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1、化妝品微生物檢驗(yàn)原始記錄樣品編號(hào): 檢驗(yàn)開始時(shí)間: 年 月 日樣品名稱: 檢驗(yàn)完成時(shí)間: 年 月 日檢測(cè)項(xiàng)目: 檢測(cè)依據(jù): 供檢樣品的制備:液體樣品: 1.水溶性的液體樣品:滅菌吸管吸取10ml加到90ml滅菌生理鹽水中,混勻后,制成110檢液;2.油性液體樣品:取樣品10g,依次加入5ml滅菌液體石蠟和10ml滅菌吐溫80,在 水浴中振蕩混合10min,加入滅菌的生理鹽水75ml,在 水浴中乳化,制成110檢液;膏、霜、乳劑半固體狀樣品:1.親水性的樣品:稱取10g加入裝有玻璃珠的90ml滅菌生理鹽水三角瓶中,充分震蕩混勻,靜置15min,取其上清液作為110檢液;2.疏水性樣品:稱取10g
2、置于滅菌的研缽中,加10ml滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀,再加入10ml滅菌吐溫80,研磨待溶解后,加70ml滅菌生理鹽水,在 水浴中充分混勻,制成110檢液;固體樣品:稱取10g,加到90ml滅菌生理鹽水中,充分震蕩混勻,使其分散混懸,靜置后,取其上清液作為110檢液;二、菌落總數(shù)測(cè)定:無菌操作吸取110稀釋的檢液1ml加入到9ml的無菌生理鹽水中,混勻,做成1100的稀釋液。以上法制備10-3、10-4稀釋液。選擇合適的稀釋度,吸取1ml加入到無菌平皿中,每一稀釋度做2個(gè)平皿同時(shí),分別吸取1ml空白稀釋液加入兩個(gè)無菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。加入冷至461的無菌卵磷脂吐溫-80營(yíng)養(yǎng)瓊脂約15ml,混
3、勻,凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置 361 培養(yǎng) 小時(shí),計(jì)數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)采用虎紅培養(yǎng)基,置281 培養(yǎng) 天,計(jì)數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。稀 釋 度10010-110-210-3lO-4空白對(duì)照菌落數(shù)(CFU/板)平均值(CFU/板)霉菌和酵母菌落數(shù)(CFU/板)平均值(CFU/板)結(jié)果計(jì)算: 細(xì)菌菌落數(shù)(CFU/g,ml): 霉菌和酵母菌落數(shù)(CFU/g,ml): 電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人:樣品編號(hào): 三、糞/耐熱大腸菌群檢驗(yàn):取1:10檢液 10ml加入到雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵管中,按以下步驟
4、檢驗(yàn)。項(xiàng)目培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間(h)結(jié) 果開始結(jié)束雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵440.5EMB分離培養(yǎng)361革蘭染色鏡檢/靛基質(zhì)試驗(yàn)361結(jié) 果注: eq oac(,+)產(chǎn)酸產(chǎn)氣;+產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或有典型菌落或靛基質(zhì)試驗(yàn)陽(yáng)性;-不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或無典型菌落或靛基質(zhì)試驗(yàn)陰性;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌; G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌四、致病菌檢驗(yàn):檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目銅綠假單胞菌/綠膿桿菌金黃色葡萄球菌增菌培養(yǎng)接種110檢液 ml ml培 養(yǎng) 基SCDLP 90mlSCDLP 90ml培養(yǎng)溫度361361培養(yǎng)時(shí)間分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基十六烷基三甲基溴化銨平板/乙酰胺平板Baird-Parker平板/血平板培養(yǎng)溫度3613
5、61培養(yǎng)時(shí)間結(jié) 果染色鏡檢生化試驗(yàn)氧化酶綠膿菌素硝酸鹽還原產(chǎn)氣明膠液化42生長(zhǎng)甘露醇發(fā)酵血漿凝固酶結(jié) 果注:+生長(zhǎng)或有可疑菌落;-未生長(zhǎng)或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人:樣品編號(hào): 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目沙門氏菌溶血性鏈球菌增菌培養(yǎng)接種110檢液 ml5ml培 養(yǎng) 基SCDLP 90ml50ml葡萄糖肉湯培養(yǎng)溫度361352培養(yǎng)時(shí)間18h24h24h分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基BS瓊脂平板或XLD瓊脂平板血瓊脂平板培養(yǎng)溫度361352培養(yǎng)時(shí)間18h24h或
