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文檔簡介
1、組織學(xué)與胚胎學(xué) ( histology and embryology ) 緒論(Introduction) 細胞(cell)組織學(xué)與胚胎學(xué)的定義和研究內(nèi)容光學(xué)顯微鏡術(shù)電子顯微鏡術(shù)組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù)原位雜交組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)習方法細胞連接重點與小結(jié)內(nèi)容提要一、組織學(xué)與胚胎學(xué)的定義和研究內(nèi)容組織學(xué)(histology):研究機體微細結(jié)構(gòu)及其相關(guān) 功能的科學(xué)。 細胞細胞間質(zhì)上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體研究內(nèi)容:胚胎學(xué)(embryology):研究機體發(fā)生、生長及其 發(fā)育機制的一門科學(xué)。研究內(nèi)容:受精卵胚胎兒(28周)(938周)人體組織學(xué)(human organizatio
2、n): 研究人體結(jié)構(gòu)(微細結(jié)構(gòu))的自組織過程及其規(guī)律的科學(xué)。人體發(fā)生 細胞 組織 器官系統(tǒng)(微細結(jié)構(gòu)及演化規(guī)律)研究內(nèi)容:為什么學(xué)習組織學(xué)與胚胎學(xué)?哪個是不正常的? 問題 解決方法 觀察對象太小 放大(顯微鏡) 觀察對象無色,無反差 染色(HE染色) 觀察對象生化成分不同 細胞化學(xué)、免疫組織化學(xué) 觀察對象是活體 培養(yǎng)二、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法和技術(shù)(一) 光鏡技術(shù) 1. 石蠟切片: 取材固定 脫水透明 包埋切片 染色封片 2. 冰凍切片、涂片、鋪片、磨片等光鏡標本制作程序切片機3. 組織切片染色法HE染色:蘇木精(Hematoxylin)伊紅(Eosin)染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)(本身酸性)
3、染成藍色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)(本身堿性)染成紅色細胞核中的DNA和RNA、細胞質(zhì)中的RNA細胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)(線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng))嗜堿性:對于堿性染料親和力強的性質(zhì)??杀惶K 木精染成紫藍色。嗜酸性:對于酸性染料親和力強的性質(zhì)??杀灰?紅染成紅色。中性: 對于兩種染料親和力都不強的性質(zhì), HE染 色著色淡。組織結(jié)構(gòu)的嗜色性特殊染色法 : 硝酸銀、地衣紅、甲苯胺藍染色法等活體染色: 臺盼藍活體注射地衣紅染色示彈性纖維甲苯胺藍染色示肥大細胞臺盼藍活體染色示巨噬細胞血涂片Wright染色透射電鏡(transmission electron microscope): 觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡(sc
4、anning electron microscope): 觀察組織或細胞表面的立體結(jié)構(gòu)(二)電子顯微鏡技術(shù)分辨率:電鏡(0.2nm)、光鏡(0.2m)透射電鏡結(jié)構(gòu)圖電子密度高電子密度低透射電鏡結(jié)構(gòu)圖掃描電鏡結(jié)構(gòu)圖(三)組織化學(xué)技術(shù) 1一般組織化學(xué)術(shù) 原理:化學(xué)或物理反應(yīng)原理 應(yīng)用:對組織或細胞內(nèi)某種化學(xué)成分進行定性、 定位、定量及相關(guān)功能的研究。PAS反應(yīng):過碘酸-Schiff反應(yīng)(periodic acid Schiff reaction, PAS反應(yīng))是顯示組織或細胞內(nèi)多糖的一種染色方法。多糖醛紫紅色沉淀氧化Schiff試劑HIO4糖類PAS反應(yīng)肝糖原小腸粘原顆粒 2.免疫組織化學(xué)(imm
5、unohistochemistry) 技術(shù): 原理:抗原和抗體特異性結(jié)合。 應(yīng)用:檢測細胞、組織中多肽、蛋白質(zhì)等。 (1)直接法(2)間接法免疫組織化學(xué)(辣根過氧化物酶標記)示胰島B細胞呈胰島素陽性(四) 原位雜交技術(shù)(in site hybridization) 為核酸(DNA和RNA)組織化學(xué)術(shù)。用帶有標記物的已知堿基順序的核酸探針,與細胞內(nèi)待測的核酸結(jié)合(雜交),從而在原位顯示該核酸。(五)細胞培養(yǎng)術(shù)(cell culture) 細胞培養(yǎng)術(shù):是把從機體取得的細胞在體外模擬體 內(nèi)的條件下進行培養(yǎng)的技術(shù)。 原代培養(yǎng)(primary culture): 傳代培養(yǎng)(sub culture) :
6、細胞系(cell line) : 細胞株(cell strain) :超凈工作臺培養(yǎng)箱體外培養(yǎng)的上皮細胞在相差顯微鏡下的圖象三、組織胚胎學(xué)學(xué)習方法要點平面與立體的關(guān)系結(jié)構(gòu)與功能相聯(lián)系靜態(tài)結(jié)構(gòu)了解動態(tài)變化縱橫聯(lián)系深化認識平面與立體結(jié)構(gòu)與功能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài)靜態(tài)與動態(tài)綜合與比較四、細胞(一)基本結(jié)構(gòu) (二)細胞連接 (cell junction) 1. 緊密連接 2. 中間連接 3. 橋粒 4. 縫隙連接緊密連接(tight junction)功能:(1)阻止大分子物質(zhì)由外部進入細胞間隙。(2)有一定機械性的連接作用。功能:(1)粘著和連接相鄰細胞。(2)保持細胞的形態(tài)。2.中間連接(intermediate junction)3.橋粒(desmosome) 是一種最牢固的細胞連接,多見于易受機械刺激或摩擦較多的部位。功能: (1)利于細胞之間小分子物質(zhì)和離子的交換,協(xié)調(diào)各細胞的功能。 (2)利于細胞之間傳遞電沖動。4. 縫隙連接(gap junction) 兩種或兩種以上的細胞連接緊接連在一起,則稱為連接復(fù)合體。 連接復(fù)合體(junctional complex):組織學(xué)研究技術(shù)新進展流式細胞術(shù)(flow cytometry) 流式細胞儀形態(tài)計量術(shù)
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