課題菊花的組織培養(yǎng)

1、課題1 菊花的組織培養(yǎng)1在人工培養(yǎng)基上，離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。 組織培養(yǎng)1.植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力。思考：2離體的植物器官、組織、細(xì)胞（外植體）脫分化愈傷組織再分化根芽植物體2.植物組織培養(yǎng)過(guò)程33.植物組織培養(yǎng)條件離體狀態(tài)含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基(包括植物激素)一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等 不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大.菊花的組培,一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝.44.實(shí)驗(yàn)操作(視頻) （一）制備MS固體培養(yǎng)基 （二）外

2、植體消毒 （三）接種 （四）培養(yǎng) （五）移栽 （六）栽培51.下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答：（1）表示_，它能被培養(yǎng)成為的根本原因是_。（2）表示_，它與相比分化程度_，全能性_。答案：（1）離體的植物組織或器官 植物細(xì)胞具有全能性 （2）愈傷組織 低 高 脫分化再分化62.你能說(shuō)出MS培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？ 提示：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)

3、基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。73基因型為AaBb的水稻（24條染色體）的花藥通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)形成試管苗。（1）愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織形成中，必須從培養(yǎng)基中獲得 和小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（2）要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有 和 兩種激素。（3）愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過(guò)程必須給予光照，其原因是 。（4）試管苗的細(xì)胞核中含有 條脫氧核苷酸鏈。（5）培育成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有 。答案：（1）水

4、、無(wú)機(jī)鹽 （2）細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 （3）葉綠素的形成需要光 試管苗的生長(zhǎng)發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)來(lái)自葉綠體利用光能制造的有機(jī)物（4）24 （5）AB、Ab、Ab、ab89（一）被子植物的花粉發(fā)育雄蕊：花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉?；ǚ凼切℃咦幽讣?xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞?；ǚ鄣陌l(fā)育要經(jīng)歷：四分體時(shí)期、單核期、雙核期10114個(gè)小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核有絲分裂8個(gè)精子1花粉母細(xì)胞花粉的發(fā)育12（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑原因是什么？花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體愈傷組織叢芽叢芽生根移栽花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基

5、中 激素 的種類及其 濃度 的配比。13（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況（花期早期初花期）合適的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）此外，植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等.2、培養(yǎng)基的組成14（四）實(shí)驗(yàn)操作(視頻)1.材料的選取染色鏡檢2.材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸鈣3.接種和培養(yǎng)（五）結(jié)果分析與評(píng)價(jià)15植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同點(diǎn)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)行移栽。外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)無(wú)需加倍。取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理，使染色體數(shù)目加倍，恢復(fù)正常植

6、株的染色體數(shù)，而且為純種。16材料的選擇： 花期早期時(shí)的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般，月季的花藥培養(yǎng)時(shí)間選在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來(lái)說(shuō)，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高。 為了挑選到單核期的花藥，通常選擇完全未開(kāi)放的花蕾。17（一）材料的選取 選擇花藥時(shí)，一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。 最常用的方法有醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。18. 現(xiàn)有甲、乙兩個(gè)煙草品種（2N=48），其基因型分別為aaBB

7、和Aabb，這兩對(duì)基因位于非同源染色體上，且在光照強(qiáng)度大于800勒克斯時(shí)，都不能生長(zhǎng)，這是由于它們中的一對(duì)隱性純合基因（aa或bb）作用的結(jié)果。取甲乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株，將它們的葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體，并將二者相混，使之融合，誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)。然后，放到大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，結(jié)果有的細(xì)胞團(tuán)不能分化，有的能分化發(fā)育成植株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）甲、乙兩煙草品種的花粉的基因型分別為 和 。（2）將葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體時(shí)，使用 破除細(xì)胞壁。（3）在細(xì)胞融合技術(shù)中，常用的促融劑是 。（4）細(xì)胞融合后誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)叫 。（5）在大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，有 種細(xì)胞團(tuán)不能分化；能分化的細(xì)胞團(tuán)

8、是由 的原生質(zhì)體融合來(lái)的（只考慮2個(gè)原生質(zhì)體的相互融合）。由該細(xì)胞團(tuán)分化發(fā)育成的植株，其染色體數(shù)是 ，基因型是 。該植株自交后代中，在大于800勒克斯光照下，出現(xiàn)不能生長(zhǎng)的植株的概率是 。答案：（1） aB Ab （2）纖維素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈傷組織（5）2 甲、乙兩煙草品種的花粉 48 AaBb 7/1619專題知識(shí)歸納原理：細(xì)胞的全能性概念：基礎(chǔ)：條件：植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程：外植體愈傷組織胚狀體幼苗脫分化再分化影響植物組織培養(yǎng)的因素：外植體的選擇營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等植物激素的用法溫度、pH、光照等實(shí)驗(yàn)操作：制備MS培養(yǎng)基外植體消毒培養(yǎng)接種移栽栽培植物組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)被子植物花粉的發(fā)育：花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂小孢子母細(xì)胞四分體時(shí)期單核期雙核期精子產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體 叢芽叢芽愈傷組織 誘導(dǎo)生根