檢測(cè)用敏感的方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.8抗HIV-1及2檢測(cè)用敏感的方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.9無菌試驗(yàn)按生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。2.10安全試驗(yàn)2.10.1豚鼠試驗(yàn)用體重300400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品5ml（每ml含10PE），注射后半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.10.2小白鼠試驗(yàn)用體重1820g小白鼠5只，每只腹腔注射檢品0.5ml(每ml含10PE)，半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，繼續(xù)觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.11熱原質(zhì)試驗(yàn)按生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行，注射劑量按家兔體重注射30PE/kg。判定標(biāo)準(zhǔn)按該規(guī)程4.2項(xiàng)要求進(jìn)行。2.12鑒別試驗(yàn)用免疫雙擴(kuò)散法，僅與抗人的血清產(chǎn)