藥物分析學(xué)：各論第一章 羧酸及其酯類藥物的分析

1、各論 第一章 羧酸及其酯類藥物的分析藥物分析學(xué)目 錄芳酸及其酯類藥物的分析1脂肪酸及其酯類藥物的分析221.芳酸及其酯類藥物的分析3 結(jié)構(gòu)特征： 苯環(huán) 直接與苯環(huán)相連的羧基 羧基可形成鹽或酯 主要類別：苯甲酸類藥物水楊酸類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)-典型藥物結(jié)構(gòu)4salycylic acid 水楊酸aspirin 阿司匹林sodium aminosalicylate對(duì)氨基水楊酸鈉salsalate 雙水楊酯水楊酸類結(jié)構(gòu)與性質(zhì)-典型藥物結(jié)構(gòu)5苯甲酸類結(jié)構(gòu)與性質(zhì)-主要理化性質(zhì)6-OH、-OCOCH3：鄰位致活基團(tuán) 酸性增強(qiáng)水楊酸阿司匹林苯甲酸 HAc H2CO3 苯酚（1）羧基-酸性pKa 2.953.49

2、4.264.76pKa1 6.38 9.95用于含量測(cè)定 酸性大?。?鄰位-OH: 分子內(nèi)氫鍵 酸性增強(qiáng)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)-主要理化性質(zhì)7（2）酯基-水解性酸性介質(zhì): 不可能全部水解堿性介質(zhì): 過(guò)量堿(氫氧化鈉和碳酸鈉)存在，可水解完全用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測(cè)定結(jié)構(gòu)與性質(zhì)-主要理化性質(zhì)8（3）官能團(tuán)反應(yīng)特性含酚羥基、潛在酚羥基的水楊酸類 （4） UV 和 IR 特征與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色重氮化反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng)含芳伯氨基、潛在芳伯氨基含硫的丙磺舒 分解生成硫化物用于鑒別、含量測(cè)定 用于鑒別、含量測(cè)定 鑒別試驗(yàn)9 水解反應(yīng) 與三氯化鐵反應(yīng) 重氮化-偶合反應(yīng)分解產(chǎn)物的反應(yīng) UV、IR鑒別試

3、驗(yàn)10（1）水解反應(yīng) 白色水楊酸沉淀 醋酸的臭氣阿司匹林：堿( Na2CO3試液) 水解強(qiáng)酸(稀硫酸)酸化 白色水楊酸沉淀雙水楊酯：堿 (NaOH試液) 水解強(qiáng)酸(稀鹽酸)酸化溶于醋酸銨試液，生成水楊酸銨和醋酸鑒別試驗(yàn)11鑒別試驗(yàn) 12反應(yīng)最適宜 pH：4-6強(qiáng)酸性溶液分解堿性溶液水解產(chǎn)生Fe(OH)3 紅棕色沉淀（2）與三氯化鐵反應(yīng)水楊酸及其鹽類：鑒別試驗(yàn) 13（2）與三氯化鐵反應(yīng) 含酚羥基或潛在酚羥基的藥物, 在中性或弱酸性條件下, 可與FeCl3試液反應(yīng), 生成類似紫色 (紫色, 紫堇色,紫紅色) 的配位化合物加水煮沸水解加氫氧化鈉煮沸水解稀鹽酸酸化成弱酸性阿司匹林：對(duì)氨基水楊酸鈉：雙水

4、楊酯：FeCl3紫色類配位化合物鑒別試驗(yàn) 14（2）與三氯化鐵反應(yīng)苯甲酸類：丙磺舒鈉鹽在pH5.06.0水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀鑒別試驗(yàn) 15（4）分解反應(yīng)丙磺舒的鑒別：熔融顯硫酸鹽反應(yīng)（3）重氮化-偶合反應(yīng)對(duì)氨基水楊酸鈉 貝諾酯水解產(chǎn)物 鑒別試驗(yàn) 16（5）UV 最大、最小吸收波長(zhǎng) 最大波長(zhǎng)及其吸收系數(shù)或吸光度 兩特征吸收波長(zhǎng)及其吸光度之比 應(yīng)注明所用溶劑、藥物的濃度等條件 UV鑒別參數(shù)：特殊雜質(zhì)檢查17 阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等 有關(guān)物質(zhì)的檢查甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的檢查特殊雜質(zhì)檢查18阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 檢查方法： 溶液的澄