6、40h48h24h結(jié) 果染色鏡檢生化試驗(yàn)三塘鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)蛋白胨水尿素瓊脂PH7.2氰化鉀培養(yǎng)基血清學(xué)試驗(yàn)鏈激酶試驗(yàn)桿菌肽敏感試驗(yàn)結(jié) 果注:+生長(zhǎng)或有可疑菌落;-未生長(zhǎng)或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人: 樣品編號(hào): 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目需氧芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌培養(yǎng)培 養(yǎng) 基葡萄糖蛋白瓊脂MYP瓊脂和葡萄糖蛋白瓊脂培養(yǎng)溫度301301培養(yǎng)時(shí)間5d24h2h結(jié) 果染色鏡檢結(jié) 果檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目鏈球菌腸球菌增菌培養(yǎng)接種110檢液 ml ml培
7、 養(yǎng) 基SCDLP 90mlSCDLP 90ml培養(yǎng)溫度361361培養(yǎng)時(shí)間24h18h24h結(jié) 果分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基血瓊脂腦心浸液瓊脂KF瓊脂或PSE瓊脂培養(yǎng)溫度361361培養(yǎng)時(shí)間24h24h2h結(jié) 果染色鏡檢生化試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)萬古霉素試驗(yàn)過氧化氫酶試驗(yàn)6.5%氯化鈉葡萄糖培養(yǎng)結(jié) 果注:+生長(zhǎng)或有可疑菌落;-未生長(zhǎng)或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人:樣品編號(hào): 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目嗜麥芽窄食單胞菌白色念珠菌增菌培養(yǎng)接種110檢液 ml ml培
8、養(yǎng) 基SCDLP 90mlSCDLP 90ml培養(yǎng)溫度301301培養(yǎng)時(shí)間482h20h72h分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基血平板中國(guó)藍(lán)平板沙氏葡萄糖氯霉素瓊脂培養(yǎng)溫度301301培養(yǎng)時(shí)間482h20h72h結(jié) 果純培養(yǎng)培 養(yǎng) 基MH平板/培養(yǎng)溫度301/培養(yǎng)時(shí)間482h/結(jié) 果/染色鏡檢生化試驗(yàn)克氏雙糖鐵氧化酶試驗(yàn)動(dòng)力試驗(yàn)DNA酶試驗(yàn)明膠液化硝酸鹽還原七葉苷水解芽管形成試驗(yàn)厚膜孢子試驗(yàn)?zāi)退幮栽囼?yàn)/結(jié) 果注:+生長(zhǎng)或有可疑菌落;-未生長(zhǎng)或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人:
9、 校核人: 審核人:樣品編號(hào): 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目弗氏檸檬酸桿菌施氏假單胞菌增菌培養(yǎng)接種110檢液 ml ml培 養(yǎng) 基SCDLP 90mlSCDLP 90ml培養(yǎng)溫度361352培養(yǎng)時(shí)間18h24h48h分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基BS瓊脂平板SS瓊脂平板假單胞菌CFC瓊脂培養(yǎng)溫度361352培養(yǎng)時(shí)間40h48h18h24h24h結(jié) 果純培養(yǎng)培 養(yǎng) 基TSA平板/培養(yǎng)溫度361/培養(yǎng)時(shí)間18h24h/結(jié) 果/染色鏡檢生化試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)TSI試驗(yàn)ONPG試驗(yàn)VP試驗(yàn)糖發(fā)酵產(chǎn)酸試驗(yàn)賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)鳥氨酸羧酶試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)TSI試驗(yàn)金氏麥芽糖OF試驗(yàn)乙酰胺試驗(yàn)葡萄糖酸鹽試驗(yàn)硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)明膠液化試驗(yàn)賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)42生長(zhǎng)試驗(yàn)淀粉水解試驗(yàn)?zāi)退幮栽囼?yàn)/結(jié) 果注:+生長(zhǎng)或有可疑菌落;-未生長(zhǎng)或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人樣品編號(hào): 五、需氧嗜溫性細(xì)菌:無菌操作加入1ml初懸液和樣品稀釋液倒入15ml20ml瓊脂培養(yǎng)基(保存在不超過48的水浴中)小心旋轉(zhuǎn)或傾注平板使初懸液和樣品稀釋液與培養(yǎng)基充分混合,室溫下將培養(yǎng)皿放置在水平面上使平皿中的混合物凝固。倒置平板放入32.52.5的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7
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