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1、實驗十一 植物體內(nèi)過氧化物酶活性的測定愈創(chuàng)木酚比色法1一、原理過氧化物酶 過氧化物酶perox idase, POD 廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。催化由過氧化氫參與的各種還原劑的氧化反應: RH2+ H2O22H2O + R22POD 分子結(jié)構(gòu)特點POD 是一種由單一肽鏈與卟啉構(gòu)成的血紅素蛋白, 脫輔基蛋白分子須與血紅素結(jié)合才構(gòu)成全酶。33、POD的主要生理功能參與活性氧代謝過程；參與木質(zhì)素和木栓質(zhì)的合成；參與生長素的降解。 注：除了與植物正常代謝和生長發(fā)育相關(guān)的結(jié)構(gòu)型POD 外, 很大部分POD的合成屬于誘導表達型。4二、實驗材料與試劑實驗材料： 不同濃度Cd處理7d的菱葉片；試劑

2、 0.1mol/L 磷酸緩沖液（pH6.0） 0.1mol/L 磷酸緩沖液（pH7.0） 愈創(chuàng)木酚； H2O2。5三、實驗步驟提取酶液： 葉片2片（w gFW）+pH7.0磷酸緩沖液5mL 研磨，離心（4000rpm*10min），上清液即為粗酶液。62、配制反應液1mol/L 磷酸緩沖液（pH6.0） 50ml +28uL愈創(chuàng)木酚+19uLH2O2(30%) 一般臨用前配制，冰箱內(nèi)短期保存。72、酶反應3mL反應液+0.2mL粗酶液，震蕩混勻后立刻記時，以3mL反應液+ 0.2mL磷酸緩沖液調(diào)零，測OD470，30內(nèi)讀第一次數(shù)，之后每10S讀數(shù)一次，至OD值1.000。83、計算酶活性選取OD值變化較均勻的一段數(shù)據(jù)，代入公式計算；以每分鐘OD值變化0.01作為1個過氧化物酶活力單位（U）。酶活力= W

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