5、清度 檢查碳酸鈉試液中的不溶物：未反應(yīng)完全的水楊酸脫羧產(chǎn)生的 苯酚乙酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸鈉試液中溶解應(yīng)澄清。苯酚發(fā)生副反應(yīng)產(chǎn)生的 阿司匹林溶于碳酸鈉特殊雜質(zhì)檢查19游離水楊酸 來(lái)源：生產(chǎn)中乙酰化不完全、貯藏中水解都會(huì)產(chǎn)生檢查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物質(zhì)Chp(2005) 檢查依據(jù)及方法： 阿司匹林無(wú)酚羥基，不能與直接高鐵鹽作用 水楊酸可直接與高鐵鹽反應(yīng)呈色對(duì)照法：與一定量水楊酸對(duì)照液生成的色澤比較，控制游離水楊酸的限量。特殊雜質(zhì)檢查20游離水楊酸 Chp(現(xiàn)行版)檢查方法：HPLC法 流動(dòng)相： 乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： O

6、DS 定量方法：外標(biāo)一點(diǎn)法說(shuō)明：一般，制劑不再檢查原料藥項(xiàng)下的相關(guān)雜質(zhì)，但ASA制劑在制備和貯藏過(guò)程中均可能引入水楊酸,故仍需檢查游離水楊酸的限量。特殊雜質(zhì)檢查21有關(guān)物質(zhì) 檢查方法：HPLC中不加校正因子的主成分自身對(duì)照法除“游離水楊酸”之外的其他合成副產(chǎn)物包括：固定相： ODS流動(dòng)相: A為乙腈- 四氫呋喃- 冰乙酸-水（205570） B為乙腈 梯度洗脫 苯酚 乙酸苯酯水楊酸苯酯 乙酰水楊酸苯酯雙水楊酯 乙酰水楊酰水楊酸水楊酸酐 乙酰水楊酸酐特殊雜質(zhì)檢查22對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查方法：HPLC有關(guān)物質(zhì)：間氨基酚、5- 氨基水楊酸、其他未知雜質(zhì)來(lái)源：未反應(yīng)完全的間氨基

7、酚原料,在貯藏過(guò)程中脫羧產(chǎn)生檢查原因：易氧化成醌型化合物，使藥物變色；有毒間氨基酚：外標(biāo)一點(diǎn)法定量其它有關(guān)物質(zhì)：不加校正因子的主成分自身對(duì)照法,限量檢查固定相：ODS流動(dòng)相：甲醇-10% 四丁基氫氧化鈉溶液 -0.05 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 20019400400） 含量測(cè)定23 酸堿滴定法 UV法 HPLC法直接滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法含量測(cè)定24酸堿滴定法強(qiáng)堿滴定本類藥物的羧基 直接滴定法乙醇溶解樣品：樣品易于溶解; 防止水解而導(dǎo)致結(jié)果偏高阿司匹林的含量測(cè)定：邊滴邊搖：防止局部堿度過(guò)大，促使水解中性乙醇：對(duì)所用指示劑顯中性 (取乙醇適量

8、，加酚酞指示液2滴，用 0.1mol/LNaOH液滴定至微紅色，即得。)專屬性差：供試品中所含游離水楊酸超過(guò)規(guī)定限量時(shí)，不宜采用含量測(cè)定25水解后剩余滴定法阿司匹林的含量測(cè)定：空白試驗(yàn): 校正 NaOH 滴定液因加熱吸收空氣中 CO2 帶來(lái)的誤差專屬性差：供試品中所含游離水楊酸超過(guò)規(guī)定限量時(shí)，不宜采用1mol Asp 2mol NaOH 1mol H2SO4含量測(cè)定26UV 法直接 UV 法丙磺舒片劑的含量測(cè)定：取本品10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 與鹽酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加熱30 min，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，

