電刺激迷走神經(jīng)對缺血再灌注影響0規(guī)范

1、電刺激迷走神經(jīng)對缺血再灌注影響0規(guī)范目的: 觀察迷走神經(jīng)電刺激對大鼠腸缺血再灌注( I/R)后血壓的影響。方法: 2只雄性大白鼠隨機分為2組: ( 1)A鼠組:暴露腹腔后夾閉腸系膜上動脈( SMA) 1 h，開放再灌注2 h; (2)B鼠組: 在夾閉前及再灌注開始均以5 V、2 ms和1 Hz強度的電能持續(xù)刺激左頸部迷走神經(jīng)遠端20 min;頸動脈插管監(jiān)測平均動脈壓(MAP) 。結果: 各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期， B鼠的MAP隨時間延長明顯高于A鼠。結論: 電刺激迷走神經(jīng)能能改善A鼠腸再灌注期的循環(huán)血壓。 摘要 腸缺血再灌注( intestinal ischemia -

2、 reperfusion，I/R)損傷是外科臨床中常見的器官損傷之一， I/R不僅可引起消化道局部組織的結構和功能的損害，而且因腸粘膜屏障功能的損害可引發(fā)腸道菌群移位和內(nèi)毒素血癥，產(chǎn)生全身炎性反應綜合征，還可能對其它臟器造成繼發(fā)性損傷，甚至多器官功能衰竭，導致并發(fā)癥和死亡率增加 1 。然而，在臨床上對I/R損傷目前仍無有效的防治手段，因而進一步展開對其機制及防治的研究無疑是具有臨床意義。近年來實驗研究表明，通過傳出迷走神經(jīng)電刺激而釋放乙酰膽堿( acetylcholine， ACh)并特異性結合于組織巨噬細胞表面的7亞基煙堿受體，抑制致炎性細胞因子釋放， 具有保護臟器功能， 維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定作用

3、 2 。但迷走神經(jīng)電刺激對I/R后腸粘膜損傷是否也有影響未見研究報道。本實驗擬對此進行驗證。 1.試劑與儀器 1%戊巴比妥鈉，肝素鈉注射液， 生理鹽水，大白鼠手術臺，大白鼠器械，大鼠氣管插管，麻醉用藥注射器（5ml），BL-420生物機能實驗系統(tǒng)（簡稱BL系統(tǒng)），壓力換能器，紗布，線，動脈插管，動脈夾。一、材料與方法2.動物模型的建立 清潔及健康的雄性大鼠2只，體重250350g，手術前禁食12h，自由飲水。腹腔注射1%戊巴比妥鈉(0.5ml/100mg)麻醉后，行氣管切開插管以保持自主呼吸通暢。鈍性分離雙側頸總動脈和迷走神經(jīng)，用絲線靠頭端結扎左側迷走神經(jīng)，遠端與雙鉑電極連接;右側頸總動脈置管

4、，連接壓力傳感器。雙鉑電極導線、壓力傳感器導線連接于BL系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測平均動脈壓并提供持續(xù)電刺激迷走神經(jīng)。盡量按無菌操作開腹，分離暴露腸系膜上動脈，自腹主動脈分出的根部用無損傷小動脈夾夾閉之，避免鉗夾腸系膜上靜脈。缺血1h后重新打開腹腔，去除動脈夾再灌注2 h。3.動物分組 上述大鼠隨機分為2組:A鼠組:夾閉SMA 1 h后松夾再灌注2 h，不刺激迷走神經(jīng);迷走神經(jīng)刺激B鼠組:在夾閉前及再灌注開始均以5 V、2 ms和1 Hz強度的電能持續(xù)刺激左側迷走神經(jīng)遠端20 min。4.動脈血壓監(jiān)測 記錄時點: 迷走神經(jīng)刺激前(基礎值T0) 、夾閉0 min ( T1 ) 、夾閉30 min ( T2

5、) 、再灌注0 min ( T3) 、再灌注30 min ( T4) 、再灌注60 min(T5) 、再灌注90 min ( T6 ) 、再灌注120 min(T7) 。每次記錄監(jiān)測波形持續(xù)30 s，取其平均值作為該時點的測量值。動脈血壓以平均動脈壓(MAP)表示。1.一般情況 各組大鼠體重及實驗室溫度均無顯著差異 。術中均存活，麻醉效果滿意。的變化 各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期(T3 - T7) ，A鼠的MAP隨時間延長而明顯下降， 與B鼠同時點相比有顯著差異; A鼠不能改善MAP。 表1 各組大白鼠腸缺血再灌注不同時期MAP的變化(mmHg)組T0T1T2T3T4T5T

6、6T7A7643.358.7843.7643.0945.8433.6620.11B797977.1174.1174.5268.7952.0338.15二、結果 本研究通過阻斷腸系膜上動脈 1 h再灌注2 h復制了I/R腸損傷模型，表明，A鼠組的病變程度最重，顯著高于B鼠組。提示迷走神經(jīng)電刺激預處理能在一定程度上減輕I/R后腸組織病理變化。同時本實驗也表明，與A鼠組相比， VNS能明顯改善再灌注期MAP下降趨勢，防止低血壓發(fā)生。目前對VNS這種保護作用的機制還不是太清楚，可能與迷走神經(jīng)興奮后釋放的ACh作用有關 2， 4 - 6 。 小腸粘膜對缺血非常敏感，在遭受30 min缺血后，發(fā)生脂質(zhì)過氧

7、化反應，缺血- 再灌注損傷時氧自由基生成，對細胞膜產(chǎn)生損傷。迷走神經(jīng)電刺激預處理能明顯降低I/R后血漿MDA含量，這提示迷走神經(jīng)電刺激能一定程度上減少MDA的生成，具有抗氧化應激損傷作用，這與石德光等 7報道的電刺激迷走神經(jīng)減少內(nèi)毒素血癥動物肺MDA生成的研究結果有相似之處。三、討論 TNF具有多種生物學效應，是啟動和加速各種炎性連鎖反應的關鍵因子 8 。在I/R損傷中， TNF通過刺激使自身和其它致炎性介質(zhì)合成增加，使免疫反應被放大;另外， TNF作為致炎細胞因子可致白細胞的趨化、聚積并釋放化學物質(zhì)引起組織損傷 9 。文獻報道迷走神經(jīng)電刺激能降低內(nèi)毒素血癥、嚴重低血量失血性休克、主動脈鉗夾缺

8、血再灌注大鼠血漿TNF的研究結果 4 - 6， 7 。另外，必須強調(diào)的是組織與血漿中的TNF濃度變化并不完全一致，血中TNF濃度不能完全反映不同組織TNF的含量，而組織中的水平似乎更具有臨床和生物學意義 10 。 綜上所述，大鼠腸缺血1 h后再灌注2 h導致腸粘膜結構明顯損傷，電刺激迷走神經(jīng)能顯著減輕I/R腸粘膜結構的病理改變并使再灌注期的循環(huán)血壓得到一定改善，其保護效應可能與減少脂質(zhì)過氧化、下調(diào)TNF生成有關，其確切機制有待進一步研究。 1 Swank GM， Deitch EA. Role of the gut in multip le organ failure: bacterial t

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