9、濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 ml，置100 ml 量瓶中，加鹽酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，在249 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系數(shù) 為338 計(jì)算含量。含量測(cè)定27柱色譜- UV 法固定相： 硅藻土和新制NaHCO3液的混合物USP用于阿司匹林栓劑、膠囊的含測(cè):ASA和SA與碳酸氫鈉反應(yīng)成鈉鹽，保留于柱上三氯甲烷洗脫，除去中性和堿性雜質(zhì) 大量冰醋酸-三氯甲烷酸化洗脫，ASA游離，測(cè)定SA酸性較大，不易游離，仍保留在柱上。樣品處理：含量測(cè)定 28栓劑樣品的預(yù)處理：多粒栓劑加熱熔融，混勻，冷卻，稱樣，加溶劑溶解待測(cè)藥物，定容，搖勻，冰浴，過(guò)濾，取續(xù)

10、濾液 HPLC法對(duì)氨基水楊酸鈉及其制劑：離子對(duì)分離模式 （流動(dòng)相中加入四丁基氫氧化銨作為離子對(duì)試劑）其余芳酸類藥物及制劑：離子抑制分離模式 （流動(dòng)相為酸性，抑制芳酸類藥物電離）定量方式：外標(biāo)一點(diǎn)法阿司匹林腸溶栓劑的含量測(cè)定案 例 分 析阿司匹林原料藥及片劑的檢驗(yàn)29 2.脂肪酸及其酯類藥物的分析30 結(jié)構(gòu)特征：與脂肪鏈碳原子相連接的羧基羧基可形成鹽或酯芳基烷酸類脯氨酸類（普利類）2- 甲基丁酸萘酯類（他汀類）苯氧基烷酸類 主要類別：結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-典型藥物結(jié)構(gòu)31芳基烷酸類結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-典型藥物結(jié)構(gòu)32脯氨酸類（普利類）結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-典型藥物結(jié)構(gòu)332- 甲基丁酸萘酯類（他汀類）結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-典型藥物結(jié)

11、構(gòu)34苯氧基烷酸類結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-主要理化性質(zhì)35 溶解性氯貝丁酯: 無(wú)色至黃色澄清油狀液體 相對(duì)密度1.1381.144 水中幾乎不溶酸堿性和水解性依那普利：含有羧基、仲胺基，顯酸、堿兩性氯貝丁酯：脂肪酸酯，在堿性溶液中易水解-酸堿滴定含量測(cè)定法的依據(jù)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)-主要理化性質(zhì)36官能團(tuán)反應(yīng)特性光譜特性卡托普利：含巰基，具有還原性，巰基還能被?；宸遥汉?，可與羰基試劑反應(yīng)-用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測(cè)定-用于鑒別、含量測(cè)定旋光性-用于純度檢查鑒別試驗(yàn)37 異羥肟酸鐵反應(yīng) 官能團(tuán)反應(yīng) UV, IR鑒別試驗(yàn)38異羥肟酸鐵反應(yīng)-多用于酯類藥物的鑒別氯貝丁酯的鑒別：紫色鑒別試驗(yàn)39官能團(tuán)反應(yīng)酰

12、化反應(yīng)-卡托普利的鑒別亞硝酰硫醇酯，紅色縮合反應(yīng)-酮洛芬的鑒別酮洛芬 + 二硝基苯肼 偶氮化合物 (橙色）鑒別試驗(yàn)40UV 法規(guī)定一定濃度藥物的 max 和（或） min規(guī)定供試藥物和其對(duì)照品在相同條件下測(cè)得的UV光譜應(yīng)一致 USP法: 氯貝丁酯、洛伐他汀原料的鑒別特殊雜質(zhì)檢查41 布洛芬中有關(guān)物質(zhì)的檢查 萘普生中有關(guān)物質(zhì)的檢查 卡托普利中卡托普利二硫化物的檢查 辛伐他汀中洛伐他汀等有關(guān)物質(zhì)的檢查 氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)檢查42布洛芬中有關(guān)物質(zhì)的檢查綠色合成路線：有10 余種，主要包括合成中間體及其副產(chǎn)物。1-（4- 異丁基苯基）乙醇、4- 異丁基苯乙酮具有成纖維細(xì)胞和紅細(xì)胞毒性。有

13、關(guān)物質(zhì)種類：1-（4- 異丁基苯基）乙醇4- 異丁基苯乙酮特殊雜質(zhì)檢查43檢查方法：ChP 和 JP : TLC 法USP : HPLC 法BP: HPLC，GC法 ChP方法： 供試品溶液自身稀釋對(duì)照法 特殊雜質(zhì)檢查44萘普生中有關(guān)物質(zhì)的檢查有關(guān)物質(zhì)：6-甲氧基-2萘乙酮其它未知雜質(zhì)ChP 檢查法：固定相：ODS流動(dòng)相：甲醇-0.01 mol/L 磷酸二氫鉀溶液（7525），磷酸調(diào)節(jié)pH 至3.0HPLC 外標(biāo)法 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 特殊雜質(zhì)檢查45卡托普利中卡托普利二硫化物的檢查ChP 檢查法：固定相：ODSHPLC (外標(biāo)法) 流動(dòng)相：0.01 mol/L 磷酸二氫鈉溶液-甲

14、醇- 乙腈（70255） （用磷酸調(diào)節(jié)pH 至3.0）辛伐他汀中洛伐他汀等有關(guān)物質(zhì)的檢查ChP 檢查法： HPLC （不加校正因子的主成分自身對(duì)照法)特殊雜質(zhì)檢查46氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)的檢查 合成路線：特殊雜質(zhì)：對(duì)氯酚、揮發(fā)性雜質(zhì)、酸度（氯苯氧異丁酸、鹽酸、硫酸等）特殊雜質(zhì)檢查47 對(duì)氯酚的檢查：GC法 （外標(biāo)一點(diǎn)法）樣品處理：氯貝丁酯供試品NaOH試液對(duì)氯酚對(duì)氯酚鈉 （上層）氯貝丁酯（下層） 水洗 揮發(fā)性雜質(zhì)檢查對(duì)氯酚鈉 （上層）CHCl3洗滌 進(jìn)一步除去脂溶性雜質(zhì)（包括氯貝丁酯）稀HCl酸化對(duì)氯酚鈉對(duì)氯酚CHCl3提取對(duì)氯酚的CHCl3溶液GC分析含量測(cè)定48 酸堿滴定法 氧化還原滴定法

15、UV法 HPLC法直接滴定法兩步滴定法非水溶液滴定法含量測(cè)定49 兩步滴定法水解后剩余滴定法測(cè)定含量時(shí)，合成過(guò)程中引入的酸性雜質(zhì)會(huì)使測(cè)定結(jié)果偏高。氯貝丁酯的含量測(cè)定：（1）中和：供試品中共存的酸性雜質(zhì)（2）水解后剩余滴定：含量測(cè)定50 卡托普利的含量測(cè)定：氧化還原滴定法碘酸鉀法，ChP 和 USP法 淀粉指示液顯藍(lán)色 含量測(cè)定51 HPLC 法 定量方式：外標(biāo)一點(diǎn)法 脂肪酸類藥物及制劑： 多采用離子抑制分離模式（流動(dòng)相為酸性，抑制藥物電離） 辛伐他汀的含量測(cè)定：流動(dòng)相：A 為乙腈-0.1% 磷酸溶液（5050） B 為0.1% 磷酸的乙腈溶液 梯度洗脫固定相：ODS練習(xí)題1. 含酚羥基或潛在酚羥基的水楊酸類藥物可采用下列哪種方法進(jìn)行鑒別？ A. 強(qiáng)酸性條件下與三氯化鐵試液反應(yīng) B. 稀鹽酸溶液中與亞硝酸鈉試液反應(yīng)C. 中性或弱酸性條件下與三氯化鐵試液反應(yīng) D. 中性或弱酸性條件下與鐵氰化鉀試液反應(yīng)E. 強(qiáng)堿性條件下與三氯化鐵試液反應(yīng)2. 阿司匹林加入碳酸鈉試液加熱后，再加稀硫酸酸化，此時(shí)產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)是 。A. 苯酚 B. 乙酰水楊酸 C. 水楊酸 D. 醋酸鈉 E. 醋酸苯酯52練習(xí)題3. 在藥物的酸堿滴定中，有時(shí)要求采用中性乙醇做溶劑，所謂“中性”是指 。A. pH = 7 .